基质金属蛋白酶-9和金属蛋白酶组织抑制物-1在IgA肾病肾组织中的表达

目的 探讨基质金属蛋白酶－9（MMP－9）／金属蛋白酶组织抑制物－1（TIMP－1）系统在IgA肾病肾组织中的表达及其对IgA肾病的进展的影响。方法 采用免疫组织化学和原位杂交技术,分别在蛋白质和基因水平检测38例IgA肾病患者肾组织中的MMP－9和TIMP－1的变化。结果 MMP－9在正常肾脏肾小球的脏层上皮细胞和内皮细胞有少量表达,在肾小管上皮细胞和间质血管壁也有少量表达;在IgA肾病中,MMP－9在系膜增殖性肾小球和间质血管壁的表达均明显增多（P＜0．001）,而在硬化肾小球内的表达则明显减少,肾小管细胞的MMP－9表达无明显变化。TIMP－1在正常肾组织中不能检出,在IgA肾病患者具有系膜增殖性病变的肾小球中有微量表达,在增殖在很重但尚未完全硬化的肾小球内表达增多,在肾小管间质表达最为明显（P＜0．001）,其主要见于肾小管细胞、间质细胞和血管内皮细胞。肾组织中的TIMP－1表达与血清肌酐水平呈显著相关（P＜0．05）,与肾小管间质的纤维化和炎细胞浸润程度亦明显相关（P值均＜0．01）。肾小球中的MMP－9表达与尿蛋白无明显相关性,但与血清肌酐水平呈显著负相关（P＜0．05）。结论 MMP－9和TIMP－1的异常表达可能是影响IgA肾病进展的因素之一。     

基质金属蛋白酶2、9及基质金属蛋白酶组织抑制因子1在肺间质纤维化实验中的表达

细胞外基质(ECM)合成和降解失衡是引起ECM积聚导致肺间质纤维化的重要病理生理因素。基质金属蛋白酶（MMPs）及其抑制物（TIMPs）是调节ECM降解的重要体系。我们以博莱霉素诱导的肺间质纤维化大鼠为模型,观察肺间质纤维化发生过程中基质金属蛋白酶2、9（MMP-2、 MMP-9）及基质金属蛋白酶组织抑制因子1（TIMP-1）基因表达的变化,探讨MMP-2、9和TIMP-1在肺间质纤维化发病中的作用。 材料与方法 (1) 动物模型制备：雌性Wistar大鼠60只(沈阳军区医学专科学校动物实验中心提供),体重(215±20)g,随机分为：模型组、对照组,每组各30只。模型组吸入乙醚麻醉后,颈前暴露气管,一次性气管内注入0.4%博莱霉素A5(天津华北制药厂)生理盐水注射液（5 mg/kg）,制成动物模型。然后分别于第1、3、7、14、28天处死6只大鼠,心脏取血。对照组同样方法注入等量生理盐水,同样天数各处死6只。(2)酶谱分析：根据刘煜等［1］介绍的方法,对标本进行MMPs酶谱分析。(3) Northern Blot：取5 μg大鼠肺组织总RNA,行RT-PCR,引物序列为：MMP-2：5′-AGTGGGACA AGAATCAGATCACAT-3′（上游）, 5′-TCGGTGGTACAGCTGT TGTAAGAG(下游);MMP-9：5′-AAGCAGACATTGTCAT CCAGTTTG-3（上游）,5′-GACAGAAACCCCACTTCTTGTCAG-3′(下游);TIMP-1：5′-CTCATCGCGGGCCGTTTAAG-3（上游）,5′-GAAGGCTTCGGGTCATCGAG-3′(下游),geneclean纯化回收PCR产物制备探针,随机引物法行α-32P-dCTP标记。20 μg RNA 样品经甲醛变性电泳、转入尼龙膜、65 ℃预杂交1～3 h、65 ℃杂交18 h,常规洗膜及放射自显影。     

基质金属蛋白酶-9及其抑制剂在COPD合并肺间质纤维化大鼠中的作用

目的 观察基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及组织型蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)在慢阻肺继发肺间质纤维化(PIFCOPD)大鼠肺组织中的变化,评价其与PIF-COPD的病理变化及发病机制的相关性.方法 雄性大鼠24只,随机分为正常对照组(1组),21天(2组)和42天(3组)模型组.以烟熏联合气管内滴注脂多糖建立PIF-COPD模型.免疫组化法检测肺组织中MMP-9及TIMP-1水平.结果 MMP-9和TIMP-1在1组有少量表达;在2和3组MMP-9为0.1970±0.0017和0.2414 ±0.0017;TIMP-1为0.1265 ±0.0018和0.2171 ±0.0023(与l组相比P＜0.05)水平逐渐增高且与肺间质纤维化的严重程度成正相关.结论 MMP-9及TIMP-1的水平与PIF-COPD的发病机制及病程有关.     

金属基质蛋白酶9及其组织抑制物1在肾组织中的表达和调控

目的:观察STZ鼠肾组织及高糖状态下正常人类系膜细胞(NHMC)中金属基质蛋白酶9(MMP-9)、金属基质蛋白酶组织抑制物1(TIMP-1)表达状况及磷酸肌酸激酶(PKC)抑制剂对其表达的影响,探讨糖尿病肾病(DN)时PKC抑制剂在细胞外基质降解中的作用。方法:Wistar大鼠随机分为正常对照组、DN模型组、PKC抑制剂组。PKC抑制剂组采用根皮素10mg/(kg.d)混悬液灌胃进行干预。第8周处死大鼠(每组6只)。检测24h尿蛋白定量、血肌酐水平。用免疫组化方法检测肾脏组织MMP-9、TIMP-1的表达。用ELISA方法检测肾脏组织PKC活性。体外实验,将NHMC置37℃,5%CO2培养箱中进行培养。并将NHMC分为N组(对照组):糖浓度5mmol/L,H组(高糖组):糖浓度30mmol/L,P组(高糖加PKC抑制剂):糖浓度30mmol/L加chelery thrine chloride 10-5mmol/L,M组(甘露醇组):甘露醇30mmol/L。于培养24、48、72h后用MTT法测定细胞增值。采用ELISA方法检测四组PKC活性。分别用RT-PCR及Western Blot检测各组MMP-9、TIMP-1mRNA及蛋白表达。结果:DN模型组尿蛋白排泄明显增加(P<0.01),血肌酐上升(P<0.05),PKC活性明显增高,MMP-9和TIMP-1出现表达,MMP-9/TIMP-1比值降低。PKC抑制剂干预后其尿蛋白排泄明显减少,血肌酐水平降低,PKC活性下降,MMP-9、TIMP-1表达上调,其MMP-9/TIMP-1比值增高。体外实验中,高糖能促进NHMC增殖,且NHMC的增殖状况随时间的递增而明显增加。高糖(30mmol/L)能增加系膜细胞PKC的活性,MMP-9、TIMP-1较高表达,MMP-9/TIMP-1比值降低。而PKC抑制剂使PKC的活性降低同时,MMP-9、TIMP-1表达上调,MMP-9/TIMP-1比值增高。结论:高糖可诱导PKC活性,PKC抑制剂能使MMP-9、TIMP-1表达上调,MMP-9/TIMP-1表达比值升高,推测PKC的活性状况可影响DN细胞外基质降解过程。     

基质金属蛋白酶2、9及基质金属蛋白酶组织抑制因子1在肺间质纤维化实验中的

细胞外基质 (ＥＣＭ)合成和降解失衡是引起ＥＣＭ积聚导致肺间质纤维化的重要病理生理因素。基质金属蛋白酶(ＭＭＰｓ)及其抑制物 (ＴＩＭＰｓ)是调节ＥＣＭ降解的重要体系。我们以博莱霉素诱导的肺间质纤维化大鼠为模型 ,观察肺间质纤维化发生过程中基质金属蛋白酶 2、9(ＭＭＰ 2、ＭＭＰ 9)及基质金属蛋白酶组织抑制因子 1(ＴＩＭＰ 1)基因表达的变化 ,探讨ＭＭＰ 2、9和ＴＩＭＰ 1在肺间质纤维化发病中的作用。材料与方法　 (1)动物模型制备 :雌性Ｗｉｓｔａｒ大鼠 6 0只(沈阳军区医学专科学校动物实验中心提供 ) ,体重 (2 15±2 0 )ｇ,…     

基质金属蛋白酶及其组织抑制物与肝纤维化

基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)是降解细胞外基质(ECM)的主要蛋白酶。基质金属蛋白酶组织抑制物(tissue inhibitors of metalloproteinases,TIMPs)是组织中MMPs主要的内源性抑制因子,至今共有4种。肝纤维化早期MMPs轻度升高;而肝纤维化的中晚期,MMPs活性则明显降低,TIMPs的表达显著增加。一旦肝纤维化逆转,MMPs的表达又显著增强,而TIMPs的表达逐渐降低。表明MMPs和TIMPs与肝纤维化的发生和发展密切相关。     

基质金属蛋白酶及其组织抑制物与肝纤维化

基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases，MMPs)是降解细胞外基质(ECM)的主要蛋白酶。基质金属蛋白酶组织抑制物(tissue inhibitors of metalloproteinases，TIMPs)是组织中MMPs主要的内源性抑制因子，至今共有4种。肝纤维化早期MMPs轻度升高；而肝纤维化的中晚期，MMPs活性则明显降低，TIMPs的表达显增加。一旦肝纤维化逆转，MMPs的表达又显增强，而TIMPs的表达逐渐降低。表明MMPs和TIMPs与肝纤维化的发生和发展密切相关。     

基质金属蛋白酶-9及其抑制物-1在原发性肝癌中的表达及临床意义

探讨肝细胞癌(HCC)中MMP-9及TIMP-1mRNA的表达,及其与HCC侵袭、转移等生物学行为的关系。使用RT-PCR法检测20例HCC及癌周组织手术切除标本的MMP-9、TIMP-1mRNA表达。结果显示HCC组的MMP-9、TIMP-1mRNA的相对含量均高于癌周对照组。有包膜浸润的HCC的MMP-9 mRNA表达明显高于无包膜浸润HCC。提示MMP-9、TIMP-1在HCC的浸润和转移中起重要作用。MMP-9 mRNA表达与肝癌细胞包膜浸润密切相关。     

葛根素对兔动脉粥样硬化基质金属蛋白酶-9及其组织抑制物-1表达的影响

目的：观察葛根素对动脉粥样硬化兔髂动脉分泌和表达基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及其组织抑制物-1（TIMP-1）的影响。方法：20只家兔分为正常对照组（正常饮食，6只）、病理对照组（球囊和高脂饮食，8只）和葛根素组（球囊、高脂饮食和葛根素，8只）。球囊损伤后4周处死，取一侧病变髂动脉做病理切片，应用免疫组化法测定MMP-9和TIMP-1的蛋白表达；取另一侧病变髂动脉抽提总RNA应用半定量逆转录多聚酶链式反应（RT—PCR）测定MMP-9和TIMP-1 mRNA的表达。结果：兔动脉粥样斑块MMP-9 mRNA（mRNA／GAP—DH mRNA）表达：正常对照组、病理对照组、葛根素组的分别为0．81±0．17，1．52±0．24，1.03±0．19，病理对照组、葛根素组的较正常对照组显著增加（P〈0．05），而葛根素组的较病理对照组显著下降（P〈0．05），上述三组的TIMP—1 mRNA的表达依次为1．44±0．14，2．63±0．16，2．67±0．12，病理对照组与葛根素组的较正常对照组显著增加（P〈0．05），但病理对照组与葛根素组间无显著差异（P〉0．05）。免疫组化检测显示葛根素抑制MMP-9蛋白质表达（P〈0．05），但对TIMP-1蛋白质的表达无影响。结论：葛根素可能是通过调节兔动脉粥样斑块分泌MMP-9途径发挥稳定动脉粥样硬化斑块的作用。     

肺间质纤维化大鼠肺组织基质金属蛋白酶的动态改变

进一步评价基质金属蛋白酶在肺间质纤维化形成过程中的作用。方法Ｗｉｓｔａｒ大鼠２１只随机分为模型组１４只,对照组７只,模型组在额镜直视下插管,注入０．４％博莱霉素注射液５ｍｇ／ｋｇ,制成动物模型。观察注射药物后１周和４周肺泡巨噬细胞和纤维细胞ＭＭＰ的活性及表达。利用空斑扩散法,测定胶原酶活性。     

基质金属蛋白酶-9和组织金属蛋白酶抑制剂-1在食管鳞癌中的表达

目的探讨基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和组织金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）在食管鳞癌中的表达及其临床意义。方法用免疫组化和Western blot法分别检测41例食管鳞癌患者的癌及相应正常组织中MMP-9和TIMP-1的表达变化。结果食管鳞癌组织中MMP-9阳性表达率与食管癌淋巴结及静脉转移有关；MMP-9的阳性表达率与表达量均显著高于TIMP-1；MMP-9和TIMP-1的表达呈负相关。结论MMP-9与食管鳞癌的侵袭转移有关，其机制可能与食管鳞癌组织中的MMP-9／TIMP-1平衡失调有关；MMP-9与TIMP-1联合检测有助于食管鳞癌生物学行为的判断。     

基质金属蛋白酶及其抑制物与肝纤维化

肝纤维化(liver fibrosis)是继发于肝脏炎症或损伤后组织修复过程中的代偿反应，由肝脏细胞外基质(ECM)蛋白聚集所致。这种聚集可以是ECM在肝组织内的沉积增加或降解减少的结果。其中，基质金属蛋白酶(MMPs)及其抑制物(TIMPs)在ECM的合成和降解中扮演着重要角色，并为抗纤维化治疗开辟新的途径。     

基质金属蛋白酶及其抑制物与肝纤维化

肝纤维化(liverfibrosis)是继发于肝脏炎症或损伤后组织修复过程中的代偿反应,由肝脏细胞外基质(ECM)蛋白聚集所致。这种聚集可以是ECM在肝组织内的沉积增加或降解减少的结果。其中,基质金属蛋白酶(MMPs)及其抑制物(TIMPs)在ECM的合成和降解中扮演着重要角色,并为抗纤维化治疗开辟新的途径。     

慢性乙型肝炎患者肝组织基质金属蛋白酶组织抑制物-1表达及其意义

目的：分析慢性乙型肝炎患者血清和肝组织基质金属蛋白酶组织抑制物-1（TIMP-1）表达水平与肝纤维化分期的相关性。方法分别采用免疫组化法和双抗体夹心酶联免疫吸附法检测患者肝组织和血清 TIMP-1表达水平,分析两者相关性;对159例慢性乙型肝炎患者行肝活检病理学检查,以组织学活动指数（HAI）予以分级（G）和分期（S）,分析慢性乙型肝炎患者血清 TIMP-1水平与 HAI 分级和纤维化分期的相关性。结果慢性乙型肝炎患者肝组织 TIMP-1表达水平与其血清水平呈显著性正相关（r=0.9521,P＜0.01）;不同肝纤维化分期（S1～S4）慢性乙型肝炎患者血清 TIMP-1水平差异显著（P＜0.05）,且血清 TIMP-1水平与肝纤维化分期呈正相关（r=0.704, P＜0.01）,但不同炎症分级的慢性乙型肝炎患者血清 TIMP-1水平差异无显著性。结论血清 TIMP-1水平可以较好地反应肝脏纤维化程度,且不受肝组织炎症分级的影响,有望被用于肝组织纤维化程度的临床无创评估。     

基质金属蛋白酶/组织金属蛋白酶抑制物表达失衡在大鼠肾脏衰老过程中的意义

目的:探讨基质金属蛋白酶(MMPs)及其抑制物(TIMPs)在大鼠肾脏衰老过程中的作用。方法:选用3、12和24月龄大鼠，采用免疫组化技术分别检测基质金属蛋白酶—2、9(MMP—2、9)、组织金属蛋白酶抑制物—1、2(TIMP—1、2)、转化生长因子—β1(TGF—β1)等在不同月龄大鼠肾组织中的表达。结果TIMP—1、TIMP—2及TGF—β1主要表达在肾小球、肾小管、间质及血管，并随增龄表达增强(P＜O．01)；MMP—9、MMP—2主要表达在肾小管上皮细胞，随增龄表达无变化；TIMP—1与TGF—β1与肾小球硬化面积有相关性(r分别为O．751、O．771，P＜O．05)；TIMP—1与TIMP—2与小管间质纤维化面积有相关性(r分别为O．783、O．766，P＜O．O5)。结论:MMPs／TIMPs表达失衡在肾脏衰老过程中可能起重要作用。     

基质金属蛋白酶-9及其抑制物在急性冠状动脉综合征中的意义

目的测定急性冠状动脉综合征患者血浆基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9) 和组织金属蛋白酶抑制因子-1(tissue inhibitor metalloproteinase-1,TIMP-1)的变化,探讨MMP-9和TIMP-1 在急性冠状动脉综合征中的作用。方法急性冠状动脉综合征患者30例,稳定型心绞痛患者29例,正常对照17例,用酶联免疫法测定MMP-9和TIMP-1的血浆水平,血脂水平用比浊法测定。结果急性冠状动脉综合征组MMP．9(13±10)μg／L,TIMP-1(1．4±0．2)μg／L,MMP-9／TIMP-1(10±7);稳定型心绞痛组MMP-9 (2．2±0．5)μg／L,TIMP-1(0．7±0．4)μg／L和MMP-9／TIMP-1(3．2±2．0);正常对照组MMP-9(1．7±1．3)μg／L、 TIMP-1(0．6±0．4)μg／L和MMP-9／TIMP-1(5．2±0．9),急性冠状动脉综合征组与稳定型心绞痛组及对照组差异有统计学意义(P<0．01)。三组血脂水平差异无统计学意义。结论 MMP-9、TIMP-1和MMP-9／TIMP-1 在急性冠状动脉综合征患者中显著升高,他们有可能成为ACS患者易损斑块的预测指标。     

基质金属蛋白酶-2及其抑制物在慢性肝炎和肝硬化肝组织中的表达

为进一步探讨基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和基质金属蛋白酶-2组织抑制因子（TIMP-2）在肝纤维化发生，发展过程中的作用，用免疫组织化学方法检测慢性肝炎和肝硬化肝组织中MMP-2和TIMP-2的表达及分布状态，并作定位及半定量分析。     

基质金属蛋白酶与弥漫性肺间质纤维化

细胞外基质(ECM)合成和降解代谢平衡的调节,特别是基质金属蛋白酶(MMPs)和金属蛋白酶组织抑制因子(TIMPs)两大酶系统的表达、调控及其功能与肺间质弥漫性纤维化之间的关系近来受到了广泛的研究及重视.本文就MMPs的分类及结构特点、活性调节及其特异性抑制物;尤其是MMPs与肺间质弥漫纤维化之间的关系及研究最新进展加以综述.     

心肌组织基质金属蛋白酶-3及其抑制物-1的表达与心功能损害

目的 探讨心肌组织基质金属蛋白酶－3（MMP－3）及其抑制物－1（TIMP－1）相对含量与心力衰竭（心衰）的关系。方法 采用RT－PCR方法对31例风湿性心脏病（RHD）心衰患者及8例健康人心室肌组织中MMP－3及TIMP－1含量进行半定量分析;RHD患者术前心功能指标采用超声心动图检查。结果 瓣膜病所致心力衰竭（心衰）病人心肌组织呈心肌重型的病理改变;心衰病人心肌组织MMP－3 mRNA表达较正常人增高,且心功能越差,MMP－3相对含量越高;TIMP－1则相反。结论 MMP－3表达含量的增加及TIMP－1表达含量的降低参与心肌重构,是影响心衰患者心功能恢复的重要因素之一。