小鼠骨性关节炎的模型制备及评价

目的探讨骨性关节炎的小鼠动物模型制备及评价方法。方法将昆明小鼠随机分为两组：即正常组和模型组。模型组采取4℃冷水冷冻刺激小鼠膝关节制作骨性关节炎模型。在造模15d和30d时分别对小鼠膝关节肿胀度进行关节炎指数（AI）评定；并取小鼠膝关节软骨作HE染色；用双抗体夹心-ELISA法检测大鼠血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、透明质酸（HA）水平。结果与正常组小鼠相比，30d时模型组小鼠AI值高达3．8；HE染色显示模型组小鼠出现典型的骨性关节炎病变症状；模型组血清中TNF-α、透明质酸含量有显著升高。结论小鼠冷冻造模能为研究骨性关节炎的发病机制提供理想的实验动物模型。     

新型β-链蛋白结合药物SAHPA1治疗去卵巢小鼠骨质疏松

目的 评估新型β-链蛋白(β-catenin)结合药物SAHPA1在绝经后骨质疏松小鼠模型中的治疗效果.方法 选取C57雌性小鼠作为实验对象.将实验动物分为3组,分别为假手术组、骨质疏松模型组(模型组)、骨质疏松模型治疗组(治疗组),每组5只小鼠.假手术组仅暴露卵巢后缝合切口;模型组和治疗组动物行双侧卵巢切除,建立去卵巢骨质疏松模型.治疗组在切除卵巢后即刻开始每日肌注β-catenin结合药物SAHPAl (10 mg/kg),假手术组和模型组每日注射同剂量的生理盐水.8周后,利用骨组织切片HE染色、micro-CT等方法观察小鼠股骨干骺端骨小梁形态并进行形态学计量分析,评估SAHPA1对去卵巢骨质疏松的治疗效果.结果 与假手术组比较,模型组小鼠骨密度、骨小梁数量、骨小梁厚度均降低,差异有统计学意义(P＜0.05).经SAHPA1治疗后,小鼠骨密度和骨小梁数量增高(P＜0.05),骨小梁厚度与模型组比较虽有一定提升但差异无统计学意义(P＞0.05).结论 新型β-catenin结合药物SAHPA1对绝经后骨质疏松小鼠模型有一定治疗作用.     

骨质疏松小鼠模型中骨组织Caveolin-1表达

目的 探讨骨质疏松小鼠模型中骨组织Caveolin-1表达变化.方法 双侧卵巢切除法建立小鼠骨质疏松模型;用双能X线骨密度仪测骨矿密度;HE染色观察骨组织变化;免疫组织化学法检测骨组织Cave-olin-1表达.结果 去卵巢12周小鼠股骨骨矿密度明显下降,同时其HE染色组织学改变符合骨质疏松症病理变化.骨质疏松组小鼠骨组织Caveolin-1表达明显低于对照组,Caveolin-1在小鼠幼年组表达最高.结论 去卵巢骨质疏松模型小鼠骨组织Caveolin-1表达降低,Caveolin-1信号分子可能具有抑制骨质疏松形成与发展作用.     

碘乙酸致大鼠膝骨关节炎疼痛模型的研究规律

目的 碘乙酸（Monoiodoacetic acid, MIA）注射是建立骨性关节炎（Osteoarthritis, OA）动物模型的经典方法,本研究通过大鼠双侧膝关节腔注射不同浓度MIA建立大鼠OA模型,探究不同浓度碘乙酸不同处理时间致大鼠膝骨性关节炎的模型规律。方法 将72只200g左右的清洁级雄性SD大鼠随机分为4组,对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组每组各18只。对照组双侧膝关节各注射50μl生理盐水,低剂量组每侧膝关节注射1 mg/50μl的MIA溶液（超纯水配置）50μl,中剂量组每侧注射3 mg/50μl的MIA溶液50μl,高剂量组每侧注射6 mg/50μl的MIA溶液50μl。比较注射后第1天,第1、2、3、4、5周运动功能、疼痛学改变、关节软骨病理变化及Mankind评分。结果：各实验组在造模两天后就出现轻微OA症状,造模后3周出现典型的病理、疼痛学改变,具有剂量效应和快速建模的特点。结论采取关节腔注射MIA能快速建立大鼠OA模型,并且具有剂量效应,随着剂量的加大,大鼠关节损伤越严重,在第3周至第4周时所表现骨性关节炎症状最为明显,是研究早期骨关节炎的理想模型。     

实验性骨质疏松症小鼠模型的建立

目的：研究建立骨质疏松症小鼠动物模型。方法：Balb／c小鼠随机分为2组，即去卵巢组和假手术对照组；用去卵巢方法建立骨质疏松症动物模型；用双能X线骨密度仪测骨密度；观察不同时期小鼠骨密度改变；HE染色观察组织学变化。结果：与假手术对照组比较，小鼠去卵巢10周可见全身骨密度下降（P〈0．05），而12周下降更明显（P〈0．01），同时其HE染色组织学改变符合骨质疏松症病理变化。结论：去卵巢12周后的小鼠与临床绝经后骨质疏松症特征相符，说明可以用做小鼠的骨质疏松症模型。     

大鼠骨质疏松骨折局部注射辛伐他汀对愈合的影响

目的 观察不同剂量辛伐他汀溶液对于骨质疏松大鼠股骨骨折愈合的影响。方法 3月龄健康雌性大鼠45只分为5组（n=9）,手术组（A）;卵巢切除组（B）;骨质疏松骨折组（C）;骨质疏松性骨折＋辛伐他汀1组（D）;骨质疏松性骨折＋辛伐他汀2组（E）,A组大鼠仅实施假手术不切除双侧卵巢,其余B~D组均要求切除双侧卵巢。C、D、E组在切除双侧卵巢8周后,制左侧股骨中段横行骨折模型,D组在骨折局部注射5mg/（kg·d）辛伐他汀溶液,E组注射10mg/（kg·d）辛伐他汀溶液,C组注射不含辛伐他汀的空载体,A、B组在术后8周处死,取出完整左侧股骨,其余3组在骨折造模后4周处死,并取出全部左侧股骨,测定左侧股骨的骨密度、HE染色并光镜下观察。结果 （1）切除卵巢8周后,测定B组骨密度显著低于A组（P〈0.05）。（2）骨质疏松骨折3组,C、D、E组的pBMD、mBMD、dBMD、tBMD均显著高于C组（pBMD：F=16.94,P=0.001;mBMD：F=15.57,P=0.001;dBMD：F=24.77,P=0.001;tBMD：F=23.46,P=0.001）,D、E 2组中E组各部分骨密度值均高于D组,且有统计学意义（P〈0.05）。（3）形态学观察：HE染色后观察,D、E组较C组而言有较多的板层骨形成,并且D、E组中有较多量的软骨细胞存在,C组中几乎不可见板层骨存在,软骨细胞数量较少,提示D、E组较C组愈合快。结论 辛伐他汀溶液皮下注射可以明显加速骨质疏松骨折愈合的进程,而且不同浓度的辛伐他汀溶液对骨质疏松骨折愈合的影响不同。高剂量明显比低剂量效果更为显著。     

大鼠骨质疏松模型的研究

目的：研究切除卵巢建立大鼠骨质疏松模型。方法将4周雌性 Wistar 大鼠随机分为正常组（sham group）、一侧卵巢切除组（model group-1）、两侧卵巢切除组（model group-2）。通过切除卵巢制备大鼠骨质疏松模型,分别于4,5,6,10,14,21周记录体重变化情况,第21周测定各组大鼠全身骨密度,股骨湿重、长度、体积以及血清 Ca、P 等。结果与 sham group 比较,model group-2各项指标检测结果更符合骨质疏松表现。结论摘除双侧卵巢可以建立稳定的骨质疏松模型。     

降钙素对骨质疏松性骨折骨痂血管内皮生长因子表达的作用

目的：观察降钙素对去卵巢大鼠股骨骨折愈合过程中骨痂组织血管内皮生长因子表达的作用。方法选择3月龄雌性SD大鼠80只,随机分为假手术组（n＝10）、卵巢切除组（n＝10）、对照组（n＝30）和用药组（n＝30）。卵巢切除后4周处死假手术组和卵巢切除组大鼠,测量右股骨骨密度。卵巢切除4周后,对照组和用药组行右股骨中段骨折,分别皮下注射生理盐水和降钙素（16 IU/kg）,隔日1次,于骨折后3、6、9周处死大鼠取右股骨测骨密度,行苏木精-伊红染色（HE染色）,血管内皮生长因子免疫组化染色。结果与假手术组比较,卵巢切除组大鼠体重显著增加（P＜0．05）,股骨骨密度显著降低（P＜0．05）。 HE染色：骨折后3周,两组骨折愈合以软骨内成骨过程为主,骨密度无显著性差异（P＞0．05）;骨折后6周,两组骨小梁排列较有序,用药组股骨骨密度较对照组升高（P＜0．05）;骨折后9周,两组均以骨性骨痂为主,骨小梁排列紧密,骨密度在两组间具有显著性差异（P＜0．05）。对照组与用药组在骨折后3、6、9周骨痂组织的血管内皮生长因子（VEGF）免疫组化染色结果无显著性差异（P＞0．05）。结论降钙素治疗能增加骨质疏松性骨折骨密度,对骨痂组织VEGF的表达无明显影响。     

桑寄生对去卵巢骨质疏松大鼠的影响

目的:观察桑寄生对去卵巢大鼠骨质疏松影响,并探讨其作用机制.方法:将26只Wistar大鼠随机分为假手术组(8只)、模型组(8只)、桑寄生组(10只).模型组和桑寄生组切除大鼠双侧卵巢, 制备去卵巢骨质疏松的动物模型,观察服用桑寄生水煎剂后,去卵巢骨质疏松大鼠骨密度(BMD)、血清雌二醇( E2 )、骨钙素(BGP)及抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)的变化.结果:模型组大鼠的E2和BMD水平显著下降(P<0.01),而血清BGP和TRACP水平明显升高(P<0.01).桑寄生组大鼠BMD水平增加,而 TRACP水平得到恢复.结论:桑寄生能抑制去卵巢大鼠的骨质疏松,具有调节骨代谢的作用.     

骨质疏松性骨折的小鼠模型探索

目的建立操作简单、重复性好的骨质疏松性骨折小鼠动物模型,以用于中老年女性绝经后骨质疏松性骨折愈合情况的研究。方法选取12周龄健康的C57BL/6J雌性小鼠50只,其中基线组10只,去势组20只,假手术组20只。常规饲养1周后,处死基线组小鼠并测量血清雌激素水平,去势组小鼠通过腹正中切口行双侧卵巢切除,假手术组小鼠切除双侧卵巢周围等量的脂肪组织。去势后4周对小鼠的左大腿行后外侧切口,暴露股骨,从膝关节处逆行插入钢针进行髓内固定,直视下用手术刀切断股骨中下1/3段部分,造成股骨的横行或斜行骨折。两组小鼠在骨折术后2周和4周分别处死10只,测量血清雌激素水平、骨痂处骨密度（BMD）及Micro-CT情况。结果术后2周和4周假手术组雌激素浓度均高于去势组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。术后2周和4周假手术组和去势组BMD、骨体积、骨体积分数比较,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。虽然术后2周假手术组和去势组骨小梁分离度（Tb.Sp）比较差异无统计学意义（P＞0.05）,但术后4周两组Tb.Sp比较差异有统计学意义（P＜0.05）,而术后2周和4周两组骨小梁结构模型指数比较差异均无统计学意义（均P＞0.05）。结论小鼠骨质疏松性骨折模型具有操作简单、直观稳定等优点;去势后的小鼠成骨能力明显下降,可用于原发性绝经后骨质疏松性骨折的愈合及其骨代谢的细胞、分子及信号通路的机制研究。     

右归丸对骨质疏松模型大鼠垂体-肾上腺轴影响的实验研究

目的:从垂体-肾上腺轴角度探讨右归丸治疗Ⅰ型原发性骨质疏松模型的作用机制。方法:取大鼠80只,取10只为假手术组(行腹部切口,但不切除卵巢),其余70只按贺西京报道的方法造模通过切除大鼠双侧卵巢建立Ⅰ型原发性骨质疏松模型。随机取造模成功后大鼠其中的60只随机分成4组,分别喂服右归丸高、中、低剂量组和生理盐水组。用药12周后处死取材,检测血清皮质醇(COR)浓度,取脑垂体行ACTH细胞免疫化学染色(S-P法)并形态计量,肾上腺行HE染色。结果:切除卵巢12周后大鼠出现骨质疏松,血清COR浓度以及垂体ACTH阳性细胞数和染色面积均明显高于假手术组。用药12周后右归丸组血清COR水平、垂体ACTH阳性细胞数和染色面积均较生理盐水组降低或减少。结论:中药右归丸可有效调节Ⅰ型原发性骨质疏松模型大鼠垂体-肾上腺轴的病理变化和功能状态,抑制雌激素水平降低后的异常骨吸收。     

兔膝关节骨性关节炎中基质金属蛋白酶-3及金属蛋白酶组织抑制剂-1表达的研究

目的通过动物模型研究膝关节骨性关节炎软骨中基质金属蛋白酶（MMP）-3及金属蛋白酶组织抑制剂（TIMP）-1的表达及其与膝关节骨性关节炎之间关系。方法雌性中国家兔制作软骨损伤模型,术后2周、4周、6周处死动物,分为实验组（E组）、实验对照组（c组）和正常对照组（N组）。对膝关节软骨进行大体形态观察并行HE组织切片、免疫组化染色观察。结果实验组膝关节呈进行性骨性关节炎改变,组织学观察显示透明软骨进行性退变,胶原破坏、蛋白聚糖降解、软骨细胞变性坏死。免疫组化染色显示透明软骨内MMP-3、TIMP-1表达均明显升高。结论膝关节骨性关节炎造成软骨所处生物力学和生化环境紊乱,软骨组织结构退变、功能丧失而进一步加重骨性关节炎病变。     

柔毛淫羊藿对骨质疏松小鼠的作用研究

目的：探讨柔毛淫羊藿对骨质疏松小鼠骨密度、破骨细胞和IL-6的作用。方法：采用切除雌性小鼠双侧卵巢复制骨质疏松整体动物模型,按小鼠体重随机分对照组（蒸馏水10 ml/kg）、模型组（蒸馏水10 ml/kg）、DES组（2 mg/kg）、EPM高剂量组（200 mg/kg）、EPM中剂量组（100 mg/kg）、EPM低剂量组（50 mg/kg）,每组14只。无钙饲料喂养,自然饮水。分别按各组相应药物相应剂量灌胃给药,60 d后测小鼠骨密度、破骨细胞数和IL-6含量。结果：模型组动物呈现明显的骨质疏松表现;给药组动物骨密度增加、破骨细胞数和IL-6表达明显降低,且有统计学意义。结论：柔毛淫羊藿能够增加去卵巢骨质疏松症小鼠的骨密度、降低破骨细胞数和IL-6的表达。     

中药骨康对骨质疏松模型大鼠骨密度的影响

[目的]观察中药骨康对骨质疏松模型大鼠骨密度的影响.[方法]选用雌性SD大鼠72只,随机分为6组,分别为假手术组,模型组,尼尔雌醇组(剂量为1 mg/kg),中药骨康高、中、低剂量组(中药高、中、低剂量组,剂量分别为9.6、4.8、2.4 g·kg-1·d-1).采用双侧卵巢切除术复制骨质疏松模型,术后3个月各组分别按相应剂量给药,治疗3个月后取材,采用双能X线检测活体骨密度及离体左股骨、左胫骨骨密度.[结果]模型组活体全身及腰椎骨密度显著降低(P<0.05或P<0.01),中药高、中剂量组及尼尔雌醇组均可显著提高活体全身及腰椎骨密度(P<0.05或P<0.01).模型组离体左股骨的整体、股骨头区(ROI 1)、股骨近端(ROI 2)、股骨远端(ROI 4)骨密度显著降低(P<0.05或P<0.01),中药高剂量组可显著提高整体及ROI 4的骨密度(P<0.05或P<0.01),中剂量组可显著提高ROI 4的骨密度(P<0.05).模型组离体左胫骨的整体、胫骨近端(ROI 1)骨密度显著降低(P<0.01),中药高、中剂量组及尼尔雌醇组均可显著提高离体左胫骨的整体及ROI1骨密度(P<0.05或P<0.01).[结论]中药骨康治疗骨质疏松的作用可能与其能提高骨密度水平有关.     

骨质疏松大鼠胰岛素样生长因子-1血清水平和转化生长因子β_1骨表达的实验研究

观察骨质疏松大鼠不同时期骨密度 (BMD)、血清胰岛素样生长因子 - 1(IGF - 1)的浓度以及骨组织中转化生长因子 β1(TGF - β1)的表达 ,进一步探讨绝经后骨质疏松与细胞因子的相关性。方法 :将 6 0只10～ 12月龄的SD大鼠随机分成实验组和对照组 ,用摘除双侧卵巢的方法制备实验大鼠骨质疏松模型 ,实验组行摘除双侧卵巢术 ,对照组行假手术 ,仅切除卵巢周围的脂肪组织 ,应用HOLOGIC第 4代双能X线4 5 0 0W骨密度仪测量去卵巢不同时期 (术后 8,12 ,16周 )大鼠全身骨密度和腰椎感兴趣区域 (L1～L4)骨密度 ,并采用ELISA法和免疫组化的方法 ,检测去卵巢大鼠不同时期血清IGF - 1水平和骨组织中TGF - β1表达。结果 :全身骨密度 :去卵巢组大鼠在术后第 8周和第 12周 ,全身骨密度与对照组 (假手术组 )无明显差异(P >0 .0 5 ) ,在术后第 16周 ,开始出现全身骨密度降低 ,与对照组相比 ,有显著差异 (P <0 .0 1)。腰椎 (L1～L4)骨密度 :从术后第 8周～第 16周去卵巢腰椎骨密度均明显低于对照组 (P <0 .0 1)。血清IGF - 1浓度 :从术后第 8周～第 16周 ,去卵巢组血清IGF - 1浓度值均低于对照组 (P <0 .0 5 )。骨组织TGF - β1表达 :去卵巢组在术后第 8周骨组织中软骨细胞、成骨细胞、骨基质TGF - β1的表达程度与对照级有     

赖氨酸对大鼠骨质疏松的防治作用

[目的]探讨L-赖氨酸对骨质疏松的防治作用.[方法]取健康雌性SD大鼠随机分组,切除除对照组外其他各组大鼠的双侧卵巢,制作骨质疏松动物模型;预防组大鼠于术后3 d开始、治疗组大鼠于术后3个月开始每日灌胃给予0.375 g/kg L-赖氨酸;对照组及模型组大鼠于术后3 d开始每日灌胃给予同等量的生理盐水.术后6个月处死各组大鼠,进行相关指标检测.[结果]预防组及治疗组大鼠骨组织最大应力、最大应变、弹性模量、骨密度值、骨钙含量、骨皮质厚度、TBV,MTT,TBP均明显高于模型组,且差异均有统计学意义.[结论]L-赖氨酸作用于骨有机质增强骨强度,增加骨量,对骨质疏松有防治作用.     

柔毛淫羊藿对去卵巢小鼠骨密度及生物力学指标的影响

目的 观察柔毛淫羊藿对去卵巢小鼠骨密度及生物力学指标的影响. 方法切除雌性小鼠双侧卵巢制备骨质疏松动物模型,随机分为模型组、己烯雌酚组及柔毛淫羊藿高、中、低剂量组,另设对照组(假手术组).各组给予相应药物,60天后测定小鼠全身及脊柱骨密度、骨最大载荷及骨挠度.结果 与模型组比较,柔毛淫羊藿高、中、低剂量组动物的全身及脊柱骨密度明显升高;柔毛淫羊藿高、中、低剂量组动物的骨最大载荷和骨挠度明显升高. 结论柔毛淫羊藿能明显改善去卵巢小鼠的骨质疏松症状.     

刺五加关节腔注射治疗兔膝关节骨性关节炎的病理学观察

目的：观察关节软骨和滑膜的病理改变,探讨刺五加治疗原发性膝关节骨性关节炎的疗效及其作用机制。方法：将64只新西兰白兔随机分为4组：正常组、刺五加组、透明质酸钠组、模型组。正常组既不造模也不给药,其余用内侧半月板部分切除的方法造模。刺五加组关节腔注射刺五加注射液,透明质酸钠组关节腔注射透明质酸钠注射液。术后2周开始用药干预,直到处死前1周。分6周和10周两个时相点处死动物取材,制备软骨及滑膜石蜡切片后进行HE及AB-PAS染色,分别在光镜下进行病理评分。结果：滑膜Mankins评分,在两个时相点刺五加组均比模型组低（均P〈0.05）;与6周相比,刺五加组10周时评分较高（P〈0.05）。关节软骨OARSI评分,在两个时相点,刺五加组均比模型组低（均P〈0.05）;与6周相比,刺五加组10周评分无显著差异（P〉0.05）。结论：刺五加注射液可以减缓甚至阻断实验性兔膝关节骨性关节炎的病变进展。     

纳米级HA涂层人工关节治疗犬骨质疏松症的实验研究

目的建立犬骨质疏松实验动物模型并初步观察纳米级羟基磷灰石(HA)涂层人工关节置换后的效果。方法选择8只平均年龄5.5±0.38岁、平均体重为16±2.5kg的雌性犬,分成实验组和对照组,实验组切除双侧卵巢,与对照组在同一环境下饲养24w。手术切除犬右侧股骨头,然后分别装入普通柄人工关节或纳米级HA涂层人工关节。12w后分别取每只犬的双侧股骨(一侧含人工关节)、胫腓骨、尺桡骨以及以椎骨进行骨密度检测,X光双侧股骨摄片检查及血液生化检查。结果两组动物模型骨标本骨密度检测以及X光双侧股骨摄片显示,去卵巢组犬符合重度骨质疏松症,而人工关节周围骨密度均匀不等,其中普通柄人工关节周围骨组织结构紊乱,含纳米级HA涂层人工关节柄周围结构良好。结论采用切除双侧卵巢的方法成功地建立了犬骨质疏松模型并初步发现纳米级HA涂层人工关节较普通柄人工关节的置换效果好。     

降钙素对卵巢切除大鼠股骨骨折愈合的作用

目的观察降钙素对卵巢切除大鼠股骨骨折愈合的作用。方法将3月龄雌性SD大鼠40只随机分为假手术组,卵巢切除组,对照组和治疗组,每组10只,除假手术组外,其余各组大鼠行双侧卵巢切除。4周后处死假手术组和卵巢切除组大鼠,测量右股骨骨密度。卵巢切除4周后,对照组和治疗组行右股骨骨折,分别皮下注射生理盐水和降钙素(16IU/kg),隔日1次,于骨折术后9周测量右股骨骨密度,行苏木精-伊红(HE)染色及抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色,骨形态发生蛋白-2(BMP-2),血管内皮生长因子(VEGF)免疫组化染色。结果与假手术组比较,卵巢切除组大鼠术后4周体质量显著增加,股骨骨密度显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。骨折后9周,治疗组TRAP染色阳性细胞积分吸光度值较对照组显著减少,差异有统计学意义(P<0.05)。骨折后9周,对照组和治疗组骨折线较模糊,骨痂体积无差别,骨小梁排列较有序,骨密度在两组间的差异无统计学意义(P>0.05)。对照组与治疗组在骨折后9周的BMP-2、VEGF表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论降钙素可以抑制去卵巢大鼠骨折部位破骨细胞活性,但促进大鼠股骨骨折愈合的作用不明显。