二烯丙基三硫化物涂层支架对冠状动脉损伤后细胞凋亡和凋亡相关基因蛋白Bcl-x1 表达的影响

目的观察二烯丙基三硫化物涂层支架对犬冠状动脉损伤后细胞凋亡和凋亡相关基因蛋白Bcl-x1表达的影响.方法犬进行冠状动脉左回旋支支架植入术,将二烯丙基三硫化物涂层支架和对照支架分别植入左回旋支的远端和近端,术后28d处死,进行细胞凋亡检测、Bcl-x1免疫组化和蛋白质印迹杂交.结果术后28d,二烯丙基三硫化物涂层支架组细胞凋亡率为(9.18±3.41)%高于对照支架组的(3.28±1.74)%,P＜0.01.对照支架组血管壁内Bcl-x1蛋白表达为,12.17±5.02,显著高于二烯丙基三硫化物涂层支架组的5.46±2.50,P＜0.05.蛋白质印迹杂交也显示对照支架组有高水平Bcl-x1蛋白表达(37.52±6.15),明显高于二烯丙基三硫化物涂层支架组(10.48±2.75),P＜0.01.结论二烯丙基三硫化物可逆转血管损伤后内膜中Bcl-x1的高表达,促进细胞凋亡,可能是二烯丙基三硫化物涂层支架抑制内膜增生的机制之一.     

二烯丙基三硫化物涂层支架对冠状动脉损伤后内皮结构和功能的影响

目的观察二烯丙基三硫化物涂层支架置入犬冠状动脉后内皮修复、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白质表达和一氧化氮水平的变化,探讨该药物支架对血管内皮结构和功能的影响。方法将8只犬进行冠状动脉左回旋支支架置入术,将二烯丙基三硫化物涂层支架(药物组)和对照支架(对照组)分别置入左回旋支的远端和近端。术后28d处死动物,采用光镜观察内膜增生情况,扫描电镜观察内皮修复情况,用免疫组织化学和Western印迹法测定eNOS蛋白质表达,硝酸还原酶法检测一氧化氮水平。结果术后28d,药物组血管内膜增生(内膜厚度0·12mm±0·05mm,内膜面积1·17mm2±0·25mm2)明显轻于对照组(内膜厚度0·35mm±0·11mm,内膜面积1·81mm2±0·36mm2,P<0·01,P<0·05);血管内膜表面的内皮细胞较对照组分布更紧密,排列更整齐,覆盖更完整;药物组eNOS蛋白质表达量(免疫组化法11·1±1·9,Western印迹法37·5±6·2)明显高于对照组(5·6±0·6,10·4±2·7,均P<0·01);药物组一氧化氮水平(279μmol/L±72μmol/L)明显高于对照组(160μmol/L±57μmol/L,P=0·01)。结论二烯丙基三硫化物涂层支架可加速内皮化、促进eNOS表达和提高一氧化氮水平,表明该药物支架在促进内皮结构修复的同时,实现了内皮功能的恢复和完善。     

支架置入后局部内膜增生以及血管紧张素Ⅱ AT1受体的演变

目的探讨冠脉内支架置入后局部内膜增生的情况和血管紧张素Ⅱ1型受体的演变.方法建立冠状动脉支架置入的微型猪动物模型.分别于支架置入后3、7、28、90和180d截取支架段血管连同临近的近端正常血管段,通过病理组织学分析和PCR技术检测支架局部内膜增生和血管紧张素Ⅱ1型受体mRNA水平的演变情况.结果正常血管段表达AT1R-mRNA在各个时间段没有显著性差异.支架置入后3 d局部血管壁AT1R-mRNA的表达明显增高,并在术后28 d达到高峰.术后90 d AT1R-mRNA的表达呈现下降的趋势,但仍显著高于正常血管段,且差异一直持续到术后180 d.术后第3天支架段血管壁内膜加中膜面积与普通血管段相比没有显著差异.到术后7 d支架血管段内膜加中膜面积已显著大于正常血管段,并随时间呈现持续的增生肥厚.在术后180 d达到高峰.结论支架置入后局部血管壁AT1R-mRNA呈现持续的高表达状态,在局部内膜持续过度的增生中起重要的作用.     

血管支架置入术后细胞凋亡的实验研究

目的 观察血管支架置放术后不同时间段血管壁增殖与细胞凋亡的变化过程.方法 对16只家兔进行颈动脉内膜损伤及支架置放术.于术后即刻、7、14、28 d,4个时间点处死.处死后取出支架部位及球囊损伤部位颈动脉血管段,进行细胞增殖与凋亡检测,包括电镜检查,病理切片HE染色及免疫组化分析细胞增殖核抗原(PCNA),Western印迹检测凋亡相关基因p53、bcl-2.结果 HE染色显示内膜损伤及支架置入血管在各时间点,血管壁全层均表现轻度不均匀增厚.PCNA在支架置入组与内膜损伤组都表现为术后即刻为阴性,术后7 d为阳性表达,术后14 d表达最强,术后28 d表达为阴性;正常血管PCNA表达为阴性.电镜检查,内膜损伤及支架置放术都表现为较多胶原基质及纤维,细胞成分较多,可见含丰富分泌颗粒的细胞,可见吞噬细胞,术后28 d标本可见凋亡的成纤维细胞.凋亡相关基因表达:p53,正常颈动脉组织可见p63表达;支架组术后即刻可见表达,术后7 d表达减弱,术后14 d表达可见,术后28 d表达最强;内膜损伤组术后即刻、术后7 d均较弱,术后14 d表达稍有增加,术后28 d表达最强;bcl-2,正常颈动脉组织未见表达;支架组术后即刻未见表达,术后7 d表达增强,术后14 d及术后28 d未见表达;内膜损伤组术后即刻未见表达,术后7 d表达增强,术后14 d有微量表达,术后28 d未见表达.结论 血管支架置入术后可见异常的凋亡现象,术后早中期细胞增殖活性较高,后期出现细胞凋亡从而抑制细胞的增殖.     

一氧化氮在冷保存致部分肝移植移植肝再生障碍中的作用

目的 探讨一氧化氮在冷保存致部分肝移植移植肝再生障碍中的作用.方法 实验分为Ⅰ组(肝切除组)、Ⅱ组(冷保存1 h部分肝移植组)和Ⅲ组(冷保存8h部分肝移植组).观察比较各组术后1、6、12、24、48、72及168 h血ALT、TBIL、NO水平、肝组织iNOS活性、PCNA和iNOS表达及肝脏病理学改变.结果 ALT、TBIT分别于术后12 h、24 h达峰值,Ⅱ组和Ⅲ组各时点ALT、TBIL均高于Ⅰ组.Ⅰ组及Ⅱ组血浆NO水平及iNOS活性于术后12 h达高峰,Ⅲ组1h至12h NO水平、iNOS活性均低于其余两组(P＜0.05),高峰出现于24h,7 d后仍高于正常水平.Ⅰ组、Ⅱ组PCNA表达于术后12 h～24 h达高峰;Ⅲ组术后12 h内PCNA表达明显低于其余两组(P＜0.05),48 h才达高峰.Ⅰ组及Ⅱ组iNOS表达于12 h达高峰,Ⅲ组于24 h达峰值,Ⅰ组7d时基本已无iNOS表达,而Ⅱ组、Ⅲ组仍有中等表达,同时Ⅲ组术后12h内iNOS表达明显低于其余各组(P＜0.05).Ⅰ组及Ⅱ组术后仅出现肝细胞浊肿,第7天肝组织即恢复正常,而Ⅲ组则有片状坏死.结论 长时间冷保存使iNOS表达及NO生成减少是导致部分肝移植后再生障碍的原因之一.     

支架携带pSV-VEGF165基因促进内皮修复的实验研究

目的评估通过支架向兔颈动脉壁转染pSV-VEGF165基因促进内皮修复的疗效. 方法采用自制支架导送系统,由生物凝胶介导,将携带质粒pSV-VEGF165的支架植入兔一侧颈动脉段,对侧植入携带质粒pSV-β-gal的支架作对照.通过RT-PCR、免疫组化染色及扫描电镜,观察局部动脉壁外源VEGF基因、蛋白的表达及内皮修复情况. 结果RT-PCR检测证实,支架植入术后1d,VEGF基因转染动脉段有VEGF mRNA的表达;7d表达达高峰.免疫组化染色显示,术后3d外源VEGF蛋白表达,表达时间延迟于基因表达,但表达趋势与基因表达一致.扫描电镜显示,治疗组内皮完全修复时间提前至术后1月. 结论采用支架携带基因的方法能成功将pSV-VEGF165基因转移至血管壁,血管壁细胞能摄取基因,并表达具有生物学功能的蛋白质,促进内皮修复.     

诱导型一氧化氮合酶、一氧化氮在Hp(+)胃炎中的表达及与细胞凋亡的关系

目的探讨幽门螺杆菌(Hp)感染时胃黏膜组织NO含量、iNOS表达,并研究它们与细胞凋亡的关系.方法测定10例正常对照,15例Hp阴性慢性胃炎,32例Hp阳性慢性胃炎胃黏膜组织NO含量及iNOS、Bax的表达.结果Hp阳性慢性胃炎组iNOS,Bax的表达、NO含量均明显高于Hp阴性慢性胃炎组及正常对照组;Hp阳性慢性胃炎组iNOS表达、NO含量与胃炎积分数呈正相关,NO含量与iNOS表达之间,iNOS表达与Bax表达之间亦存在正相关关系.结论Hp感染时胃黏膜NO含量的增加主要来源于iNOS;iNOS、NO参与了Hp所致的胃黏膜细胞凋亡的调控机制,而此作用很可能是通过Bax蛋白或其它细胞凋亡相关基因的参与来实现的.     

支架置入后局部内膜增生以及血管紧张素IIAT1受体的演变

目的 探讨冠脉内支架置入后局部内膜增生的情况和血管紧张素Ⅱ1型受体的演变。方法 建立冠状动脉支架置入的微型猪动物模型。分别于支架置入后3、7、28、90和180d截取支架段血管连同临近的近端正常血管段,通过病理组织学分析和PCR技术检测支架局部内膜增生和血管紧张素Ⅱ1型受体mRNA水平的演变情况。结果 正常血管段表达AT1R-mRNA在各个时间段没有显著性差异。支架置入后3d局部血管壁AT1R-mRNA的表达明显增高,并在术后28d达到高峰。术后90dAT1R-mRNA的表达呈现下降的趋势,但仍显著高于正常血管段,且差异一直持续到术后180d。术后第3天支架段血管壁内膜加中膜面积与普通血管段相比没有显著差异。到术后7d支架血管段内膜加中膜面积已显著大于正常血管段,并随时间呈现持续的增生肥厚。在术后180d达到高峰。结论 支架置入后局部血管壁AT1R-mRNA呈现持续的高表达状态,在局部内膜持续过度的增生中起重要的作用。     

参附注射液对实验心源性休克犬血浆NO、iNOS及心肌iNOS mRNA的影响

目的 观察参附注射液对心源性休克犬血浆NO、iNOS含量及心肌iNOS mRNA的影响.方法 选择健康成年家犬15只,体质量(14.0±2.7)kg,雌雄不拘.完全随机分为参附组、模型组,并设假手术组(n=5),在结扎前,休克时,给药后30、60、120、180 min抽血,用比色法测血浆NO、iNOS的含量,180 min时取心肌组织,用RT-PCR法测心肌iNOSmRNA的表达,同时监测犬的心功能指标.结果 参附注射液能降低心源性休克时升高的NO[ (66.54±2.42) μmol/Lvs(45.31 ±3.39) μmol/L]、iNOS[(6.60±0.23)U/ml vs( 5.13±0.23)U/ml]水平(P＜0.01),并下调心肌iNOS mRNA的基因表达.参附注射液给药可显著增加心源性休克犬的CO和Cl,明显降低动物的TPVR.结论 参附注射液可以降低血浆中NO和iNOS的水平,抑制心肌iNOS mRNA的表达.     

Cyr61、TNF-α、IL-6和IL-1β与颈动脉损伤后再狭窄的关系

目的 探讨富含半胱氨酸61蛋白(Cyr61)及组织炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β与颈动脉损伤后再狭窄发生的关系.方法 36只Wistar大鼠随机分为模型组和对照组(n=18).模型组大鼠经2F Fogarty球囊导管损伤左颈总动脉建立颈动脉血管成形术模型,分别于建模后1、4、7、14、28 d和3月取材,观察血管壁组织的病理学改变;免疫组化和Real-time PCR技术检测血管壁组织中Cyr61、TNF-α、IL-6和IL-1β的表达变化;ELISA法测定血清TNF-α、IL-6和IL-1β水平.结果 球囊损伤后血管壁新生内膜在术后7 d出现,术后28 d时达到高峰;形成的新生内膜厚度不均,较对照组明显增厚(P<0.01);大鼠颈总动脉损伤后,血管壁组织Cyr61、TNF-α、IL-6和IL-1β表达明显升高,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);而血清炎症因子水平无明显变化.结论 大鼠颈总动脉球囊损伤后血管壁Cyr61、TNF-α、IL-6和IL-1β表达明显增强,提示Cyt61可能与炎症因子相互协同作用,使血管壁组织增生而最终导致再狭窄的发生.     

28例肝素膜支架的临床分析

为评价肝素膜支架对防止急性／ 亚急性支架内血栓形成的有效性及其对远期再狭窄的影响,对２８ 例病人的３２ 个靶病变置入肝素膜支架。结果手术成功率１００ ％ ,术后无１ 例急性／ 亚急性血栓形成,术后随访６ ～２４ 月,５ 例复发心绞痛（１７ ．９ ％ ） ,３ 例经冠状动脉造影证实再狭窄,无死亡病例。结果提示：肝素膜支架对于防止急性／ 亚急性支架内血栓形成是有效的,但不能降低远期再狭窄率。     

冠心病患者冠脉支架置入前后血清内脏脂肪素的变化及意义

 目的研究冠脉支架植入对冠心病患者血清内脏脂肪素表达的影响。方法将50例冠心病患者随机分为冠脉支架植入组和未接受支架植入的冠状血管造影组,于术前1d、术后1d、术后10d、术后30d取静脉血,检测患者血清脂肪素水平的变化。结果冠脉造影组手术前后各时间段血清脂肪素浓度的差异无统计学意义（P>0.05）;冠状血管造影组术后1d、术后10d、术后30d脂肪素的浓度持续升高,各时间段血清脂肪素浓度的差别有统计学意义（P<0.01）。结论单纯冠脉造影不影响冠心病患者脂肪素表达,冠脉支架植入后一个月内脂肪素持续升高,分析脂肪素可能与内皮损伤修复有关。     

血管内支架在冠状动脉复杂病变成形术中的临床应用

本文报道了 31例冠心病患者冠状动脉复杂病变在经皮冠状动脉成形术 (PTCA)并发急性血管内闭塞、内膜严重撕裂、术后显著残留狭窄及短期内再狭窄等的情况下行冠状动脉内支架植入术 (CASI) ,均获成功 ,术后急性血管闭塞和内膜撕裂征象消失 ,残留狭窄及再狭窄解除 ,未出现出血和穿刺部位血管并发症及CASI后亚急性血栓形成。随访 2 6例 ,1例术后 1 3天发生猝死 ,2例因胸痛复发经造影证实支架血管再狭窄 ,再次球囊扩张后再狭窄有所改善 ,余 2 3例冠状动脉造影示支架血管正常 ,结果表明 ,冠心病复杂冠状动脉病变行CASI是解除PTCA急性并发症的安全有效的方法 ,亦有助于PTCA后再狭窄的防治。     

缠绕型和管型冠状动脉内支架在冠心病治疗中的应用

目的　探讨应用缠绕型和管型冠状动脉内支架治疗冠心病的效果。方法　对 2 3例冠心病患者根据不同情况植入冠状动脉内支架 ,其中DeNovo支架 17个 ,Suboptimal支架 6个 ,Bail-out支架 2个。结果　 2 3例患者 2 5支血管植入 2 5个冠状动脉内支架。其中缠绕型支架 9个 ,包括Gianturco -Robin支架2个 ,XT支架 7个 ;管型支架植入 16个 ,均为NIR支架。植入前降支 15个 ,回旋支 2个 ,右冠状动脉 8个。所有支架植入均获得成功。 3例心绞痛复发的患者经造影证实为再狭窄 ,其中XT支架 1个 ,NIR支架 2个 ,总的再狭窄率为 12 % ,缠绕型和管型支架的再狭窄率分别为 11%和 12 .5 %。结论　冠状动脉内支架为治疗PTCA术后急性冠状动脉闭塞、降低再狭窄率的有效措施 ;根据不同的病变合理选择缠绕型和管型支架可提高支架植入的成功率 ,减少并发症。     

雷公藤内酯醇洗脱支架预防猪冠脉支架内再狭窄

目的 观察雷公藤内酯醇洗脱支架植入后对冠脉支架内再狭窄的影响,初步探讨其预防支架内再狭窄的作用机制.方法 采用20只国内杂种幼猪,分别植入雷公藤内酯醇洗脱支架和普通支架(裸金属支架)各10个.术后28 d取冠脉行组织病理检查内膜增生程度,并用免疫组化方法 检测内膜平滑肌细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)和血小板源性生长因子(PDGF)的表达.结果 支架部位血管腔面积裸支架组小于雷公藤内酯醇组、支架内增生内膜面积及内膜增生程度裸支架组大于雷公藤内酯醇组(P＜0.05).支架植入后28 d两组血管新生内膜均可见增殖细胞(PCNA阳性细胞),雷公藤内酯醇组比裸支架组明显减少,PDGF阳性细胞数雷公藤内酯醇组亦明显少于裸支架组,差异均有显著性(P＜0.05).结论 雷公藤内酯醇洗脱支架能抑制新生内膜的形成,其通过影响PDGF的表达,抑制新生内膜平滑肌细胞的增殖,从而减少支架内再狭窄的发生.     

经皮冠状动脉腔内支架置入术治疗冠心病

目的:评估冠状动脉内支架置入术的效果。方法:回顾性分析1996年2月～2000年2月我院接受冠状动脉内支架置入术的120例病人的治疗效果。结果:在183处病变共置入支架125只。在未经介入性治疗的病变置入支架(De novo stenting)101只,PTCA结果不理想(suboptimal)置入支架19只,2例PTCA并发夹层,濒临闭塞时紧急置入支架(Bail-out stenting)2只,在再狭窄病变置入支架3只。置入支架平均直径3.00±0.69mm,平均长度18.15±10.26mm。手术即刻成功率98.4％,主要并发症率为1.6％((2例AMI)。结论:冠脉内支架置入术是治疗冠心病的一种安全有效的介入性治疗技术,其成功率高,并发症少。     

雷公藤内酯醇洗脱支架抑制支架内再狭窄及对PCNA、P27kip1表达的影响

目的 研究雷公藤内酯醇洗脱支架对冠脉支架植入术后再狭窄的有效性及安全性,及其对冠脉增殖细胞核抗原(PCNA)、P27kip1表达的影响.方法 采用20只国内杂种幼猪,随机分成裸支架组和雷公藤内酯醇洗脱支架组,每组各植入支架10枚.比较支架植入后4周各组的冠脉造影、组织病理学、免疫组化及血生化结果.结果 雷公藤内酯醇洗脱支架组支架内最小内径相似,大于裸支架组(P＜0.05);雷公藤内酯醇洗脱支架组新生内膜面积小于裸支架(P＜0.05).雷公藤内酯醇洗脱支架组PCNA阳性细胞少于裸支架组(P＜0.05),而P27kip1表达多于裸支架组(P＜0.05).未发现明显的毒副作用.结论 雷公藤内酯醇能抑制新生内膜的形成,在支架植入后4周能预防再狭窄的形成,可能通过影响PCNA和P27kip1蛋白的表达抑制血管平滑肌细胞增殖发挥作用.     

光学相干断层成像评价药物洗脱支架与金属裸支架治疗后的内膜增殖

目的应用光学相干断层成像(OCT)技术比较冠状动脉内雷帕霉素药物洗脱支架(DES)和金属裸支架(BMS)治疗后内膜增殖情况。方法对19例冠心病经冠状动脉内支架置入治疗后5~93个月的患者进行冠状动脉造影复查,造影后对21支血管23个支架进行OCT成像检查。DES术后6~10个月为药物支架A组;BMS术后5~10个月为金属裸支架B组;BMS术后23~93个月为金属裸支架C组。应用OCT成像技术比较3组支架之间内膜增殖情况。结果OCT成像结果显示3组之间有关支架后最大内膜增殖厚度、血管腔直径和截面积丢失及直径和截面积再狭窄等方面差异有统计学意义。其中A组内膜最大增殖厚度明显小于B组(0·20mm±0·13mmvs0·81mm±0·46mm,P=0·019)和C组(0·91mm±0·27mm,P=0·007);A组血管腔直径丢失明显小于B组(0·27mm±0·17mmvs1·12mm±0·79mm,P=0·009)和C组(1·20mm±0·31mmP=0·013);A组直径再狭窄明显小于B组(8%±4%vs36%±24%,P=0·009)和C组(35%±6%,P=0·017);A组截面积丢失明显小于B组(1·14mm2±0·9mm2vs3·96mm2±2·62mm,P=0·009)和C组(4·66mm2±1·66mm2,P=0·006);A组截面积再狭窄明显小于B组(P=0·017)和C组(P=0·009)。置入的13个BMS支架,几乎所有支架支撑杆表面均有内膜覆盖,而置入DES后内膜增殖较少,部分支架支撑杆表面即使在支架术后29个月仍然没有内膜覆盖。结论OCT成像技术可清晰地显示支架支撑杆及表面内膜增殖情况,对评价药物洗脱支架的治疗效果具有重要意义。