莱菔硫烷对食管癌细胞凋亡以及Caspase-3和Survivin表达的影响

目的研究莱菔硫烷（sulforaphane,SFN）对食管癌细胞凋亡的影响以及能否影响细胞凋亡蛋白酶（Caspase）-3和存活素（Survivin）的表达。方法培养食管癌细胞EC9706,用10—50μM的SFN处理后,流式细胞分析术检测细胞的凋亡情况以及Caspase-3和Survivin的表达水平。结果10～50μM的SFN能明显促进EC7906细胞凋亡,呈时间和剂量依赖性,同时,SFN还能促进Caspase-3的表达和下调Survivin水平。结论SFN可能通过促进肿瘤细胞凋亡和增加Caspase-3的水平,抑制Survivin表达而实现抗肿瘤效应的。     

膀胱移行细胞癌中Survivin表达的意义

目的探讨膀胱移行细胞癌（TBCC）中Survivin表达的意义。方法应用免疫组织化学一步法、RT PCR法检测40例BTCC和12例正常膀胱粘膜中Survivin和Survivin mRNA的表达,Western blot方法检测40例BTCC与32例非BTCC患者尿液细胞中Survivin的表达。结果免疫组织化学方法显示,Survivin在BTCC中阳性表达率为95.0%,在正常膀胱粘膜中无表达（P<0.01）。RT PCR显示,Survivin mRNA在BTCC中阳性表达率为100.0%,在正常粘膜中无表达（P<0.01）。Western blot显示,Survivin在BTCC患者尿液细胞中阳性表达率为95.0%,在非BTCC患者中无表达(P<0.01)。3组中Survivin的表达与BTCC的分级、分期密切相关（P<0.01）。结论Survivin在BTCC中高表达,因而可作为BTCC的一个良好的诊断和预后指标。     

Survivin与肿瘤相关因子在胃癌中的表达及其相关性研究

胃癌是消化系统中最常见的恶性肿瘤,我国胃癌的发病率和病死率均居于恶性肿瘤的首位。存活素（Survivin）是近年新发现的一种蛋白,属于凋亡抑制蛋白（IAP）家族,具有强大的抗细胞凋亡功能,在胃癌组织中有较高表达。研究表明,Survivin与现在已知的某些因子在胃癌中的表达有一定的相关性;并且,Survivin在胃癌组织中的表达与胃癌的早期诊断、治疗及预后有着明显的联系。本文就Survivin与肿瘤相关因子在胃癌中的表达及其相关性研究做一概述。     

白英提取物诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡及其对凋亡相关蛋白表达的影响

目的:探讨白英提取物(Solanum lyratum Thunb extract,STE)对人胃癌SGC-7901细胞凋亡及凋亡相关蛋白Survivin和caspase-3表达的影响.方法:体外培养SGC-7901细胞,以2.5、5、10mg/L STE处理SGC-7901细胞48小时,并以2.5mg/L顺铂(DDP)作为阳性对照.用MTT法检测细胞抑制率,TUNEL法检测凋亡率,二步法免疫组化检测Survivin和caspase-3表达.结果:与正常对照组相比,STE各浓度组细胞抑制率显著上升(P<0.001),细胞凋亡率明显升高(P<0.01),Caspase-3蛋白表达显著上升(P<0.05或P<0.01),Survivin蛋白表达明显下降(P<0.05或P<0.01).结论:STE具有诱导SGC-7901细胞凋亡的作用,其分子机制可能与上调Caspase-3及下调Survivin蛋白表达有关.     

胃癌组织Survivin表达及其与凋亡的关系

目的:研究胃癌组织中Survivin表达及其与凋亡的关系.方法:应用免疫组织化学S-P法检测20例正常胃粘膜及120例胃癌组织中Survivin的表达;采用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)技术,检测其凋亡指数.结果:20例正常胃枯膜组织Survivin均不表达,胃癌组织中Survivin阳性率为64.2%(77/120),二者有显著性差异(P<0.01);Survivin表达与组织分化程度和TNM分期密切相关(P<0.05).胃癌组织凋亡指数(AJ)和TNM分期、组织分化程度密切相关(P<0.05).Survivin表达水平与凋亡指数呈显著负相关(P<0.01).结论:Survivin在胃癌中过表达,Survivin在胃癌的发生发展过程中可能起重要作用,检测Survivin和凋亡指数有利于判断胃癌的恶性程度,胃癌凋亡的抑制可能与PTEN蛋白表达上调有关.     

白英提取物诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡及其对凋亡相关蛋白表达的影响

目的：探讨白英提取物（Solanum lyratum Thunb extract，STE）对人胃癌SGC-7901细胞凋亡及凋亡相关蛋白Survivin和Caspase-3表达的影响。方法：体外培养sGC-7901细胞，以2．5、5、10mg／LSTE处理sGC-7901细胞48小时，并以2．5mg／L顺铂（DDP）作为阳性对照。用MTT法检测细胞抑制率，TUNEL法检测凋亡率，二步法免疫组化检测Survivin和Caspase-3表达。结果：与正常对照组相比，STE各浓度组细胞抑制率显著上升（P〈0．001），细胞凋亡率明显升高（P〈0．01），Caspase-3蛋白表达显著上升（P〈0．05或P〈0．01），Survivin蛋白表达明显下降（P〈0．05或P〈0．01）。结论：STE具有诱导SGC-7901细胞凋亡的作用，其分子机制可能与上调Caspase-3及下调Survivin蛋白熹主夭有姜．     

cFLIP蛋白在胃癌组织中的表达及其对胃癌细胞凋亡的影响

目的 检测cFLIP蛋白在胃癌组织中的表达及其与临床病理特征和胃癌细胞凋亡的关系.方法 采用免疫组化(SP)法检测45例胃癌组织、23例癌旁非典型增生组织及21例正常胃黏膜组织中cFLIP蛋白的表达;原位末端标记(TUNEL)法检测胃癌细胞凋亡情况.结果 cFLIP蛋白在胃癌组织中的表达在癌旁非典型增生组织及正常胃黏膜组织中的表达差异有显著性(P＜0.05).胃癌组织中出现cFLIP蛋白的高表达和细胞凋亡的低表达,cFLIP蛋白的表达水平与细胞凋亡指数(AI)成负相关(r=-0.0016,P<0.01).进一步分析发现,在胃癌组织中,肿瘤细胞分化越差,临床分期越晚,以及伴有癌细胞转移淋巴结中,cFLIP蛋白高表达.cFLIP蛋白的表达与患者年龄、组织学分型无关.结论 cFLIP蛋白与胃癌的发生、发展和转移密切相关并可能在抑制胃癌细胞凋亡中发挥重要作用.     

胃癌组织中cFLIP蛋白的表达及其对胃癌细胞凋亡的影响

目的 检测cFLIP蛋白在胃癌组织中的表达及其与临床病理特征和胃癌细胞凋亡的关系。方法 采用免疫组化(SP)法检测45例胃癌组织、23例癌旁非典型增生组织及21例正常胃黏膜组织中cFLIP蛋白的表达;原位末端标记（TUNEL）法检测胃癌细胞凋亡情况。结果 cFLIP蛋白在胃癌组织中的表达与癌旁非典型增生组织及正常胃黏膜组织中的表达差异有显著性(P<0.05)。胃癌组织中出现cFLIP蛋白的高表达和细胞凋亡的低表达,cFLIP蛋白的表达水平与细胞凋亡指数（AI）成负相关(r=-0.0016,P<0.01)。进一步分析发现,在胃癌组织中,肿瘤细胞分化越差,临床分期越晚,以及伴有癌细胞转移淋巴结中,cFLIP蛋白高表达。cFLIP蛋白的表达与患者年龄、组织学分型无关。结论 cFLIP蛋白与胃癌的发生、发展和转移密切相关并可能在抑制胃癌细胞凋亡中发挥重要作用。     

白藜芦醇诱导胃癌细胞脱落凋亡

目的 研究白藜芦醇诱导胃癌细胞脱落凋亡的作用。方法 采用细胞形态学观察、Annxin-V和PI细胞染色和流式细胞仪检测，观察白藜芦醇(0．1、0．2、0．5 mmol／L)对脱落培养胃癌细胞BGC823、SGC7901和HGC27的生长状态、细胞周期的影响及诱导脱落凋亡的作用。结果 倒置显微镜下发现脱落培养的胃癌细胞聚集成团生长，0．1mmol／L白藜芦醇作用细胞后可抑制抗脱落凋亡的胃癌细胞聚集成团；流式细胞仪检测和Annxin-V和PI细胞染色表明0．5mmol／L白藜芦醇可分别阻滞脱落培养的BGc823、sGc7901和HGc27细胞于G0／G1、S、G2／M期，并可诱导这3株胃癌细胞发生脱落凋亡，其中自藜芦醇诱导HGC27细胞脱落凋亡比例达19．3％，远高于其他两株胃癌细胞。结论自藜芦醇可诱导胃癌细胞发生脱落凋亡。     

苦丁茶熊果酸诱导鼻咽癌细胞凋亡及其对Survivin和 APC蛋白表达的影响

目的 探讨不同浓度的苦丁茶熊果酸诱导鼻咽癌细胞凋亡情况及其对大肠腺瘤样息肉(adenomatous polyosis coli,APC)和生存素(Survivin)蛋白表达的影响,为揭示苦丁茶熊果酸的抗肿瘤机制提供研究依据.方法 从苦丁茶老叶中提取熊果酸并纯化与鉴定,以10、20、40、80、100 μmol/L的苦丁...     

藤黄酸对胃癌BGC-803细胞凋亡的作用及对survivin基因表达的影响

目的:研究藤黄酸对人胃癌细胞株BGC-803凋亡的作用及其对胃癌细胞survivin基因表达的影响。观察应用RNA干扰(RNAi)技术沉默survivin基因的表达后,藤黄酸对胃癌细胞BGC-803的抑瘤效应。方法:应用MTT、DNAladder等方法研究藤黄酸对胃癌细胞系BGC-803凋亡的诱导作用,运用RT-PCR、Western-blotting分析藤黄酸和survivin-siRNA对胃癌细胞survivin表达的影响。MTT法检测藤黄酸对转染survivin-siRNA后的BGC-803细胞株抑瘤作用。结果:藤黄酸可抑制BGC-803细胞的生长,其抑制率与药物浓度及作用时间呈依赖关系。藤黄酸作用BGC-803细胞后,survivin蛋白表达降低。通过siRNA有效阻断BGC-803细胞survivin基因的表达后,藤黄酸对细胞的抑瘤效果可以进一步提高。结论:藤黄酸可以有效的抑制survivin基因表达,从而促进肿瘤细胞凋亡,同时survivin-siRNA与藤黄酸具有明显的协同抗肿瘤作用。     

survivin反义寡核苷酸诱导胃癌细胞凋亡及对多西他赛的增敏作用

目的探讨生存素（survivin）反义寡核苷酸（antisense oligonucleotide,ASODN）对人胃癌细胞株SGC7901的凋亡诱导、对多西他赛的化疗增敏作用。方法设计合成特异性靶向survivin ASODN。将胃癌细胞株分为空白对照组（Sham组）、单纯脂质体对照组（Lip组）、正义寡核苷酸转染对照组（Lip-SODN组）、ASODN转染组（Lip-ASODN组）。转染48 h后,Western blot法检测各组细胞survivin表达情况,流式细胞仪检测各组细胞凋亡率,MTT法检测转染细胞对多西他赛的敏感性。结果脂质体介导survivin ASODN转染后的胃癌细胞survivin蛋白表达明显下降,细胞凋亡率明显高于各对照组（P〈0.05）,对多西他赛的IC50值明显低于各对照组（P〈0.05）,细胞生长抑制率明显高于各对照组（P〈0.05）。结论survivin ASODN转染胃癌细胞能下调survivin蛋白表达,诱导胃癌细胞凋亡,抑制细胞增殖,增强多西他赛化疗敏感性。     

Survivin反义寡核苷酸对人卵巢癌细胞株中survivin和SMAC/DIABLO基因表达的影响

目的 观察survivin反义寡核苷酸(ASODN)对人卵巢癌细胞株SKOV3中survivin、Smac/DIABLO表达的影响,探讨survivin、Smac/DIABLO在ASODN诱导卵巢癌细胞凋亡和细胞周期改变中的作用和分子机制.方法 用脂质体(LipofectamineTM 2000)介导survivin ASODN转染人卵巢癌细胞株SKOV3,用MTT比色法检测细胞生长活性,流式细胞学技术检测细胞凋亡指数、细胞周期分布及survivin、Smac蛋白表达改变,逆转录酶链反应检测survivin、Smac/DIABLO基因表达改变.结果 同对照组比较,不同浓度ASODN作用后细胞生长明显减慢,转染后48 h IC50在600 nmol/1左右.用600 nmol/LASODN转染48h后,细胞凋亡指数(AI)明显增加,(t=6.3671,P＜0.05);更多的细胞停留在G0/G1期(t=10.3832,P＜0.01).Survivin mRNA和蛋白表达明显下调(t=3.5031,P＜0.05,t=7.8146,P＜0.01),SmacmRNA和蛋白表达上调(t=2.8011,P＜0.05,t=11.3917,P＜0.01).结论 ASODN诱导细胞凋亡,使更多的细胞停留在G0/G1期,减少进入有丝分裂细胞数的作用,是通过下调survivin基因,上调Smac基因表达来共同完成的,survivin、Smac/DIABLO基因在调节SKOV3细胞周期、凋亡的功能上密切相关,二者的相互作用是卵巢癌发生、发展的重要分子机制之一.     

白藜芦醇对TRAIL诱导乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的影响

目的 研究白藜芦醇对TRAIL诱导乳腺癌,MDA-MB-231细胞增殖及凋亡的影响.方法 MTT法检测细胞增殖;AnnexinV染色并流式细胞术检测细胞凋亡;分光光度法检测Caspse-8、Caspase-3相对活性;DAPI细胞核染色法观察细胞凋亡.结果 50μmol/L和100μmol/L白藜芦醇分别与50 ng/mL TRAIL联合作用后,对MDA-MB-231细胞增殖的抑制率为(62.43±2.07)%和(87.32±1.44)%;而细胞凋亡率分别为(53.59±1.44)%和(73.72±1.96)%,与单独应用相应浓度的白藜芦醇和TRAIL比较,差异均存在显著性(P＜0.01).50ng/mL TRAIL分别与50μmol/L和100μmol/L白藜芦醇联合作用后,Caspase-8、Caspase-3的相对活性为(0.282±0.008)、(0.386±0.013)及(0.437±0.05)、(0.521±0.03),与对照组及单用TRAIL、白藜芦醇比较均明显增强,差异显著(P＜0.01).结论 TRAIL与白藜芦醇联合可协同抑制MDA-MB-231细胞增殖并诱导其凋亡,白藜芦醇增强TRAIL诱导细胞凋亡的作用可能是通过促进Caspase-8和Caspase-3的表达来实现.     

干扰水通道蛋白3对胃癌细胞增殖与凋亡的影响

目的:探究水通道蛋白3(AQP3)对胃癌细胞增殖与凋亡的影响及其可能机制。方法:通过RT-PCR、Western-blot实验检测胃癌细胞株中的AQP3表达水平;小干扰RNA构建AQP3低表达细胞系;CCK-8增殖实验和流式细胞术分别检测细胞增殖与凋亡水平;Western-blot检测细胞自噬水平,透射电镜观察自噬小体数目。结果:胃癌细胞AQP3表达水平较高;与干扰前相比,AQP3低表达细胞系中胃癌细胞增殖水平降低(P<0.05),凋亡水平提高(P<0.001),自噬标记蛋白LC3Ⅱ水平降低(P<0.001),P62表达水平上升(P<0.001)。结论:AQP3在胃癌细胞中高表达,干扰AQP3可通过降低自噬水平促进细胞凋亡,进而抑制胃癌细胞增殖,提示AQP3具有成为胃癌治疗分子靶点的潜能。     

甘草黄酮诱导肝癌ＳＭＭＣ-７７２１细胞凋亡及其对相关蛋白ｓｕｒｖｉｖｉｎ表达的影响

目的:探讨甘草黄酮(GF9)对肝癌SMMC-7721细胞凋亡的诱导作用及其机制.方法:采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测GF9对人肝癌细胞SMMC-7721细胞生长的影响,Hoechst染色法和电镜观察GF9诱导细胞凋亡的形态变化,流式细胞仪检测GF9诱导的细胞凋亡率,并通过免疫印迹法检测凋亡相关蛋白survivin和pro-caspase-3表达水平的变化.结果:GF9可抑制SMMC-7721细胞增殖,并呈时间剂量效应;400 μmol/L GF9可诱导细胞凋亡,呈时间依赖性;随着GF9作用时间的延长,survivin和pro-caspase-3表达下调.结论:GF9能诱导SMMC-7721细胞凋亡,这可能与GF9能够引起抑制凋亡蛋白survivin的下调有关.     

白藜芦醇在诱导人胃癌HGC27细胞凋亡中的机制研究

目的 探讨白藜芦醇(Res)干预人胃癌HGC27细胞后.PTEN与p-Akt信号通路中,VEGF、MMP-9表达差异并探讨其相互关系.方法 应用体外HGC27细胞培养技术,采用CCK-8实验测定Res对HGC27细胞生长抑制率的影响;采用流式细胞术分析细胞周期;采用Western blotting检测Res对HGC27细胞中凋亡相关基因PTEN和p-Akt的影响;采用ELISA法检测Res干预前后HGC27细胞的VEGF和MMP-9蛋白分泌水平的变化.结果 Res对HGC27细胞的生长抑制率存在浓度和时间依赖性(P＜0.05);Res干预HGC27后48 h,细胞周期分析显示DNA合成期(S期)细胞比例明显减少,并呈现剂量相关性(r=-0.930,P=0.007);PTEN相对表达量与Res干预浓度呈正相关(r=0.951,P=0.04);p-Akt、VEGF和MMP-9相对表达量均与Res干预浓度呈负相关(r=-0.969,P=0.03;r=-0.894,P=0.02;r=-0.881,P=0.01).结论 Res能够抑制人胃癌HGC27细胞的增殖.并且诱导其凋亡,其机制可能与上调PTEN的表达和抑制Akt的磷酸化有关,并通过调控VEGF和MMP-9的分泌实现HGC27的增殖抑制及凋亡.     

白藜芦醇在诱导人胃癌HGC27细胞凋亡中的机制研究

目的探讨白藜芦醇(Res)干预人胃癌HGC27细胞后,PTEN与p-Akt信号通路中,VEGF、MMP-9表达差异并探讨其相互关系。方法应用体外HGC27细胞培养技术,采用CCK-8实验测定Res对HGC27细胞生长抑制率的影响;采用流式细胞术分析细胞周期;采用Western blotting检测Res对HGC27细胞中凋亡相关基因PTEN和p-Akt的影响;采用ELISA法检测Res干预前后HGC27细胞的VEGF和MMP-9蛋白分泌水平的变化。结果 Res对HGC27细胞的生长抑制率存在浓度和时间依赖性(P<0.05);Res干预HGC27后48 h,细胞周期分析显示DNA合成期(S期)细胞比例明显减少,并呈现剂量相关性(r=-0.930,P=0.007);PTEN相对表达量与Res干预浓度呈正相关(r=0.951,P=0.04);p-Akt、VEGF和MMP-9相对表达量均与Res干预浓度呈负相关(r=-0.969,P=0.03;r=-0.894,P=0.02;r=-0.881,P=0.01)。结论 Res能够抑制人胃癌HGC27细胞的增殖,并且诱导其凋亡,其机制可能与上调PTEN的表达和抑制Akt的磷...     

Resveratrol induces apoptosis in pancreatic cancer cells

Background Pancreatic cancer is one of the most lethal human cancers with a very low survival rate of 5 years.Conventional cancer treatments including surgery, radiation, chemotherapy or combinations of these show little effect on this disease. Several proteins have been proved critical to the development and the progression of pancreatic cancer.The aim of this study was to investigate the effect of resveratrol on apoptosis in pancreatic cancer cells.Methods Several pancreatic cancer cell lines were screened by resveratrol, and its toxicity was tested by normal pancreatic cells. Western blotting was then performed to analyze the molecular mechanism of resveratrol induced apoptosis of pancreatic cancer cell lines.Results In the screened pancreatic cancer cell lines, capan-2 and colo357 showed high sensitivity to resveratrol induced apoptosis. Resveratrol exhibited insignificant toxicity to normal pancreatic cells. In resveratrol sensitive cells,capan-2 and colo357, the activation of caspase-3 was detected and showed significant caspase-3 activation upon resveratrol treatment; p53 and p21 were also detected up-regulated upon resveratrol treatment.Conclusion Resveratrol provides a promising anti-tumor stratagy to fight against pancreatic cancer.     

手术前中药康莱特对胃癌细胞凋亡与增殖的影响

0　引言　进展期胃癌患者免疫力低下 ,手术打击加重免疫功能下降 ,手术刺激又增加癌细胞的增殖 ,导致围手术期的免疫降低和加快肿瘤的生长及转移 .通过检测胃癌细胞凋亡与增殖 ,评价康莱特在围手术期对抑制癌细胞生长的作用 .1　临床资料　进展期胃癌患者 30 (男 18,女 12 )例 ,年龄 2 86 8(平均 4 6 )岁 .低分化腺癌 11例 ,中分化腺癌 13例 ,高分化腺癌 6例 .随机分为 3组 :对照 (Ａ)组 10例 ;康莱特治疗 (Ｂ)组10例 ;化疗 (Ｃ)组 10例 .各组间年龄、性别、病理分型及分期无统计学差异 (Ｐ >0 .0 5 ) .Ａ组 :术前及术后常规全肠外营养(ＴＰ…