地中海贫血造血干细胞移植供体及预处理方案选择的研究进展

地中海贫血为常染色体隐性遗传疾病,是由于基因突变导致血红蛋白的a或β珠蛋白链生成障碍引起的血液系统疾病.目前,造血干细胞移植(HSCT)是唯一可以治愈地中海贫血的方法.但是,由于受到HSCT供者与患者人类白细胞抗原(HLA)相合程度的限制,以及HSCT后的移植排斥与移植相关不良反应等并发症与预处理方案相关,因此选择合适的造血干细胞供体与预处理方案,对提高HSCT治疗地中海贫血的疗效至关重要.笔者拟就无关供者HSCT、亲缘供者HSCT、脐血移植(UCBT)及预处理方案的研究现状与研究进展进行综述.     

非清髓性外周血造血干细胞移植治疗重型β-地中海贫血1例

目的:异基因造血干细胞移植是治愈地中海贫血的唯一方法.观察应用强免疫抑制剂及胸腺球蛋白与减量的消胺为预处理方案,异基因外周血造血干细胞移植治疗重型β-地中海贫血的移植后效应以及降低并发症的特点.方法:选择2002-11于广州市第一人民医院血液科住院的11岁患者.出生时即诊断为纯合子重型β-地中海贫血.经患者家属同意和医院伦理委员会批准.对患者实施异基因外周血造血干细胞移植.供者为妹妹,血型相同,HLA配型全相合的杂合子轻型β-地中海贫血.预处理方案:氟达拉滨35 mg/(m2·d),马利兰 4 mg/(kg·d);抗胸腺细胞球蛋白200 mg/d.外周血造血干细胞动员粒细胞集落刺激因子150 μg/d×7 d;于移植前1 d至移植后1 d连续3 d采集细胞总量为:CD34 3.22×106/kg,单个核细胞4.52×108/kg,CD3 T细胞22.33×107/kg,当天输注.移植物抗宿主病的预防:环孢素A联合甲基泼尼松龙并渐减量,甲基泼尼松龙在2个月内停药.采用骨髓细胞的XY/XX的荧光原位杂交和微卫星法DNA指纹图检测植入证据.结果:血小板和白细胞在移植后10,14 d最低值为:1.26×109 L-1, 28.8×109 L-1;移植后30 d,血小板> 50×109 L-1,血红蛋白> 60 g/L, DNA指纹图为混合性嵌合体,性染色体示供者细胞占96%.移植后44 d,血红蛋白< 45 g/L,XY染色体占94%,行动员供者干细胞输注,输注CD34 1.02×106/kg,单个核细胞1.20×108/kg,T细胞(CD3 )2.2×107/kg,2周后血红蛋白上升;移植后75 d供者嵌合体占40%,停用环孢素A,供者嵌合体上升至96%,移植后120 d,仍然为混合性嵌合体状态.无移植物抗宿主病、肝静脉闭塞病、出血性膀胱炎和感染的发生.结论:以氟达拉滨和抗胸腺细胞球蛋白强烈免疫抑制剂、减量马利兰为基础预处理方案,实施异基因外周血造血干细胞移植治疗重型β-地中海贫血,可达到造血细胞在患者体内的迅速植入,减少移植相关并发症的发生.     

免疫治疗桥接二次非血缘外周血干细胞移植治疗重型β地中海贫血一例

造血干细胞移植是目前唯一能治愈重型β地中海贫血的方法,但移植难度大,移植失败后再次移植风险更大,如何改进预处理方案提高移植成功率尚无定论,该文报道了1例接受非血缘HLA全相合供者造血干细胞移植术后发生原发排斥并接受二次移植成功患儿。该例患儿被确诊为Pesaron分度Ⅲ度的重型β地中海贫血,首次接受非血缘HLA全相合供者造血干细胞移植术,移植失败,原发排斥,自身造血恢复后1年再次接受另一非血缘HLA全相合供者外周血干细胞移植术。二次移植前30 d予氟达拉滨联合地塞米松免疫抑制治疗,调整预处理方案,并输注骨髓间充质干细胞促进植入。二次移植后患儿获得稳定植入,完全脱离输血状态至35个月,发生肺炎1次,无其他并发症。该例治疗结果提示,移植前予氟达拉滨联合地塞米松抑制受者T淋巴细胞功能可促进植入。减低强度预处理方案,辅助输注骨髓间充质干细胞促进造血重建,可以克服非血缘外周血干细胞移植治疗重型β地中海贫血的原发排斥,促进二次移植成功。     

含氟达拉滨的预处理异基因造血干细胞移植治疗β-重型地中海贫血

目前异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)是根治重型地中海贫血(地贫)的惟一方法。预处理是供者造血干细胞能否植入的关键。寻找一种既能克服移植物排斥又不增加移植相关并发症的预处理方案一直是临床研究的一个热点。我们将氟达拉滨(Flud)加入地贫标准预处理方案中,不仅使 PesaroⅢ级重型地贫在清髓HSCT后获得持久植入,还成功地为2例肝硬化地贫患儿施行了非清髓无关供者HSCT。     

脐血干细胞移植治疗重型β-地中海贫血的临床进展

造血干细胞移植(Hematopoietic stem cell transplantation ,HSCT)是目前根治重型β-地中海贫血最有效的方法,它包括骨髓造血干细胞移植(BMT)、外周血干细胞移植 (PB SCT),脐血干细胞移植(CBSCT).相对而言,脐血干细胞具有增殖快、可以扩增、集落形成高,对异基因刺激反应轻,CBSCT所需细胞数比BMT、 PBSCT者少,且来源广泛等优点,已成为干细胞的重要来源之一.现将其有关CBSCT治疗重型β-地中海贫血的临床进展作一综述. 1 历史回顾     

动员后的同胞骨髓联合脐血混合移植治疗儿童重型β-地中海贫血8例

目的:总结分析动员后的同胞骨髓联合脐血混合移植治疗儿童重型β-地中海贫血的效果.方法;南方医科大学附属南方医院儿科2005-01/2009-03行同胞骨髓+脐血混合移植的重型β-地中海贫血患儿8例,男5例,女3例,年龄4.0～7.5岁,按Pesaro标准进行地中海贫血临床分度,Ⅰ～Ⅱ度7例,Ⅲ度1例.供者年龄1～4岁,预处理前4 d开始予以粒细胞集落刺激因子10 μg/(kg·d),共5 d,第5天抽取骨髓以及输注脐带血至患儿体内.结果:所有患儿均在移植后4周内恢复造血.8例患儿中有7例发生感染,4例患儿出现Ⅰ度肝静脉闭塞,2例患儿出现Ⅰ度急性移植物抗宿主病,1例患儿发生局限型慢性移植物抗宿主病.移植后32 d因肺部感染和心脏衰竭1例死亡,7例存活.结论:动员后的同胞骨髓联合脐血混合移植治疗儿童重型β-地中海贫血安全可靠,初步结果满意,但移植后存在一定的并发症需高度重视.     

异基因造血干细胞移植治疗重型再生障碍性贫血的护理

目的探讨异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）治疗重型再生障碍性贫血（SAA）的护理。方法对30例SAA的患者进行了allo—HSCT治疗与护理,比较不同移植方法的预后。结果除3例患者在移植期间死亡外,1例患者血小板未植活,后再次输注供者外周血干细胞后获得植活外,余患者移植后造血恢复顺利,于术后6～21dWBC植入,9～30dPLT植入;除1例脐带血移植患者移植物未植入,自身恢复外,余患者术后30d行骨髓STR—PCR检测显示为完全供者的基因型。结论allo—HSCT是治疗SAA的有效方法,在临床工作中把握不同类型的allo—HSCT的关键点,采取针对性的护理措施至关重要。     

嵌合体监测在非清髓异基因造血干细胞移植后干预治疗中的应用

非清髓异基因造血干细胞移植包括非清髓性预处理和移植后的临床干预治疗．而以后者更为重要。通过免疫抑制强度的调整、供者淋巴细胞输注（donor lymphocyte infusion,DLI）及二次移植等手段,强化移植物抗自血病（graft versus leukemia effect,GVL）效应,增加供体细胞植入,预防白血病复发,使部分移植后发生移植排斥和白血病复发的患者得到再次植入和完全缓解。国际骨髓移植登记处（IBMTR）主张干预性治疗必须在嵌合状态动态监测结果的指导下进行。我们对9例非清髓异基因造血干细胞移植后处于混合嵌合状态或疾病进展期．出现供体细胞（donor cell。DC）嵌合率下降,早期移植排斥和复发的患者在术后不同时间段监测嵌合体,并在此指导下给予临床干预治疗,取得较好疗效,现报道如下。     

重型β地中海贫血并发糖尿病六例

目的:探讨β地中海贫血并发糖尿病的发病机制和临床特征.方法:对我院收治的β地中海贫血并发糖尿病6例的临床资料进行回顾性分析.结果:本组6例均在出生后6个月内发病,全部经血常规、血红蛋白电泳及家系调查确诊为重型β地中海贫血.均在输血治疗2～3年后出现皮肤色素沉着并轻度黄染,其中表现为多饮、消瘦2例,消瘦2例,夜尿多、多饮并多尿各1例.经检查空腹血糖、尿糖明确诊断为糖尿病.结论:合并糖尿病的重型β-地中海贫血有逐年上升的趋势,可能与重型贫血患者寿命延长以及人们对地中海贫血合并糖尿病日益重视有关.造血干细胞移植(HSCT)为最有效治疗手段.     

肾-骨髓联合移植诱导免疫耐受:能够促进移植后嵌合体的形成吗?

背景:特异性的供者骨髓造血干细胞输注促进了嵌合体的形成,可以诱导器官移植免疫耐受.然而为达到细胞嵌合进行骨髓移植的预处理毒性大,发生移植物抗宿主反应的风险较高,人们开始寻找一些毒性更小的方案,其中包括免疫抑制剂联合骨髓输注等,尽管动物实验中已有诱导成功的耐受模型,但临床实用的诱导耐受方法则难以突破.目的:以嵌合体理论为基础,分析肾-骨髓联合移植诱导嵌合体形成与免疫耐受的相关性及安全性. 设计、时间及地点:对比观察,于1998-01/2005-12在郑州市第三人民医院泌尿外科完成.对象:根据ABO/Rh血型相同及HLA配型原则,将同期等待肾移植的96例女性慢性肾功能衰竭患者分为2组,每组48例.联合移植组患者接受尸体肾、骨髓联合移植;同期接受上述同一供者另一肾脏的尿毒症患者作为对照组.供者为48例健康男性.方法:供者在取肾的同时,采集骨髓加入细胞冷冻保养液,经细胞程序降温至-198 ℃液氮罐保存.移植后应用大剂量抗人T淋巴细胞免疫球蛋白诱导治疗2周,于肾脏移植后2周实施骨髓细胞回输,输注的单个核细胞数为(0.9～2.5)×10~8/kg.采用聚合酶链反应方法检测人性别决定基因SRY.抽血检测CD3,CD4,CD8,CD25,以酶联免疫吸附法测定血白细胞介素10、肿瘤坏死因子α、肿瘤坏死因子β等血细胞因子质量浓度.主要观察指标:移植后于不同时间点对受体进行嵌合体、淋巴细胞亚群及细胞因子检测.随访观察两组受者的临床移植效果及并发症发生情况.结果:联合移植组嵌合体阳性率显著高于对照组(P < 0.05).随访3年,嵌合体阳性受者和嵌合体阴性受者排斥发生率差异具有显著性意义(13%,35%,P < 0.05).联合移植组呈现免疫抑制状态,未见移植物抗宿主病发生.结论:肾-骨髓联合移植能促进移植后嵌合体的形成,显著降低排斥反应发生率,是一种安全有效的诱导免疫耐受的方法.     

骨髓干细胞输注联合低剂量他克莫司在肾移植中诱导嵌合体的形成

背景:骨髓细胞嵌合体通过有效的免疫耐受机制,使其成为临床用于移植免疫耐受的主要候选方法.目的:探讨大鼠肾移植及活体肾移植中骨髓干细胞移植对免疫耐受的诱导作用及机制.方法:①大鼠肾移植:40只Wistar大鼠(雌雄各半)随机分为实验组和对照组,进行肾移植手术,术前经门静脉分别注射骨髓干细胞及生理盐水,30 d后观察肉眼和光镜下排斥反应及检测嵌合体的形成.②活体肾移植:实验组为夫妻或亲属共5对,供者均为男性,受者为女性.术前应用他克莫司口服,供者皮下注射生白细胞药物,采集白细胞悬浊液,以流式细胞仪测定CD34细胞比例,0.7%以上为骨髓干细胞含量合格,并通过外周静脉输注至受者体内,10 d后同法再输注1次,1周内行移植手术,术后复查肾功,于半年后采用荧光原位杂交的方法检测Y基因片段.对照组为正常活体.肾移植手术,未行骨髓干细胞移植.结果与结论:动物实验组大体和光镜下排斥反应均较轻微,嵌合体检测均为阳性,活体实验组嵌合体检测4例为阳性,而对照组仅1例为阳性.提示应用他克莫司并输注供者骨髓干细胞,可诱导一定的免疫耐受.移植前输注供者骨髓干细胞形成的嵌合体与免疫耐受有关.     

造血干细胞移植中"非清髓性"预处理治疗的研究进展

造血干细胞移植中"非清髓性"预处理方案,是相对于强烈放、化疗预处理而设计的治疗措施.治疗过程中患者受到一定程度的免疫抑制,减弱其对异基因移植物的排斥反应.移植物获植入后,分裂增殖的免疫细胞和输注供者T淋巴细胞,逐步清除体内残留的肿瘤细胞,同时建立嵌合体造血或完全供者型造血.临床观察,该方案毒、副作用相对较小,可扩大移植适应证范围.需进一步完善预处理方案和明确临床适应证.     

熊去氧胆酸预防重型地中海贫血移植后肝静脉闭塞病

目的:为探讨更好的重型地中海贫血(地贫)造血干细胞移植患者肝静脉闭塞病(VOD)预防方案,观察熊去氧胆酸联合小剂量肝素及前列腺素E脂质微球预防重型β-地中海贫血造血干细胞移植VOD的效果.方法:58例重型β-地中海贫血患儿接受异基因造血干细胞移植61次,所有患者从移植前开始至移植后20 d均给予肝素钠每日100～150 IU/kg,24 h微量泵维持静脉注射,前列腺E脂质微球每日1～1.5μg/kg,输液泵持续静脉输注10 h以上;研究组给予口服熊去氧胆酸[12 mg/(kg·d)],对照组则不给熊去氧胆酸,两组均用肝素及前列腺素E脂质微球至移植后第20天,以预防VOD.结果:研究组3例发生VOD(3/33,8.8%),对照组10例发生VOD(10/28,37.0%).两种预防方案在使用过程中均未出现明显的药物毒副反应.结论:熊去氧胆酸联合肝素及前列腺素E脂质微球预防重型β-地中海贫血造血干细胞移植后肝静脉闭塞病疗效更加显著.     

非清髓异基因造血干细胞移植术后荧光STR-PCR血细胞嵌合体定量检测

非清髓异基因造血干细胞移植（allo—NST）后，明确判定残余宿主细胞与供者细胞嵌合状态对于疗效评估及供者淋巴细胞输注（DLI）时机的把握是至关重要的。由于短片段串联重复（STR）的核心序列短小，不易受DNA降解及优势扩增的影响，因而STR可作为异基因造血干细胞移植后嵌合体检测的灵敏度高，且易于操作的技术方法。我们对29例allo—NST后供一受者的嵌合体分析，研究嵌合体与微量残留病（MRD）、疾病复发、移植物抗宿主病（GVHD）等的相关性。     

HLA不全相合同胞脐血移植治疗儿童重型β珠蛋白生成障碍性贫血——附6例报告

目的：评价人类白细胞抗原（human leukocyte antigen，HLA）不全相合同胞脐血移植治疗儿童重型β珠蛋白生成障碍性贫血（重型β珠贫）的可行性。方法：对6例重型β珠贫患儿进行HLA2个位点不合的同胞脐血移植，输入脐血总有核细胞6．1×10^7／kg～15．6×10^7／kg（中位数9．7×10^7／kg），CD34＋细胞0．3×10^5／kg～13．3×10^5／kg（2．4×10^5／kg）。预处理方案包括，应用羟基脲、氟达拉滨、白消安、环磷酰胺及抗胸腺细胞球蛋白，大量输注红细胞悬液，同时应用去铁胺。结果：5例患儿获得植入，其中3例为长期稳定植入并脱离红细胞输注，获得植入的5例患儿均发生Ⅰ～Ⅱ度急性移植物抗宿主病，无发生慢性移植物抗宿主病。1例短暂植入（移植后17～21d）后发生排斥，并于移植后75d死于颅内出血和大肠埃希菌败血症。结论：HLA不全相合同胞脐血移植治疗儿童重型β珠贫，虽然移植排斥率较高，但急性移植物抗宿主病严重程度低，为无HLA全相合供者的儿童重型β珠贫患者提供了新的治疗手段。     

修正的供者淋巴细胞输注研究进展

造血干细胞移植(HSCT)已经成为恶性血液病的重要治疗手段.然而,移植后疾病复发可显著降低患者的长期生存率.修正的供者淋巴细胞输注(MDLI),输注的是经粒细胞集落刺激因子(G-CSF)动员的外周造血干细胞,而非静止状态的淋巴细胞.该方法能够减少供者淋巴细胞输注(DLI)后相关的移植物抗宿主病(GVHD)及复杂性血细胞减少,同时保留或者增强移植物抗肿瘤效应(GVT),因此MDLI已经广泛用于恶性血液病移植后复发的治疗.笔者拟就MDLI的作用机制、临床适应证、输注剂量、输注时机、间隔时间、疗效评估等进行综述.     

15例异基因造血干细胞移植术后复发患者骨髓中树突细胞亚群分析

近年来，人们将供者淋巴细胞输注（DLI）用于白血病患者异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）术后复发的治疗，并获得良好效果。许多临床研究结果显示，无论是allo-HSCT治疗白血病还是DLI治疗allo—HSCT术后复发均存在一个规律：即对慢性粒细胞白血病慢性期（CML-CP）效果最好，急性髓系白血病（AML）其次，急性淋巴细胞白血病（ALL）最差。     

建立人源β-地中海贫血小鼠模型

背景: 没有适合的β-地中海贫血动物模型的发展,就没有β-地中海贫血基因治疗的进步,而小鼠模型是最有用的且通常用于第一线的体内试验.目的: 拟建立人源β-地中海贫血小鼠模型,为β-地中海贫血的基因治疗提供与人类疾病相似、可靠的动物模型.方法: 非肥胖糖尿病,重症联合免疫缺陷(NOD/SCID)小鼠15只,随机均分为3组;β-地贫/HbE骨髓移植组、β-地贫骨髓移植组、空白对照组.取β-地中海贫血/HbE和β-地中海贫血患者骨髓的单个核细胞,分别从尾静脉输注给经60Co Y射线350 cGy全身照射预处理后的β-地贫/HbE骨髓移植组、β-地贫骨髓移植组小鼠,空白对照组输注RPMI-1640培养液.移植后小鼠腹腔注射重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子及重组人促红细胞生成素.观察小鼠一般状况和存活情况,移植5周后取小鼠骨髓及外周血,检测人CD45+细胞比例、人β-地贫基因,观察红系细胞内α-珠蛋白链的沉积情况、小鼠的肝脏和脾脏病理及铁染色检查.结果与结论: 移植5周后,小鼠骨髓和外周血人CD45+细胞比例结果分别为:β-地贫/HbE骨髓移植组为.7.21%、4.08%(+47 d),7.37%、6.03%(+61 d);β-地贫骨髓移植组为8.17%、3.43%(+36 d),16.82%、8.89%(+45 d),空白对照组均为0.β-地贫基因检测结果与供者相符,部分红系细胞内出现电子致密物(过剩α-珠蛋白肽链)沉积.移植组小鼠脾脏长度与其体质量的比值比空白对照组的大(P<0.05),肝脾出现较明显的铁沉积.提示,所建立的小鼠模型具有人源化β-地中海贫血的表现,基本符合人源β-地中海贫血小鼠模型的要求.     

甲磺酸伊马替尼或联合供者淋巴细胞输注治疗异基因造血干细胞移植后复发的慢性粒细胞白血病

异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）后复发的慢性粒细胞白血病（CML）患者可采用化疗、2次移植和干扰素α治疗，但效果均不理想。供者淋巴细胞输注（DLI），因其能使复发者重建供者型造血而成为移植后复发CML的一线治疗，但常伴有移植物抗宿主病（GVHD）和全血减少两大合并症。甲磺酸伊马替尼（伊马替尼）是针对CML致病基因——bcr／abl融合基因产物的分子靶向药物。近年来，     

造血干细胞移植中“非清髓性”预处理治疗的研究进展

造血干细胞移植中“非清髓性”预处理方案，是相对于强烈放、化疗处理而设计的治疗措施。治疗过程中患者受到一定程度的免疫抑制，减弱其对异基因移植物的排斥反应。移植物获植入后，分裂增殖的免疫细胞和输注供者T淋巴细胞、逐步清除体内残留的肿瘤细胞，同时建立嵌合体造血或完全供者型造血。临床观察，该方案毒、副作用相对较小，可扩大移植适应证范围。而进一步完善预处理方案和明确临床适应证。