瘦素及其受体在子宫内膜异位症中的表达

目的测定瘦素(leptin)及其受体在子宫内膜异位症组织中的表达,探讨瘦素及其受体与子宫内膜异位症的相关性。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测21例手术后病理确诊的子宫内膜异位症患者的异位内膜及其诊刮的子宫内膜组织中瘦素受体mRNA表达,同时以17例因功能性子宫出血而行全子宫切除手术的子宫内膜组织中瘦素受体mRNA表达水平为对照。并采用放射免疫法(RIA)检测两组患者血清中瘦素水平。结果子宫内膜异位症患者与对照组血清瘦素水平比较差异无显著性(P>0.05)。异位子宫内膜组与自体子宫内膜及对照子宫内膜均有瘦素受体表达,而前者与后两者之间有显著性差异(P<0.05),后两者之间无显著性差异(P>0.05)。结论瘦素及其受体并非通过影响体内激素代谢而导致子宫内膜异位症的发生,可能参与腹腔内环境的改变而成为子宫内膜异位症发生的相关因素之一。     

瘦素及其受体系统在子宫内膜的表达

目的　研究瘦素 (Leptin)及其受体 (Obgenereceptor ,Ob -R)在子宫内膜的表达 ,探讨Leptin对女性生殖的影响。方法　分别用免疫组织化学和原位杂交技术检测Leptin、具信号传导功能的Leptin长受体 (Ob -Rb)在子宫内膜 (39例 ,增殖期 2 4例 ,分泌期 15例 )的表达。结果　 (1)Leptin、Ob -RbmRNA及其蛋白在人的子宫内膜的腺体及间质均呈阳性表达。 (2 )Ob -Rb蛋白在分泌期子宫内膜的表达明显高于增殖期 ,差异有极显著性P <0 0 1)。Leptin蛋白在不同期子宫内膜的表达差异无显著性。 结论　瘦素和瘦素受体系统在孕卵着床和种植过程中可能发挥重要作用。     

瘦素受体在肾上腺皮髓质及其肿瘤中的表达及与血浆瘦素的关系

目的 观察长型瘦素受体(Ob-Rb)在正常肾上腺皮、髓质及其肿瘤中的mRNA和蛋白表达;并观察原发性醛固酮增多症(PA)、皮质醇分泌瘤(CS)和嗜铬细胞瘤(PHEO)患者的血浆瘦素水平.方法 提取6名健康者肾上腺皮质和髓质和10例CS、14例醛固酮分泌瘤(APA)、20例PHEO患者的组织总RNA和蛋白,用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western印迹法检测不同组织中Ob-Rb mRNA和蛋白表达.ELISA方法测定29例PA、11例CS、15例PHEO患者和20名年龄匹配的血压健康者血浆瘦素水平.结果 在肾上腺皮、髓质及其肿瘤中存在Ob-Rb的mRNA和蛋白表达.在正常肾上腺皮质中,Ob-Rb mRNA(0.32±0.12)和蛋白(1.31±0.26)表达明显均高于其余各组(均P＜0.05).Ob-Rb mRNA在APA(0.15±0.10)中的表达明显高于CS(0.05±0.02,P＜0.05).APA中Ob-Rb mRNA表达与立位血浆醛固酮水平正相关(r=0.670,P=0.024),而CS患者瘤内Ob-RbmRNA水平与其24 h尿UFC水平正相关(r=0.870,P=0.005).CS患者血浆瘦素水平明显高于非皮质醇瘤患者(P=0.001).结论 肾上腺皮髓质及其肿瘤广泛表达长型瘦素受体,且其表达之间存在差异,瘦素与肾上腺间的关系还需进一步研究.     

健胎液对模型小鼠着床期子宫内膜容受性的影响

目的:研究健胎液对胚泡着床障碍小鼠着床期子宫内膜容受性的影响。方法:于妊娠第4天9∶00利用米非司酮建立胚泡着床障碍小鼠模型,予健胎液进行干预,于妊娠第4天21∶00处死小鼠,观察小鼠胚泡着床率及平均着床胚泡数,采用放免法检测血清及子宫组织雌二醇、孕酮的含量,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测子宫ERmRNA、PRmRNA表达。结果:与模型组相比,中药组着床率和平均着床胚胎数均显著升高,与对照组无显著差异;模型组子宫内膜发育不良,中药组子宫内膜的发育与正常组相似;3组血清及子宫组织的雌二醇和孕酮的含量无显著改变;中药组子宫ER mRNA、PR mRNA表达均较模型组显著提高,与正常组比较差异无显著性。结论:健胎液通过促进子宫内膜发育,调节胚泡着床障碍小鼠子宫组织ER、PR基因的表达,改善子宫内膜容受性,利于胚泡着床。     

TACE在着床窗口期小鼠子宫内膜上皮细胞中的表达及其抗体对胚泡粘附的影响

目的:通过检测肿瘤坏死因子α转换酶(Tumor necrosis factor α convening enzyme,TACE)在小鼠子宫内膜上皮细胞中的表达及其在体外着床模型中对胚泡粘附的影响,初步探讨TACE在小鼠生殖中的作用以及其与胚胎着床的关系.方法:体外培养孕4d(d4)小鼠子宫内膜上皮细胞和胚泡,构建胚泡体外着床模型;通过细胞免疫组化鉴定小鼠子宫内膜上皮细胞;运用RT-PCR和细胞免疫组化分别检测小鼠子宫内膜上皮细胞中TACE mRNA和蛋白的表达;向体外着床模型中添加不同浓度的TACE抗体,观察对胚泡体外着床的影响,并用细胞免疫化学检测抗体干预后各培养体系中TACE蛋白质的表达情况.结果:原代培养小鼠子宫内膜上皮细胞生长旺盛,鉴定结果显示:上皮细胞对角蛋白抗体有棕黄色阳性表达,对波形蛋白抗体为阴性表达.PCR结果显示TACE mRNA在共培养体系中有高表达,免疫组化结果与RT-PCR结果相一致;小鼠胚泡体外共培养具有较高的粘附率,添加TACE抗体后胚泡帖附率均显著低于对照组帖附率(P<0.05),且随着抗体浓度的降低胚泡粘附率随之升高,免疫化学检测结果也显示随着抗体浓度的降低TACE的表达量随之升高.结论:TACE可能参与了胚泡着床过程,有利于小鼠胚胎粘附、扩展,为胚胎的着床做准备.     

小鼠子宫内膜胚泡着床点及旁组织白血病抑制因子基因表达研究

目的:探讨白血病抑制因子(LIF)基因在小鼠胚泡着床窗口期了宫内膜表达的特定部位.方法:采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),对20只孕期第4天的小鼠子宫内膜着床点和旁组织的LIF mRNA进行检测.结果:20只孕期第4天的小鼠着床点LIF mRNA表达平均水平为0.5316,旁组织LIF mRNA表达平均水平为0.3711.统计处理t检验差异具有显著性(P＜0.05).结论:在胚泡着床窗口期,小鼠子宫内膜胚泡着床点和旁组织LIF基因表达存在差异.     

瘦素在着床前小鼠胚胎中的表达及其对胚胎发育的影响

目的 探讨瘦素(leptin)在围着床期小鼠胚胎中的表达规律和分布情况以及leptin抗体对小鼠胚胎体外发育的影响.方法 雌性NIH小鼠超排后与雄鼠交配,分别在妊~4 d上午从输卵管或子宫角冲取相应时期的胚胎,用于以下实验:①分别提取总RNA,检测胚胎中leptin mRNA表达情况.②采用免疫荧光技术,观察leptin蛋白在囊胚的表达和分布情况.③将8-细胞小鼠胚胎培养于含不同浓度leptin抗体的培养液中,观察囊胚形成及脱透明带的情况.结果 leptin mRNA仅在囊胚期特异性表达,其余各时期胚胎未见表达;leptin蛋白在囊胚的滋养层细胞和内细胞团的细胞质和细胞膜呈阳性表达,而在细胞核无表达.一定浓度的leptin抗体可明显降低囊胚的形成率(1∶400, P<0.05) 和脱带率(1∶1 600, P<0.05),且随着抗体浓度的增加,这种抑制作用更明显.结论 leptin能促进着床前胚胎发育,同时也可能参与了胚胎着床过程.     

瘦素受体在子宫肌瘤组织中表达的初步研究

目的　测定瘦素受体在子宫肌瘤组织中的表达 ,探讨瘦素及其受体与子宫肌瘤的相关性。方法　采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术 ,检测 4 3例全子宫切除手术子宫肌瘤组织及远离肌瘤的平滑肌组织中瘦素受体mRNA表达水平。同时采用放射免疫法 (RIA)检测子宫肌瘤病人及 4 0例正常对照组血清中瘦素水平。结果　子宫平滑肌及子宫肌瘤组织均存在瘦素受体mRNA表达 ,且表达水平无显著性差别 (P >0 .0 5 ) ,子宫肌瘤组 (增生期 )血清瘦素为 (1 1 .2± 3.8)ng/ml与对照组 (9.3± 4 .6 )ng/ml比较无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论　子宫肌瘤组织与子宫平滑肌相同有瘦素受体表达 ,瘦素、瘦素受体与子宫肌瘤的发生可能无直接相关性     

补肾安胎方对胚泡着床障碍小鼠子宫内膜HB-EGF及其受体EGFR表达的影响

目的 观察中药补肾安胎方对胚泡着床障碍模型小鼠胚泡着床情况及对类肝素结合样表皮生长因子(HB-EGF)及其受体(EGFR)表达的影响.方法 将妊娠雌鼠随机分为正常组、模型组、中药组,每组30只.分别于妊娠第5、6天(Pd5、6)用伊文思蓝尾静脉注射后取妊娠子宫.观察妊娠第5天(Pd5)各组对伊文思蓝的着色反应;运用RT-PCR方法检测HB-EGF mRNA的含量,采用免疫组织化学法测定HB-EGF及其受体EGFR的表达.结果 Pd5,模型组对伊文思蓝反应和平均反应点数显著低于正常组,中药组与模型组有显著差异.Pd5、6,模型组子宫内膜HB-EGF及其受体EGFR的表达在时间上明显滞后于正常组并且表达量减少,中药组与模型组有显著差异(P<0.05).结论 补肾安胎方改善胚泡着床障碍小鼠胚胎着床可能与提高着床位点的HBEGF及其受体EGFR的表达有关.     

瘦素及其受体在胎盘组织中的表达及与新生儿出生体重的关系

目的 探讨瘦素(1eptin)及其受体在胎盘组织中的表达及其与新生儿出生体重的关系.方法 采用免疫组织化学方法检测leptin和瘦素受体(obR)在22例小于胎龄儿(SGA)和48例适于胎龄儿(AGA)胎盘组织中的表达,分析两组之间表达的差异.结果 胎盘组织中leptin和obR的表达呈正相关(r=0.525,P=0.000),SGA组leptin(x2=4.153,P=0.042)和obR(x2=9.291,P=0.002)的表达水平均显著低于AGA组.结论 胎盘组织中leptin和obR水平的降低可能与SGA的发生有关.     

瘦素及其受体系统在女性生殖器官的表达

目的　研究瘦素 (leptin)及其受体 (Ob R)、瘦素信号传导相关蛋白质在女性生殖器官的表达 ,探讨瘦素对女性生殖系统的影响。方法　分别用免疫组织化学和原位杂交技术检测瘦素、具有信号传导功能的瘦素长受体 (Ob Rb)、磷酸化的细胞因子信号传导转录活化因子STAT3(p STAT3)、细胞因子信号传导抑制剂 3(SOCS3)、活化的STAT3蛋白质抑制剂 (PIAS3)在正常妇女子宫内膜 ( 39例 ,增殖期 2 4例 ,分泌期 15例 )、子宫颈和阴道及输卵管 ( 3例 )的表达。结果　 ( 1)瘦素、Ob RbmRNA及其蛋白质在子宫内膜的腺体及间质均呈阳性表达。 ( 2 )Ob Rb蛋白质在分泌期子宫内膜的表达 3例弱阳性 ,3例阳性 ,9例强阳性 ;在增殖期子宫内膜的表达为 2例阴性 ,19例弱阳性 ,3例阳性 ,两者比较差异有显著意义 (P <0 .0 1)。瘦素蛋白质在不同期子宫内膜的表达差异无显著意义。 ( 3)瘦素及受体蛋白质在子宫颈、阴道、输卵管的上皮 (包括腺体 )均有表达。 ( 4)信号传导相关蛋白质SOCS3、PIAS3在子宫内膜和子宫颈的腺上皮、输卵管的纤毛上皮呈阳性表达 ,p STAT3表达极弱或不表达。结论　瘦素可能通过受体系统 ,与生殖器官间有广泛联系 ,影响女性的生殖功能。     

模拟失重对大鼠胃黏膜瘦素及其受体表达的影响

目的：观察模拟失重条件下大鼠胃黏膜瘦素及其受体（OB-R）表达的变化,探讨失重对消化系统功能的影响.方法：将22只SD大鼠分为模拟失重组（n=12）和正常对照组（n=10）,采用尾悬吊模拟失重28d,用免疫组化ABC方法,观察大鼠胃黏膜瘦素及其受体的定位与表达,并比较两组动物胃黏膜瘦素及其受体免疫反应阳性细胞密度的差异.结果：瘦素及其受体免疫反应阳性细胞均分布于胃底腺的中下部区域、阳性物质主要定位于主细胞和壁细胞.与正常对照组相比,模拟失重组大鼠胃黏膜瘦素免疫反应阳性细胞密度显著增加（P＜0.01）;而瘦素受体免疫反应阳性细胞密度虽有增加趋势,但无显著差异（P＞0.05）. 结论：28 d的悬吊模拟失重可致大鼠胃黏膜瘦素及其受体表达增加,提示瘦素可能参与失重过程中消化道功能紊乱的调节.     

瘦素及胰岛素对人类肝细胞癌细胞系细胞瘦素受体mRNA表达的作用

目的研究瘦素及胰岛素对瘦素受体(OB—R)的调节作用。方法以人类肝细胞癌细胞系(HepG2)为实验摸型,采用6孔板培养皿培养HepG2细胞,4个孔作为一个浓度组,通过DNA序列测定及半定量的逆转录-聚合酶链反应等方法,分别观察了0、10^-9、10^-8、10^-7、10^-6mol／L浓度的人类瘦素及胰岛素对HepG2细胞内瘦素受体mRNA表达水平的影响。结果通过RT-PCR及DNA序列测定,我们证明了HepG2细胞含有瘦素长型受体(Ob-Rb)及短型受体(OB-Ra：OB—R219．3);通过半定量RT-PCR,我们检测了Ob-Rb和OB-R219．3的mRNA表达水平。当HepG2细胞与不同浓度的瘦素孵育24h后,10^-7-10^-6mol／L浓度的瘦素明显抑制了OB—Rb的mRNA表达,并在10^-6mol／L浓度时达到最大抑制为43％;同样10^-8-10^-6mol／L浓度的瘦素亦明显抑制了OB-R219．3的mRNA表达,并在10^-6mol／L浓度时达到最大抑制为49％。当HepG2细胞与不同浓度的胰岛素孵育24h后,OB-Rb及OB—R219．3的mRNA表达水平无改变。结论在HepG2细胞内瘦素对OB-Rb及OB—R219．3的mRNA表达有下调作用,而胰岛素对OB-Rb及OB-R219．3的mRNA表达无调节作用,这对与我们了解瘦素抵抗及瘦素的外周功能具有重要意义。     

血清瘦素、癌组织瘦素受体在结直肠癌患者中的表达及其意义探讨

目的：研究结直肠癌患者血清瘦素和癌组织中受体与临床特征的关系。方法采取50例结直肠癌患者和42例健康对照者新鲜血清,应用酶联免疫吸附试验测定瘦素的浓度,并且收集结直肠癌患者癌组织及癌旁正常组织样本,运用免疫组化的方法检测瘦素受体的表达,并分析其间是否存在差异。结果共有直肠（16例）、左半结肠（12例）、右半结肠（22例）,按肿瘤TNM分期,Ⅰ/Ⅱ期组（22例）,Ⅲ/Ⅳ期组（28例）。肿瘤组患者的血清瘦素水平明显高于对照组;不同位置肿瘤患者血清瘦素表达有明显差异;晚期肿瘤组瘦素水平高于早期组;有远处转移组的血清瘦素水平明显高于未转移组;超重组血清瘦素水平高于正常体重组;瘦素水平与患者性别,肿瘤分化没有明显相关。瘦素受体在结直肠癌组织和正常结直肠组织中均有表达,癌组织的表达阳性率和表达强度均高于正常结直肠组织;晚期癌组织瘦素受体表达阳性率和表达强度高于早期癌组织;但瘦素受体与结直肠癌组织分化,位置,体重指数无明显相关。结论瘦素可能有促进结直肠癌的侵袭和远处转移的作用,另外瘦素在肥胖与结直肠癌的关系中可能起了重要作用。     

巨噬细胞移动抑制因子在围植入期小鼠子宫内膜中的表达

目的探讨巨噬细胞移动抑制因子(MIF)在围植入期小鼠子宫内膜中的表达分布状况及其意义。方法应用免疫组化SP法检测妊娠1～8d小鼠子宫内膜MIF的表达情况,并以动情期非妊娠小鼠子宫做对照。结果在小鼠子宫内膜的所有组织均可检测到MIF的表达,主要表达于腺上皮、腔上皮及基质中的细胞团。MIF在妊娠1～3d表达较强,妊娠4～5d表达较弱,主要表达于子宫内膜的腔上皮和腺上皮;妊娠6～8d,MIF表达再次增强,但主要表达于基蜕膜和次级蜕膜区。结论妊娠1～8d小鼠子宫持续表达MIF,提示MIF可能参与小鼠胚泡植入及胚泡植入后的发育过程。     

瘦素及其受体和血管内皮生长因子在正常子宫内膜中的表达及在血管形成中的作用

目的：研究瘦素（Leptin,LEP）及其受体（Ob gene receptor,Ob—R）和血管内皮生长因子（VEGF）在子宫内膜的表达,探讨LEP对女性生殖的影响。方法：采用SP免疫组织化学的方法检测LEP及其受体和VEGF在120例子宫内膜（增殖期60例,分泌期60例）的表达。结果：LEP、Ob—R在人的子宫内膜的腺体及间质均呈阳性表达;Ob--R在分泌期子宫内膜的表达明显高于增殖期,差异有统计学意义（P〈0．05）;VEGF在分泌期子宫内膜的表达明显高于增殖期,差异有统计学意义（P〈0．05）;分泌期子宫内膜中,Ob—R和VEGF表达存在显著正相关性（r=0．288,P〈0．05）。结论：LEP及其受体可能通过VEGF在子宫内膜血管形成中起作用,利于分泌期胚胎着床发育。     

瘦素与儿童肥胖研究进展

瘦素(leptin)是一种主要由脂肪组织产生的蛋白激素,直接作用于下丘脑,参与能量平衡的调节,在机体肥胖的产生过程中起着重要作用.体内存在多种瘦素蛋白受体亚型,其中可溶性的瘦素受体(sOb-R)可调节瘦素水平,具有很高的检测价值.相关研究显示,瘦素很有可能成为判断儿童肥胖风险的标记物,瘦素水平还可被用来评估肥胖儿童对运动干预的应答性.