汞、镉、铅联合染毒对小鼠DNA损伤的研究

目的 探讨汞、镉、铅对小鼠外周血淋巴细胞DNA损伤的联合作用及其机制。方法 连续2d给昆明种小鼠腹腔注射不同组合的汞、镉、铅，末次染毒1h后取血用单细胞凝胶电泳(SCGE)和^3H-TdR掺入法检测DNA的损伤。结果 SIEGE试验时，汞-镉-铅组DNA迁移距离明显高于其相应单独作用组，汞-镉组、镉-铅组分别与镉组比较，差异也有显著性；用^3H-TdR掺入法同时进行实验，汞-镉组及汞-铅组与其单独染毒组比较，DPM值明显下降，汞-镉-铅三者联合染毒时，DPM值下降更为明显，说明DNA损伤愈加严重。结论 汞、镉、铅具联合毒性作用，三者联合染毒对小鼠外周血淋巴细胞DNA损伤更为显著。     

硫芥对中国仓鼠肺成纤维细胞DNA的损伤及还原型谷胱甘肽的保护作用

目的 研究硫芥对中国仓鼠肺成纤维细胞（Chinese hamster fibroblast cell line,CHL）DNA的损伤作用及还原型谷胱甘肽（reduced glutathione,GSH）的保护作用。方法 将CHL分为2组,均以10、100、1000μmol／L硫芥染毒,其中1组以10mmol/L的GSH加以保护,分别在不同时间点（即刻,6、24、48、72 h）收集细胞进行单细胞凝胶电泳（single cell gel electrophoresis assay,SCG）检测。结果 硫芥染毒组CHL的DNA迁移率和迁移度在染毒后6、24、48、72h均显著高于相应时刻的生理盐水组和溶剂对照组（P〈0．01）。GSH保护组DNA迁移率和迁移度亦显著增高（P〈0．01）,但较之单纯硫芥染毒组DNA迁移率下降了13．0％-52．5％,迁移度亦显著下降。结论 硫芥对CHL的DNA有损伤作用,呈时间、剂量关系。GSH对DNA的损伤有一定保护作用。     

六味地黄生物制剂对衰老小鼠脾淋巴细胞DNA损伤的保护作用

目的探讨六味地黄生物制剂延缓衰老的机制。方法小鼠随机分为正常对照组、阳性药物(维生素E)组、衰老模型组与六味地黄生物制剂组。除正常对照组注射生理盐水外,其余各组皮下注射0.5mL 5%D-半乳糖以建立衰老模型,连续50 d。第10天开始以0.2 mL.10 g-1给予各组小鼠灌胃相应的药物,50 d后处死小鼠,分离脾淋巴细胞并利用单细胞凝胶电泳法检测各组小鼠脾脏淋巴细胞的DNA损伤情况。结果与正常对照组比较,衰老模型组小鼠的脾淋巴细胞有较为严重的损伤(P<0.01),尾长、尾距与DNA拖尾率分别为(145.96±94.63)μm、(51.34±44.67)μm、(23.14±15.90)%;与衰老模型组比较,阳性药物组和六味生物制剂组小鼠的DNA损伤均显著降低(P<0.01)。结论六味地黄生物制剂对D-半乳糖所致的衰老小鼠的脾淋巴细胞有明显的保护作用,这可能是六味地黄生物制剂延缓衰老的机制之一。     

核酸营养对铅染毒大鼠肝肾组织的保护作用

目的观察染铅大鼠抗氧化系统的改变及核酸对抗氧化酶系统的影响。方法大鼠经饮水铅染毒后给予核酸,5周后处死,测定肝匀浆和肾匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力、丙二醛(MDA)含量。结果给予核酸的大鼠肝组织和肾组织的SOD活性、GSH-Px活力上升,MDA含量降低,与染毒组相比,在统计学上差异有显著性(P<0.05)。结论铅染毒可引起大鼠肝肾组织过氧化损伤,核酸可以提高抗氧化酶活力,减轻铅染毒引起的损伤。     

褪黑素对丙烯酰胺致大鼠睾丸细胞DNA损伤的拮抗作用

目的研究丙烯酰胺(AA)致大鼠睾丸细胞DNA损伤及褪黑素(MT)对损伤的拮抗作用。方法 40只8周龄SD雄鼠,随机分为空白对照组、MT组、AA组和MT+AA组,每组10只。MT(10 mg.kg-1.d-1)腹腔注射,AA(25 mg.kg-1.d-1)经口灌胃染毒,共30 d。单细胞凝胶电泳检测睾丸细胞DNA损伤(CASP软件测定慧星尾长、慧尾DNA百分含量、尾矩及Olive尾矩),TUNEL标记凋亡细胞,ELISA试剂盒检测睾丸组织中8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)含量,硫代巴比妥酸法测定丙二醛(MDA)水平,黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)活力。结果与对照组比较,AA组大鼠睾丸细胞彗星尾长、彗尾DNA百分含量、尾矩、Olive尾矩均显著增加,凋亡细胞增多,睾丸组织8-OHdG和MDA含量增加,SOD活力降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与AA组比较,MT+AA组大鼠睾丸细胞DNA损伤程度减轻,凋亡细胞数减少,睾丸组织8-OHdG和MDA含量降低,SOD活力升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 AA能够引起大鼠睾丸细胞DNA损伤并诱发凋亡,且对睾丸产生氧化损伤;MT则能拮抗AA引起的损伤。氧化损伤可能是AA引起大鼠睾丸细胞DNA损伤的机制之一。     

敌百虫暴露对孕鼠脏器及胎鼠DNA和生长发育的影响

目的 研究低剂量有机磷农药敌百虫暴露对孕鼠脏器及胎鼠DNA和生长发育的影响.方法 雌性ICR小鼠,随机分为空白对照组、10 mg/kg敌百虫染毒组和50 mg/kg敌百虫染毒组.每组至少10只孕鼠,孕前和孕期以饮水方式染毒共30 d,于孕第17天断髓处死,比较孕鼠染毒前后体质量和脏器系数;观察胎鼠生长发育情况,并行单细胞凝胶电泳实验检测胸腺DNA损伤(DNA百分含量、尾长、尾矩、Olive尾矩、细胞拖尾率).结果 染毒组孕鼠除肝脏脏器系数较对照组显著降低外(P<0.01),体质量及胸腺和卵巢等脏器系数与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05).50 mg/kg染毒组胎鼠体质量较对照组明显降低(P<0.05);而染毒组的活胎、死胎及畸形发生率等与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05).染毒组胎鼠胸腺DNA损伤各项指标均较对照组严重(P<0.05或P<0.01).结论 经口敌百虫暴露(10、50 mg/kg),在未对孕鼠产生明显毒性的情况下,可引起胎鼠生长发育延缓和DNA遗传学损伤.     

敌百虫暴露对孕鼠脏器及胎鼠DNA和生长发育的影响

目的 研究低剂量有机磷农药敌百虫暴露对孕鼠脏器及胎鼠DNA和生长发育的影响.方法 雌性ICR小鼠,随机分为空白对照组、10 mg/kg敌百虫染毒组和50 mg/kg敌百虫染毒组.每组至少10只孕鼠,孕前和孕期以饮水方式染毒共30 d,于孕第17天断髓处死,比较孕鼠染毒前后体质量和脏器系数;观察胎鼠生长发育情况,并行单细胞凝胶电泳实验检测胸腺DNA损伤(DNA百分含量、尾长、尾矩、Olive尾矩、细胞拖尾率).结果 染毒组孕鼠除肝脏脏器系数较对照组显著降低外(P<0.01),体质量及胸腺和卵巢等脏器系数与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05).50 mg/kg染毒组胎鼠体质量较对照组明显降低(P<0.05);而染毒组的活胎、死胎及畸形发生率等与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05).染毒组胎鼠胸腺DNA损伤各项指标均较对照组严重(P<0.05或P<0.01).结论 经口敌百虫暴露(10、50 mg/kg),在未对孕鼠产生明显毒性的情况下,可引起胎鼠生长发育延缓和DNA遗传学损伤.     

中药复方962对老年大鼠外周血淋巴细胞DNA损伤的影响

目的：观察不同年龄组（4月和24月龄）大鼠和连续灌胃给予中药复方962 3个月的老年大鼠的外周血淋巴细胞DNA的损伤情况。方法：利用快速、灵敏的单细胞电泳技术结合激光扫描共聚焦显微镜来观察大鼠外周血淋巴细胞的DNA损伤,以彗星样细胞出现率（计数一定量细胞中彗星样细胞所占的比例）、占彗星长度（“彗星”电泳方向上的最大长度）和尾距（尾部DNA占总DNA的百分比与头尾部中心间距的乘积）来评价淋巴细胞DNA的损伤程度。结果：发现老年大鼠外周血淋巴细胞中彗尾样细胞出现率显著高于青年大鼠（P＜0．01）,复方962不仅能明显降低老年大鼠的淋巴细胞的彗尾样细胞出现率,而且能明显降低老年大鼠外周血彗星样细胞的总彗星长度和尾蹑（P＜0．01）。结论：实验表明复方962对老年大鼠淋巴细胞DNA的损伤有明显的保护作用。     

单细胞凝胶电泳法检测HBV患者外周血淋巴细胞DNA损伤

目的 探讨乙型肝炎病毒与DNA损伤的关系以及不同感染模式慢性乙型肝炎患者（大三阳和小三阳患者）DNA损伤情况.方法 应用单细胞凝胶电泳（SCGE）技术检测对照组和不同感染模式慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞DNA的损伤情况,采用彗星分析软件对实验结果进行淋巴细胞损伤率、彗星尾长（Tail Extent）、彗星尾DNA百分含量（Tail %DNA）、彗星尾惯量（Tail Inertia）、Olive尾距（Olive Tail Moment）等指标进行分析.结果 经SCGE技术后得HBV感染与DNA损伤断裂关系有统计学意义（P〈0.05）;大小三阳组间DNA损伤断裂有统计学差异（P〈0.05）. 小三阳组经SCGE技术后所得彗星图像可见有少量彗星尾.大三阳组经SCGE技术后所得彗星图像可见有明显彗星尾.慢性乙型肝炎组外周血淋巴细胞DNA损伤与对照组比较彗星尾长、尾惯量在统计学上有显著性差异（P〈0.05）;不同感染模式的乙型肝炎外周血淋巴细胞DNA损伤比较,尾长、尾DNA百分含量和尾惯量在统计学上有统计学差异（P〈0.05）.结论 HBV感染可能造成外周血淋巴细胞DNA损伤,且不同感染模式的损伤情况不同.     

大黄酸对镉染毒大鼠急性氧化损伤的保护作用

目的研究大黄酸对镉染毒大鼠急性氧化损伤的保护作用。方法 Wista大鼠32只,随机分为4组,正常对照组,单纯镉染毒模型组,大黄酸低剂量干预组,大黄酸高剂量干预组。镉染毒后,观察74h,处死大鼠,测定大鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)的活力,测定肝、肾组织中超氧化物岐化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量。结果与对照组比较,模型组大鼠肝、肾组织MDA含量显著升高(P<0.05),SOD活力显著下降(P<0.05),与模型组比较,大黄酸高剂量组血清中ALT和AST活力显著降低(P<0.01),肝、肾组织中SOD活力增加,MDA含量降低(P<0.05)。结论大黄酸对镉染毒大鼠造成的氧化损伤具有一定的保护作用,其机制可能与大黄酸的抗氧化活性有关。     

室内装修对人体及小鼠外周淋巴细胞DNA损伤的影响

目的研究新装修客房中挥发性有机毒物对人体及小鼠外周淋巴细胞DNA损伤的影响。方法通过动物实验和人群流行病学调查相结合的方法,应用单细胞凝胶电泳法,分别检测在新装修场所和未装修场所工作半年以上女服务员外周血淋巴细胞DNA的损伤和实验动物外周血淋巴细胞DNA的损伤。结果在新装修场所工作半年以上女服务员的外周血淋巴细胞DNA断裂比对照组高,差别具显著性意义(P<0.01)。动物实验组外周血淋巴细胞DNA的损伤高于对照组,两组比较具有显著性差异(P<0.01)。结论新装修住房中挥发性有机毒物对人体外周血淋巴细胞存在DNA损伤作用。高浓度有机挥发物可引起小鼠外周血淋巴细胞DNA损伤。     

单细胞凝胶电泳技术检测慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞DNA的损伤

目的　观察正常人及慢性乙型肝炎 (慢乙肝 )患者外周血淋巴细胞DNA的损伤情况。方法　利用快速、灵敏的检测细胞DNA损伤的单细胞凝胶电泳 (SCGE)技术结合IMI1 0慧星分析软件 ,以“彗星”尾长、尾惯量、尾 %DNA、尾矩来评价淋巴细胞DNA的损伤程度。结果　慢乙肝患者外周血淋巴细胞DNA经SCGE ,形成的“彗星”尾长、尾惯量、尾 %DNA、尾矩较健康人明显增大 (P <0 0 5 )。结论　慢乙肝病毒感染可能是造成淋巴细胞DNA断裂损伤的主要原因     

Oxidative Damage to Lung Tissue and Peripheral Blood in Endotracheal PM2.5-treated Rats

Objective To investigate the oxidative damage to lung tissue and peripherial blood in PM2.5-treated rats. Methods PM2.5 samples were collected using an auto-sampling instrument in summer and winter. Treated samples were endotracheally instilled into rats. Activity of reduced glutathione peroxidase （GSH-Px） and concentration of malondialdehyde （MDA） were used as oxidative damage biomarkers of lung tissue and peripheral blood detected with the biochemical method. DNA migration length （μm） and rate of tail were used as DNA damage biomarkers of lung tissue and peripheral blood detected with the biochemical method. Results The activity of GSH-Px and the concentration of MDA in lung tissue significantly decreased after exposure to PM2.5 for 7-14 days. In peripheral blood, the concentration of MDA decreased, but the activity of GSH-Px increased 7 and 14 days after experiments. The two indicators had a dose-effect relation and similar changing tendency in lung tissue and peripheral blood. The DNA migration length （μm） and rate of tail in lung tissue and peripheral blood significantly increased 7 and 14 days after exposure to PM2.5. The two indicators had a dose-effect relation and similar changing tendency in lung tissue and peripheral blood. Conclusion PM2.5 has a definite oxidative effect on lung tissue and peripheral blood. The activity of GSH-Px and the concentration of MDA are valuable biomarkers of oxidative lung tissue damage induced by PM2.5. The DNA migration length （μm） and rate of tail are simple and valuable biomarkers of PM2 5-induced DNA damage in lung tissues and peripheral blood. The degree of DNA damage in peripheral blood can predict the degree of DNA damage in lung tissue.     

Experimental study of the heat and cold constitutional types (II). A comparative observation on the heat and cold constitutional type rats on the DNA replication capacity after ultraviolet damage]

The cold-constitutional and the heat-constitutional type had selected in Wistar rats as the object of study. Using peripheral blood and spleen as materials by means of ultraviolet injury, isotope incorporation, cells incubation in vitro and liquid scintillation counting, the capacity of peripheral lymphocytes DNA replication after damage with ultraviolet radiation and the capacity of the spleen lymphocytes proliferation in vitro was observed. The results showed that the both capacities mentioned above were higher in the heat constitutional type rat than that in the cold type. It is suggested that the following conclusion in the Lingshu Jing is correct: "the capacity of tissue repair is higher in the heat constitutional type than in the cold."     

硫芥中毒犬外周血IL-2、IL-6含量变化和淋巴细胞DNA损伤

目的 研究硫芥中毒犬外周血IL-2、IL-6变化和淋巴细胞DNA损伤的规律。方法 重庆家犬硫芥中毒(16mg/kg，sc)。中毒后不同时相点取血，分离血清和淋巴细胞。采用放射免疫方法测定血清中IL-2、IL-6含量，以单细胞凝胶电泳技术测淋巴细胞DNA损伤程度。结果 中毒后4h血清IL-2、IL-6含量开始下降，72h达最低值，120h开始恢复。单细胞电泳检测结果提示，硫芥导致明显的淋巴细胞彗星现象。受损细胞率、淋巴细胞DNA片段迁徙度于中毒4h即开始升高，24～72h持续升高。结论 硫芥中毒导致发生早且持续时间较长的犬外周血IL-2、IL-6含量下降和淋巴细胞DNA损伤。     

山茱萸醇提液对D-半乳糖致衰大鼠DNA损伤及糖基化终末产物形成的影响

目的研究不同剂量山茱萸醇提液对D-半乳糖致衰大鼠体内外周血淋巴细胞DNA损伤和糖基化终末产物(AGEs)形成的影响。方法大鼠随机分为青年组、衰老模型组、模型给药组。以D-半乳糖颈背注射6周制造大鼠衰老模型,模型给药组同时灌服大(5g/kg)、小剂量(2.5g/kg)山茱萸醇提液,测定青年、老年大鼠外周血淋巴细胞DNA损伤、AR活性和胸主动脉、尾腱AGEs含量,同时观察不同剂量山茱萸醇提液对老年大鼠上述指标的影响。结果衰老大鼠外周血淋巴细胞DNA损伤严重(P<0.01)、醛糖还原酶(AR)活性增高(P<0.01)、尾腱、胸主动脉AGE含量随龄增多(P<0.01)。山茱萸醇提液可减少外周血DNA损伤(P<0.01),降低AR活性(P<0.05,P<0.01)和抑制AGEs(P<0.01)形成。结论山茱萸醇提液可抑制体内糖基化终末产物形成、减少外周血淋巴细胞DNA损伤,具有抗衰老作用。     

Oxidative damage to DNA and its relationship with diabetic complications

Objective To detect the oxidative DNA damage in diabetic patients and to investigate the relationship of oxidative DNA damage with diabetes and diabetic nephropathy. Methods Single cell gel electrophoresis （SCGE） was used to detect the DNA strand breaks in peripheral blood lymphocytes, and oxidative DNA damage product and serum 8-OHdG were determined by a competitive ELISA in 47 cases, including 25 patients without diabetic complications, 22 patients with diabetic nephropathy and 25 normal control subjects. Results Diabetic patients showed greater oxidative damage to DNA. The percentage of comet cells and the length of DNA migration （comet tail length） of peripheral blood lymphocytes were significantly increased in patients with diabetes, and significantly higher in patients with diabetic nephropathy than in diabetic patients without vascular complications （P〈0.05）. There was a significant increase in serum 8-OHdG in diabetic patients compared with normal subjects （P〈0.05）. Moreover, serum 8-OHdG was much higher in patients with diabetic nephropathy than in diabetic patients without vascular complications （P〈0.05）. Coneluslon There is severe oxidative DNA damage in diabetic patients. Enhanced oxidative stress may be associated with diabetes, especially in patients with diabetic nephropathy.     

不同剂量依达拉奉对急性脑梗死患者外周血淋巴细胞DNA损伤的影响

目的研究不同剂量依达拉奉对急性脑梗死患者外周血淋巴细胞DNA损伤的影响。方法急性脑梗死患者90例,随机分为3组：观察1组、观察2组和对照组,每组30例。人院后予以常规治疗,观察组在常规治疗基础上每日加用依达拉奉注射液静脉滴注（观察1组：30mg／d,每日1次;观察2组：30mg／d,每日2次）。总疗程7d,观察比较3组患者治疗后外周血淋巴细胞损伤和NIHSS评分。结果观察1组、2组治疗后NIHSS评分均低于治疗前（P〈0．05）,且观察1组、2组患者治疗后的NIHSS评分显著低于对照组（P〈0．05）。3组治疗后外周血淋巴细胞DNA损伤均较治疗前减轻（P〈0．05）。在中性单细胞凝胶电泳试验中,观察1组和观察2组患者治疗后外周血淋巴细胞DNA损伤均较对照组减轻（P〈0．05）,且观察2组轻于观察1组（P〈0．05）;但在碱性单细胞凝胶电泳试验中观察2组与观察1组比较无显著差异（P〉0．05）。结论大剂量依达拉奉保护急性脑梗死外周血淋巴细胞DNA损伤效果更显著,对改善脑梗死预后更具意义。