蝎毒活性多肽对内皮细胞释放PGI2和NO的影响

目的 探讨蝎毒活性多肽(SVAP)抗栓作用机制.方法酶消化法培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),放射免疫分析法测定HUVEC培养液中6-Keto-PG F1α的含量以反映PGI2的变化,硝酸还原酶法测定NO的含量.结果SVAP 1、5、10、20 mg.L-1均可明显增加 HUVEC PGI2的释放,而SVAP 1、5 mg.L-1对NO的释放无明显影响,SVAP 10、20 mg.     

蝎毒活性肽对内皮细胞释放t-PA和PAI的影响

血管内皮细胞 (ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓ,ＶＥＣ)能合成和分泌组织型纤溶酶原激活物 (ｔｉｓｓｕｅｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎａｃｔｉｖａｔｏｒ ,ｔ ＰＡ) ,使纤溶酶原激活为纤溶酶 ,促进局部血栓溶解 ,ＶＥＣ还可分泌纤溶酶原激活物抑制剂 ( ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎａｃｔｉｖａｔｏｒｉｎ ｈｉｂｉｔｏｒ,ＰＡＩ) ,当机体处于正常情况下ｔ ＰＡ与ＰＡＩ保持动态平衡 ,这对于维持血液纤溶和凝血系统的稳定至关重要 ,因此 ,血管内皮细胞在调节血栓的形成和溶解方面具有十分重要的作用。全蝎是名贵中药材 ,有祛风、…     

蝎毒多肽的镇痛及抗炎和作用

采用热板法和醋酸扭体法证明腹腔注射蝎毒多肽０．６５０，０．４３３ｍｇ／ｋｇ能明显升高小鼠痛阈和减少小鼠的扭体次数，腹腔注射蝎毒多肽０．４３３，０．２１６ｍｇ／ｋｇ能明显对抗蛋清所致的大鼠中肿用连续７天腹腔注射蝎毒多肽０．２６０，０．１３０ｍｇ／ｋｇ能明显抑制大鼠棉球肉芽肿形成；腹腔注射蝎毒多肽０．６５０，０．４３３ｍｇ／ｋｇ能降低小鼠腹腔毛细血管通透性。     

蝎毒抗癌多肽对大肠癌LoVo细胞的影响

目的探讨东亚钳蝎毒抗癌多肽对大肠癌LoVo细胞的影响及其与多种化疗药物的协同作用。方法采用MTT法(噻唑蓝比色试验)测定该抗癌多肽单独及与化疗药物协同对LoVo细胞的增殖抑制作用。结果蝎毒抗癌多肽可抑制LoVo细胞增殖,并且低浓度的蝎毒抗癌多肽与化疗药物协同,可产生较强的抑制细胞增殖的作用。结论蝎毒抗癌多肽具有直接的抗肿瘤作用,并且具有增强化疗药物作用的功效。     

蝎毒多肽的镇痛及抗炎作用

采用热板法和醋酸扭体法证明腹腔注射蝎毒多肽０．６５０，０．４３３ｍｇ／ｋｇ能明显升高小鼠痛阈和减少小鼠的扭体次数．腹腔注射蝎毒多肽０．４３３，０．２１６ｍｇ／ｋｇ能明显对抗蛋清所致的大鼠足肿胀；连续７天腹腔注射蝎毒多肽０．２６０，０．１３０ｍｇ／ｋｇ能明显抑制大鼠棉球肉芽肿形成；腹腔注射蝎毒多肽０．６５０，０．４３３ｍｇ／ｋｇ能降低小鼠腹腔毛细血管通透性     

蝎毒多肽提取物对白血病细胞粘附力影响的实验研究

目的 观察蝎毒多肽提取物(PESV,防治白血病中药提取物)对抑制人白血病原代细胞粘附力的影响.方法 以人白血病原代细胞为研究对象,台盼蓝拒染法检测PESV对人白血病原代细胞的细胞毒作用;观察其对白血病原代细胞与人脐静脉内皮细胞(HUVEC)粘附的影响.结果 PESV在对细胞最佳作用浓度15μg·mL-1下,能够明显抑制人白血病原代细胞与HU-VEC的粘附,抑制率为(52.18±21.01)%;各浓度组与阳性对照组比较具有显著性差异(P<0.05).结论 PESV在对细胞最佳作用浓度下,对人白血病原代细胞的黏附力有明显抑制作用.     

蝎毒活性多肽对大鼠脑缺血-再灌注后IL-1B蛋白表达和神经功能的影响

目的:研究蝎毒活性多肽对大鼠脑缺血-再灌注损伤的保护作用,并观察该保护作用对白细胞介素-1B(interleukin- 1B,IL-1B)蛋白表达的影响。方法:采用左侧大脑中动脉插入栓线(Middle cerebral artery occlusion,MCAO)方法制作大鼠脑缺血-再灌注模型,观察蝎毒活性多肽对脑缺血大鼠神经功能的影响;用免疫组化方法标记各组大鼠脑组织海马中IL-1B阳性细胞数量。结果:蝎毒活性多肽可降低大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤行为学评分,改善因缺血所致神经行为功能缺失,且随着剂量的增加效应增强,并可以显著减少海马IL-1B阳性细胞的数量(P<0．05)。结论:蝎毒活性多肽对脑缺血损伤有一定的保护作用,且这种作用与其减少脑缺血早期IL-1B表达有关。     

鲎血细胞多肽对LPS诱导入脐带动脉平滑肌细胞释放NO的影响

目的：观察从肢口纲动物鲎的血液细胞中提取的一类相对低分子质量的抗菌多肽对脂多糖（LPS）诱导人脐带动脉平滑肌细胞释放NO的影响。方法：MTT法观察鲎血细胞多肽对人脐带动脉平滑肌细胞的毒性，用Griess试剂测定LPS诱导人脐带动脉平滑肌细胞释放NO水平，并观察鲎血细胞多肽对LPS诱导人脐带动脉平滑肌细胞毒性不明显，半数抑制率（IC50）为70mg.L^-1；鲎血细胞多肽对LPS诱导人脐带动脉平滑肌细胞释放NO具有一定的抑制作用，半数抑制剂（IC50）为109．56mg.L^-1；同时可以抑制NOS活性。结论：鲎血细胞多肽可以抑制LPS诱导人脐带动脉平滑肌细胞释放NO。     

2种海参胶原蛋白多肽对血管内皮细胞保护作用的比较研究

目的 观察革皮氏海参和北极刺参胶原蛋白多肽对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)损伤的血管内皮细胞的保护作用,探讨其保护内皮细胞的作用机制。方法 采用ox-LDL处理血管内皮细胞(ECV304)建立氧化应激损伤模型,以MTT法测定ECV304的增殖活性,硫代巴比妥酸法测定细胞内的丙二醛(MDA)含量,比色法测定一氧化氮合酶(NOS)活力和一氧化氮(NO)释放量,Hoechst33258染色法检测细胞的凋亡,Western blotting法检测caspase-3蛋白的表达。结果 经2种海参胶原蛋白多肽预处理后,ECV304细胞的增殖率显著升高 (P<0.05,P<0.01),细胞凋亡比率和MDA含量显著降低(P<0.05,P<0.01),细胞NOS活力和NO释放量均显著提高 (P<0.05,P<0.01),凋亡蛋白caspase-3的表达量显著降低。结论 2种海参胶原蛋白多肽均能有效保护脂质过氧化物损伤的血管内皮细胞,其中北极刺参胶原蛋白多肽在抑制细胞凋亡和提高NOS活性方面效果更突出,可能与其氨基酸组成有关。     

蝎毒素IV对血管内皮细胞介导纤溶作用的影响

目的　研究蝎毒素IV纤溶作用的内皮细胞介导机制。方法　培养的人脐静脉血管内皮细胞分别与剂量为 0 ,1,2 ,4 ,8mg/L的蝎毒素IV孵育后 ,测定蝎毒素IV对内皮细胞释放组织型纤溶酶原激活剂 (t PA)、组织型纤溶酶原激活剂抑制物(PAI 1)的影响。结果　蝎毒素IV在低剂量能降低t PA和PAI 1活性 ,但t PA/PAI 1比值较对照组相比明显升高。结论　蝎毒素IV能够通过影响内皮细胞功能 ,发挥纤溶作用 ,提示其为纤溶促进剂。     

灯盏花素对人脐静脉内皮细胞胞内Ca~(2+)水平的调控作用

目的探讨灯盏花素对培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)胞内Ca2+水平([Ca2+]i)的调控作用。方法采用新一代Ca2+荧光探针Fluo-3/AM标记培养的HUVECs,激光共聚焦显微镜检测细胞胞内钙荧光信号,观察灯盏花素对培养的HUVECs胞内Ca2+水平的调控作用。结果在胞外有Ca2+或无Ca2+的情况下,灯盏花素均可引起[Ca2+]i的短暂性升高;灯盏花素的Ca2+释放作用与钙泵抑制剂CPA存在着交迭;灯盏花素能够抑制由KCl所引起的[Ca2+]i的升高;灯盏花素对胞内Ca2+池耗竭后胞外复Ca2+所引起的钙内流无明显阻断作用。结论灯盏花素可引起胞内Ca2+池的Ca2+释放,其释放的Ca2+来自CPA敏感的Ca2+池。灯盏花素也可抑制经电压依赖性Ca2+通道的Ca2+内流,对Ca2+池耗竭后引起的Ca2+内流通道无明显阻断作用。     

蝎毒提取物对受损神经再生与修复过程的影响

蝎毒 (scorpionvenom ,SV)是全蝎的主要药效成分 ,包括蛋白组分和非蛋白组分 ,其中占多数是蛋白组分 ,亦是发挥药理活性的主要成分。我室对马氏钳蝎SV的研究发现 ,SV中一种相对分子质量 90 0 0左右的组分有较强镇痛作用 ,我们称它为SV A组分[1 ] 。本实验通过蛛网膜下腔给予最小镇痛剂量的SV A ,观察对大鼠神经痛病理模型受损神经恢复过程的影响。1　材料与方法1 .1　材料　SV冻干粉 ,由本室自提 ;用QHyperDTM阴离子交换柱和Biosys 2 0 0 0型蛋白纯化系统 (美国Beckman公司生产 )洗脱得到SV A组分 ,冷冻干燥备用。神经生长因子(ne…     

Anticancer and antimicrobial activities of scorpion venoms and their peptides

Scorpion venom is a natural biological resource that contains several components, which are not only responsible for death but also have a potential therapeutic activity. Scorpion venom has been used as traditional and folk therapy in various pathophysiological conditions. Now, many scorpion venom components have been purified and identified. Based on the available structural and functional information of these components, the scientists can produce new venom-derived medications with potential therapeutic activity against many important diseases. This review focused on the importance of scorpion venoms and their peptides against cancer and microbes.     

蝎毒组分Ⅲ对人头颈部鳞状细胞癌细胞生长的影响

目的 :观察蝎毒组分Ⅲ (SVC Ⅲ )对人头颈部鳞状细胞癌细胞株 (AGZY 973)生长的影响 ,试图找出SVCⅢ抑制鳞状细胞癌的最佳浓度。方法 :采用噻唑蓝 (MTT)法检测经不同浓度SVC Ⅲ作用下AGZY 973生长抑制率。结果 :SVCⅢ能抑制该细胞的生长 ,SVC Ⅲ可导致AGZY 973细胞代谢MTT的能力显著低于对照组 ,生长抑制率达 6 8.96 % (P <0 .0 1)。当SVCⅢ的浓度 <4 0mg·L- 1时 ,剂量效应关系明显 ;而SVC Ⅲ的浓度 >4 0mg·L- 1时无剂量效应关系。 5 Fu治疗组生长抑制率达 5 5 .2 7%P <0 .0 1)。结论 :SVC Ⅲ是存在于东亚钳蝎蝎毒中的一种抗肿瘤成分 ,能够抑制AGZY 973的生长 ,并在一定浓度范围内存在剂量效应关系     

Isolation and primary structure of a potent toxin from the venom of the scorpion Centruroides sculpturatus Ewing

A potent toxin has been purified from the venom of the scorpion Centruroides sculpturatus Ewing using the ion-exchange resin CM-Sepharose CL-6B at basic pH. The toxin, designated CsE M₁, comprised 65 amino acid residues and its primary structure was established as: Lys-Glu-Gly-Tyr-Leu-Val-Asn-Ser-Tyr-Thr¹⁰-Gly-Cys-Lys-Tyr-Glu-Cys-Leu-Lys-Leu-Gly²⁰-Asp-Asn-Asp-Tyr-Cys-Leu-Arg-Glu-Cys-Arg³⁰-Gln-Gln-Tyr-Gly-Lys-Ser-Gly-Gly-Tyr-Cys⁴⁰-Tyr-Ala-Phe-Ala-Cys-Trp-Cys-Thr-His-Leu⁵⁰-Tyr-Glu-Gln-Ala-Val-Val-Trp-Pro-Leu-Pro⁶⁰-Asn-Lys-Thr-Cys-Asn. CsE M₁ is the most lethal protein to be identified in C. sculpturatus venom and the LD₅₀ of the toxin, determined by subcutaneous injection into Swiss mice, is 87 μg/kg. CsE M₁ shows strong structural similarity (92% positional identity) to the most potent β-toxin, Css II, from the Mexican scorpion, Centruroides suffusus suffusus but is quite dissimilar to the previously characterized toxins with low potency isolated from C. sculpturarus Ewing.     

重组CD_(13)单链抗体和蝎毒素多肽AGAP融合蛋白真核表达及对NB4细胞的靶向杀伤作用

目的:本研究应用基因工程技术方法,构建含重组编码CD13单链抗体和蝎毒素镇痛抗肿瘤缬精甘肽(analgesic antitumoral peptide,AGAP)融合蛋白基因的表达载体,并研究CD13-AGAP融合蛋白对CD13阳性白血病细胞NB4影响。方法:克隆东亚钳蝎活性肽AGAP的基因,插入真核表达载体pSecTag2/CD13/RFP,得到pSecTag2/CD13/AGAP重组真核表达载体。酶切及测序鉴定后,脂质体介导重组质粒转染293T细胞,通过RT-PCR和免疫印迹方法检测融合基因和蛋白的表达。纯化融合蛋白,作用NB4细胞,CCK8检测细胞活性,流式细胞仪检测细胞周期。结果:酶切及测序结果证实pSecTag2/CD13/AGAP重组真核表达载体构建成功,转染293T细胞后,RT-PCR和免疫印迹方法结果证实重组质粒得到有效表达,并纯化真核表达融合蛋白CD13-AGAP对血液肿瘤CD13阳性白血病细胞NB4有一定的生长抑制作用,并且使细胞周期G1期阻滞,S期减少。结论:成功构建了融合蛋白真核表达载体pSecTag2/CD13/AGAP,并在293T细胞中成功表达,进一步证实融合蛋白对CD13阳性白...     

植物雌激素α-ZAL对oxLDL诱导的人内皮细胞分泌NO和ET-1的影响及其机制研究

目的探讨植物雌激素α-ZAL影响oxLDL诱导的人脐静脉内皮细胞分泌NO、ET-1的机制。方法采用RTPCR方法对eNOS、iNOS、ET-1mRNA的表达进行分析;采用WesternBlotting方法对eNOS、iNOS蛋白表达进行分析;同时测定内皮细胞上清液中NO、ET-1分泌的变化。结果植物雌激素α-ZAL增加oxLDL诱导内皮细胞eNOSmRNA、蛋白的表达和NO的分泌,降低ET-1mRNA的表达和蛋白的分泌。结论植物雌激素α-ZAL通过上调oxLDL诱导内皮细胞eNOSmRNA、蛋白的表达和NO的分泌,下调ET1mRNA的表达和蛋白的分泌起着保护血管内皮的作用。