合用开博通和螺内脂对扩张型心肌病心肌纤维化及心功能的影响

目的评价血管紧张素转换酶抑制剂开博通及醛固酮拮抗剂螺内脂逆转原发性扩张型心肌病(DCM)心肌纤维化及改善心功能的作用。方法放射免疫法测定45例原发性DCM患者应用开博通及螺内脂治疗前及治疗6个月后血清心肌纤维化指标:血清Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、层粘连蛋白(LN)、透明质酸(HA);超声测定左心室内径、左心房内径、右心室内径及左心室射血分数(LVEF)。结果应用开博通及螺内脂治疗后血清心肌纤维化指标显著下降:PCⅢ(243.4±50.3 vs 186.6±38.4P<0.01)、LN(224.7±50.1 vs 160.8±36.8P<0.01)、HA(259.4±70.4 vs 173.4±40.6P<0.01);心功能明显改善:左心室内径(62.4±11.4 vs 51.6±10.2P<0.05)、左心房内径(48.6±10.3 vs 40.7±8.9P<0.05)、右心室内径(30.4±7.3 vs 23.4±5.7P<0.05)、LVEF(36.5±9.6 vs 41.8±11.8P<0.05)。结论开博通及螺内脂能明显逆转原发性DCM心肌纤维化,改善其心功能。     

血清肝纤维化HA、Ⅳ-C、PCⅢ和LN联合检测在布加综合征导致的肝纤维化诊断中的价值

目的:探讨血清透明质酸(hyaluronic acid,HA)、Ⅳ型胶原(type Ⅳ collagen,Ⅳ-C)、Ⅲ型前胶原肽(type Ⅲ procollagen,PCⅢ)、层黏连蛋白(laminin,LN)检测在布加综合征(budd-chiari syndrome,BCS)导致肝纤维化诊断的价值.方法:应用化学发光法分别检测我院介入科2004-03/2012-06收治的61例BCS患者(研究组)及60例健康者(对照组)血清HA、Ⅳ-C、PCⅢ、LN含量,并进行统计学分析.结果:BCS患者血清HA、Ⅳ-C、PCⅢ、LN含量均高于对照组,差异具有统计学意义,分别为t=6.879,P<0.05;t=7.071,P<0.05;t=5.753,P<0.05;t=6.330,P<0.05.研究组进行组间比较,血清HA、Ⅳ-C、PCⅢ、LN含量差异无统计学意义(P>0.05).结论:血清HA、Ⅳ-C、PCⅢ、LN作为检测肝纤维化灵敏指标,联合检测对BCS导致肝纤维化的诊断和临床治疗具有重要意义.     

慢性乙型肝炎患者血清中HA、LN、PCⅢ的含量与肝纤维化程度的关系探讨

目的 观察分析慢性乙型肝炎患者血清中的细胞外基质(ECM)HA、LN、PCⅢ的含量与肝纤维化程度的关系,以寻求肝纤维化的诊断指标。方法 采用放射免疫分析法(RIA)测定30例正常对照、45例慢性乙肝及10例肝硬化患者血清中HA、LN、PCⅢ的含量。同时进行肝活检。结果 慢性乙型肝炎轻、中、重度及肝硬化患者血清HA、LN、PCⅢ水平均不同程度高于对照组(P<0.01或P<0.05),并且随着肝损伤程度的加重逐渐升高,与肝纤维化程度呈正相关关系(P<0.01);结论 慢性乙型肝炎患者血清中HA、LN、PCⅢ水平与肝纤维化发生发展密切相关,对血清中HA、LN、PCⅢ水平同时测定,可作为诊断肝纤维化的血清学指标。     

安络化纤丸对慢性肝炎患者肝纤维化指标的影响

目的 :观察安络化纤丸对慢性肝炎患者肝纤维化指标的影响。方法 :将 89例慢性肝炎患者随机分为对照组 ( 4 4例 )和安络化纤丸组 (治疗组 ,45例 )。两组治疗前和疗程结束后 ,采用放免法检测血清PCⅢ、HA、LN、Ⅳ C的水平 ,采用彩色多普勒超声仪观察门静脉内径、门静脉血流速度、门静脉血流量和脾脏厚度 ,对部分患者进行肝组织学检测。结果 :治疗前两组患者血清PCⅢ、HA、LN、Ⅳ C水平及门静脉内径、门静脉血流速度、门静脉血流量和脾脏厚度差异无显著性意义 (P >0 0 5 ) ,治疗组治疗后血清PCⅢ、HA、LN、Ⅳ C水平及门静脉内径、脾脏厚度与治疗前相比有显著性减低 (P <0 0 1) ,门静脉血流速度、门静脉血流量明显改善 (P <0 0 5 ) ,与对照组相比差异均有显著性意义 (P <0 0 1～ 0 0 5 )。结论 :安络化纤丸具有阻止和逆转慢性肝炎患者肝纤维化的作用     

α干扰素治疗慢性乙型肝炎肝纤维化血清标记与病理评价

目的评价干扰素α(IFN)的抗肝纤维化作用及其抗病毒疗效的关系。方法干扰素α治疗36例慢性乙型肝炎患者,对照组用常规方法治疗,治疗前后检测血清肝纤维化指标HA、PC-Ⅲ、Ⅳ-C、LN以及TGF-β1,B超引导下肝穿作组织学炎症活动度和纤维化程度的评分比较。结果IFN组治疗后HA、PC-Ⅲ、Ⅳ-C、LN和TGF-β1均较治疗前明显降低(P＜0.01),与对照组治疗后相比较,HA、PC-Ⅲ和TGF-β1明显降低(P＜0.05)。IFN组治疗后组织学炎症活动度评分为(9.3±3.2)分降至(6.2±2.1)分,肝纤维化程度评分由(7.5±2.2)分降至(5.1±1.8)分(P值均＜0.05)。结论肝纤维化程度的改善与毒抗病毒疗效密切相关,α干扰素对慢性乙型肝炎肝纤维化有较好疗效。     

高血压左室肥厚心肌纤维化指标的变化及ACEI的影响

目的:观察高血压左室肥厚患者血清心肌纤维化指标的变化及血管紧张素转换酶抑制剂降压治疗的影响。方法:应用放射免疫法测定39例高血压左室肥厚患者和32例正常人血清Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(ⅣC)、层粘连蛋白(LN)和透明质酸(HA)浓度,并与用血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)治疗12个月后患者复查的以上指标进行比较。结果:高血压左室肥厚患者PCⅢ、ⅣC、HA和LN分别为189.7±24.2、69.21±20.7、172.35±36.2μg/L和196.32±24.5 μg/L,明显高于正常对照组的106.4±14.7、51.67±15、89.53±28.31μg/L和112.26±24.3μg/L(P<0.05-P<0.01)。用ACEI治疗12个月后,高血压左室肥厚组以上指标分别下降至112.24±21.5、55.24±18.51、19.25±18.23μg/L和122.26±10.37μg/L,P<0.01或P<0.05,均有显著差异。结论:血清PCⅢ、ⅣC、HA和LN均可作为高血压左室肥厚患者心肌纤维化指标;ACEI在降压的同时可使以上纤维化指标水平下降。     

肝纤维化血清五项标志物的诊断意义

目的探讨慢性肝炎患者血清透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(CⅣ)、层粘蛋白(LN)和转化生长因子β1(TGFβ1)对肝纤维化的诊断意义.方法检测116例病毒性肝炎患者血清HA、PCⅢ、CⅣ、LN、TGFβ1水平、并与其中87例慢性肝炎患者的肝组织病理作对比.结果血清HA与肝组织炎症活动度呈较弱的正相关(r＝0393,P<0.05),血清HA、PCⅢ、LN、TGFβ1与肝纤维化程度呈中等程度的正相关(r分别为0584、0454、0441和0612,P<005),血清CⅣ与之则呈较弱的正相关(r=0.319,P<0.05).血清HA诊断肝硬化的AUC明显大于血清PCⅢ、CⅣ、LN、TGFβ1者(AUC=0.904vs0.784、0.815、0.805、0828.P<0.05)血清HA、LN、TGFβ1判断S2期以上肝纤维化的ROC曲线下面积(AUC)明显大于血清PCⅢ、CⅣ者(AUC=0849、0.819、0836vs0702、0721,P<0.05).联合五项指标估计肝纤维化程度,判别分析只选人血清HA和TGFβ1.若将肝纤维化程度S1、S2、S3不作区分,判别效果中各期的差异有显著性(P<005).正确预测率为72.90%.结论五项指标均有助于诊断肝硬化和判断S2期以上肝纤维化,前者应选择血清HA.后者则可选择血清HA、LN或TGFβ1;估计肝纤维化程度以血清HA和TGFβ1同时检测为佳,但仅有助于估计慢性肝炎患者是"无肝纤维化”、"处于肝纤维化阶段”或"肝硬化”,而不能对肝纤维化程度进行精确估计.因而不能取代肝组织病理活检.     

中药鳖甲煎丸抗肝纤维化作用的临床研究

目的研究中药鳖甲煎丸对慢性肝炎肝纤维化的治疗作用.方法用肝穿或RIA法测定血清肝纤维化指标如透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)及层粘蛋白(LN)等,筛选出肝纤维化指标明显异常的慢性肝炎患者80例,随机分为鳖甲煎丸组及对照组各40例,对照组用普通保肝药治疗,疗程均为3个月,观察治疗前后的血清肝纤维化指标及肝脏组织病理学变化.结果血清HA、PCⅢ及LN水平治疗前,鳖甲煎丸组为465.3±121.5(ng/ml)、190.5±77.1(μg/L)及164.7±41.9(ng/ml),对照组为479.9士198.3(ng/ml)、206.4±87.2(μg/L)及175.2±67.5(ng/ml),两组之间无显著性差异(P＞0.05);治疗后,鳖甲煎丸组为87.2±41.7(ng/ml)、126.7±53.6(μg/L)及43.4±20.7(ng/ml),对照组为261.7±105.3(ng/ml)、191.2±61.3(μg/L)及89.4±45.3(ng/ml),两组差异显著(P＜0.05).鳖甲煎丸组患者血清肝纤维化指标治疗后与治疗前相比有非常显著性差异(P＜0.01),且治疗后其肝纤维化指标接近正常组(P＞0.05),其组织病理学显示肝纤维化组织增生程度显著减轻.结论中药鳖甲煎丸具抗纤维化作用,可用于临床.     

大黄酸对大鼠肝纤维化形成的影响

目的观察大黄酸对肝纤维化形成的影响。方法采用体积分数60％的CCl4及5％的乙醇制备肝纤维化动物模型,分别用小剂量、大剂量大黄酸干预,测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)及肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量,免疫组织化学方法观察抗转化生长因子β1(TGFβ1)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达情况,并观察肝组织胶原面积及病理变化。 结果(1)血清ALT(U/L)、HA(μg/L)、PCⅢ(μg/L)水平及肝组织中MDA(nmol/mg)含量,大黄酸大剂量组分别为78±18、217±75、16±6和1.88±0.34,模型对照组分别为150±16、321±97、31±14和3.67±0.68,两组比较t值分别为7.831、2.977、3.249和6.751,差异有非常显著性(P<0.01)。肝组织中SOD活性(NU/mg蛋白)大黄酸大剂量组为91.26±14.04,模型对照组为62.45±8.74(t=4.453,P<0.01)。(2)肝组织中TGFβ1、α-SMA的表达显著减少(P<0.05或P<0.01)。(3)肝组织胶原面积明显减少,纤维化程度明显改善(P<0.05或P<0.01)。结论大黄酸具有保肝作用和抗肝纤维化作用,其作用机制可能与其抗炎、抗氧化作用及抑制TGFβ1的活性、抑制肝星状细胞活化有关。     

慢性肝病小肠细菌过度生长与内毒素血症

目的观察慢性肝病患者小肠细菌过度生长(SIBO)的情况与内毒素、血小板源生长因子PDGF)水平及血清肝纤维化指标的关系。方法采用乳果糖氢呼气试验(LHBT)检测64例慢性肝病患者SIBO情况,鲎试验检测血浆内毒素,双抗体夹心ELISA检测PDGF,放免法检测透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原肽氨基末端肽(PⅢNP)、Ⅳ型胶原(Ⅳ.C)水平。分析SIBO与内毒素、血清肝纤维化指标之间的关系。结果64例慢性肝病患者中,LHBT阳性22例(34.4%),慢性肝病伴与不伴SIBO的血浆内毒素为(62±19)和(31±13)pg/ml;PDGF为(211±77)和(136±57)pg/ml;HA为649±189)和(394±210)ng/ml;LN为(139±24)和(110±35)μg/L;Ⅳ.C为(156±41)和(112±51)μg/L;PⅢNP为(32±10)和(21±12)μg/L(P值均<0.01)。慢性肝病患者血浆内毒素水平与PDGF水平呈直线正相关(r=0.803,P<0.01);血浆内毒素、PDGF水平与血清肝纤维化指标呈正相关。结论SIBO是慢性肝病患者出现高内毒素血症的原因之一,其引起的肠源性内毒素血症可能参与促进肝纤维化发生、发展的过程。     

硫普罗宁联合美他多辛治疗酒精性肝病患者疗效初步研究*

目的 探讨应用硫普罗宁联合美他多辛治疗酒精性肝病(ALD)患者的疗效。方法 将76例ALD患者随机分为对照组38和联合组38例,分别给予硫普罗宁或硫普罗宁联合美他多辛口服治疗3个月。采用放射免疫法检测血清IV型胶原(IV-C)、透明质酸(HA)和层粘连蛋白(LN),使用美国贝克曼-库尔特有限公司生产的DX-800型全自动生化分析仪检测血生化指标,使用彩色多普勒超声诊断仪检测门静脉内径(PVD)、脾静脉内径(SVD)和脾厚度。结果 治疗后,联合组患者血清IV-C、HA和LN水平分别为(84.3±24.7) μg/L、(142.6±46.8) μg/L和(134.4±35.2)μg/L,显著低于对照组【分别为(142.2±29.3) μg/L、(186.4±40.5) μg/L和(190.5±47.3) μg/L,P<0.05】;联合组丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、γ-谷氨酰转肽酶和碱性磷酸酶水平分别为【(42.6±12.3) U/L、(41.3±11.8) U/L、(119.3±55.6) U/L和(91.3±37.8) U/L,显著低于对照组患者【分别为(70.4±20.1) U/L、(75.2±14.9) U/L、(180.4±77.8) U/L和 (130.5±43.6) U/L,P<0.05】;联合组患者PVD、SVD和脾厚度分别为(11.8±1.1) mm、 (6.3±1.2) mm和(54.3±10.7) mm,其中后两者显著小于对照组患者【分别为(12.9±1.4) mm、(7.9±1.3) mm和(61.9±11.6) mm,P<0.05】;治疗后,联合组轻度、中度和重度脂肪肝构成比分别为7.9%、15.8%和7.9%,显著低于对照组(分别为18.4%、31.6%和13.2%,P<0.05)。结论 应用硫普罗宁联合美他多辛治疗ALD患者能有效降低血清肝纤维化指标,减轻脂肪肝和纤维化程度,从而有效改善肝功能指标。     

Influence factors of serum fibrosis markers in liver fibrosis

AIM: To analyze the factors which influence the serum levels of hyaluronic acid (HA), type III pro-collagen (PCIII), laminin (LN) and type IV collagen (C-IV) in liver fibrosis. METHODS: The serum specimens from 141 chronic hepatitis patients were assayed for fibrosis indexes including HA, PCIII, LN and C-IV with radioimmunoassay (RIA) and liver function indexes by an automatic biochemistry analyzer. The patientswere then divided into consistent group and inconsistent group. The patients‘‘clinical manifestations were recorded, routine blood pictures were done by a blood counter and analyzer (AC-900). Liver biopsy specimens were examined path-morphologically. The inner diameters of portal vein, splenic vein and thickness of spleen were all measured by ultrasonography. RESULTS: Sixteen patients (14.16%) had serum fibrosis indexes inconsistent with histological stage of their hepatic fibrosis. Their serum fibrosis indexes did not correlate with the stage of hepatic fibrosis (P&gt;0.05), but were positively correlated with the grade of inflammation (72=12.07, P&lt;0.05). At the same time, serum albumin (ALB) and the ratio of albumin and globulin (A/G) were significantly increased (t=3.06, P&lt;0.01), (t=3.70, P&lt;0.01). Serum levels of glutamic-pyruvic transaminase (ALT), glutamic-oxaloacetic transaminase(AST), γ-glutamyl transferase (GGT) and globulin (GLB) were all significantly decreased (t=-2.45, P&lt;0.05), (t=-2.33,P&lt;0.05), (t=2.08, P&lt;0.05), (t=-3.03, P&lt;0.01). Weary degreealso decreased more obviously (χ^2=7.52, P&lt;0.05), but other clinical manifestations, routine blood indexes, serum levels of alkaline phosphatase (AKP), total bilirubin (TBIL), total protein (TP), width of main portal vein, width of splenic vein and thickness of spleen had no significant change (P&gt;0.05). CONCLUSION: Serum fibrosis indexes can be influenced by the grade of inflammation, some liver function indexes and clinical manifestations. Comprehensive analysis is necessary for its proper interpretation.     

血清纤维化指标对肝纤维化诊断价值的研究

目的评价血清纤维化指标透明质酸（HA）、Ⅳ型胶原（CⅣ）、Ⅲ型前胶原肽（PⅢP）、层黏连蛋白（LN）对肝纤维化诊断的价值.方法对确诊的慢性乙型肝炎患者50例和健康人18例,测定血清纤维化指标水平,并进行肝组织纤维化分期.根据受试者工作特征曲线判别4项指标对于肝纤维化分期的诊断价值.结果血清HA、CⅣ、PⅢP和肝脏组织炎症分级呈较弱正相关（r分别为0.430、0.382和0.300,P＜0.05）.血清HA、CⅣ与肝脏组织纤维化分期呈中度正相关（r分别为0.614、0.708,P＜0.05）.血清HA、CⅣ水平随肝纤维化的进展程度而升高.血清HA诊断早期肝硬化（S4）的受试者工作特征曲线下面积（AUC）大于血清CⅣ、PⅢP和LN（AUC=0.967比0.932、0.659、0.403）.血清CⅣ诊断肝纤维化（S1～S4）的AUC大于血清HA、PⅢP和LN（AUC=0.853比0.680、0.536、0.487）.血清LN对于肝组织分级或分期均无统计学意义.联合HA＋CⅣ检测比单一指标有更高的特异度.结论血清纤维化指标对肝纤维化进程有一定的预测意义,但不能对肝纤维化精确分期,因此不能取代肝组织病理活检.联合多项指标检测可在一定程度上提高检测效率.寻找新的血清标志物和联合其他标志物是肝纤维化无创性研究的趋势所在.     

Effect of WeiJia on carbon tetrachloride induced chronic liver injury

AIM:To study the effect of WeiJia on chronic liver injuryusing carbon tetrachloride(CCl_4)induced liver injuryanimal model.METHODS:Wistar rats weighing 180-220g were ran-domly divided into three groups:normal control group(Group A),CCl_4 induced liver injury control group(GroupB)and CCl_4 induction with WeiJia treatment group(GroupC).Each group consisted of 14 rats.Liver damage andfibrosis was induced by subcutaneous injection with 40?l_4 in olive oil at 3 mL/kg body weight twice a week foreight weeks for Groups B and C rats whereas olive oilwas used for Group A rats.Starting from the third week,Group C rats also received daily intraperitoneal injectionof WeiJia at a dose of 1.25 μg/kg body weight.Animalswere sacrificed at the fifth week(4 male,3 female),andeighth week(4 male,3 female)respectively.Degree offibrosis were measured and serological markers for liverfibrosis and function including hyaluronic acid(HA),typeIV collagen(CIV),γ-glutamyl transferase(γ-GT),alanineaminotransferase(ALT)and aspartate aminotransferase(AST)were determined.Alpha smooth muscle actin (α-SMA)and proliferating cell nuclear antigen(PCNA)immunohistochemistry were also performed.RESULTS:CCl_4 induction led to the damage of liver anddevelopment of fibrosis in Group B and Group C ratswhen compared to Group A rats.The treatment of WeiJiain Group C rats could reduce the fibrosis condition sig-nificantly compared to Group B rats.The effect could beobserved after three weeks of treatment and was moreobvious after eight weeks of treatment.Serum HA,CIV,ALT,AST and γ-GT levels after eight weeks of treatmentfor Group C rats were 58±22 μg/L(P<0.01),57±21 μg/L(P<0.01),47±10 U/L(P<0.01),139±13 U/L(P<0.05)and 52±21 U/L(P>0.05)respectively,similar to normalcontrol group(Group A),but significantly different fromCCl_4 induced liver injury control group(Group B).An in-crease in PCNA and decrease in α-SMA expression levelwas also observed.CONCLUSION:WeiJia could improve liver function andreduce liver fibrosis which might be through the inhibi-tion of stellate cell activity.     

代偿性肝硬化无创性诊断指标的筛选及评价

目的：比较肝纤维化血清标志物对慢性乙型肝炎（CHB）代偿性肝硬化的诊断评价，筛选可行的无创性诊断标志物。方法：350例CHB患者经皮肝脏穿刺活检术行病理组织学检查，B型超声波检查肝硬化图像，检测血清透明质酸（HA）、Ⅲ型前胶原肽（PCⅢ）、层黏连蛋白（LN）及Ⅳ型胶原（CⅣ）等肝纤维化标志物。用临床流行病学方法确定诊断截断值，并对各项指标作诊断评价分析，比较不同标志物的诊断评价指标。结果：85例CHB患者经肝脏活检术确认为代偿性肝硬化，81例经B型超声波检查有肝硬化图像，ROC曲线下面积以HA最高；血清HA、PCⅢ、LN及CⅣ对代偿期肝硬化的诊断截断值分别为154．35μg/L、198．44μg/L，137．58μg/L和100．80μg/L，对其应诊断灵敏度分别为82．4％，63．5％，57．3％及70．6％，特异度为79．3％，54．0％，56．8％及68．3％，准确度为80．0％，56．3％，56．9％及68．9％，并联试验诊断虽可提高灵敏度，但相应降低特异度及准确度，与其他无创性诊断方法比较，HA有较高水平的诊断评价指标（u≥1．814，P＜0．05），血清HA诊断代偿性肝硬化的截断值以119．17μg/L较恰当，其相应诊断灵敏度，特异性度，准确度，阳性预告值及阴性预选值分别为87．1％、67．6％、72．3％、46．25％，94．7％。结论：在现有肝脏纤维化血清标志物及超声波检查等无创性诊断指标中，血清HA是代偿性肝硬化最好的诊断标志物。     

CD4+CD25+调节性T淋巴细胞在大鼠肝纤维化模型中的变化

目的 探讨CD4+CD25+调节性T淋巴细胞(Tregs)在肝纤维化免疫发病机制中的作用.方法 26只大鼠分为对照组(6只)和模型组(20只),通过皮下注射四氯化碳(CCl4)建立肝纤维化模型,检测血清肝功能和纤维化指标,观察肝脏病理学变化,流式细胞仪测定外周血及脾脏CD4+CD25+Tregs数量的变化.两组间差异比较采用t检验,相关性采用Pearson直线相关分析.结果 模型组血清ALT、AST升高,Alb下降;HA、PC Ⅲ、Ⅳ C分别为(177.42±61.25)/μg/L、(34.86±7.47)μg/L、(7.32±3.71)μg/L,较对照组明显升高(t=-3.670、-5.661、-3.950,均P<0.01);模型组肝脏组织胶原纤维大量增生,分割肝小叶并包绕成假小叶.模型组外周血中CD4+CD25+Tregs占CD4+T淋巴细胞比例为(7.41±2.15)%,较对照组的(12.88±2.93)%低(t=3.752,P<0.01);模型组脾脏中Tregs为(9.49±1.16)%,较对照组的(13.16±2.36)%亦低(t=2.793,P<0.05).ALT、AST与外周血和脾脏中Tregs水平呈直线负相关(ALT、AST与外周血中Tregs:r分别为-0.727、-0.698,ALT、AST与脾脏中Tregs:r=-0.663、-0.535;均P<0.05);而Alb与外周血和脾脏中Tregs水平无直线相关(r=0.423、0.372,均P>0.05);HA、PCⅢ、ⅣC与外周血和脾脏中Tregs水平呈直线负相关(HA、PCⅢ、ⅣC与外周血中Tregs:r=-0.719、-0.558、-0.792,HA、PCⅢ、ⅣC与脾脏中Tregs:r=-0.424、-0.685、-0.506;均P<0.05).结论 CCl4诱导的大鼠肝纤维化模型CD4+CD25+Tregs的表达降低,其肝纤维化的免疫学发病机制有待进一步研究.

Abstract：

Objective To investigate the role of CD4+ CD25+ regulatory T lymphocyte(Tregs)in the immunological pathogenesis of liver fibrosis.Methods Twenty-six rats were divided into two groups:control group(6 rats)and model group(twenty rats).The rat model of liver fibrosis was induced bv subcutaneous injection of carbon tetrachloride(CCl4).The serums were collected for detection of hepatic function and fibrosis parameters.Hepatic tissue samples were used to observe the histopathological changes.The flow cytometry was used to detect the proportions of Tregs in both peripheral blood and spleen.The data were evaluated by t-test.The relationship between two variables was analyzed using Pearson linear correlation.Results The levels of serum alanine aminotransferase (ALT)and aspartate aminotransferase (AST) were significantly increased,but the level of serum albumin (Alb) was obviously decreased.The concentrations of serum hyaluronic acid (HA),procollagen type Ⅲ(PCⅢ),collagen type Ⅳ(CⅣ)of the model group increased to(177.42±61.25)μg/L,(34.86±7.47)μg/L and(7.32±3.71)μg/L,respectively,which were higher than those in the control group(t=-3.670,-5.661,-3.950,respectively;all P<0.01).In model group,hepatic lobules were full of collagen fibers and the hepatic pseudolobule formation was observed.The proportion of peripheral blood Tregs in CD4+ T lymphocyte in liver fibrosis model was(7.41±2.15)%,which was significantly lower than that in control group(12.88±2.93)%(t=3.752,P<0.01).Furthermore,the frequency of Tregs in spleen of the model group was(9.49±1.16)%,which was also significantly lower than that in control group(13.16±2.36)%(t=2.793,P<0.05).In addition,the levels of serum ALT,AST and fibrosis parameters were inverselv correlated with the frequency of Tregs in spleens and peripheral blood(ALT and Tregs in blood:r=-0.727,AST and Tregs in blood:r=-0.698,ALT and Tregs in spleen:r=-0.663,AST and Tregs in spleen:r=-0.535,HA and Tregs in blood:r=-0.719,PCⅢ and Tregs in blood:r=-0.558,CⅣ and Tregs in blood:r=-0.792,HA and Tregs in spleen:,r=-0.424,PCⅢ and Tregs in spleen:r=-0.685,CⅣ and Tregs in spleen:r=-0.506;all P<0.05).However,the linear correlations between serum Alb and Tregs in spleens and peripheral bloods were not observed(r=0.423,0.372,respectively,both P>0.05).Conclusion These findings suggest that the reduction of CD4+ CD25+ Tregs probably play an important role in the immunological pathogenesis of liver fibrosis.     

复方中药对肝纤维化治疗前后的血清学评价

目的通过对肝纤维化复方中药治疗的前后对比,结合肝病理组织学改变,进一步了解血清纤维化指标的诊断价值。方法对临床确诊为慢性乙肝及早期肝硬化的３４例患者,服用复方中药制剂半年,治疗前后各肝穿一次及采血４次,血清检测透明质酸（ＨＡ）,Ⅲ型前胶原（ＰＣⅢ）Ⅳ型胶原（ＣＩＶ）及层粘素（ＬＮ）。ＨＡ、ＰＣⅢ及ＬＮ用放免法,ＣＩＶ用酶免法。结果治疗前后对比,血清纤维化指标中,ＨＡ、ＰＣⅢ及ＩＮ变化非常显著（Ｐ＜０００１）;ＣＩＶ变化不明显（Ｐ＞００５）;血清纤维化四项指标与病理炎症及纤维化程度关系密切。与炎症计分的相关系数为：ＰＣⅢ：（０５２８５）、ＨＡ（０３８７７）、ＣＩＶ（０３４６４）和ＬＮ（０３３４１）;与纤维化计分的相关系数为：ＨＡ（０６２０３）、ＬＮ（０４２８９）、ＰＣⅢ（０４０９８）和ＣＩＶ（０３９７７）。结论血清纤维化指标为较好反映肝纤维化的指标,并随治疗有效而下降,其中ＨＡ对肝纤维化及早期肝硬化的诊断价值较大,ＰＣⅢ更倾向于反映活动性肝纤维化。     

肠屏障在自身免疫性肝炎发病中的作用

目的观察并分析肠屏障在自身免疫性肝炎(AIH)发病中的作用,为阐释AIH的发病机制和探索基于肠道的治疗策略提供方向。方法纳入2017年1至12月在天津医科大学总医院就诊的14例AIH患者(AIH无肝硬化组6例,AIH肝硬化组8例)和10名健康对照(健康对照组),采用ELISA法检测各组血清D-乳酸、二胺氧化酶(DAO)含量,实时荧光定量PCR检测各组回肠末端组织紧密连接蛋白[闭锁小带蛋白-1(ZO-1)、闭合蛋白(occludin)]、细胞因子[IL-2、干扰素γ、IL-4和IL-10]和TLR4的相对表达量,蛋白质印迹法检测回肠末端组织分泌型免疫球蛋白A(sIgA)的相对表达量。选取30只BALB/c小鼠分为空白组、葡聚糖硫酸钠(DSS)组、刀豆蛋白A(ConA)组、DSS+ConA组、DSS+灌菌+ConA组,每组6只,检测各组小鼠结肠组织ZO-1和闭合蛋白的相对表达量,血清转氨酶水平(ALT、AST)和肝组织学炎症活动度Knodell评分。统计学方法采用独立样本t检验和单因素方差分析。结果AIH肝硬化组和AIH无肝硬化组的血清D-乳酸和DAO水平均高于健康对照组[(1768.2±147.1)μg/L、(436.2±197.0)μg/L比(100.2±10.9)μg/L和(11.5±2.5)U/L、(5.4±0.9)U/mL比(3.5±0.9)U/mL],且AIH肝硬化组血清D-乳酸和DAO水平最高,差异均有统计学意义(t=5.512、36.010、4.088和9.443,F=396.958、46.640,P均<0.01)。AIH肝硬化组的肠黏膜ZO-1、闭合蛋白的相对表达量均低于健康对照组(0.20±0.14比1.67±0.51,0.12±0.09比0.90±0.21),AIH无肝硬化组ZO-1的相对表达量低于健康对照组(0.99±0.37比1.67±0.51),差异均有统计学意义(t=8.641、7.407、2.295,P均<0.05)。AIH肝硬化组回肠末端组织中IL-2、干扰素γ的相对表达量均高于健康对照组(1.11±0.43比0.24±0.16和3.50±1.90比0.32±0.30),肠黏膜sIgA的相对表达量低于健康对照组(0.506±0.024比1.081±0.102),差异均有统计学意义(t=4.679、3.981、5.493,P均<0.05);AIH肝硬化组和AIH无肝硬化组IL-10的相对表达量均低于健康对照组(0.30±0.20、0.42±0.24比0.84±0.23),回肠末端组织TLR4的相对表达量均高于健康对照组(8.74±5.13、6.74±3.65比0.89±0.70),差异均有统计学意义(t=3.095、4.816、3.856、3.685,P均<0.05)。DSS+ConA组肠黏膜ZO-1和闭合蛋白的相对表达量均低于ConA组(0.14±0.08比0.98±0.13和0.09±0.02比0.98±0.16),血清ALT、AST水平和Knodell评分均高于ConA组[(5496.67±618.83)U/L比(3325.00±1030.06)U/L、(8825.00±1165.35)U/L比(5433.33±1691.14)U/L和(18.00±2.00)分比(9.33±3.01)分],差异均有统计学意义(t=13.480、13.520、4.427、4.045、-2.892,P均<0.01)。DSS+灌菌+ConA组肠黏膜ZO-1和闭合蛋白的相对表达量均高于DSS+ConA组(0.46±0.08比0.14±0.08和0.53±0.15比0.09±0.02),血清ALT、AST水平均低于DSS+ConA组[(4343.33±252.16)U/L比(5496.67±618.83)U/L和(6123.33±1086.60)U/L比(8825.00±1165.35)U/L],差异均有统计学意义(t=6.928、7.122、4.228、4.153,P均<0.01)。结论AIH患者的肠道通透性增高、肠屏障被破坏,且肝硬化患者较非肝硬化患者的程度更严重。肠屏障被破环会加重ConA诱导的免疫性肝损伤,而保护和修复肠屏障则可相对减轻ConA诱导的免疫性肝损伤。