加热联合紫杉醇对人喉癌细胞Hep-2体外增殖抑制及凋亡的影响

目的 探讨加热(hyperthermia,HT)联合紫杉醇(Taxol)对人喉癌细胞系(Hep-2细胞)体外增殖抑制及凋亡的影响.方法 将Hep-2细胞分为实验组与对照组,实验组用不同浓度(0.1、1.0及10.0μmol/L)的Taxol预处理后联合热疗(39、41及43℃1h)处理不同时间(24、48及72h)后,采用Wright-Gimsa染色法观察Hep-2细胞凋亡的形态学变化;以四甲基偶氮唑盐(MTT)还原试验检测细胞活力,以细胞增殖率作为细胞损伤指标,流式细胞术检测细胞凋亡发生率.结果 加热41℃组细胞增殖率与其他不同温度同剂量组比较均显著降低(P＜0.01);39℃组与对照组37℃组比较差异无统计学意义(P＞0.05);热疗联合Taxol组处理细胞48h后,细胞出现凋亡形态学改变.与热疗和Taxol单药组相比,热疗联合Taxol组对细胞的抑制率显著增强(P＜0.01),其作用呈时间和剂量依赖性;热疗联合Taxol组诱导细胞凋亡率与单药组及单热疗组相比较均增高(P＜0.05);而单药紫杉醇组与单独热疗组之间比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 热疗和Taxol单药体外均可抑制Hep-2细胞增殖并诱导其调亡.热疗和Taxol联合应用对Hep-2细胞体外增殖抑制其诱导凋亡作用显著增强;诱导凋亡可能是细胞增殖抑制的作用机制之一.     

加热与紫杉醇联合应用对人舌癌Tca8113细胞增殖的影响

目的:探讨加热与紫杉醇联合应用对人舌癌Tca8113细胞增殖的影响,为临床热疗与紫杉醇化疗的联合应用提供依据。方法:将不同温度(39℃、41℃和43℃)及不同浓度紫杉醇(1.25μg/L、2.50μg/L、5.00μg/L、10.00μg/L和20.00μg/L)采用组内分组设计,共15个组,并设各浓度37℃对照组(5组)。在紫杉醇对人舌癌Tca8113细胞作用24h后加温40min,应用MTT比色分析法测定加热和紫杉醇联合应用对细胞增殖率的影响。结果:41℃组细胞增殖率与不同温度同剂量组比较,除与39℃1.25μg/L紫杉醇组比较差异无统计学意义外(P>0.05),与其余各组比较均降低,比较差异均有统计学意义(P<0.05或0.01);39℃和43℃10μg/L紫杉醇组细胞增殖率与37℃对照组比较均升高,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:41℃时各浓度紫杉醇对Tca8113细胞均有增殖抑制作用;39℃或43℃联合10μg/L紫杉醇时Tca8113细胞增殖能力最强。     

热疗联合紫杉醇对NCI-H446细胞增殖和VEGF mRNA表达的影响

目的:观察热疗联合紫杉醇对NCI-H446细胞增殖作用以及VEGF mRNA表达的影响。方法:将NCI-H446细胞分组,Ⅰ热疗组(43℃加热90 min);Ⅱ紫杉醇组;Ⅲ热疗联合紫杉醇组;Ⅳ对照组(常规培养细胞)。分别在处理72 h后用MTT法检测4组细胞增殖情况;RT-PCR检测各组细胞中VEGF mRNA的表达量。结果:加热抑制了NCI-H446细胞的增殖;单独应用紫杉醇随着药物浓度的倍比增大,增殖抑制率逐渐增大;加热联合紫杉醇与对应浓度单独使用比较差异有统计学意义(P<0.05)。加热降低了NCI-H446细胞中VEGF mRNA的表达;加热联合紫杉醇组中NCI-H446细胞中VEGF mRNA的表达量明显减少,与对应浓度紫杉醇组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:43℃加热90 min联合紫杉醇对NCI-H446细胞增殖有抑制作用,并降低了VEGF mRNA的表达量。     

不同温度热疗联合紫杉醇化疗对肺癌A549细胞增殖及Akt蛋白表达的影响

目的:探讨不同温度热疗联合紫杉醇化疗对肺癌A549细胞增殖的抑制作用及可能机制.方法:采用不同温度(39 ℃,41 ℃,43 ℃, 45 ℃)热疗联合化疗(50 μg/L紫杉醇)处理A549细胞,以未处理的A549细胞作空白对照,应用MTT法检测各组细胞的增殖率,Western Blotting观察各组细胞Akt磷酸化水平(p-Akt)的变化;在43 ℃热疗联合化疗组加入Akt抑制剂Wortmannin预处理30 min,同上方法分别检测细胞的增殖率和p-Akt.结果:A549细胞的增殖率有随温度的升高而降低的趋势,并以43 ℃组最低(F＝18.26,P<0.05);p-Akt亦随温度升高而降低,并以43 ℃组最低(F=14.25,P<0.05).加入抑制剂Wortmannin后,与未加抑制剂相比,43 ℃热疗联合化疗组p-Akt降至最低,细胞增殖率降低(P<0.05).结论:不同温度热疗联合紫杉醇化疗对肺癌A549细胞增殖均有抑制作用,并以43 ℃为最佳,这种抑制作用可能与抑制Akt信号转导通路的激活有关.     

不同温度热疗联合紫杉醇化疗对肺癌A549细胞生长及JNK磷酸化的影响

目的:研究热疗及化疗联合对肺癌A549细胞生长的影响及其可能的机制.方法:以不同的临床常用温度(39 ℃、41 ℃、43 ℃、45 ℃)加热联合50 μg/L紫杉醇化疗的方法处理肺癌A549细胞,以37 ℃加热联合紫杉醇处理的A549细胞和未处理的A549细胞作对照.应用噻唑蓝比色法检测各组细胞增殖率的变化,损伤修复试验比较各组细胞的侵袭力,Western blotting检测JNK磷酸化水平.另取A549细胞如上分组,加入JNK特异性抑制剂SP600125预处理30 min,同法检测上述指标.结果:A549细胞的增殖率有随温度的升高而降低的趋势(P<0.05),并以43 ℃组最低.给予JNK特异性抑制剂SP600125后,除39 ℃组外,细胞增殖率均较加入前升高(P<0.05);细胞的侵袭力变化具有与此相似的趋势;43 ℃组JNK磷酸化水平最高,39 ℃组几乎未检测到JNK的磷酸化,差异有统计学意义(P<0.05).结论:不同温度热疗联合紫杉醇作用于肺癌A549细胞后,可对细胞产生不同程度的抑制作用,这种抑制作用可能是通过不同程度地激活JNK信号通路而产生的.     

热疗联合柔红霉素对人急性髓细胞白血病KG1a细胞增殖抑制及凋亡的影响

目的观察热疗联合柔红霉素(DNR)对人急性髓细胞白血病细胞株KG1a体外增殖抑制和凋亡的影响。方法甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测DNR作用KG1a细胞48 h抑制50%的药物浓度(IC50),以此浓度为工作浓度,设对照组(正常培养)、热疗组(单纯加热)、化疗组(单纯DNR处理)和热化疗组(加热联合DNR处理),热疗和热化疗各设40℃、42℃、43℃3个温度组,热疗在恒温水浴箱中加热60 min;MTT法检测作用前后对KG1a细胞的抑制作用;甲基纤维素培养体系分析细胞克隆能力;流式细胞仪检测KG1a细胞凋亡率。结果热疗、化疗和热化疗均能抑制KG1a细胞增殖,热化疗组细胞抑制率明显高于化疗组及相同温度的热疗组,且抑制作用随温度的升高而增强(P<0.05);热疗组、化疗组和热化疗组细胞克隆形成率明显低于对照组(P<0.05),热化疗组克隆集体落形成率明显低于热疗组、化疗组(P<0.05);热疗组、化疗组和热化疗组的细胞凋亡率均较对照组显著升高(P<0.05),热化疗组与化疗组及相同温度热疗组相比细胞凋亡率均显著提高(P<0.05)。结论热疗联合DNR能增强对KG1a细胞的体外抑制作用,提高其凋亡率。     

JNK通路及HSP70在热化疗抑制人小细胞肺癌细胞生长中的作用

目的:研究热化疗对小细胞肺癌生长的影响及其可能的机制.方法:参考临床常用剂量,采用43℃加热联合120μg/L紫杉醇(热化联合组)、43℃加热联合120 μg/L紫杉醇及20μmol/L JNK特异抑制剂SP600125(热化联合 SP600125组)、单纯43℃加热(单纯热疗组)、单纯使用120μg/L紫杉醇(单纯化疗组)处理H446细胞,以未处理的H446细胞作对照.应用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测各处理方式下细胞增殖率的变化,通过Western印迹法检测JNK、磷酸化JNK(pJNK)和HSP70的表达并对数据进行统计学分析.结果:热化联合组细胞增殖率低于对照组、单纯化疗、单纯热疗及热化联合 SP600125组(P＜0.05);p-JNK表达水平在热化联合组中表达明显增高(P＜0.05),但SP600125可抑制其表达,使热化联合 SP600125组细胞的增殖率相应增高(P ＜0.05);HSP70在热化联合组的表达低于单纯热疗组(P<0.05),细胞增殖率也发生了相应变化.结论:热疗可以明显增加紫杉醇对H446细胞生长的抑制作用,且这种作用可能是通过激活JNK信号转导通路或抑制HSP70的表达完成的.     

热疗和热放疗对CNE-2细胞凋亡的影响

目的:研究热疗和热放疗对诱导鼻咽癌(CNE-2)细胞凋亡的作用.方法:将CNE-2细胞分为正常对照组、单纯放疗组、单纯热疗组和热放疗组,应用热疗联合放疗在不同照射剂量下诱导CNE-2细胞凋亡,以末端标记法(TUNEL法)检测其凋亡率.结果:单纯放疗、单纯热疗、热放疗均能诱导CNE-2细胞的凋亡,随放疗剂量的增加凋亡率明显升高(P<0.05)热放疗组的细胞凋亡率明显大于单纯放疗组和单纯热疗组(P<0.05).结论:单纯放疗、单纯热疗及热放疗均能诱导CNF-2细胞凋亡,热疗对CNE-2 细胞系有明显的放射增敏作用.     

热疗与紫杉醇联合应用对H446细胞生长和MMP-2 mRNA表达的影响

目的：探讨单纯热疗、单纯化疗以及热化疗联合应用对H446细胞生长及MMP-2mRNA表达的影响。方法：以不同温度（39℃、40℃、41℃、42℃、43℃和44℃）、不同剂量紫杉醇（30μg／L、60μg／L、120μg／L、240μg／L和480μg／L）及热化疗联合的方法处理H446细胞，同时设对照组（0μg／L紫杉醇，37℃），每组又分为3个热疗时间（30min、60min和90min），观察热疗、化疗和热化疗联合对H446细胞生长抑制率的影响；另取H446细胞，分为单纯热疗组（43℃，90min），单纯紫杉醇化疗组（60μg／L、120μg／L和240μg／L），43℃热疗90min联合紫杉醇组（60μg／L、120μg／L和240μg／L），对照组（0μg／L、37℃），采用RT—PCR检测各组细胞MMP-2mRNA的表达。结果与结论：单纯热疗与紫杉醇均可抑制H446细胞的生长，热疗不同程度地增强了紫杉醇对H446细胞的增殖抑制率，热化疗联合对H446细胞生长抑制的最优组合是43℃热疗90min联合120μg／L紫杉醇化疗，在此条件下，H446细胞MMP-2mRNA的表达明显降低，提示热化疗联合对H446细胞增殖的抑制作用可能是通过降低MMP-2mRNA的表达，从而抑制肿瘤细胞的侵袭和转移而实现。     

热化疗对Raji细胞体外增敏作用的实验研究

目的 观察热疗联合阿霉素对人B细胞淋巴瘤细胞系Raji细胞内的药物浓度变化及凋亡的影响.方法 MTT法确定阿霉素的工作浓度,以该浓度进行化疗或与热疗的联合,选择温度40℃、41℃及42℃,体外作用于Raji细胞.作用前及48 h采用台盼蓝拒染法检测肿瘤细胞的存活率;MTT法检测肿瘤细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪检测肿瘤细胞的凋亡及细胞内药物浓度的变化.观察热疗联合阿霉素的抗肿瘤效果.结果 作用48 h IC50的药物浓度作为实验的工作浓度.热化疗组对Raji细胞有明显的抑制作用(P＜0.01),随着温度的增高而增强;热化疗组细胞内的药物浓度明显增加(P＜0.01).结论 热疗联合阿霉素能增加Raji细胞内的药物浓度,提高肿瘤细胞的凋亡率.