肥大细胞标本制作方法的改进

<正> 肥大细胞是疏松结缔组织中常见的细胞,常成群地沿着小血管和淋巴管分布。该细胞胞质内充满着粗大的嗜碱性颗粒,其颗粒具有水溶性,用碱性染料染色时呈现异染性。肥大细胞的染色标本是组织学教学中常用标本。通常标本制作时先取皮下组织或肠系膜进行铺片,风干后经过固定液固定,再用甲苯胺蓝、硫堇、沙黄、醛品红等染色方法显示胞质内颗粒,然后再经脱水、透明和封片等常规制片过程完成标本制作。近年来,笔者根据该细胞质内的嗜碱性颗粒具有异染性和水溶性的特点,采用以酒精为溶剂的醛品红染液对肥大细胞铺片标本风干后不经固定而直接染色,染色后只经酒精一次洗去浮液,风干即可直接按常规封片,无需经过脱水、透明等若干制片过程。按此方法制作肥大细胞标本不仅操作简便,效果也极为满意。现将方法介绍如下。     

块染石蜡切片方法显示肥大细胞的探讨

肥大细胞为疏松结缔组织内一种常见细胞 ,沿小血管和小淋巴管分布 ,其特点为胞浆中充满大量异染性颗粒 ,用碱性染料染色时显异染色性[1] 。显示肥大细胞的传统方法多用铺片染色法[2～ 4] ,虽能清楚显示颗粒 ,却极易褪色 ,标本不易保存。我们选用大鼠舌体 ,运用块染和石蜡切片技术显示肥大细胞 ,获得满意效果。1　材料与方法　　Ｗｉｓｔａｒ健康成年大鼠 (第三军医大学实验动物中心提供 ) ,体重 2 5 0ｇ左右。 3%戊巴比妥钠腹腔内注射麻醉 ,取切成 0 .5ｃｍ厚块。固定液 95 %酒精 90ｍｌ;甲醛 1 0ｍｌ;醋酸钙1ｇ固定 6～ 1 0ｈ。组织块移出…     

制作疏松结缔组织铺片的经验和体会

疏松结缔组织铺片是结缔组织实验课的重点内容。制作一种良好的铺片,对增强学生的感性认识,确保实验效果至关重要。我们通过反复实践,终于摸索出一种能在同一标本上显示出疏松结缔组织的多种成分的理想方法,现总结如下:     

制作疏松结缔组织铺片的方法与经验

疏松结缔组织铺片可暴露纤维与细胞的完整形态，在染色方法上已有不少报道［1~3］，但涉及制片过程中细节问题却很少记载。我们在多年实践中，找出了如下方法，制成了效果满意、重复性好的疏松结缔组织铺片，现作一介绍。1材料与方法在室温18℃～25℃的条件下，取健康小白鼠，严格消毒后自尾静脉注射0．2％～｝．5％的台盼蓝水溶液2～5mlkg－1，隔日一次，共2～3次，断头法放血处死后，切取下腹部皮下组织，用一寸长针灸针拨开铺片于载玻片上，用AFA固定液（75％酒精90ml，甲醛10ml，冰醋酸5ml固定30min，依次经如下步骤进行染色：（1）We…     

疏松结缔组织铺片染色方法的改良

有关疏松结缔组织铺片染色技术,已有不少新的改良方法,即大多采用分别显示法。近些年来出现了能同时显示巨噬细胞、成纤维细胞、肥大细胞、弹性纤维和胶原纤维的方法,但我们采用后,感到胶原纤维和弹性纤维显示仍不太理想,胶原纤维、弹性纤维显示清楚,肥大细胞则显示不够理想。为了能制作成理想的教学用片,进一步提高实验教学效果,本文作者根据疏松结缔组织细胞和纤维的染色原理,采用不同的染色方法,使两种纤维、3种细胞同时显示在一张铺片上,获得较为满意的效果。现将方法简介如下。1材料与方法1．1材料选用体重150～ZOOg的雄…     

一项制作巨噬细胞标本的技术改良

传统显示巨噬细胞的方法有几种 ,主要是台盼兰活体染色 ,取肝脏切片或疏松结缔组织铺片 ,然后再进行HE染色 ,这样制作出来的标本 ,不易辨认 ,影响实验课质量。为此 ,我们特采用台盼兰或涕注射染色 ,取材部位选择睾丸 ,经过常规石蜡包埋切片后 ,仅进行伊红染色 ,取得较满意效果 ,现将这项新方法介绍如下。取健康的成年雄性大鼠两只 ,体重 2 50 g左右 ,间天分别给予无毒性的 5%台盼兰水溶液4ml腹腔注射 1次 ,共注射 3次 ,第 6天处死动物 ,取两侧睾丸固定于 0 .2M磷酸盐缓冲液配制的 1 0 %福尔马林中 ,常规脱水、透明、浸蜡、包埋、切片 ,每…     

结缔组织平铺片制作简易法

疏松结缔组织铺片的制作方法较多,但要在同一张标本内同时清晰反映大多数细胞、纤维的形态结构是不容易的。经几年的实验,总结了下述简易方法,能清晰显示疏松结缔组织中的四种细胞和两种纤维的形态。     

不同方法制作疏松结缔组织铺片的比较观察

（1）目的：筛选优秀的结缔组织铺片染色法。（2）方法：腹腔注射锥虫蓝后，取大白鼠肠系膜，分别用地衣红和醛复红两种方法对比染色，显示疏松结缔组织各种结构成分。（3）结果：地衣红染色显示巨噬细胞呈不规则形，胶原纤维色浅，不甚清晰，而醛复红染色显示的胶原纤维，弹性纤维清晰可辨，巨噬细胞，肥大细胞，成纤维细胞均易于辨认。（4）结论：醛复红染色法是一种制作疏松结缔组织铺片的优良方法。     

血片迅速染色新法

血片染色一般临床检验室都采用瑞忒氏染色,但是此染色液价钱贵不易购到且染色时间很长。我院在临床工作中曾甲血片伊红美蓝迅速染色法其成绩良好。兹介绍如下:一、染色液的配制1.伊红 0.4克溶于甲醇或4%石炭酸100毫升——即成第一液。2.a.美蓝 2克溶于150毫升水中使沸。     

疏松结缔组织铺片染色法的改良

疏松结缔组织铺片，是组织学实验课中重要实验内容。由于内容多，制片过程复杂，同时在一张铺片中观察到的吞噬细胞 、肥大细 胞、成纤维细胞、胶原纤维、弹性纤维的效果一直不够理想。特别是注射印度墨汁时成纤维细胞也吞噬部分印度墨汁，初学者不易辨别和掌握,我们经过反复实验改进，用复合染料染色收到较好的效果，现介绍方法如下。1 材料与方法1.1 材料 取健康成熟小白鼠，皮下注射印度墨汁3d。1.2 方法 （1）取小白鼠皮下做成撕片，自然干燥。（2)用甲醇和纯酒精各50ml混合固定15-20min。（3）复合染料染色5-10min。（复合染料的配…     

肥大细胞标本制作法

1　材料固定液　甲醛酒精 ,配方 :甲醛 1 0ml,无水酒精 80ml,蒸馏水 1 0ml。染色液　甲苯胺蓝液 ,配方 :甲苯胺蓝1 g ,苯胺油 2ml,蒸馏水 50ml,无水酒精50ml;配法 ,将苯胺油加入蒸馏水中 ,煮沸后 ,冷至 4 0℃～ 50℃ ,依次加入甲苯胺蓝 ,无水酒精 ,隔日使用。脱水透明剂　苯酚 1份 ,二甲苯 4份混合即成。实验动物　成年大白鼠。2　方法取材　取成年大白鼠 ,麻醉致死 ,打开胸腔 ,刺破右心房 ,放空血液 ,取皮下疏松结缔组织 (或肠系膜 ) ,制成平铺片。固定　把制成的平铺片入固定液中固定1小时左右。自来水略洗。染色　染色液染 1 - 2分钟自来…     

制作疏松结缔组织铺片改良法

疏松结缔组织是一种柔软而具有弹性和韧性的组织。这种组织在体内分布最广,形成各种器官的支架,保持器官的一定形态,联结器官中的各种组织,血管、神经、淋巴管都随疏松结缔组织伸入器官中。该组织由纤维、细胞和基质三种成分构成。通常制作疏松结缔组织铺片,是直接将组织(多采用肠系膜)铺在载玻片上。应用这种方法制作铺片,一只老鼠的肠系膜只能制作不到10张铺片,又由于直接铺片,很难铺展,致使薄厚不均,染色后着色深浅不一,镜下观察各种成分尤其是纤维成分显示不清。我     

疏松结缔组织铺片染色新法

疏松结缔组织铺片的染色是组织学技术中的难点.常规方法存在着较多的不足,如两种纤维对比不够鲜明,各种细胞成分较难区分,铺片厚薄不均等.作者经过反复实验,能够显示组织的多种成分,特异性强,效果稳定,为教学和科研提供了一种简便可行的新方法,现介绍如下.     

疏松结缔组织铺片五色染法

在普通组织学中,结缔组织占有很大的比重,全面了解疏松结缔组织的结构又是正确认识结缔组织基本组成的基础,因此不论在教学或科学研究工作中,对于如何显示疏松结缔组织的各种成份,一直为大家所重视。疏松结缔组织舖片(撕片)是观察疏松结缔组织内各种细胞与纤维最常用的也是最重要的方法;同时由于疏松结缔组织的各种成份,具有不同的嗜染性,所以过去的工作者曾研究过许多有关疏松结缔组织舖片的染色法,如:用苏木紫——     

改良瑞氏染色法

血片常规染色一般都采用传统的瑞氏单一染色，这种染色法总觉不太理想，染色时间较长，且不易掌握，尤其是冬季室温偏低，往往把血片染成偏酸或偏碱，致使血片细胞不易辨认。瑞氏染色只对细胞颗粒着色强，而对细胞核的染色较差，每次配制的瑞氏染波要放置较长时间才能使用。作者参考有关文献，将瑞氏单一染色液中加入适量的对细胞核着色较好的姬姆萨染色粉，克服了瑞氏单一染色法存在的问题。现将改良的瑞氏染色液的配制方法介绍如下，以供参考。试剂与方法1．染液配制：取瑞氏染色粉06克，姬姆萨染色粉1克，一同放入乳钵内，加进甘油10毫升…     

疏松结缔组织切片制作方法的改良

制作疏松结缔组织切片难度较大 ,组织块易酥脆、收缩 ,不易切片。笔者经过反复摸索 ,用ＡＳＡＦ液取代常用固定液 ,用乙醇 -正丁醇混合脱水剂取代乙醇 ,克服了上述不足 ,现将方法介绍如下 :ＡＳＡＦ液的配制 :取水杨酸 10ｇ溶于 85ｍｌ、95 %乙醇中 ,再加入纯醋酸 5ｍｌ、40 %甲醛 10ｍｌ,混匀即可。混合脱水剂的配制 :取无水乙醇及 10 0 %正丁醇等量混合备用。取新西兰兔一只 ,耳静脉注射空气处死 ,取皮下疏松结缔组织 ,立即固定于ＡＳＡＦ液中 ,1～ 2ｈ后取出 ,直接放入 95 %酒精Ⅰ、Ⅱ脱水各 1ｈ ,然后放入混合脱水剂Ⅰ、Ⅱ各 1ｈ。二甲…     

ASK SOLUTION染色液的应用评价

对新购置的ASK　SOLUTION网织红细胞染色液临床应用进行评价。方法 :收集 3 4例健康人标本经传统煌焦油蓝生理盐水溶液和ASK染色液染色后 ,在不同时间涂片计数网织红细胞百分数进行比较观察 ,传统煌焦油蓝盐水溶液染色 15～ 2 0分钟 ,ASK染色液染色 5～ 10分钟 ,经统计学处理两种方法P >0 .0 5无显著性差异 ,3 4例网织细胞百分数均值分别为 0 .86%、0 .88%。结果 :ASK染色时间短 ,红细胞内的RNA与新亚甲蓝染料作用充分 ,深蓝色颗粒清晰易见 ,不易漏检 ,背景清晰无杂质。结论 :ASK染色液可以取代传统煌焦油蓝染色液。     

卢戈氏苏木素的配制与染色的体会

<正> 卢戈氏苏木素是Clark等人(1983)继Clark等人(1973)改进了Cde's苏木(1943Cole's)的一个简单方法,是碘矾苏木素的一个改良方法。其优点是将各种溶液配制为干液,随用随配,配方简单经济,染色时间短而不分色;缺点是染色液仅能保存7天左右,每100毫升染色液染片50张左右,而且染色液表面有一层浮膜。我们在实验中,对这个配方进行了探索性实验,使染色液保存时间延长到30天左右,每100毫升染色液能染片200张左右,染色液表面无浮膜,染色结果与原法相同,并适合各种组织染色,现将方法介绍如下。     

疏松结缔组织铺片方法在组织学与胚胎学实验教学中应用与体会

为了提高《组织学与胚胎学》的教学质量,培养学生的综合素质,在中医院校开展了"疏松结缔组织铺片法"的实验课教学。通过复合染色方法,可一张铺片呈现蓝、红、紫三种颜色,使得镜下能够观察到两种纤维和三种细胞。这种方法的实施不仅增强学生动手能力,而且能很好地了解疏松结缔组织中细胞的不同表型和分布,同时,既丰富组织学内容,把教学、科研连接一起,又达到提高实验教学质量的目的。     

细菌标本批量制作方法的改进

细菌标本片的制作．传统的方法分为涂片．自然干燥．火焰固定．染色四个步骤。但是．在大批量的教学标本片制备时，若待其自然干燥后再逐张进行火焰固定．一则需要花费大量时间和人力，再则不易掌握好固定所需温度．温度低了标本不易固定，染色时易被冲洗掉;温度高了则使细菌蛋白质变性，细菌形态不典型．难以观察。因此．我们在大批量的细菌标本片的制作过程中，对其中的几十环节进行了改进．其具体步骤如下：