脓毒症大鼠肝组织高迁移率族蛋白B1和Toll样受体4基因的表达及相关性

目的 探讨脓毒症大鼠肝组织高迁移率族蛋白B1(HMGB1)和Toll样受体4(TLR4)mRNA的表达变化及其相互关系.方法 采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制成脓毒症大鼠模型.将50只Wistar大鼠分成正常对照组(10只)和CLP组(40只),CLP组分别于CLP术后6、12、18、24 h各处死10只大鼠,应用实时聚合酶链反应检测肝脏组织HMGB1和TLR4 mRNA的表达.结果 正常对照组大鼠肝脏组织存在微量的HMGB1、TLR4 mRNA表达.脓毒症组大鼠CLP术后各时间点的HMGB1、TLR4 mRNA表达均显著高于正常对照组(P值均<0.01),CPL术后6 h HMGB1、TLR4 mRNA表达开始升高,至12 h达峰值,18 h后开始下降,各时间点间HMGB1、TLR4 mRNA表达的差异均有统计学意义(P值均<0.05).直线相关分析表明,脓毒症大鼠肝脏组织HMGB1 mRNA与TLR4 mRNA的表达呈正相关(r=0.90,P=0.04).结论 HMGB1可能通过TLR4进一步激活炎性细胞,引起下游炎性因子释放的瀑布效应.     

MiR205在脓毒症小鼠心脑肾中对HMGB1表达的影响

目的:检测在胆碱能抗炎通路(CAP)中miR-205表达变化和对脓毒症小鼠脑、心、肾组织中高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的调节作用。方法:15只BALB/C小鼠被随机分成3组:脓毒症组和CAP组各6只,对照(control)组3只,分别腹腔注射脂多糖(LPS)15mg/kg+生理盐水,LPS 15mg/kg+GTS-21 4mg/kg,等量生理盐水。24h后处死小鼠取材心、肾、脑组织。定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测脓毒症小鼠和胆碱能抗炎通路小鼠的脑、心、肾组织中miR-205与HMGB1的表达。结果:脓毒症小鼠脑、心、肾组织的miR-205表达与对照组相比无明显变化(P_2、P_4、P_6>0.05),CAP组均较其他两组明显升高(P_1、P_3、P_5<0.001)。脑、肾组织中HMGB1的表达CAP组较脓毒症组有明显降低(P_1、P_3<0.001)。心肌组织中HMGB1的表达在脓毒症组和CAP组差异无显著性(P5>0.05)。结论:激活胆碱能抗炎通路时,脑、心、肾组织中表达升高的miR-205降低脑、肾组织中HMGB1的表达。     

氯胺酮对急性肺损伤大鼠肺组织HMGB1表达的影响

目的:探讨氯胺酮在盲肠结扎穿孔术(CLP)脓毒症肺损伤大鼠中对肺组织HMGB1表达的影响.方法:45只SPF级雄性成年Wister 大鼠随机分为三组:(1)假手术组(sham组)、(2)盲肠结扎穿孔(Cecal ligation and puncture.CLP)组(CLP组)、(3)氧胺酮干预组(KET组).CLP组和KET组施行盲肠结扎穿孔术.术毕半小时开始给药,KET组给予5%氯胺酮50g/kg,im,q12h;Sham组和CLP组则给予等容积生理盐水a在术后6h、24h、72h各随机处死大鼠5只,分别作为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ亚组,无菌留取大鼠肺组织、动脉血待测.采用热干法测肺组织湿/干(weVdry,W/D)重比值;光镜下观察肺脏组织形态学变化,并进行中性粒细胞计数:测定各组大鼠不同时问点动脉血氧分压(PaO2);免疫组织化学法(IHC)和逆转录聚合酶链(RT-PCR)法分别检测肺组织HMGB1蛋白和HMGB1mRNA.结果:与CLP组相比,氯胺酮组在CLP术后6h、24h和72h时间点PaO2较CLP组明显增高,而肺组织W/D比值、中性粒细胞计数、HMGB,免疫组化及HMGB.mRNA表达明显降低(P<0.05).结论:氯胺酮能够抑制CLP脓毒症大鼠肺组织HMGB1mRNA和蛋白表达水平,减轻肺组织PMN浸润,减轻CLP诱导的大鼠肺损伤的程度.     

脓毒症多器官损害与髓样细胞触发受体-1基因表达的关系

[摘要] 目的 探讨髓样细胞触发受体-1(TREM-1)基因表达与脓毒症所致多器官损害的关系。方法 采用小鼠盲肠结扎穿孔(CLP)模型造成脓毒症。将60只雄性小鼠随机分为正常对照组(n=10)、假手术组(n=10)和脓毒症组(n=40),并按不同的时间点留取肝、肺、肾及小肠组织及血液样本,分别用于检测TREM-1mRNA,TNF-αmRNA表达及测定丙氨酸转氨酶(ALT)、肌酐(Cr)、肺组织髓过氧化物酶(MPO)、小肠组织二胺氧化酶 (DAO)的活性。结果 与对照组及假手术组相比,CLP后6 h肝、肺、肾组织 TREM-1 mRNA 表达开始增多,肝组织24 h表达均达峰值(P＜0.01),肺、肾组织12 h表达达峰值(P＜0.01),小肠组织的TREM-1表达表现出了一定的升高趋势,但无统计学意义(P＞0.05)。TNF-αmRNA在各组织的表达在CLP后6 h开始升高(P <0.05或P <0.01),12 h降低,48 h再次升高(P<0.05)。相关分析结果显示,肝、肺、肾、小肠组织中TREM-1基因表达分别与TNF-αmRNA表达、ALT,Cr,MPO及DAO 水平显著相关。结论 脓毒症可导致多种组织 TREM-1 mRNA表达增加,其改变与多器官损害密切相关。 [关键词]　髓样细胞触发受体-1　脓毒症　多器官功能损伤     

盐酸戊乙奎醚预先给药对脓毒症大鼠肺组织高迁移率族蛋白B1表达的影响

目的评价盐酸戊乙奎醚预先给药对脓毒症大鼠肺组织高迁移率族蛋白B1（HMGB1）表达的影响。方法健康雄性SD大鼠108只,4⁵月龄,体质量300³50 g,采用随机数字表法分为:假手术组（S组）、脓毒症模型组（CLP组）和盐酸戊乙奎醚+脓毒症模型组（PH组）,每组36只。CLP组和PH组采用盲肠结扎穿孔（CLP）制备脓毒症大鼠模型。PH组于模型制备前1 h时静脉注射盐酸戊乙奎醚0.1 mg·kg^-1,S组和CLP组给予等容量生理盐水。分别于术前2 h（TO）、术后2、12、24、48和72 h（T1^T5）时随机取6只大鼠,收集支气管肺泡灌洗液（BALF）,采用考马斯亮兰法检测BALF总蛋白;测定肺组织湿/干质量比;采用分光光度法检测肺组织髓过氧化物酶（MPO）活性;采用Elisa和RT-PCR检测肺组织HMGB1含量和mRNA表达水平。结果与S组比较,CLP组肺组织湿/干质量比、BALF总蛋白含量、MPO活性、HMGB1含量和HMGB1 mRNA表达升高（P<0.05）;与CLP组比较,PH组肺组织湿/干质量比、BALF总蛋白含量、MPO活性、HMGB1含量和HMGB1 mRNA表达降低（P<0.05）。结论预先给药盐酸戊乙奎醚可下调脓毒症大鼠肺组织中HMGB1表达,这可能是其减轻肺损伤的一个重要机制。     

间苯三酚对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用

目的：研究间苯三酚对大鼠肾缺血再灌注损伤（ischemia reperfusion injury, IRI）的保护作用及机制。方法：将雄性Wistar大鼠48只平均分为3组（n=16）：假手术组（Sham组）切除大鼠右肾后,左肾动脉进行同等分离,但不予夹闭;对照组即肾缺血再灌注组（ischemia reperfusion, I/R组）,腹腔注射等量的生理盐水,15 min后切除大鼠右肾,无创动脉夹夹闭左肾动脉45 min;实验组即缺血再灌注间苯三酚预处理组（phloroglucinol,PG组）,腹腔注射间苯三酚注射液（30 mg/kg）,15 min后切除大鼠右肾,无创动脉夹夹闭左肾动脉45 min。每组动物再均分为两个亚组（n′=8）,分别于再灌注后6和24 h将大鼠处死。处死前经下腔静脉取血,检测血清肌酐（secrum creatinine, SCr）、尿素氮（blood urine nitrogen, BUN）;将肾于冠状位切成两半,一半组织制作成组织匀浆,取组织上清液检测丙二醛（malondialdehyde, MDA）、过氧化氢酶（catalase, CAT）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase, SOD）及谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase, GSH-Px）;另一半组织行石蜡包埋,切片进行病理组织学观察,再灌注后24 h的大鼠肾组织行核转录因子-kapa B(nuclear factor-kapa B, NF-κB)及Caspase 3免疫组织化学检测。结果：再灌注后 6 h,I/R组大鼠血清SCr和BUN分别为(103.9±10.4) μmol/L和(15.2±1.0) mmol/L,PG预处理的SCr及BUN分别为(81.8±13.4) μmol/L和(11.5±1.2) mmol/L;再灌注后24 h,I/R组大鼠血清SCr和BUN分别为(154.9±12.1) μmol/L和(28.1±1.4) mmol/L,PG预处理的SCr及BUN分别为(103.8±5.9) μmol/L和(16.0±1.0) mmol/L;PG预处理组较I/R组明显改善肾功能（P<0.05）;苏木素-伊红染色病理图片可见肾小管损伤较I/R组明显减轻（P<0.05）;经PG处理后大鼠肾组织内MDA含量较I/R组低（P<0.05）,SOD及CAT含量较I/R组高（P<0.05）,GSH-Px含量较I/R组高（P<0.05）。再灌注后24 h,经间苯三酚处理的肾组织内核因子-kapa B在细胞核内表达的水平明显降低,活化的Caspase-3亦较I/R组有所减少。结论：间苯三酚通过减轻氧化应激和炎性损伤,抑制细胞凋亡,有效改善了大鼠肾IRI。     

黄芪多糖对CLP诱导的脓毒症小鼠急性肝损伤MDA、caspase-3和ICAM-1的影响研究

目的：探讨黄芪多糖（astragalus polysaccharide,ＡＰＳ）对脓毒症诱导的小鼠急性肝损伤丙二醛（methane dicarboxylic aldehyde,MDA）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（caspase-3）和细胞间黏附分子-1（intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1）的影响。方法：将小鼠随机分为假手术组（SHAM组,n=25）、脓毒症组（SEP组,n=25）、APS处理组（APS组,n=25）、生理盐水处理组（NS组,n=25）,采用盲肠结扎穿刺术（cecal ligation puncture,CLP）造模,APS组经腹腔注射APS 50 mg/（kg?d）,NS组经腹腔注射等量生理盐水,SHAM组和SEP组不做特殊处理。染色观察肝脏组织病理变化;检测①血浆中MDA、caspase-3和ICAM-1变化;②肝组织匀浆MDA和caspase-3变化;③肝脏组织中caspase-3蛋白的表达。结果：SEP组12 h开始表现肝细胞水肿进行性加重,48 h达到高峰。APS干预后,肝细胞损害严重程度较SEP组明显改善。通过APS处理后,24、48 h APS组血浆中MDA[（29.69±4.62） mol/ml,P=0.041;（23.95±4.10） mol/ml,P=0.003]、caspase-3[（33.12±9.01） ?滋mol/L,P=0.000;（31.25±8.68） ?滋mol/L,P=0.000]和ICAM-1[（439.49±71.66） ?滋g/L,P=0.009;（321.87±68.64） ?滋g/L,P=0.000]浓度降低,肝组织匀浆MDA与caspase-3浓度亦在相应时相点开始降低。24、48 h APS组caspase-3蛋白[（19.93±4.53） ?滋mol/L,P=0.005;（16.91±4.76） ?滋mol/L,P=0.000]表达较SEP组明显降低。结论：APS可有效减轻急性肝损伤,其作用可能与降低MDA、ICAM-1以及抑制caspase-3表达有关。     

表没食子儿茶素没食子酸酯通过减弱HMGB1/TLR4/NF-κB/NLRP3途径改善脓毒症后急性肝损伤

目的　探究表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）在脓毒症后急性肝损伤中的保护作用及潜在机制。方法　采用盲肠结扎穿刺术（CLP）建立脓毒症模型小鼠,以及使用脂多糖建立脓毒症后急性肝损伤细胞模型。8～10周龄雄性C57BL/6J小鼠88只随机分为CLP组、CLP+EGCG低剂量（4 mg/kg）组、CLP+EGCG高剂量（8 mg/kg）组和假手术组。正常肝细胞（L02细胞）根据干预方式不同分为脂多糖（LPS）（400 ng/mL）组、LPS（400 ng/mL）+高迁移率族蛋白B1（HMGB1）（100 ng/mL）组、LPS（400 ng/mL）+EGCG（100 μg/mL）组和对照组（PBS）组。术后24 h,采用全自动生化分析仪检测小鼠肝功能,镜下分析肝组织病理变化;ELISA法检测血清炎症因子;Western blot检测HMGB1、TOLL样受体4（TLR4）、NF-κB p65、NOD样受体蛋白3（NLRP3）、焦亡相关蛋白[消皮素D（GSDMD）、caspase 1、caspase 11、IL-1β、IL-18]的水平变化;采用免疫组织化学染色观察小鼠肝组织中HMGB1、GSDMD的表达及定位情况。L02细胞干预24 h后,采用ELISA法检测细胞上清液中炎症因子以及采用Western blot检测细胞中HMGB1、TLR4、NF-κB p65、NLRP3及焦亡相关蛋白的水平变化。结果　动物实验（样本量n=6）表明：CLP组小鼠白细胞计数、淋巴细胞计数、中性粒细胞计数、单核细胞计数均低于假手术组（P均<0.01）。与CLP组相比,CLP+EGCG低剂量、高剂量组小鼠血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、HMGB1、TNF-α、IL-6表达水平明显降低（P均<0.05）,且CLP+EGCG高剂量组较低剂量组降低更为明显（P均<0.05）;HE染色结果提示CLP+EGCG低剂量、高剂量组小鼠肝组织损伤明显减轻,且以高剂量组为甚;Western blot提示CLP+EGCG低剂量、高剂量组肝组织中HMGB1、TLR4、NF-κB p65、 NLRP3、焦亡相关蛋白的表达水平明显下降（P均<0.05）,且以高剂量组降低更为明显（P均<0.05）;免疫组化提示CLP+EGCG低剂量、高剂量组中HMGB1和GSDMD的表达明显减少（P均<0.05）,且CLP+EGCG高剂量组降低更为明显（P均<0.05）。细胞实验（样本量n=8）表明：与LPS+HMGB1组相比,LPS组、LPS+EGCG组以及对照组的细胞上清液中HMGB1、TNF-α和IL-6的表达水平明显减少（P均<0.05）,且LPS+EGCG组较LPS组明显降低（P均<0.05）。Western blot结果提示LPS+HMGB1组中HMGB1、TLR4、NF-κB p65、 NLRP3以及焦亡相关蛋白表达水平较其余三组明显升高（P均<0.05）,且LPS+EGCG组较LPS组明显降低（P均<0.05）。结论　EGCG对脓毒症后急性肝损伤有保护作用,其机制可能与通过减弱HMGB1/TLR 4/NF-κB P65/NLRP3途径降低肝细胞焦亡有关。     

内毒素休克大鼠肾组织TLR2 mRNA和TLR4 mRNA的表达

目的 探讨内毒素休克大鼠肾组织Toll样受体2(TLR2) mRNA和TLR4 mRNA的表达变化,以及血管活性肠肽(VIP)和甲基泼尼松龙(MP)的作用及可能机制.方法 采用大肠杆菌脂多糖(LPS)(E coli O55:B5)10 mg/kg静脉注射,建立大鼠内毒素休克模型(LPS组,n=16);LPS+VIP组(n=16)建模后注射VIP(5 nmol/kg),LPS+VIP+MP组(n=16)注射VIP(5 nmol/kg)和MP(3 mg/kg);另设生理盐水对照组(n=8).透射电子显微镜观察LPS注射6 h和24 h大鼠肾组织病理学变化;RT-PCR测定肾组织TLR2 mRNA和TLR4 mRNA的表达.结果 建模后6 h,电子显微镜下见LPS组肾小球毛细血管内皮细胞肿胀,线粒体空泡变性;建模后24 h,可见LPS组肾小管细胞线粒体肿胀、空泡变性,细胞核轻度固缩;LPS+VIP组及LPS+VIP+MP组肾组织病变轻于同期LPS组.LPS注射6 h,LPS组、LPS+VIP组及LPS+VIP+MP组肾组织TLR2 mRNA和TLR4 mRNA表达均高于对照组(P<0.01);LPS注射24 h,LPS组TLR2 mRNA和TLR4 mRNA表达高于其他组(P<0.01).结论 内毒素休克大鼠肾组织TLR2 mRNA和TLR4 mRNA表达增强;VIP和MP干预可减轻肾脏损伤,可能与其下调TLR2 mRNA和TLR4 mRNA的表达有关.     

TNF-α 通过 p38 丝裂原活化蛋白激酶信号通路对小胶质细胞HMGB1 表达的调控作用

目的：观察P38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK)抑制剂SB203580对 TNF-α诱导的原代培养大鼠小胶质细胞高迁移率族蛋白B1(high mobility group protein B1,HMGB1)表达的影响。方法： 采用原代培养大鼠小胶质细胞,设立对照组、TNF-α组(25 ng/mL)、TNF-α(25 ng/mL)+SB 203580组(10 μmol/L)、SB 203580组(10 μmol/L),各组细胞经药物处理16 h后分别用ELISA法检测细胞培养上清中HMGB1的表达情况,Western 印迹检测细胞HMGB1和磷酸化p38MAPK表达情况,用反转录PCR检测HMGB1 mRNA表达。结果：经TNF-α刺激 后,大鼠小胶质细胞及其培养上清液中HMGB1蛋白表达增高;SB 203580可抑制TNF-α诱导的磷酸化p38 MAPK表达 (P<0.01),同时下调HMGB1mRNA和HMGB1蛋白的表达。结论：TNF-α可诱导小胶质细胞晚期炎症因子HMGB1的表 达,并且其诱导机制与p38 MAPK被快速激活相关。     

唾液基质金属蛋白酶2、9与儿童龋病相关性的初步研究

目的：比较健康儿童和不同龋损程度儿童唾液中基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase,MMP）-2、MMP-9含量差异以及重度龋儿童治疗前后唾液中MMP 2、MMP-9的蛋白水平变化,探讨其与儿童龋病发生、发展的相关性。方法：纳入368名3~5岁儿童,根据牙齿龋坏程度分为重度龋组112人、轻度龋组98人和无龋组158人,重度龋组患儿中完成全面的龋齿治疗并随访取样的83人纳入治疗组,测定唾液中MMP-2,MMP-9水平。使用SPSS 13.0软件分析数据,重度龋组、轻度龋组与无龋组之间的比较采用SNK-q法,重度龋组与治疗组之间的比较采用配对t检验。结果：重度龋组、轻度龋组、无龋组和治疗组的年龄及性别构成差异无统计学意义。重度龋组唾液中的MMP-2含量［(141.3±32.5) μg/L］高于轻度龋组［(107.5±21.3)μg/L］和无龋组［(102.8±18.5)μg/L］（P均＜0.05）,轻度龋组与无龋组间差异无统计学意义（P＞0.05）。对纳入治疗组的83人进行分析,唾液中MMP 2含量［(120.1±24.8)μg/L］低于治疗前［(144.6±30.3)μg/L］（P＜0.05）,但仍高于无龋组（P＜0.05）。重度龋组［(445.8±68.1)μg/L］和轻度龋组［(428.6±59.2)μg/L］唾液MMP 9含量高于无龋组［(385.4±60.6)μg/L］（P均＜0.05）,重度龋组与轻度龋组间差异无统计学意义（P＞0.05）。对纳入治疗组的83人进行分析,唾液中MMP 9含量［(432.2±64.7)μg/L］与治疗前［(440.1±75.5)μg/L］没有明显变化（P＞0.05）。结论：重度龋患儿唾液中MMP-2、MMP-9含量显著高于无龋儿童,即使经过治疗仍高于健康儿童,提示唾液中的MMP-2、MMP-9可能是儿童患龋的相关影响因素。     

胃癌患者血清可溶性B7 H4的检测及其临床意义

目的检测胃癌患者血清中可溶性B7 H4（sB7 H4）的水平并探讨其临床意义。方法应用酶联免疫吸附试验（ELISA）夹心法检测61例胃癌患者与51例正常人血清sB7 H4水平,分析其与病理类型、治疗前后、胃癌其他血清标志物的相关性。结果胃癌患者血清sB7 H4水平（49.14±16.16）μg/L明显高于正常人（32.67±12.28）μg/L,P＜0.01。低分化腺癌患者sB7 H4水平（64.51±20.67）μg/L高于高分化腺癌（36.78±13.39）μg/L、粘液腺癌（42.79±12.31）μg/L和印戒细胞癌（44.62±12.27）μg/L,P＜0.05。手术前胃癌患者血清sB7 H4水平（58.09±15.28）μg/L明显高于术后（38.58±9.49）μg/L,P＜0.01。胃癌患者血清sB7 H4水平与CEA、CA19 9水平呈正相关（P＜0.01）。结论胃癌患者血清中高水平的sB7 H4及其与病理类型、治疗情况、及其他肿瘤标志物相关,提示sB7 H4可能在胃癌的发生发展中有重要作用,可为胃癌的诊断和治疗提供一种新的靶位点。     

联合应用基质细胞衍生因子1、辛伐他汀及骨胶原支架进行体内异位成骨

目的：探讨使用小鼠基质细胞衍生因子1（murine stromal cell-derived factor 1, mSDF-1）结合辛伐他汀（simvastatin,SIM）以及骨胶原支架（Bio-Oss^®）构建无外加种子细胞的组织工程化骨的可行性,并检验其体内异位成骨的效果。方法：将32只ICR小鼠随机分为4组,每组8只,于小鼠颅部做皮肤切口,各组小鼠分别植入：(1)1 ∶50（体积比）的二甲基亚砜（dimethyl sulfoxide,DMSO）/磷酸盐缓冲液（phosphate buffered saline,PBS）混合液+骨胶原支架（空白对照组）;(2)10^-3 mol/L SIM溶液+骨胶原支架（SIM组）;(3)200 mg/L mSDF-1溶液+骨胶原支架（mSDF-1组）;(4)10^-3 mol/L SIM+200 mg/L mSDF-1溶液+骨胶原支架（SIM+mSDF-1组）。植入1周后,连续2 d,每天分别在支架局部注射上述各组相应的溶液50 μL。饲养6周后,取出支架及其周围组织,通过软X射线投射成像及灰度测定、HE染色、免疫组织化学染色的方法,定性及定量观察其成骨效果。结果：SIM+mSDF-1组软X射线灰度值［（421 836.5±65 425.7）像素］明显高于空白对照组［（153 345.6±45 222.2）像素,P<0.01］、SIM组［（158 119.2±100 284.2）像素,P<0.01］以及mSDF-1组［（255 529.5±152 142.4）像素,P<0.05］;在SIM+mSDF-1组内可见明显的骨桥蛋白和骨钙素的表达;SIM+mSDF-1组血管丛密度［（46±8）条/mm²］明显高于空白对照组［（23±7）条/mm², P<0.01］和SIM组［（24±6）条/mm², P<0.01］。结论：使用mSDF-1结合SIM以及骨胶原支架构建的无外加种子细胞的组织工程化骨可于小鼠颅部皮下异位成骨。     

基于SIRT1/PGC-1α通路探讨葡萄籽原花青素提取物对糖尿病肾脏疾病大鼠的保护作用

目的 探讨葡萄籽原花青素提取物(GSPE)通过调控沉默信息调节因子1(SIRT1)/过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助活化因子1α(PGC-1α)通路对糖尿病肾脏疾病(DKD)大鼠的保护作用。 方法 将40只雄性SD大鼠随机分为对照组、对照治疗组、模型组和治疗组,每组10只。腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制备糖尿病大鼠模型,对照治疗组和治疗组灌胃GSPE,对照组和模型组灌胃等量生理盐水,连续给药12周,检测大鼠血糖、血肌酐和尿微量白蛋白;过碘酸希夫(PAS)染色观察肾组织病理学变化;透射电镜观察肾组织超微结构;采用Tunel染色法评估肾组织细胞凋亡水平;采用免疫组化法和Western blotting法检测肾组织中线粒体生物合成SIRT1/PGC-1α通路相关分子SIRT1、PGC-1α、核呼吸因子1(NRF1)和线粒体转录因子A(TFAM)的表达水平。 结果 模型组血糖［(39.38±4.18)mmol/L vs(8.21±3.57)mmol/L］ 、血肌酐［(55.83±3.72)μmol/L vs(40.00±2.49)μmol/L］和尿微量白蛋白［(10.98±3.36)mg/L vs(1.22±0.23)mg/L］水平较对照组升高(P<0.05)。模型组肾组织损伤严重,线粒体碎片化增多,细胞凋亡［(31.81±8.84)% vs(0.50±0.35)%］多于对照组(P<0.05);同时肾脏中线粒体生物合成相关分子SIRT1(0.34±0.13 vs 0.66±0.06)、PGC-1α(0.32±0.03 vs 0.71±0.13)、NRF1(0.05±0.01 vs 0.21±0.02)和TFAM(0.06±0.03 vs 0.33±0.06)蛋白表达水平较对照组降低(P<0.05)。经GSPE干预后,治疗组血糖［(27.26±3.93)mmol/L vs(39.38±4.18)mmol/L］、血肌酐［(43.50±1.70)μmol/L vs(55.83±3.72)μmol/L］和尿微量白蛋白［(4.05±2.06)mg/L vs(10.98±3.36)mg/L］水平较模型组下降(P<0.05),细胞凋亡［(4.90±1.62)% vs(31.81±8.84)%］减少(P<0.05),肾脏中SIRT1(0.55±0.05 vs 0.34±0.13)、PGC-1α(0.62±0.14 vs 0.32±0.03)、NRF1(0.16±0.02 vs 0.05±0.01)和TFAM(0.26±0.06 vs 0.06±0.03)蛋白表达水平较模型组升高(P<0.05)。 结论 GSPE可能通过调控线粒体生物合成SIRT1/PGC-1α信号通路,改善DKD大鼠肾脏线粒体生物合成,从而发挥肾脏保护作用。     

碱性成纤维细胞生长因子在老龄大鼠血清及阴茎海绵体中的含量

目的：探讨老龄大鼠血清及阴茎海绵体中碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)的含量。方法：12只24月龄SD雄性大鼠作为老龄大鼠组,10只12周龄SD雄性大鼠作为正常对照组。采用电刺激海绵体神经方法评价大鼠阴茎勃起功能,留取标本后ELISA方法检测血清和阴茎海绵体组织中bFGF水平,masson染色方法检测阴茎海绵体组织中平滑肌含量。结果：与正常对照相比,老龄大鼠的勃起功能明显下降（阴茎海绵内压/颈动脉压值在2.5、5.0和7.5 V电压刺激时分别为0.41±0.05 vs. 0.70±0.06,0.44±0.04 vs. 0.75±0.07和0.51±0.06 vs. 0.81±0.04, P<0.05）,血清和阴茎海绵体组织中bFGF水平明显降低［分别为（6.43±0.51） vs. （10.53±0.42） μg/L, P <0.05;（598.6±51.7）pg/mg protein vs. （985.8±76.8） pg/mg protein,P<0.05］,同时海绵体平滑肌含量也明显减少（大鼠阴茎组织平滑肌与胶原纤维的比值0.038±0.005 vs. 0.075±0.006,P <0.05）。结论：阴茎海绵体组织中bFGF水平降低可能与海绵体平滑肌含量减少有关。     

阿托伐他汀抑制RhoA/Rho激酶活性逆转低氧性肺动脉高压大鼠肺动脉高压和肺血管重构

目的:探讨阿托伐他汀是否通过抑制肺动脉RhoA/Rho激酶通路的激活而逆转低氧所致的大鼠肺动脉高压及肺血管重构.方法:32只成年雄性Westar大鼠随机分成4组:A组为正常对照组;B,C,D组建立常压低氧性肺动脉高压大鼠模型,自低氧干预第1天起C组每日给予1 mg/mL阿托伐他汀溶液10 mg/kg灌胃,D组以生理盐水...     

高同型半胱氨酸血症孕鼠与其仔鼠发生先天性心脏病的关系

目的:探讨同型半胱氨酸与哺乳动物先天性心脏病发生的关系,观察不同剂量同型半胱氨酸对哺乳动物心脏发育的毒性作用.方法:将30只SD孕鼠随机分为3组:高剂量组、低剂量组、对照组(每组10只).从妊娠第7天起,高剂量组腹腔内注射同型半胱氨酸200 mg/(kg·d),低剂量组腹腔内注射同型半胱氨酸100 mg/(kg·d),...     

MIF对耐ADM人乳腺癌细胞MCF-7/ADM 体内外耐药逆转作用

目的：采用动物体内外结合方法探讨米非司酮（mifepristone, MIF）对耐阿霉素（adriamycin,ADM）人乳腺癌细胞MCF-7/ADM耐药逆转作用。方法：四甲基偶氮唑蓝法检测5 μmol/L MIF对 MCF-7/ADM体外耐药逆转作用。MCF-7/ADM接种裸鼠皮下构建裸鼠移植瘤模型,空白对照组（NS组）为0.2 mL生理盐水腹腔注射+0.5 mL食用油灌胃;ADM组为5 mg/kg ADM腹腔注射+0.5 mL食用油灌胃;MIF组为30 mg/kg MIF灌胃+0.2 mL生理盐水腹腔注射;ADM+MIF组为5 mg/kg ADM腹腔注射+30 mg/kg MIF灌胃。观察各组裸鼠移植瘤情况。结果：（1）5 μmol/L MIF对MCF-7/ADM细胞的抑制率小于5%,与未用MIF组的抑制率比较差异无统计学意义（P>0.05）。（2）ADM对MCF-7/ADM细胞的半抑制率为17.21 mg/L,而对非耐药乳腺癌细胞MCF-7细胞的半抑制率为0.42 mg/L,ADM对MCF-7/ADM细胞的半抑制率明显高于MCF-7的半抑制率（P＜0.05）。（3）5 μmol/L MIF与ADM联合处理MCF-7/ADM细胞后,MCF-7/ADM半抑制率为1.96 mg/L,明显低于单用ADM组的半抑制率（P＜0.05）。逆转ADM耐药倍数为8.78。（4）ADM+MIF组瘤体积［（232.5149±309.2377）mm3］均低于NS组的瘤体积［（962.2309±261.1313 ）mm3］（均P＜0.05）,也低于MIF组的瘤体积［（778.2846±42.6919）mm3］,还低于ADM组的瘤体积［（508.9648±16.2609） mm3］（均P＜0.05）。MIF+ADM组的瘤质量抑制率为78.0%。结论：MIF对耐阿霉素的人乳腺癌细胞MCF-7/ADM体内外均有逆转耐药性的作用。     

切口妊娠介入治疗的临床应用及预后分析

目的：分析子宫动脉栓塞(uterine artery embolization,UAE)治疗切口妊娠(cesarean scar pregnancy, CSP)的临床价值及预后。方法： 选取2011年1月至2014年12月收治于南京医科大学附属南京妇幼保健院的确诊CSP患者492例,其中高危组283例、低危组209例。根据是否行UAE治疗,将高危组分为高危UAE组（UAE+腹腔镜组）167例,高危非UAE组(化疗+腹腔镜组)116例;将低危组分为低危UAE组(UAE+清宫组)113例,低危非UAE组(化疗+清宫组) 96例。分别比较术中出血、住院时间、血人绒毛膜促性腺激素(beta human chorionic gonadotropin,β-HCG)降至正常时间、月经复潮时间及住院费用的差异,并通过多因素回归分析预测CSP再发风险。结果： 高危UAE组在术中出血［（36.5±14.8） mL vs. （76.5±39.7） mL）］、住院时间［（5.9±0.9） d vs.（9.6±1.3） d］、血β-HCG降至正常时间［（17.9±8.7） d vs. （28.7±10.1） d）］以及月经复潮时间［（18.1±1.6） d vs.（24.3±1.8） d］的比较中优于高危非UAE组,而低危UAE组在术中出血［（93.2±43.3） mL vs. （284.8±110.5） mL］、住院时间［（10.2±1.4） d vs.（ 30.7±9.6） d］、血β HCG降至正常时间［（50.1±17.6） d vs. （67.5±22.9） d）］以及月经复潮时间［（56.3±6.7） d vs.（65.9±9.3） d）］的比较中优于低危非UAE组,均P<0.05;高危UAE组住院费用［（20 140±1 520）元 vs.（13 510±1 013）元）］高于高危非UAE组,而低危UAE组住院费用［（10 095±962）元 vs. （3 890±457）元）］高于低危非UAE组,P<0.01;多因素Logistic回归分析结果显示,治疗方法是CSP再发风险的独立预测因素(OR 2.407, 95%CI 1.176～5.092,P<0.05),采用包含UAE在内的综合治疗方法可降低CSP再发风险。结论： UAE治疗CSP疗效迅速可靠、并发症少、恢复快、再发风险低,在有条件的医院,特别是针对有再次生育要求的CSP患者,应将含UAE治疗手段的综合治疗方案列为首选。     

评估呼出气一氧化氮(FeNO)在支气管哮喘管理中的作用

 目的  评估呼出气一氧化氮(fractional exhaled nitric oxide,FeNO)在支气管哮喘管理中的作用。方法  选取未规范使用控制药物的哮喘患者25例,给予为期12周的布地奈德(200 μg,bid)吸入治疗,检测治疗前后的FeNO水平、肺功能、ACT评分、血常规、血清总IgE以及诱导痰。同期选取25例健康受试者,给予检测FeNO水平。结果   哮喘组患者吸入布地奈德治疗后的FeNO水平(体积分数)较治疗前显著降低［(49.98±25.98)×10-9 vs. (109.18±65.23)×10-9,P=0.000］。治疗前的FeNO水平明显高于健康对照组［(109.18±65.23)×10-9 vs. (12.44±4.31)×10-9,P=0.000］,治疗后的FeNO水平也明显高于健康对照组［(49.98±25.98)×10-9 vs.(12.44±4.31)×10-9,P=0.000)］。治疗后的FEV1/pred较治疗前显著改善［(83.40%±15.74%) vs. (72.45%±7.48%),P=0.002］;治疗后的ACT评分显著高于治疗前(22.88±1.81 vs.14.88±4.21,P=0.000);治疗后的血嗜酸性粒细胞百分比 (Eos%)明显低于治疗前 ［(4.33%±1.89%) vs. (5.70%±1.85%),P=0.004］;治疗后的血清总IgE显著低于治疗前［(231.35±200.59) ng/mL vs. (284.81±231.12) ng/mL,P=0.004］;治疗后的诱导痰Eos%明显低于治疗前［(6.58%±3.66%)vs.(10.00%±4.75%),P=0.004］。治疗前的FeNO水平与ACT评分呈显著负相关(r=-0.425,P=0.034),与诱导痰Eos%呈显著正相关(r=0.657,P=0.020)。结论   FeNO水平是一种用于评估气道嗜酸粒细胞性炎症的可行性指标,其有助于评估哮喘的控制情况。