p53介导的凋亡相关基因的研究进展

p53是重要的细胞周期调控基因之一。在参与维持细胞周期的正常运行中起着重要作用，p53基因通过诱导细胞发生G1期阻滞修复损伤DNA和诱导细胞凋亡来抑制肿瘤细胞的增殖。在p53基因介导细胞凋亡的通路中，有许多已知和未知的相关基因发生作用。本就p53基因调控细胞凋亡途径的上，下游已知基因作一综述。     

白色念珠菌诱导小鼠胸腺细胞凋亡的基因调控

目的　探讨白色念珠菌诱导小鼠胸腺细胞凋亡过程中的基因调控作用。方法　经小鼠尾静脉注射白色念珠菌后 ,采用FCM技术测定胸腺凋亡细胞上 5个凋亡相关基因 ( p5 3,bax ,bcl 2 ,fas和c myc)产物的水平在不同时间组的变化。结果　p5 3和bax两个基因产物的水平明显增加 ;而bcl 2 ,fas和c myc基因产物的水平无明显改变。 结论　白色念珠菌诱导小鼠胸腺细胞凋亡 ,可能是经由基因调控的转录途径机制而发生 ,p5 3和bax基因在此过程起重要作用     

产单核细胞李斯特菌诱导胸腺细胞凋亡及其基因调控

为研究产单核细胞李斯特菌 (LM )感染对小鼠胸腺细胞凋亡的诱导作用及胸腺细胞凋亡过程中的基因调控 ,小鼠经尾静脉注射LM后 ,以DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪 (FCM )检测细胞凋亡及凋亡细胞的基因产物表达水平。结果表明LM能诱导小鼠胸腺细胞凋亡 ,琼脂糖凝胶电泳分析显示胸腺细胞出现典型的DNA“梯状带” ,FCM分析显示特征性的凋亡峰。胸腺细胞凋亡于LM (5× 10 5CFU )感染后 8h出现 ,48h达高峰。胸腺细胞凋亡百分率随LM感染剂量增加而增高。LM诱导小鼠胸腺细胞凋亡中p5 3、Bax及c myc基因表达产物明显增加 ,而Bcl 2基因表达产物水平无明显改变。提示LM以时间和剂量依赖方式诱导小鼠胸腺细胞凋亡 ,p5 3、Bax及c myc基因在LM诱导小鼠胸腺细胞凋亡的基因调控中起重要作用。     

细胞核和线粒体的p53凋亡途径

与 p5 3介导的细胞周期抑制相比 ,由 DNA损伤、氧化作用以及致癌物引起的 p5 3诱导的细胞凋亡机制还知之甚少 ,阐明 p5 3肿癌抑制基因诱导凋亡是当务之急 ,p5 3作为抗癌靶分子主要在于它的凋亡作用 ,揭开 p5 3诱导凋亡途径之谜 ,可以证明 p5 3具有生化多样性 ,其功能远远超出一个单纯转录因子的功能。线粒体内 p5 3蛋白诱导凋亡的证据表明 ,协同 p5 3转录活性功能 ,将使 p5 3诱导的凋亡路径变得更加复杂     

肿瘤抑制基因p53和p21WAF1／Cip1／Sdi1的相关性

抑癌基因p53在细胞周期调控、基因组稳定性维持、细胞分化和凋亡中起重要作用。DNA损伤后的细胞反应包括凋亡或细胞周期阻滞 ,它们都需要野生型p53基因转录活化。对此 ,目前研究集中在p53下游靶基因p2 1WAF1 /Cip1 /Sdi1 ,该基因编码一种细胞周期蛋白激酶抑制剂 ,后者在介导p53依赖性的细胞周期阻滞中起重要作用。然而DNA损伤诱发的凋亡需要有转录活性的p53而不是p2 1WAF1 /Cip1 /Sdi1参与。     

PTEN与p53基因功能的相互作用

PTEN和p53是两个最重要的抑癌基因,他们在细胞周期调控、细胞凋亡以及肿瘤发生发展过程中均发挥重要作用。尽管二者功能及机制各异,p53主要是阻滞细胞周期或诱导细胞凋亡,PTEN主要是阻断细胞接受的外界生存增殖信号,但二者在功能上有交互作用。     

NO诱导血管平滑肌细胞凋亡原癌基因调控的初步研究

血管平滑肌细胞 (VSMC)异常增殖引起的细胞数量过度增加是动脉粥样硬化发生发展的一个主要病理特征 ,而 VSMC凋亡又在其中起着重要作用。引起细胞凋亡的因素有多种 ,近期发现 ,广泛存在于心血管系统的一氧化氮 (NO)除已知的多种生物作用外 ,还具有诱导巨噬细胞、VSMC凋亡的功能。但是 ,NO诱导 VSMC凋亡的调控机制尚不十分明确。而 bcl- 2、p5 3、bax、c- m yc、fas等都是参与细胞凋亡调控的原癌基因。鉴此 ,本实验探讨 NO诱导 VSMC凋亡与 bcl- 2、p5 3、bax之间的关系。方法 :采用贴块法培养大鼠主动脉 VSMC,3～ 8代细胞用于实…     

衰老和凋亡对宫颈鳞状细胞癌的致癌作用

<正>目的:许多细胞周期调控因子如p14ARF、p15INK4b和p16INK4a在G1细胞周期阻滞和癌基因诱导衰老中起重要作用;bcl-2蛋白是抗凋亡成分中关键因子之一,而p53蛋白在凋亡和衰老中都起重要作用,这些关键调控因子的基因在各种恶性肿瘤中常常突变或缺如。本文研究衰老、凋亡和增殖标志物在正常宫颈上皮、宫颈上皮内瘤变(CIN)和宫颈鳞状细胞癌(SCC)中的表达。方法:每组(正常宫颈组、CIN Ⅱ-Ⅲ组和F组)40例。样本分别来源于120个宫颈活组织检查和宫颈锥形切除术。     

细胞周期相关新基因CACUL1对培养的结直肠癌细胞凋亡的影响

目的 研究细胞周期相关新基因细胞周期素依赖激酶2相关性Culin结构域1(CACUL1)对肿瘤细胞凋亡的影响,探讨CACUL1与细胞凋亡调控的关系.方法 用紫外线及化疗药物诱导细胞周期的阻滞,研究CACUL1在细胞DNA损伤状态下表达情况;同时用p53野生型及敲除的结直肠癌细胞,应用Western blot、Northern blot等方法检测了CACUL1蛋白及mRNA表达与p53的关系.结果 与细胞凋亡的调控有关,在紫外线及化疗药物诱导的DNA损伤情况下,CACUL1蛋白的表达在2h达最高,随着时间的逐渐延长,CACUL1的表达逐渐减低,而这种表达的增高是p53非依赖性的,Northern blot结果显示CACUL1的表达增高是转录后调控机制.CACUL1的高表达能够抑制紫外线及化疗药物诱导的细胞凋亡.结论 CACUL1在细胞凋亡中的作用是以一种转录后调控的p53非依赖方式帮助细胞跨过G1/S检控点,利于细胞生存.     

p27^kip1的功能研究及其与肿瘤的关系

p2 7kip1是细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂 ,具有多种生物学功能。它参与调控细胞周期 ,调节细胞凋亡 ,增强细胞间的粘附 ,诱导细胞分化等。p2 7kip1基因被认为是候选的肿瘤抑制基因 ,其表达下降与肿瘤的发生、侵袭密切相关 ,可作为某些肿瘤预后的独立判定指标。     

Noxa在凋亡中的作用及机制

Noxa是内源性途径凋亡中Bc l-2家族促凋亡的BH3-on ly亚家族成员之一,在诱导细胞凋亡中起重要作用。它通过定位于线粒体,引起线粒体释放细胞色素C以形成凋亡体,启动caspase级联反应而诱导细胞发生凋亡。Noxa的表达主要受p53调控,但是多种刺激因子可以通过p53或者不依赖p53等多种途径诱导Noxa表达上调,最后由Noxa来诱导细胞发生凋亡。     

p19ARF对白血病细胞增殖与凋亡的影响

目的:克隆正常人p19ARF基因,探讨其对肿瘤细胞增殖、细胞周期与凋亡的影响。方法:用流式细胞术、MTT测定及末端标记观察p19ARF基因对白血病细胞HEL和K562的作用。结果:将p19ARF导入HEL细胞后可明显抑制细胞繁殖,细胞周期被阻滞在G1期并可导致部分细胞凋亡。但是p19ARF对于p53基因突变的K562细胞的增殖和细胞周期没有明显的影响,也不能诱导其凋亡。结论:p19ARF可显著抑制人白血病细胞的增殖,其抑制作用依赖于p53基因的存在。     

HPV对细胞周期调控影响的研究进展

人乳头瘤病毒 (HPV)通过其基因产物干扰正常的细胞周期调节 ,延长宿主细胞终末分化时间 ,使病毒易于自身复制。HPVE5 ,E6 ,E7蛋白不仅在细胞转化过程中起重要作用 ,而且是干扰细胞周期调控的重要蛋白。E5主要通过提高丝裂原激活蛋白激酶 (MAP)活性发挥转化作用 ,HPVE6和E7蛋白主要通过与关键细胞周期调节物 (p5 3,pRb)作用 ,使受累细胞绕过细胞周期负性调控因子的调控 ,导致细胞连续增殖及恶性转化。     

P53基因对K562细胞增殖的影响

目的 观察恢复K562细胞的p53蛋白功能后该细胞的生物学行为的改变，探索用野生型p53基因治疗白血病的可能性。方法 以K562细胞为研究对象，电穿孔法转导野生型p53基因，RT-PCR和免疫细胞化学方法检测p53基因的表达，^3H-TdR掺入法检测细胞增殖，用流式细胞仪分别以TUNEL、annexin-V、细胞周期检测细胞的凋亡情况和细胞周期分布情况。结果 转染p53基因的K562细胞，出现明显细胞周期G1期停滞，增殖抑制率为24．17％，但用TUNEL、annexin-V和亚二倍体峰检测未发现与未转染p53基因组有凋亡细胞比例差异。结论 P53基因对K562细胞有一定的治疗效应，但不能诱导其发生凋亡。     

细胞辐射抗性相关基因的研究进展

电离辐射能够诱导细胞一系列基因的表达。与辐射抗性相关的基因如p53抑癌基因、癌基因、DNA损伤修复相关基因以及影响细胞生长分化的多种调控基因等,通过参与调节细胞周期、促进细胞DNA损伤修复和抑制细胞凋亡等多种途径,最终使得细胞的辐射抗性增加。目前人们对其中一些基因的作用机制已有所了解,而对更多的基因的作用机理尚不清楚。认识细胞辐射抗性相关基因的表达调控和生物功能对阐明细胞辐射抗性分子机制至关重要。     

幽门螺杆菌对AGS细胞p53、p21WAF1/CIP1和p27KIP1基因转录的影响

细胞周期蛋白依赖性激酶抑制物(Cyclin-dependent kinase inhibitors，CDKIs)负调控CDKs活性，主要有p16^INK4a和p15^INK4b及p21^WAF1/CIP1和p27^KIP1等两类。p53基因亦可调控细胞周期及凋亡，异常的细胞凋亡与消化道等肿瘤密切相关。本文采用MP-RT-PCR检测了cag-A^ ／CagA^ 和cagA^-／CagA^- Hp菌株感染前后AGS细胞p53、p21^WAF1/CIP1和p27^KIP1转录水平的改变，以期了解肋诱导细胞癌变和细胞周期阻滞的关系及可能的机制。     

Dlx2基因过表达与前成骨细胞系MC3T3-E1成骨分化过程中的细胞凋亡和周期调控*****◆

背景：Dlx2基因在颅神经嵴细胞迁徙进入第一鳃弓过程和颅颌面骨骼发育中起重要作用,但Dlx2基因对成骨细胞分化过程中细胞凋亡和细胞周期调控的影响尚未见报道。 目的：观察Dlx2基因过表达对前成骨细胞系MC3T3-E1成骨分化过程中细胞凋亡和细胞周期调控的影响。 方法：构建反转录病毒pMSCV-puro-Dlx2并转染矿化诱导液培养下的MC3T3-E1细胞,构建稳定过表达Dlx2基因的细胞系MC3T3-E1-Dlx2。RT-PCR和Western blot验证Dlx2基因过表达细胞系的建立。Annexin V/PI双染色后流式细胞分选检测细胞凋亡,PI/RNase双染色后流式细胞分选检测细胞周期变化。 结果与结论：实验成功构建稳定过表达Dlx2基因的细胞系MC3T3-E1-Dlx2。发现Dlx2基因过表达促进细胞凋亡(P < 0.05),同时阻滞细胞周期于G1/G0期(P < 0.05),减低细胞增殖性,促进细胞分化行使功能。 关键词：成骨细胞分化;Dlx2基因;稳定过表达;细胞凋亡;细胞周期 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2012.10.022     

细胞周期调控研究进展

细胞周期是细胞生命活动的基本过程 ,由细胞周期素 (Cyclin)依次激活相应的细胞周期蛋白依赖激酶 (CDK)所推动。Cyclin的周期性积累与分解对细胞周期进展起着正调控作用 ,而细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子 (CKI)通过在细胞周期适当的时间点上抑制 CDK的活性 ,从而对细胞周期进展起负调控作用。 Cyclin、CDK、CKI多因素相互协同作用 ,通过 p Rb途径和 p5 3途径共同影响细胞周期进程。对细胞周期调控的研究有助于阐明肿瘤的发生以及终末细胞的分化 ,将为治疗肿瘤和诱导终末分化细胞的增殖提供有益的思路     

ATM介导的蛋白磷酸化与DNA损伤的信号转导机制

细胞周期检定点激酶 ATM蛋白属于磷酸肌醇 3激酶 (PI- 3K)家族成员 ,也是哺乳动物细胞 BASC高分子蛋白复合物的组成者之一。ATM调整由于 DNA损伤引发的 DNA修复和凋亡通路。该通路主要表现为 DNA损伤激活 ATM激酶 ,ATM激酶磷酸化其下游的相应蛋白 ,使细胞在细胞周期关卡处停滞分裂 ,主要是 G1 - S期和G2 - M期的阻滞 ,使损伤的 DNA得以修复 ,当修复失败时 ,细胞进入凋亡进程。ATM磷酸化的蛋白质很多 ,如 p5 3,cdc2 5 A,cdc2 5 C等 ,这些蛋白质对细胞周期关卡调控都非常重要。因此也就证明了 ATM在细胞周期调控中的重要作用     

人乳头瘤病毒58型E6蛋白对p53的作用研究

目的 研究HPV58 E6蛋白与p53蛋白的作用关系，以初步探讨其致癌机理。方法 先通过GST沉降试验和体外降解试验，体外研究HPV58 E6结合降解p53蛋白的作用，进而将表达质粒导人SAOS-2细胞，在细胞内研究HPV58 E6对p53诱导细胞凋亡活性的影响。结果 HPV58 E6能够有效结合p53蛋白并进一步诱导其降解，而且在细胞内，HPV58 E6具有抑制p53蛋白的诱导凋亡的功能。结论 p53蛋白的降解影响其细胞周期调控和诱导凋亡的功能，导致细胞发生恶性转化引发子宫颈癌等肿瘤。