麻黄、五味子影响肺纤维化大鼠血管新生的差异性研究

目的 探讨麻黄、五味子对肺纤维化大鼠血管新生影响差异的作用机制.方法 选择SPF级Wistar雄性大鼠90只,随机设立假手术组、模型组、氢化可的松组、麻黄组、五味子组以及麻黄五味子组.采用博莱霉素A5(7 mg/kg)气管滴入方法建立肺纤维化模型,假手术组灌胃生理盐水(6 mL/kg)28 d;中药水煎液浓缩至每毫升含原药材1 g,麻黄组、五味子组分别灌胃麻黄(5g/kg)、五味子(2.5g/kg)水煎液28 d,麻黄五味子组灌胃麻黄水煎液(5g/kg)7 d后灌胃五味子水煎液(2.5g/kg)至28 d,氢化可地松组肌注氢化可地松20 mg/kg 28 d.于7、28 d放射免疫法检测各组大鼠内皮素-1(ET-1)、6-酮-前列腺素F1a(6-Keto-PGF1a)含量变化,免疫组化法观察肺组织微血管密度.结果 7 d时,模型组血浆ET-1含量升高,较假手术组差异有统计学意义(P＜O.05),6-Ke-to-PGF1a含量较假手术组有所升高,但差异无统计学意义;28 d时,麻黄五味子组与氢化可的松组血浆ET-1含量显著降低,与模型组比较差异有统计学意义(P＜0.05),各治疗组6-Keto-PGF1a含量较7 d时均有所升高.模型组肺微血管密度显著多于假手术组及各治疗组(P＜0.05),麻黄组对肺小动脉血管新生的抑制高于五味子组、麻黄五味子组.结论 麻黄对改善肺纤维化大鼠肺系数有积极作用,麻黄、五味子联合应用对肺纤维化的肺部小动脉损伤有抑制作用.     

养肺活血方对肺纤维化大鼠肺组织血管新生的影响

目的 探讨养肺活血方对平阳霉素诱导肺纤维化大鼠肺组织血管新生的影响.方法 麻醉大鼠后,经气管软骨环间隙向心端穿刺,气管内注入平阳霉素5 mg/kg建立大鼠肺纤维化模型,假手术组大鼠在同样麻醉条件下气管内注入等量生理盐水.术后第2天开始每天灌胃给药,假手术组和模型组予5‰羧甲基纤维素钠(CMC钠)溶液,地塞米松组予等容积地塞米松蒸馏水溶液,养肺活血组予等容积养肺活血方合剂,灌胃28 d,麻醉处死大鼠,将左肺固定,包埋切片,常规脱蜡,用免疫组化SP法检测肺组织血管内皮细胞生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)和CD34标记微血管.采用光学显微镜和全自动图像获取系统随机测量并计算平均光密度(IOD)值及微血管密度(Microvascular density,MVD).结果 模型组大鼠肺组织VEGF的水平明显高于假手术组(P＜0.01),养肺活血组肺组织VEGF的水平明显低于模型组(P＜0.01).模型组大鼠肺组织微血管密度明显低于假手术组,养肺活血组肺组织微血管密度明显高于模型组.结论 降低肺组织VEGF的水平和增加微血管密度可能是中药养肺活血方治疗肺纤维化的机制之一.     

麻黄、五味子联用地塞米松对肺纤维化大鼠血管新生促进因子与抑制因子的影响

目的探讨麻黄、五味子联用地塞米松(DXM)对肺纤维化大鼠血管新生促进因子与抑制因子的影响。方法将106只SPF级雄性Wistar大鼠随机分成假手术组、模型组、麻黄组、五味子组、麻黄+DXM组、五味子+DXM组以及DXM组。采用气管滴入博莱霉素(7 mg/kg)法复制肺纤维化模型,并分别给予相应的药物干预。各组大鼠分别于造模后第7天、第28天腹主动脉取血处死,肺组织灌洗后HE染色观察病理形态变化,ELISA法检测血清中缺氧诱发因子(HIF)-1α、血小板衍生生长因子(PDGF)、色素上皮源性因子(PEDF)和内皮抑素endostatin的表达水平。结果模型组HIF-1α、PDGF、PEDF和endostatin的表达升高,与假手术组比较具有显著性差异(P0.01);第28天时HIF-1α、PDGF含量较第7天时升高,PEDF和endostatin含量较第7天时降低。与模型组比较,麻黄组、五味子组HIF-1α、PDGF表达降低,PEDF、endostatin表达升高(P0.05);麻黄组第28天与第7天比较,HIF-1α、PDGF表达升高,PEDF、endostatin表达降低。五味子组与麻黄组情况相反。第7天、第28天,麻黄+DXM组、五味子+DXM组与模型组比较,HIF-1α、PDGF表达降低,PEDF、endostatin表达升高(P0.05);第7天、第28天比较表达无显著变化。与DXM组比较,五味子+DXM组HIF-1α表达升高,PEDF表达降低,具有显著性差异(P0.05)。结论肺纤维化进程中血管新生调控因子失去平衡,麻黄、五味子可抑制HIF-1α、PDGF的表达,促进PEDF、endostatin表达,与地塞米松联用后,对肺纤维化的不同病理阶段选择性减弱。     

扶正剔邪搜络方对肺纤维化大鼠血管新生活动的影响

目的研究扶正剔邪搜络方对肺纤维化大鼠肺组织血管新生活动的影响,探索扶正剔邪搜络方发挥治疗作用的潜在机制。方法将健康雄性SD大鼠分为对照组、模型组和治疗组,每组32只。模型组和治疗组通过气管插管推注博莱霉素复制肺纤维化大鼠模型,对照组气管内注射等体积生理盐水。造模24 h后,治疗组按0.67 g/(kg·d)的剂量以扶正剔邪搜络方混悬液灌胃,对照组和模型组给予相同体积的生理盐水,于造模后第7、14、21、28天分别处死,每次8只,取肺组织进行HE染色、Masson染色,ELISA法检测肺组织内血管内皮生长因子(VEGF-A)及其受体(VEGFR-2)的表达情况,以免疫组织化学染色检测肺组织CD34抗原的表达情况,并通过Weidner法测微血管密度(MVD)。结果治疗组大鼠肺组织的病理改变与模型组相似,但炎症和纤维化程度均轻于同一时相模型组;治疗组大鼠各时相肺组织VEGF-A及其受体VEGF-R2的表达水平均低于同一时相模型组(P0.01或P0.05);CD34阳性细胞被染成棕黄色或褐色,治疗组大鼠微血管密度低于模型组(P0.01或P0.05)。结论扶正剔邪搜络方可以减轻博莱霉素诱导肺纤维化大鼠肺组织炎性渗出,减少胶原沉积,其机制可能与扶正剔邪搜络方降低大鼠VEGF-A及其受体VEGFR2的表达水平,抑制肺纤维化大鼠肺组织的异常血管新生活动有关。     

清肺化痰、益气活血对肺纤维化大鼠不同时间点TGF-β1mRNA表达的影响

目的 比较清肺化痰、益气活血中药对肺纤维化大鼠不同时间、不同吞噬细胞β型转化生长因子(TGF-β1)mRNA表达的影响.方法 将77只雄性SPF级Wistar大鼠随机分为7组,即假手术组、模型组、清肺化痰组、益气活血组、两法联合运用组、两法分阶段运用组及氢化可的松组,建立肺泡巨噬细胞(AM)、肺间质巨噬细胞(IM)细胞模型.用原位杂交方法检测TGF-β1 mRNA表达水平,积分光密度法计算TGF-β1 mRNA阳性面积.结果 7 d时AM和28 d时IM的 TGF-β1 mRNA阳性细胞率和积分光密度显示,模型组较假手术组增加,差异具有极显著性(P<0.01);中药各治疗组较模型组降低,差异具有显著性 (P<0.05).结论 清肺化痰、益气活血中药均可通过减少AM、IM分泌TGF-β1,抑制肺泡炎和肺纤维化的进程.     

益气活血化痰方药对肺纤维化大鼠细胞因子及血液流变性影响的研究

目的研究益气活血化痰方药对肺纤维化大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平及血液流变性变化的影响。方法用平阳霉素诱发大鼠的肺纤维化建立模型,观察空白组、模型组、中药1组(1.86 g/100 g)、中药2组(3.72 g/100 g)在第28天的指标变化情况。结果模型大鼠BALF中IL-8、TNF-α水平、全血黏度、血浆黏度及血小板聚集率均明显升高,红细胞变形能力显著下降(P<0.01或P<0.05);中药1、2组均可降低IL-8、TNF-α的致肺纤维化的趋化作用,降低全血黏度、血浆黏度及血小板聚集率水平,升高红细胞的变形能力(P<0.05),以中药2组作用明显。结论益气活血化痰方药对用平阳霉素诱发大鼠的肺纤维化病变有明显的防治作用。     

Caveolin-1对脑缺血大鼠血管新生的影响

目的 探讨缺血性脑卒中大鼠缺血周边脑组织Caveolin-1(Cav-1)的表达及抑制其表达对缺血周边血管新生的影响。方法 随机将雄性Wistar大鼠分为4组:假手术组(Sham组,n=15),脑缺血组(MCAO组,n=55),Cav-1 siRNA慢病毒转染组(siRNA组,n=20)以及非编码siRNA慢病毒转染组(misRNA组,n=20)。用Q-PCR以及免疫印迹检测Cav-1的动态表达,FITC-dextran检测血管密度,多普勒血流仪检测血流量。结果 与Sham组比较,MCAO组再灌注4 h~3 d, Cav-1表达逐渐下降(P均<0.05),3 d表达水平最低(P<0.01),7 d 后明显恢复(P<0.05),14 d接近正常(P>0.05)。与MCAO组比较,siRNA组Cav-1的表达水平显著降低,并且缺血周边血管密度及血流量显著下降(P均<0.05);misRNA组的上述指标无明显变化。结论 Cav-1参与调节缺血性脑卒中后缺血周边脑组织的血管新生。     

清热活血方抑制Ⅱ型胶原诱导型关节炎大鼠滑膜组织血管新生的研究

目的 研究清热活血方的活血化瘀作用,探讨该方药抑制滑膜组织内血管新生的机制.方法 采用Ⅱ型胶原诱导型关节炎(CIA)大鼠模型,治疗组用清热活血方大、小剂量干预,同正常组、模型组、阳性药物组比较,观察清热活血方对CIA大鼠关节肿胀度、关节病理切片、滑膜病理切片、微血管密度(MVD)、血清中致炎因子干扰素(INF)-γ及血管疾病相关指标组织型纤溶酶原激活因子(tPA)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的影响.结果 清热活血方能明显缓解CIA大鼠关节肿胀;关节病理切片显示清热活血方可以抑制关节内滑膜的增生,延缓关节软骨与骨的破坏.滑膜病理切片显示,清热活血方大、小剂量组滑膜组织内炎症细胞的浸润较模型组减少,且微血管密度较模型组降低;清热活血方大、小剂量组大鼠血清中INF-γ含量较模型组明显减少(P＜0.05).与模型组比较,清热活血方大剂量组可以减少tPA的生成(P＜0.05);与模型组比较,清热活血方小剂量组可以下调eNOS的表达(P＜0.05),大剂量组能显著下调eNOS的表达(P＜0.01),说明该方对于eNOS表达具有抑制作用,并且呈剂量相关性.结论 清热活血除了可以有效地控制关节的炎症,延缓关节内软骨与骨的破坏,减少关节内滑膜的增生外,还可以改善关节周围血瘀的情况,抑制促血管生成因子的表达,从而减少新生血管的数量,较好地控制活动期类风湿关节炎的病情.     

冠心舒通胶囊对急性心肌梗死大鼠缺血心肌血管新生的影响

目的 观察冠心舒通胶囊对心肌梗死后大鼠缺血心肌血管新生的影响.方法 健康Wistar大鼠正常喂养1周,建立大鼠心肌梗死模型后,随机分为冠心舒通胶囊高、低剂量组、阳性药物对照组(贝复济与肝素对照组)、模型组及假手术组.连续给药4周后处死大鼠,取梗死边缘区心肌组织,进行免疫组化检测.结果 免疫组化法中各组与假手术组、模型组比较差异无统计学意义(P＞0.05);VEGF及PDGF-B蛋白表达情况,药物组与模型组、假手术组比较差异均有统计学意义(P＜0.05),高剂量组与阳性药物对照组比较结果相当.结论 冠心舒通胶囊对心肌梗死后大鼠缺血心肌有促进血管新生的作用.     

姜黄素对高氧致新生大鼠肺纤维化的保护作用及机制探讨

目的:支气管肺发育不良(BPD)从肺发育停滞和肺间质纤维化为主要病理改变,姜黄素(Cu)具有抗氧化、抗纤维化等生物活性.观察Cu对高氧致新生大鼠肺纤维化胶原沉积、转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响.方法:出生12 h内的足月新生大鼠160只,随机分成4组(每组40只):空气组、空气+Cu组、高氧组和高氧+Cu组.高氧组、高氧+Cu组置于氧箱中,氧浓度维持在90%左右,空气组、空气+Cu组吸人空气.空气+Cu组、高氧+Cu组新生鼠每日腹腔注射溶于亚麻油的Cu[200mg/(kg×d)],空气组、高氧组每日腹腔注射等量亚麻油.各组分别于3、7、14、21 d随机处死5只,取肺组织进行苏木精-伊红和Masson染色、应用免疫组化技术测定TGF-β1表达水平. 结果:高氧组支气管黏膜下、血管壁及周围、肺泡壁、肺间质均有胶原大量沉积;高氧+Cu组胶原沉积明显轻于高氧组;空气组、空气+Cu组胶原沉积不明显.免疫组化发现高氧组TGF-β1表达最强,高氧+Cu组较弱,空气组、空气+Gu组微弱表达. 结论:Cu可抑制高氧致新生大鼠的肺纤维化,其作用机制可能是通过抑制TGF-β1的表达来实现.     

益气活血散结法对肺纤维化的干预效果及机制研究

[目的]探讨益气活血散结法对肺纤维化的干预效果及机制。[方法]通过临床与动物实验系统研究益气活血散结法为主要治则的中药复方对肺纤维化的干预效果及机制。[结果]益气活血散结法不仅能明显改善肺纤维化患者的临床症状，提高生活质量，而且能抑制肺泡炎症，减少肺组织损伤，显著降低转化生长因子-β1（TGF-β1）的过度表达。[结论]益气活血散结法能改善肺纤维化患者临床症状，对防治肺纤维化有一定的作用。     

从“正气内虚,痰瘀并存”论治肺间质纤维化

中医认为,肺间质纤维化的病因病机特点为本虚标实,本虚为肺、脾、肾三脏虚损,标实为痰、瘀、热、毒,痰、热、毒均在虚和瘀基础上形成.正虚和邪实可以相互影响,并互为因果,形成因虚致实、因实致虚、虚者更虚、实者更实的病理特点.中医药治疗该病有其独特优势,可外感与内伤并重,扶正与祛邪并调.从“正气内虚,痰瘀并存”的病机观点论治肺间质纤维化,可为该病的治疗提供理论依据.     

张念志教授运用益气活血化痰法治疗肺胀

张念志教授治疗肺胀根据其"虚"痰"瘀"之特点,治疗上无论何期多采用益气活血化痰法.急性发作期偏重于祛除外邪,缓解期偏重于补虚固本,并创制益气活血化痰方,临证灵活加减能有效减轻患者症状和急性发作次数.     

补肾活血化痰汤对多囊卵巢综合征患者不孕疗效和内分泌代谢的影响

[目的]探讨补肾活血化痰汤对多囊卵巢综合征(PCOS)患者不孕疗效和内分泌代谢指标的影响。[方法]选取2014年1月—2015年11月期间治疗的PCOS不孕患者82例,随机分为观察组与对照组,对照组予口服二甲双胍治疗(每次500 mg,每日3次),观察组在此基础上联合应用自拟补肾活血化痰汤治疗,比较两组患者治疗前后性激素水平及代谢指标的变化,并比较排卵率及妊娠率。[结果]两组患者黄体生成素(LH)、催乳素(PRL)、睾酮(T)治疗后均明显降低,雌二醇(E_2)明显增高,且组间比较差异有统计学意义(P0.05)。两组患者体质量指数(BMI)均较治疗前明显下降(P0.05),但组间比较差异无统计学意义(P0.05)。两组患者治疗后甘油三酯(TG)、血清胆固醇(TC)、空腹血糖(FPG)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)均较治疗前显著降低,且观察组低于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。观察组排卵率及妊娠率均明显高于对照组(P0.05)。[结论]补肾活血化痰法治疗PCOS可调节患者性激素水平,改善糖、脂代谢及胰岛素抵抗,提高排卵及妊娠率。     

益气活血通络法对特发性肺纤维化患者生存质量的影响

目的探讨益气活血通络法对特发性肺间质纤维化(IPF)气虚血瘀证患者生存质量的改善作用。方法符合中西医诊断标准的IPF患者30例,采用自身前后对照的方法,给予益气活血通络汤口服,每日1剂,每服200 mL,每日服2次。3个月为1疗程,观察2个疗程。以呼吸疾病问卷(SGRQ)作为测评工具,观察患者生存质量的改善情况。结果治疗6个月时SGRQ中呼吸症状评分、活动受限评分、总分积分均有所降低,与治疗前相比有显著性差异(P<0.05);疾病影响评分也有所降低,但与治疗前相比未见显著性差异(P>0.05)。结论益气活血通络法对改善IPF气虚血瘀证患者生存质量具有显著意义。     

理气活血法对萎缩性胃炎癌前病变大鼠基因表达谱的影响

目的 观察理气活血法对萎缩性胃炎癌前病变大鼠胃黏膜组织基因表达谱的影响.方法 使用金属弹簧、灌服盐水溶液和热糊的综合方法建立大鼠萎缩性胃炎癌前病变模型,运用基因芯片技术,检测理气活血法干预后萎缩性胃炎癌前病变大鼠基因的差异表达变化,筛选出差异表达基因,并应用Real-time PCR对主要差异基因进行鉴定.结果 共筛选出差异表达基因14个,其中上调基因8条,下调基因6条,共同构成了理气活血法干预大鼠萎缩性胃炎癌前病变的差异表达基因谱.其中蛋白酪氨酸激酶2(ptk2)在自然恢复组中明显下调,经理气活血法干预后明显上调.结论 理气活血法可上调ptk2基因的表达,从而调节肌动蛋白细胞骨架的重构,促进损伤的胃黏膜修复和愈合,这可能是理气活血法治疗萎缩性胃炎癌前病变的机理之一.     

补肾活血解郁法治疗类风湿关节炎伴发抑郁症的临床观察

目的 观察补肾活血解郁法对类风湿关节炎(RA)伴发抑郁症肾虚血瘀证的临床疗效.方法 采用随机、对照原则,选取符合RA、抑郁症及中医学证候标准的66例患者,分为治疗组和对照组,在常规抗风湿治疗基础上,治疗组予补肾活血解郁方,每天1剂,对照组予氟西汀胶囊,20 mg/d,治疗6周后,观察对抑郁程度及RA的影响.结果 ①汉密顿抑郁量表(HAMD)评分显示,治疗组总显效率、总有效率分别为79.41%、88.24%;对照组为62.50%、81.25%.两组比较,P＞0.05.②按RA改善程度评估临床疗效,治疗组总显效率、总有效率分别为79.41%、91.18%;对照组为71.88%、87.50%,两组比较,P＞0.05.两组疗效相当.结论 肾虚血瘀、脑神失养是RA伴发抑郁症病机之一,补肾活血解郁法可减轻抑郁症状、改善RA病情.     

健脾益肾活血法对维持性血液透析患者微炎症反应状态的影响

目的探讨健脾益肾活血颗粒对维持性血液透析（MHD）患者微炎症反应的影响。方法选取48例进行血液透析的患者,将其随机分成中药组和对照组。治疗前和3个月后检测患者的血清超敏C反应蛋白（hs-CRP）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）、血红蛋白（Hb）、转铁蛋白（TRF）、胆固醇（TC）水平。结果两组患者血压无明显变化,两组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。中药组hs-CRP[（12.56±3.97）mg/L]、TNF-α[（16.25±5.31）ng/L]、IL-6[（14.62±6.63）ng/L]和对照组hs-CRP[（13.35±3.72）mg/L]、TNF-α[（17.61±6.84）ng/L]、IL-6[（15.25±6.29）ng/L]治疗后血清水平均有明显的下降趋势,与治疗前比较差异有统计学意义（P〈0.05）;治疗后中药组Hb[（109.27±16.53）g/L]、TRF[（2.51±0.36）g/L]、TC[（4.53±0.12）g/L]水平都有明显升高,与治疗前和治疗后对照组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论健脾益肾活血颗粒能减轻血液透析患者的微炎症,从而减缓患者病症的发展。     

芪红汤治疗特发性肺间质纤维化的临床研究

目的 评价中药芪红汤治疗特发性肺间质纤维化的疗效.方法 将60例特发性肺间质纤维化患者随机分为治疗组与对照组各30例,治疗组予芪红汤口服,对照组予激素强的松口服,观察3个月.结果 治疗组总有效率73.33%,对照组总有效率43.33%,治疗组在症状总积分及喘息、咳嗽、Velcro罗音等积分下降方面均较对照组明显,治疗组能显著提高肺弥散功能和血氧,且再感染次数较对照组明显减少.结论 芪红汤治疗特发性肺间质纤维化疗效优于对照组,且用药安全.     

肺纤方对博莱霉素致肺间质纤维化大鼠肺系数与肺组织病理的影响

目的 观察肺纤方对博莱霉素致肺间质纤维化大鼠肺系数和肺组织病理的影响,研究肺纤方对肺间质纤维化的治疗作用.方法 雄性Wistar大鼠经气管插管灌注博莱霉素(1 mg/kg)复制大鼠肺间质纤维化模型,分为假手术组、模型组、泼尼松组和肺纤方组.造模后24 h开始常规每日1次灌胃给药.造模后第14、28、45天取材,计算肺系数,检测肺组织病理,进行肺组织病理学肺泡炎与肺间质纤维化分级;对Masson染色切片进行胶原纤维的面密度和数密度分析.结果 肺纤方组28 d和45 d时肺系数显著低于14 d(P<0.05),而其他各组不同时间点比较没有统计学意义.模型组、泼尼松组、肺纤方组均有肺泡炎和肺间质纤维化改变,45 d时肺纤方组的肺间质纤维化程度较模型组和泼尼松组轻.28 d时,肺纤方组肺泡炎显著低于模型组(P<0.05).45 d时肺纤方组与模型组比较肺间质纤维化程度明显降低(P<0.05).定量分析显示胶原纤维的面密度和数密度在45 d时肺纤方组与模型组和泼尼松组比较均显著降低(P<0.05).结论 肺纤方有一定的减轻博莱霉素致大鼠肺间质纤维化的作用,并能在较短时间内降低博莱霉素致肺间质纤维化大鼠的肺系数.