黄连解毒汤对细胞因子的影响

黄连解毒汤出自唐·王焘《外台秘要》,由黄连、黄芩、黄柏、栀子组成,为常用清热解毒代表方。临床试验表明,该方对急性炎症、胃溃疡、乙型肝炎、类风湿性关节炎有良好的治疗效果。目前,认为这些疾病的发生与多种炎性细胞因子的增加有关。笔者采用Ｄ－氨基半乳糖合脂多...     

黄连解毒汤激活自噬减轻脓毒症大鼠急性肺损伤

目的 探讨黄连解毒汤对脓毒症肺损伤的保护作用及其机制。方法 雄性SD大鼠被随机分为假手术组(Sham)、模型组(CLP组)、黄连解毒汤组(H+CLP组),雷帕霉素组(H+Rap组)和3-甲基腺嘌呤组(H+3-MA组),每组各7只。除Sham组外,其他组均使用盲肠结扎穿孔术(CLP)建立脓毒症模型。H+CLP组、H+Rap组和H+3-MA组术前一周开始灌胃给药,其他组给等量生理盐水。术后1h按分组分别腹腔注射相应药物或等量生理盐水。术后24h取材,检测大鼠肺部组织湿干重之比;Elisa法检测肺部组织炎症因子白介素6(interleukin-6, IL-6)、IL-1β、肿瘤坏死因子α(tumornecrosis factor-α, TNF-α)的水平;HE染色观察肺组织病理形态学变化;透射电镜观察肺部细胞亚显微结构,主要是自噬小体的形成情况;蛋白印迹法检测肺组织中自噬相关蛋白的表达情况,包括微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3, LC3)、Beclin-1、P62。结果 与Sham组相比,CLP组大鼠肺部出现明...     

黄连解毒汤通过促进自噬减轻脓毒症大鼠心肌损伤

目的:探究黄连解毒汤对脓毒症大鼠急性心肌损伤的保护作用与自噬相关蛋白的关联。方法:将35只SPF级SD雄性大鼠随机分为Sham组、CLP组、HLJDD组、H+RAP组、H+3MA组共5组(n=7)。连续给药7 d,通过盲肠结扎穿孔术建立脓毒症模型。术后3 d仍存活的大鼠采血行血常规检测;苏木素-伊红(HE)染色观察心脏组织的病理变化;蛋白免疫印迹法检测心脏组织中自噬相关蛋白(LC3、Beclin-1、P62)的表达;Q-PCR法检测大鼠心脏组织中ATG9 m RNA的表达差异。结果:与Sham组比较,CLP组小鼠血常规中感染指标(WBC、Gran、Gran%)水平明显升高(P<0.05),心肌细胞坏死、炎症细胞浸润明显,自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、Beclin-1、ATG9 m RNA的表达明显下调,P62蛋白累积明显(P<0.05);与CLP组比较,HLJDD组脓毒症大鼠感染指标明显降低(P<0.05),心脏组织损伤明显减轻,LC3-Ⅱ、Beclin-1、ATG9 m RNA的表达明显上调,P62蛋白明显下降(P<0.05);H+RAP组模拟了HLJDD组的趋势,...     

黄连解毒汤治疗重症肛周脓肿

目的:研究黄连解毒汤治疗重症肛周脓肿的疗效及作用机制。方法:将重症肛周脓肿住院手术患者随机分为两组,治疗组(n=30)术后常规治疗的基础上口服黄连解毒汤,对照组(n=26)术后常规治疗。观察术后两组患者体温(T)、切口红肿情况,检测术前及术后第3天血白细胞(WBC)、血清内毒素(ET)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。结果:术前两组各检测指标均无明显差异,术后第3天治疗组WBC,T低于对照组,但无统计学差异,切口红肿程度,血清ET,TNF-α水平显著低于对照组(P<0.01)。结论:术后口服黄连解毒汤是治疗重症肛周脓肿的有效方法,其可能通过降低血清ET水平,下调TNF-α来发挥治疗作用。     

黄连解毒汤治疗脓毒症的网络药理学研究

目的：探索黄连解毒汤治疗脓毒症的核心作用靶点、主要活性成分及作用机制。方法：在中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)以黄连、黄芩、黄柏、栀子为关键词分别检索,按照口服生物利用度(OB)≥30%,类药性(DL)≥0.18的条件筛选,获得黄连解毒汤各中药的活性成分及其作用靶点;通过在线人类孟德尔遗传数据库(OMIM)、GeneCards、治疗靶点数据库(TTD)检索脓毒症的疾病靶点;将预测到的成分及其疾病靶点运用Cytoscape软件进行中药-成分-疾病-靶点网络构建及分析,筛选核心靶点及主要活性成分,通过STRING数据库结合Cytoscape软件绘制蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络并进行网络拓扑学分析,通过R语言运行后对核心靶点进行基因本体(GO)分析和京都基因和基因组百科全书(KEGG)通路注释分析,设定阈值P<0.05,Q<0.05,筛选具有显著性差异的生物过程及信号通路。结果：筛选出黄连解毒汤78个成分和841个药物靶点;这些共同靶点涉及147条生物过程包括TNF信号通路、趋化因子信号通路、HIF-1信号通路、细胞凋亡通路等代谢通路,内分泌抵抗等与内分泌系统...     

黄连解毒汤通过诱导自噬减轻脓毒症小鼠肝损伤

目的:探讨黄连解毒汤对盲肠结扎穿孔术(CLP)诱导的脓毒症小鼠肝损伤保护作用中自噬相关蛋白的表达。方法:将60只8周龄C57BL/6小鼠随机分为假手术组、脓毒症模型组、黄连解毒汤低、高剂量组(1.44,2.88 g·kg^-1)共4组(n=15)。连续给药3 d,末次给药1 h,盲肠结扎穿孔术建立脓毒症模型。观察小鼠24 h生存率;另取5只,术后12 h处死小鼠,收集血清和肝组织。采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中炎症因子白细胞介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL-1β)的水平;生化法检测血中丙氨酸氨基转移酶(ALT),天冬氨酸氨基转移酶(AST)的水平;苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织的病理变化;TdT介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)染色观察肝细胞凋亡指数(AI);蛋白免疫印迹法检测肝组织中高迁移率族蛋白1(HMGB1),自噬效应蛋白1(Beclin1),自噬标志物微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ/Ⅰ(LC3-Ⅱ/Ⅰ)的表达。结果:与假手术组比较,模型组小鼠12,24 h生存率明显降低,血清中炎症因子IL-6...     

黄连解毒汤对脓毒症模型小鼠肺损伤的保护作用及其机制研究

目的:研究不同剂量黄连解毒汤对脓毒症小鼠模型肺损伤的保护作用及其机制。方法:SPF级ICR小鼠100只随机分为正常组、模型组和黄连解毒汤低、中、高剂量组,每组又分为造模后24h和48h两个时间点检测组。除正常组外,其余各组小鼠腹腔注射酵母多糖-石蜡混悬液,建立脓毒症小鼠模型,造模同日各组分别灌胃给予相应的药物,正常组与模型组灌胃生理盐水,1次/d,持续至实验结束。于造模24h、48h进行小鼠行为学观察,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测小鼠血清炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)水平,荧光定量PCR法检测肺组织核转录因子kappa Bp65(NF-κBp65)、Toll样受体4(TLR4)m RNA转录水平变化,光镜观察小鼠肺组织病理结构。结果:与模型组同时间点比较,黄连解毒汤各剂量组小鼠血清TNF-α、IL-6水平均明显降低(P0.01),中、高剂量组指标明显低于低剂量组(P0.01),中、高剂量组组间比较无统计学差异(P0.05)。与模型组同时间点比较,黄连解毒汤中、高剂量组大鼠肺组织NF-κBp65、TLR4 m RNA转录水平均明显降低(P0.01),低剂量组NF-κBp65(24h、48h)、TLR4 m RNA(48h)转录水平明显降低(P0.01),中、高剂量组上述指标明显低于低剂量组(P0.01),中、高剂量组组间比较差异无统计学意义(P0.05)。组内比较,黄连解毒汤各剂量组48h时点对上述指标的改善作用均明显优于24h时点,以中、高剂量组更为明显(P0.05,P0.01)。病理结果显示,黄连解毒汤各剂量组小鼠肺组织损伤程度明显轻于模型组,以中剂量组损伤程度最轻。结论:黄连解毒汤能够明显改善脓毒症小鼠的肺损伤,且该保护作用可能是通过调控TLR4受体介导的炎症反应通路来实现的,治疗最佳剂量确定为中剂量。     

黄连解毒汤与三黄泻心汤对大鼠胃粘膜保护作用的产生机理

本文运用经牛磺胆酸盐处理后，酸性试液留置于胃内而引起大鼠胃粘膜损害模型，探讨了黄连解毒汤与三黄泻心汤的胃粘膜保护作用的产生机理，这两种药剂抑制胃粘膜损害，抑制因酸性液体留置于胃而经起氢离子及钠离子流量的增大，且均呈量效相关，三黄泻心汤可通过胃粘膜，使^14C标志的由花生四烯酸合成的各种前列腺素总量显著增加，以上结果显示，两种药剂通过强化胃粘膜屏障发挥对胃粘膜保护作用，并推测三黄泻心汤的这种作用是由于胃粘膜的前列腺素合成功能增强。     

黄连解毒汤对多器官功能障碍大鼠脏器的保护作用

目的探讨黄连解毒汤对多器官功能障碍综合征(MODS)大鼠脏器的保护作用.方法采用腹腔注射酵母多糖的方法复制大鼠MODS模型,观察黄连解毒汤(HLJDT)对MODS大鼠血浆丙氨酸转氨酶(ALT)、肌酐(Cr)、呼吸(R)、心率(HR)及组织病理的影响.结果造模后各时段,治疗组动物血浆丙氨酸转氨酶、肌酐、呼吸、心率比模型组显著降低,且小肠、肝、肾和肺脏等组织病理也明显改善.结论黄连解毒汤对MODS大鼠脏器具有一定的保护作用.     

黄连解毒汤对神经细胞保护作用活性成分的筛选

目的:探讨黄连解毒汤及其主要成分小檗碱、黄芩苷、巴马汀、栀子苷对过氧化氢(H2O2)、谷氨酸(Glu)所致神经细胞损伤的影响.方法:制备H2O2,Glu损伤入神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)、小鼠神经母细胞瘤细胞(Neuro-2a)模型,设正常对照、模型、黄连解毒汤、小檗碱、黄芩苷、巴马汀及栀子苷组,筛选浓度为7.812 5,15.625,31.25,62.5,125,250,500 mg·L-1,应用MTT法检测药物对损伤后细胞增殖的影响.结果:黄连解毒汤能够促进SH-SY5Y细胞增殖,适当浓度的栀子苷能够促进SH-SY5Y,Neuro-2a细胞增殖,并对H2O2,Glu损伤的SH-SY5Y细胞有保护作用,对H2O2损伤的Neuro-2a也具有保护作用.结论:栀子苷可能为黄连解毒汤对神经细胞保护作用的有效成分.     

黄连解毒汤对营养性肥胖大鼠的毒性研究

目的探讨各剂量黄连解毒汤不同给药时长对营养性肥胖大鼠的毒性。方法雄性SD大鼠100只,按体质量随机分为正常对照组、模型对照组、黄连解毒汤高、中、低剂量组,每组20只,每3日测量一次体质量及摄食量。除正常组外,每组均采用三重喂养法复制大鼠模型。给药22天与42天后各处理10只动物,计算脂肪指数,检测血清Alb、TP、TBIL、GGT、ALT、ALP、Cre和CYP450含量。结果黄连解毒汤能有效降低营养性肥胖大鼠的体质量及脂肪指数,升高血清ALT、GGT、TBIL,降低血清Alb、TP及CYP450,以上结果具有统计学意义(P0.05或P0.01)并与摄食量减少无明显相关性。结论黄连解毒汤可能对营养性肥胖大鼠产生肝、肾毒性并抑制代谢活性,临床应用时建议综合考虑其对机体的影响。     

黄连解毒汤对高脂血症大鼠血脂及氧自由基代谢的影响

目的:探讨黄连解毒汤(Huanglian Jiedu Decoction,HJD)对实验性高脂血症大鼠血脂及氧自由基代谢的影响。方法:将50只SD大鼠随机分为正常对照组,模型组,立普妥组(0.2 mg·kg-1),HJD低、高剂量组(6,12 g·kg-1)。除正常对照组外,其他组大鼠喂饲高脂饲料建立高脂血症模型。连续ig 8周后,测定血清总胆固醇(total cholesterol,TC)、三酰甘油(triacylglycerol,TAG)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(high-densitylipoprotein cholesterol,HDL-C)水平,以及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化酶(glutathioneperoxidase,GSH-Px)活性及丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,并观察肝组织病理学改变。结果:与模型组比较,HJD各组能明显降低实验大鼠血清TC,TG,LDL-C,MDA含量,显著提高HDL-C含量和SOD,GSH-Px活性,并能减轻肝细胞脂肪变性。结论:HJD能有效调节高脂血症大鼠血脂代谢,提高机体抗氧化能力,改善肝组织病理损害。     

黄连解毒汤对2型糖尿病大鼠血管VEGF的影响

目的 研究黄连解毒汤对2型糖尿病大鼠血脂指标、腹主动脉VEGF表达的影响.方法 采用STZ腹腔注射联合高糖高脂饲料喂养Wistar大鼠,建立2型糖尿病模型.治疗6周后,检测血脂指标,采用免疫组织化学法测定腹主动脉VEGF（血管内皮生长因子）的表达.结果 黄连解毒汤组与模型组、二甲双胍组比较,腹主动脉VEGF的表达、血脂指标均明显降低（P〈0.01）.结论 黄连解毒汤组可以下调VEGF的表达,并且明显改善血脂紊乱.     

黄连解毒汤对自发性高血压大鼠血栓前状态的影响

目的:观察黄连解毒汤对自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)血栓前状态(prothromboticstate,PTS)的影响。方法:24只12周龄雄性SHR随机分为黄连解毒汤组(15 g·kg-1)、卡托普利组(0.0175 g·kg-1)和模型组3组,8只同龄雄性Wistar-Kyoto(WKY)大鼠为空白对照组,通过BP-6动物无创血压测试仪测定各组治疗前血压,连续ig给药6周,每日1次,第1,2,4,6周的第7天下午定时测量各组血压,6周后由腹主动脉取血,检测血清血栓素A2(TXA2),6-酮前列环素(6-K-PG),一氧化氮(NO),内皮素-1(ET-1),纤溶系统激活剂(t-PA),纤溶系统抑制因子(PAI-1),同型半胱氨酸(Hcy)和血管性血友病因子(vWF)。结果:黄连解毒汤可控制SHR血压,降低TXA2,ET-1,Hcy和vWF(P<0.05或P<0.01),增加6-K-PG和NO(P<0.05或P<0.01)。结论:黄连解毒汤可降低SHR的血压,改善其PTS。     

黄连解毒汤对糖尿病大鼠脂肪因子visfatin表达的影响

目的 :研究黄连解毒汤对糖尿病大鼠肝脏visfatin表达的影响,探讨黄连解毒汤改善胰岛素抵抗的作用机制。方法 :实验采用高脂高糖饮食联合链脲佐菌素(STZ)复制糖尿病大鼠模型,分为空白组、模型组、对照组、治疗组,连续给药6周后测空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量及肝脏visfatin表达的变化。结果:治疗组血清FBG、FINS、TC、TG、LDL-C水平显著低于模型组(P0.01),HDL-C水平高于模型组(P0.01);治疗组肝脏表达visfatin显著低于模型组(P0.01)。结论:黄连解毒汤能显著降低糖尿病大鼠血脂血糖,改善胰岛素抵抗,其机制可能是调节脂肪因子visfatin的表达,降低炎症信号通路,改善脂肪组织的慢性炎症反应。     

清热解毒方治疗大鼠实验性脓毒症的药效学观察

目的:观察清热解毒方(GJD)对脓毒症模型大鼠的治疗作用并探讨其细菌学方面的机制.方法:采用盲肠结扎穿孔法制作大鼠脓毒症模型,实验分为假手术对照组、脓毒症模型组和GJD治疗组(生药24 g·kg-1),给予清热解毒方治疗后观察大鼠生存情况,同时使用细菌培养和实时定量PCR的方法对腹水和血标本进行细菌学分析.结果:大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌等条件致病菌在脓毒症模型组动物腹水和血液中大量繁殖,在治疗组中上述细菌含量明显减少(P＜0.01).结论:条件致病菌是脓毒症模型大鼠的主要致病菌,GJD可以通过抑制致病菌的繁殖而对脓毒症起到治疗作用.     

黄连解毒汤对糖尿病大鼠血清chemerin水平的影响

目的研究黄连解毒汤干预糖尿病大鼠血清chemerin水平的变化情况,初步探讨黄连解毒汤改善胰岛素抵抗的作用机制。方法实验采用高脂高糖饮食联合链脲佐菌素（STZ）复制大鼠糖尿病模型,连续给黄连解毒汤6周后测定空腹血糖（FBG）、空腹胰岛素（FINS）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）含量,同时以测定脂肪因子chemerin水平的变化。结果给予黄连解毒汤组治疗的糖尿病大鼠,其血清中FBg、TC、Tg、LDL-C水平显著低于模型组（P〈0.01）,HDL-C水平高于模型组（P〈0.01）,血清chemerin水平显著低于模型组（P〈0.01）。结论黄连解毒汤对高脂高糖饮食联合小剂量STZ所致糖尿病大鼠有一定的治疗作用,能改善胰岛素抵抗,其机制可能是通过调节脂肪因子chemerin的表达,从而降低了炎症信号通路,改善了脂肪组织的慢性炎症反应,继而改善胰岛素抵抗。     

黄连解毒汤传统饮片汤剂与配方颗粒汤剂药效学对比研究

目的对黄连解毒汤传统饮片汤剂与配方颗粒汤剂进行药效学比较,为黄连解毒汤配方颗粒汤剂的临床应用提供理论依据。方法从对二甲苯致小鼠耳廓肿胀、新鲜鸡蛋清致大鼠足跖肿胀和2,4-二硝基苯酚致大鼠发热三个方面的影响,考察黄连解毒汤传统饮片汤剂与配方颗粒汤剂药效的差异。结果传统饮片汤剂与配方颗粒汤剂均能减轻二甲苯致小鼠耳廓肿胀和新鲜蛋清致大鼠足跖肿胀,且两种汤剂等剂量间的抗炎作用无显著性差异(P0.05)。而不同剂量组的传统饮片汤剂和配方颗粒汤剂对2,4-二硝基苯酚致大鼠发热均有不同程度的解热作用,其中,两者的中、高剂量组优于低剂量组(P0.05),且等剂量的配方颗粒组优于传统饮片组(P0.05)。结论黄连解毒汤配方颗粒汤剂药效相似或优于传统饮片汤剂。     

黄连解毒汤对胰岛素抵抗大鼠瘦素和抵抗素的影响

目的 探讨黄连解毒汤对胰岛素抵抗大鼠脂质代谢、瘦素和抵抗素的影响。方法观察黄连解毒汤对实验性胰岛素抵抗大鼠的血脂[甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、载脂蛋白A1（apoAI）、载脂蛋白B（apoB）、游离脂肪酸（FFA）]、骨骼肌组织甘油三酯（mTG）、糖耐量（OGTT）、空腹血糖（FB6）、血清胰岛素（INS）及体重的变化,用ELISA方法检测血清瘦素和抵抗素的含量。结果 与模型组比较,黄连解毒汤组大鼠血清TC、TG、apoB、FFA、mTG及FBG水平均明显降低,而HDL-C与apoA1水平显著升高,OGTT改善,大鼠体重减轻,瘦素和抵抗素明显降低（P〈0．05或P〈0．01）。结论 黄连解毒汤能调节胰岛素抵抗大鼠脂质代谢,同时能降低瘦素和抵抗素的水平,这可能与其改善胰岛索抵抗有关。     

正交试验优选黄连解毒汤的机器煎煮工艺

目的: 优选黄连解毒汤的机器煎煮工艺。 方法: 以黄芩苷、小檗碱和浸出物含量的综合评分为指标,通过单因素试验和正交试验考察浸泡时间、煎煮时间、煎煮温度对黄连解毒汤的机器煎煮工艺的影响,并与传统煎煮工艺进行比较。采用HPLC测定指标成分含量,色谱条件为YMC-Pack ODS-A色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,流动相甲醇-0.2%磷酸水溶液（47∶53）,检测波长250 nm。 结果: 黄连解毒汤的最佳机器煎煮工艺为浸泡时间10 min,煎煮温度105℃,煎煮时间30 min,明显优于传统煎煮工艺。 结论: 优化的机器煎煮工艺稳定可靠,评价指标可控,为中药汤剂的机器煎煮工艺制定提供实验依据。