单中心191例健康供者应用G-CSF动员造血干细胞的影响因素分析

本研究旨在探讨粒细胞集落刺激因子（G-CSF）动员外周血造血干细胞的影响因素及对健康供者的影响。181例志愿健康供者应用G-CSF5-10μg/（kg·d）动员,10例应用G-CSF3．3-4．9μg/（kg·d）动员,12h1次,连续动员4-5d;采集、检测外周血中单个核细胞（MNC）数与CD34＋细胞数,并观察供者动员及采集过程中的不良反应。结果表明,与动员前相比,动员后（采集前）供者外周血白细胞数平均升高7倍（P〈0．01）;血小板数明显下降（P〈0．01）;血红蛋白含量无明显差异性。动员第4或5天采集效果无差异。男性供者采集的MNC、CD34＋细胞数高于女性（P〈0．01）,高体重供者采集的MNC、CD34＋数高于低体重供者,年龄对采集效果无明显影响。G-CSF剂量与采集效果无线性关系。供者不良反应轻微。结论：G-CSF可以有效动员外周血造血干细胞,供者无明显的不良反应。     

健康供者外周血造血干细胞动员后采集的最佳时机

背景:外周血干细胞移植的首要条件是造血干细胞有效动员和采集,并能较快持久地重建造血.近年国内外不少单位已开展了此项工作,但平均每例供者采集次数较多,且造血干细胞的产率高低差别较大. 目的:探讨健康供者外周血造血干细胞动员后采集的最佳时机.方法:2003-01/2008-12海口市人民医院进行异基因外周血造血干细胞采集的健康捐赠者16例,随机分为2组,单纯动员组6例,皮下注射粒细胞集落刺激因子5.0～10.0 μg/(kg·d),共5 d;联合组10例,在单纯动员组基础上,静脉推注地塞米松10 mg.每例供者均采集2次外周血造血干细胞,单纯动员组与联合组又各分为2 h,4 h两个亚组,即若在第4天动员后2 h采集,则第5天在动员后4 h采集;若在第4天动员后4 h采集,则第5天在动员后2 h采集.16例供者采集量为4.0～5.0 mL,推赶量3.0～5.0 mL,总循环血量6.7～10.1 L.结果与结论:单纯动员组、联合组采集的单个核细胞数均达到(4.0～8.0)×10~8 kg~(-1).与2 h亚组比较,两组4 h亚组采集物的单个核细胞数均明显增加(P < 0.05).提示粒细胞集落刺激因子动员后第4,5天进行采集,4 h采集物的细胞浓度明显高于2 h;供者采集时循环血量是其自身循环血量的1.8～2.2倍时已能一次采集足够量的细胞数,有较合理的采集时间-价值-效益的关系.     

健康供者造血干细胞动员和采集效果的分析

目的对影响造血干细胞动员和采集效果的多因素进行分析,进一步探讨最佳动员方案及采集时机。方法对94例健康供者采用惠尔血或瑞白5～10μg·kg-1·d-14～5d进行造血干细胞动员,采取相关性分析方法分析供者体重、粒细胞集落刺激因子（G-CSF）动员天数、剂量及采集前外周血淋巴细胞数值与采集效果的关系。结果采集效率与供者体重指数、采集天数、动员剂剂量有关。G-CSF动员第5天采集的供者,其单个核细胞（MNC）数、CD34＋细胞数优于其他时间采集的供者。同时,外周血淋巴细胞数值与采集物MNC比例呈正比。结论应用5～10μg·kg-1·d-1G-CSF动员并于第5天开始采集是健康供者造血干细胞动员的较理想方案。     

异基因造血干细胞移植中回输造血干细胞的量和回输时受者白细胞数与疾病预后关系分析

本研究旨在探讨异基因造血干细胞移植中造血干细胞的回输量和回输时受者白细胞数与疾病预后关系。回顾性分析西安交通大学医学院第一附属医院血液科收治的37例异基因造血干细胞移植患者的临床资料,按照回输时受者白细胞数分为粒细胞缺乏组和非粒细胞缺乏组,比较两组患者移植后造血重建、移植物抗宿主病（GVHD）、移植后复发及死亡的发生情况;按照回输的单个核细胞数（MNC）及CD34阳性细胞数的中位数,将患者分为高剂量组和低剂量组,比较不同剂量组患者移植后造血重建、GVHD、移植后复发及死亡的发生情况。结果表明,回输时受者为非粒细胞缺乏者造血重建快于粒细胞缺乏者;高剂量MNC组造血重建快于低剂量MNC组;CD34阳性细胞计数高剂量组与低剂量组之间造血重建无统计学显著差异。高剂量MNC组和非粒细胞缺乏组GVHD发生率高（P〈0．05）。不同回输造血干细胞量及回输时白细胞数组间复发及死亡率间无统计学显著差异。结论：异基因造血干细胞移植中MNC计数和回输时受者白细胞数与造血重建相关;高剂量MNC组和非粒细胞缺乏组GVHD发生率高：回输造血干细胞的量与回输时受者白细胞数与疾病的复发及死亡无显著关系。     

预判急性白血病患者Auto—PBSCT动员、采集效果影响因素的临床研究

目的：探讨急性白血病患者外周血干细胞动员、采集的效率及影响因素。方法对37例急性白血病患者经化疗＋生长因子动员,动员第5～10天,当外周血WBC＞5×109/L,CD34＋＞20个/μl时,使用CS-3000 Plus血细胞分离机（Baxter公司）进行外周血干细胞采集;采集前外周血WBC分类单个核细胞（MNC,包括幼稚细胞、淋巴细胞及单核细胞）,计算MNC%×WBC计数＞（4～6）×109/L预计需要采集循环血容量。分析不同化疗动员时机、疾病、年龄、性别的动员采集,并对采集前外周血进行白细胞计数、分类以及干细胞采集物进行WBC计数、分类和CD34＋检测。结果所有患者均成功动员和采集到了外周血干细胞（MNC＞6×108/kg,CD34＋＞2×106/kg）,并成功造血重建。急性髓细胞白血病患者采集所获得的 MNC 与急性淋巴细胞白血病患者采集获得无明显差异;但急性淋巴细胞白血病患者采集获得CD34＋细胞明显较多（P＝0.015）;动员时机的化疗病程与采集物的CD34＋细胞呈负相关,动员时机≤3个疗程与≥6个疗程比较,前者CD34＋细胞明显较好,具有统计学差异（P＝0.028）;外周血MNC数值与采集物MNC及CD34＋细胞具有相关性（r＝0.600,P＝0.00;r＝0.510,P＝0.001）。结论根据不同的疾病、性别、年龄,采用不同的动员采集方案,一般可以成功采集。外周血 MNC 数值对采集物中 CD34＋细胞的总量具有一定预测意义。     

ABO血型不合供者外周血造血干细胞的采集及移植效果研究

目的探讨应用CS-3000 Plus血细胞分离机采集ABO血型不合供者外周血造血干细胞的效率及不去除红细胞和/或血浆进行异基因外周血造血干细胞移植(PBSCT)的安全性。方法经G-CSF 5μg/(kg.d)动员的异基因外周血干细胞供者33名,应用CS-3000 Plus血细胞分离机的干细胞采集程序于动员后d 5采集,其中ABO血型主要不合12名,次要不合8名以及ABO血型相合13名。根据供者外周血的红细胞压积(Hct)和单个核细胞(MNC)计数,对分离机参数作相应调整。输注前从产品袋中留取干细胞,检测有核细胞数、MNC比例、CD34+细胞数、红细胞、血浆含量。单次处理循环血量(9 986±2 489)ml,抗凝剂用量(971±162)ml。供者采集前注射10%葡萄糖酸钙,以预防低钙反应。观察PBSC输注后受者的生命体征、尿液颜色及是否有溶血相关不良反应等。结果ABO血型主要不合组、次要不合组与ABO血型相合组采集物中的有核细胞数、CD34+细胞数、MNC比例无统计学差异(P>0.05),3组供者每次采集的PBSC产品终体积近60 ml,ABO主要不合组采集物中混入红细胞为(3.67—10.25)×1010/袋,ABO次要不合组采集物中血浆量为22—38 ml,不去除红细胞及血浆,直接回输给受者,均未出现溶血反应,所有患者造血功能均获得重建。结论应用CS-3000 Plus血细胞分离机采集ABO血型不合供者的外周血干细胞,通过调整分离机参数,减少ABO血型不合红细胞的混入,可以获得足够的干细胞数量并安全用于移植。     

健康供者外周造血干细胞采集的护理

目的 总结健康供者外周造血干细胞采集过程的护理。方法 对健康供者采集外周造血干细胞进行全程护理。结果 22例健康供者均顺利完成外周血造血干细胞采集,不良反应较少,采集物单个核细胞数(MNC)和CD34+细胞数均达到移植要求。结论 正确的护理可以顺利、高质量地完成健康供者外周血造血干细胞的采集。     

3种血细胞分离机采集外周血造血干细胞的安全性与有效性研究

目的 初步探讨3种血细胞分离机在采集外周血造血干细胞中的应用,并分析影响其安全性与有效性的相关因素.方法 总结2005年10月～2012年1月,浙江省血液中心与浙江大学附属第一医院自/异体外周血造血干细胞采集129例,比较并探讨CS-3000 Plus、COM.TEC与COBE Spectra MNC3种血细胞分离机的采集效率与影响因素,评估3种仪器对供者血小板与血红蛋白的影响.结果 129例供者中,CS-3000 Plus血细胞分离机采集47例,共70次;COM.TEC血细胞分离机采集22例,共33次;COBE Spectra MNC血细胞分离机采集60例,共89次.每位供者平均采集1.5次.3种仪器采集的产品CD34+细胞总数无显著性差异,COBE Spectra MNC组体外总循环量与采集产品容量最低,对供者的血小板影响程度最低(P ＜0.005);COM.TEC组对供者血红蛋白的影响最小(P ＜0.005);采集产品中CD34+细胞总数与采集前供者MNC计数和处理血量均呈正相关关系(r =0.771 4,0.397 1,P＜0.001).结论 根据不同供者的循环血量、动员情况、血色素、血细胞计数、患者经济状况等因素选择合适的单采仪器与方法,经过1～2次的单采都可以安全地采集到高浓度的、能满足临床需要的外周血造血干细胞.相比之下,COM.TEC血细胞分离机采集外周血造血干细胞产品容量大,对供者血小板影响也大.     

中剂量rhG-CSF对正常供者外周血CD34+细胞动员效果

本研究探讨中等剂量600μg/d粒细胞集落刺激因子(GCSF)对正常供者CD34 细胞的动员效果及动员前后外周血单个核细胞中T细胞亚群的变化。对2002-2004年我科31例健康供者给予rhGCSF600μg/d,在动员的第4天开始采集外周血干细胞(PBSC),并检测动员前后白细胞总数、动员后的有核细胞(NC)数、单个核细胞(MNC)数、CD34 细胞数及粒巨噬细胞集落形成单位(CFUGM),同时观察动员及采集过程中的不良反应。对12例供者GCSF动员前后外周血单个核细胞中T细胞亚群的变化进行了观察。结果显示:600μg/d组与既往使用的300μg/d组相比,rhGCSF动员后的外周血细胞中NC、MNC和CD34 细胞及CFUGM显著增加(P<0.05),受者造血重建时间缩短(P<0.05),动员和采集过程中的不良反应发生率无明显上升(P>0.05),无严重不良反应发生。动员后CD3 细胞在PBMNC中的比例较动员前下降(15.05±3.3)%,(P<0.05)。动员前后CD4 /CD8 淋巴细胞的比值无明显变化(P>0.05)。结论:600μg/d的GCSF对正常供者的动员效果好,受者造血重建快,无严重不良反应发生。动员后PBMNC中CD3 细胞的下降及CD4 /CD8 淋巴细胞比值无明显变化,从而使得移植后急性GVHD的发生率无明显上升。     

无关供者55例外周血造血干细胞动员和采集护理

目的:探讨外周血造血干细胞(PBSC)动员和采集对无血缘关系造血干细胞供者的影响和相关的护理措施.方法:对55例PBSC无关供者采用重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)皮下注射3～5 d,使用CS-3000 plus型血细胞分离机采集PBSC,在动员和采集过程中给予相应的身心护理.结果:55例供者均顺利完成PBSC动员和采集,不良反应较少而且可预见、可控制,所有供者采集物单个核细胞数(MNC)和CD+34细胞数均达到移植要求.结论:良好的身心护理、充分的技术准备、娴熟的操作技巧以及严密的术中监测,在最大限度减轻供者躯体不适,消除其心理疑虑的同时,保障了PBSC动员和采集顺利完成.     

亲缘与非亲缘供者造血干细胞动员和采集的安全性比较

本研究对捐献骨髓及外周造血干细胞的健康亲缘供者及只捐献外周造血干细胞的非亲缘供者,在造血干细胞动员和采集的安全性方面进行比较。对2005年9月至2006年8月在北京大学人民医院血液病研究所提供异基因造血干细胞的亲缘供者100例及2003年11月至2007年12月在中国造血干细胞捐献者资料库北京管理中心登记的非血缘供者71例,在造血干细胞动员、采集及采集后1、3、6个月及每年进行了评估。对血常规指标、不良反应等进行观察记录,并对随访期间的长期不良反应及生活质量进行了问卷调查。结果显示：亲缘供者提供的骨髓＋外周血干细胞总MNC剂量为6．70（4．11—12．23）×10^8／kg,总CD34^＋细胞剂量为3．40（1．61—13．57）×10^6／kg：非亲缘供者提供的外周血干细胞总MNC剂量为6．69（3．35-11．48）×10^8／kg,总CD34^＋细胞剂量为3．50（1．15—11．60）×10^6／kg。动员时的常见副作用为骨痛,在亲缘供者的发生率为47％,在非亲缘供者的发生率为43．7％,两组之间无显著性差异;采集时的常见副作用为感觉异常（口唇和四肢）,在亲缘供者的发生率为25％,在非亲缘供者的发生率为29．6％,两组之间无显著性差异;所有供者对副作用皆可耐受,没有供者因为不能耐受而中断采集。亲缘供者由于骨髓和外周血的采集,其血红蛋白水平低于非亲缘供者[（125．8±20．2）g／L vs（143．2±20．1）g／L]（P〈0．05）。非亲缘供者由于外周干细胞采集多为2次,其血小板计数低于亲缘供者[（126．2±57．2）×10^9／L vs（162．4±72．9）×10^9／L]（P〈0．05）。在长期随访中,亲缘供者与非亲缘供者的血常规检查结果比较无显著性差异,无长期的不良反应,健康状况良好。结论：亲缘与非亲缘供者进行造血干细胞采集都是安全可行的。术前进行完备的检查,术中仔细操作、严密观察,及术后长期随访对于供者的安全有重要的意义。     

恶性血液系统疾病自体外周血造血干细胞动员的临床分析

目的:分析恶性血液系统疾病患者外周血造血干细胞动员与采集过程中的影响因素。方法:对50例血液系统恶性疾病患者在东南大学附属中大医院血液科进行外周血造血干细胞动员。对患者年龄、性别、动员方案、疾病状态、采集机器等因素进行分析,评估以上因素对干细胞动员结果的影响,并分析了采集前白细胞、血红蛋白、血小板的数量与采集的CD34^+细胞计数的相关性。结果:动员方案对CD34^+细胞采集数及CD34^+细胞采集成功率的影响有显著性影响,而性别、年龄、确诊到动员间隔时间、既往化疗方案、骨髓受累与否等对干细胞采集数量影响并不显著。采集前外周血白细胞数量及血红蛋白数量与采集的CD34^+细胞数呈正相关。采集前外周血中白细胞计数及单个核细胞计数与采集成功密切相关。结论:化疗联合细胞因子的动员方案采集造血干细胞优于单用细胞因子的动员方案。通过采集前白细胞计数及单个核细胞计数确定合适的采集时机,可以提高采集的成功率。     

新型外周血CD34+细胞动员剂--抗CD49d单克隆抗体的实验研究

为了探讨外周血干细胞动员的新途径，用抗CD49d单克隆抗体和rhG-CSF及二者联合给小鼠皮下注射，动态观察小鼠外周血的白细胞总数和CD34^ 细胞数的变化，并将各种动员方法所获得的干细胞分别进行干细胞移植。结果发现，给予动员剂后小鼠的外周血白细胞总数和CD34^ 细胞比例明显升高，以rhG-CSF和抗CD49d单克隆抗体联合给药效果最佳。移植后各组小鼠均获造血重建，以联合动员组造血恢复速度最快。结论：抗CD49d单克隆抗体能有效动员小鼠外周血干细胞，与rhG-CSF具有协同作用。     

低剂量rhG-CSF对56例非血缘供者外周造血干细胞动员

本研究观察低剂量人重组粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)对非血缘健康供者的影响,探讨用于中华造血干细胞捐赠者资料库提供的非血缘健康供者外周造血干细胞动员方案。56例非血缘健康供者接受rhG-CSF 5μg/(kg.d)皮下注射,在动员第4、5两天或第5、6两天采集干细胞,观察动员效果及不良反应,检测动员前后血常规指标、CD3+、CD4+、CD8+和CD20+细胞比例;对采集物进行单个核细胞(MNC)和CD34+细胞计数;对所有供者随访至2006年5月31日。结果显示:在rhG-CSF动员过程中出现1级毒副作用(按WHO分级标准):腰背酸痛17.9%(10/56)、焦虑失眠8.9%(5/56)、疲乏4.5%(3/56)等,无需特殊处理,无需终止动员。第4、5两天采集和第5、6两天采集所得的MNC分别是(5.95±1.52)×108/kg和(7.19±2.12)×108/kg;CD34+细胞分别是(3.03±1.09)×106/kg和(7.92±2.50)×106/kg。血红蛋白水平、血小板量、CD3、CD4、CD8、CD20百分比动员前后无变化。结论:5μg/(kg.d)rhG-CSF用于非血缘健康供者的动员是安全而有效的。     

未动员的外周血造血干细胞采集效果及影响因素

目的探讨未动员的外周血造血干细胞(PBSC)采集效果及影响因素。方法应用血细胞分离机对112例未经重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)动员的健康供者进行PBSC采集,并分析年龄、体质量指数(BMI)、采集前血常规指标、采集循环血容量、处理血量及循环次数等因素对男女两组供者所采集获得的单个核细胞(MNC)、CD34+计数的影响,同时比较分析男女两组供者采集前血常规指标及采集过程、采集物等指标。结果男性组年龄,BMI,采集前血细胞比容(Hct)、血红蛋白(Hb)、MNC计数、白细胞(WBC)计数,总循环血量高于女性组,而采集处理血量、采集物中MNC计数低于女性组,差异均有统计学意义(P<0.05)。在男性组中,采集物中MNC计数的影响因素为采集循环数(P=0.018),CD34+计数的影响因素为采集前血小板(PLT)计数(P=0.048)。女性组年龄、采集前PLT计数、WBC计数、MNC百分比、MNC计数是采集物中MNC计数的影响因素(P<0.05),采集前Hct、PLT计数及采集处理血量是采集物中CD34+计数的影响因素(P<0.05)。结论未经rhG-CSF动员的健康供者其外周血中存在一定数量的MNC、CD34+细胞,并能采集到满足临床嵌合抗原受体T细胞疗法所需要的MNC阈值。健康供者不同年龄、性别、总循环血量等可致采集效果不一致;采集前关注血常规中PLT计数有助于预测PBSC采集效果。     

rhG-CSF体内应用对骨髓和外周血造血干/祖细胞上CXCR-4表达的影响

为了观察rhG-CSF动员对外周血和骨髓造血干/祖细胞上CXCR-4表达的影响,应用三色荧光标记技术对动员前后骨髓和外周血中单个核细胞（MNC）和CD34＋细胞上CXCR-4的表达进行了测定.结果显示,G-CSF动员显著增加了外周血MNC及骨髓CD34＋细胞上CXCR-4的表达,骨髓MNC及外周血CD34＋细胞上CXCR-4的表达无变化,稳态骨髓（SS-BM）中CD34＋细胞比例与G-BM、G-PB中CD34＋细胞比例呈正相关,与采集到的骨髓及外周血中CD34＋细胞/公斤也具有良好的正相关性.结论：G-CSF体内应用后CD34＋细胞上CXCR-4表达的变化可能是动员机制的一部分,CXCR-4的高表达可能有利于MNC的植入,SS-BM中CD34＋细胞的含量可作为动员效果好坏的预测指标.     

外周血造血干/祖细胞动员与采集时动态快速监测造血祖细胞的意义

为了获得高效的外周血干/祖细胞采集,探索一种简便、快速的外周血干/祖细胞监测方法，采用Sysmex XE-2100血细胞分析仪的幼稚细胞信号（IMI）检测通道识别和计数外周血造血祖细胞（HPC）。对25例行异基因外周血造血干细胞移植动员的供和11例自体外周血干细胞动员的患的外周血造血干/祖细胞进行了动态观察。于动员过程中取外周血进行HPC，CD34^ 细胞和CFU-GM的检测，对采集物也进行上述检测。结果表明：在外周血标本中HPC与CD34^ 细胞和CFU-GM二间均呈良好的正相关性。所有检测病例外周血CD34^ 细胞与HPC同时上升，同时达高峰。供的峰值出现在动员的第5天，快速升高晚于白细胞。而患外周血干/祖细胞的快速升高早于白细胞。采集物中HPC与CD34^ 细胞和CFU-GM呈正相关性。采集当日外周血中HPC和CD34^ 细胞计数与采集所得CD34^ 细胞数量亦具有良好的线性相关。结论：造血祖细胞的监测是一种快速、简便又经济的监测外周血干细胞采集时机和预测成功采集的可靠指标。     

MAG方案对恶性血液病患者造血干细胞动员作用的研究

目的　研究米托蒽醌 (MTZ)联合大剂量阿糖胞苷 (Ara C)、重组人粒细胞集落刺激因子(rhG CSF)组成MAG方案对恶性血液病患者外周血干细胞的动员作用。方法　 1995年 12月至2 0 0 3年 4月 ,采用MAG方案对 14例恶性淋巴瘤和 2 9例急性白血病患者外周血干细胞进行动员 ,其用量为MTZ 10mg/m2 ,第 2 ,3天 ;Ara C 2 g/m2 ,每 12h 1次 ,第 1,2天 ;rhG CSF 30 0 μg/d。首先用MA方案联合化疗 ,白细胞 <1.0× 10 9/L时开始用rhG CSF ,白细胞回升时用CS 30 0 0plus或CobeSpectra血细胞分离机采集外周血干细胞。结果　 14例恶性淋巴瘤患者除 1例外周血干细胞采集失败外 ,其余 13例均 1次性采集成功 ,所得单个核细胞 (MNC) (3.91± 2 .70 )× 10 8/kg ,CD34 细胞 (17.79± 12 .90 )× 10 6/kg。采集 2 9例急性白血病患者外周血干细胞平均 2 .13次 ,2 4例采集成功 ,5例采集失败 ,所得MNC (3.6 2± 2 .89)× 10 8/kg ,CD34 细胞 (7.37± 6 .6 0 )× 10 6/kg。rhG CSF平均使用时间为 7d。经MAG方案动员后 ,除 8例患者有胃肠道反应、14例患者骨髓抑制期合并感染外无明显不良反应 ,无动员相关死亡。MAG方案动员后进行微小残留病检测 ,部分病例转为阴性。结论　MAG方案在恶性淋巴瘤和急性白血病患者外周血干细胞动员中安全     

无关供者24例外周血干细胞动员和采集

目的 总结无关供者外周血千细胞(PBSC)动员和采集情况.方法 24例无关供者给予重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)5 μμg·kg-1·d-1,每天皮下注射,第4、5天或5、6天用CS-3000PLUS血细胞分离机采集外周血干细胞,计数采集物中单个核细胞(MNC)和CD34+细胞.结果 所有供者均安全顺利完成...