人血浆脂蛋白（a)的分离纯化

目的：探讨Lp(a)分离纯化的方法,为Lp(a)的研究,检测方法的建立奠定基础。方法：应用密度梯度超速离心结合Sepharose 6B凝胶柱层析的方法分离纯化Lp(a)。结果：经预染脂蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳及双层免疫火箭电泳鉴定,所得Lp(a)为纯品,结论：密度梯度超速离心结合Sepharose 6B凝胶柱层析是较好的分离纯化Lp(a)的方法。     

人血清脂蛋白的超速离心分离Ⅰ、人血清极低密度及低密度脂蛋白的大量分离

本文报道了用区带转头超速离心分离人血清两种低密度脂蛋白的新方法,该法先用硫酸右旋糖酐粗提,浓缩,得到人血清中极低密度(VLDL)及低密度(LDL)脂蛋白混合液,然后再用溴化钠密度梯度区带超速离心法将VLDL、LDL分开并除去混合液所含少量杂蛋白,从而获得大量纯净VLDL及LDL制品。本法分离效果好,重复性佳,固定离心条件后,     

脑梗死患者脂蛋白氧化水平分析

目的 :了解脑梗死患者血清脂蛋白氧化易感性。　方法 :采用密度梯度超速离心分离 38例脑梗死患者的血清脂蛋白组分 (VL DL、L DL、HDL) ,用 A2 34 nm光吸收鉴定脂蛋白氧化易感性 ,硫代巴比妥酸值 (TBARS)分析脂蛋白脂质过氧化程度 ,并与 40例正常人进行了比较。　结果 :脑梗死患者 VL DL 组分脂质过氧化程度明显高于正常人 (P<0 .0 0 1) ,氧化延滞时间明显缩短 (P<0 .0 0 1) ,L DL 组分脂质过氧化程度高于正常人 (P<0 .0 5 ) ,氧化延滞时间缩短 (P<0 .0 5 )。　结论 :脑梗死患者 VL DL、L DL 组分氧化易感性增加     

聚焦导析法分离人血清载脂蛋白CⅢ亚型

用密度梯度超速离心法,从混合人血清中分离极低密脂蛋白,经脱脂后再进行聚焦层析分离其中的载脂蛋白。     

脂蛋白和载脂蛋白对脂蛋白受体作用的研究——Ⅳ.正常和高脂血家兔血清低密度脂蛋白理化性质的比较

本文报告正常和高脂血家兔血清低密度脂蛋白理化性质的比较。高脂血家兔血清脂蛋白超速离心图不同于正常家兔。高脂血家兔血清低密度脂蛋白的理化性质在颗粒大小、密度、电泳迁移率、上浮速度和脂质蛋白质组成方面均不同于正常家兔血清低密度脂蛋白。特别是其中的apoE可能使高脂LDL结合于平滑肌细胞大于正常LDL,这也表明饮食脂肪和胆固醇的变化可以引起家兔血清脂蛋白组成和理化性质的变化,可导致脂蛋白代谢在细胞和分子水平上的差异。     

予染血清脂蛋白的琼脂糖凝胶电泳分析法的探讨及其临床意义

<正> 血清中脂类物质都是以脂蛋白的形式存在的。自1949年 Gofman 等应用超速离心法分离人血清脂蛋白后,许多研究工作者对脂蛋白进行了一系列的研究。按脂蛋白的密度不同,利用超速离心法可将脂蛋白分成乳糜微粒、极低密度脂蛋白、低密度脂蛋白和高密度脂蛋白四种,并证明脂蛋白由甘油三酯、胆固醇及其酯、磷脂和蛋白质组成。各     

一种快速简便的人血清脂蛋白分离制备法

研究脂蛋白的结构、功能和代谢,对阐明动脉粥样硬化形成及消退的机制具有重要意义。开展这方面的研究需要大量纯化的脂蛋白,然而在脂蛋白的分离方法上,虽有传统的低温酒精法①、电泳法②和超速离心法     

两步超速离心法快速分离大量血浆极低密度脂蛋白及低密度…

本法先使血浆中的脂蛋白快速富集浓缩，再将脂蛋白各组份分离纯化。即具备序列漂浮法分离样品量大长处，双具有密度梯度法离心时间短的优点。使用ＢＥＣＫＭＡＮＬ８－８０Ｍ型超速离心机，Ｔｙｐｅ７０Ｔｉ转头，分离２８０ｍｌ血浆只需超速离心ｈ。所和极低密度脂蛋白及低密度脂蛋白经琼脂糖电泳、聚丙烯酰胺电泳及载脂ＳＤＳ－聚丙烯酰胺电泳鉴定纯度良好。     

2型糖尿病患者血清脂蛋白氧化易感性及高密度脂蛋白抗氧化能力分析

目的 :探讨 2型糖尿病患者血清脂蛋白氧化易感性以及高密度脂蛋白抗低密度脂蛋白氧化能力的变化。　方法 :采用密度梯度超速离心分离 5 3例 2型糖尿病患者血清脂蛋白组分 (VL DL、L DL 和 HDL) ,用 A2 34 nm光吸收鉴定脂蛋白氧化易感性 ,硫代巴比妥酸值 (TBARS )分析脂蛋白脂质过氧化程度 ,同时检测 HDL对 L DL氧化的抑制能力 ,并与正常人 (44例 )进行比较。　结果 :2型糖尿病患者 VL DL 、L DL 氧化延滞时间明显缩短 (VL DL:80 .7± 5 .8vs 2 4.3± 4.85 ;L DL :6 0 .0± 4.0 vs 1 7.4± 3.0 1 ,P<0 .0 0 1 ) ,HDL组分对 L DL氧化的抑制能力明显降低 (P<0 .0 1 )。　结论 :2型糖尿病患者 VL DL、L DL 组分氧化易感性提高以及 HDL 抗氧化能力的下降 ,是 2型糖尿病动脉粥样硬化发生率高的原因之一     

兔血清ApoAI亚类的研究——Ⅰ.超速离心法分离兔血清脂蛋白

用垂直转头超速离心法一次可制备兔血清各种脂蛋白。经脂蛋白电泳、免疫电泳等鉴定表明各脂蛋白纯度满意。此法具有操作简单、时间短、制备容量大、脂蛋白纯度较高等特点。     

血清总低密度β脂蛋白的测定及其临床意义

已知血液中的脂质是以脂蛋白的形式进行运转的。各种脂蛋白在动脉粥样硬化的发病中所起的作用不同。因而,测定它们的含量比单独测定血脂含量意义更加重大。虽然,超速离心是分离和定量脂蛋白的较好技术,但由于它设备昂贵、操作费时,故不能为一般实验室所采用。近年来发展起来的血清总低密度β脂蛋白含量的浊度测定法,被认为是予测高脂血症的简便有效的方法。可惜该项技术目前不论在方法学和临床应用方面均存在着许多问题。为此,我们首先制备纯的总低密度脂蛋白,解决了多年来未能     

两步超速离心法快速分离大量血浆极低密度脂蛋白及低密度脂蛋白

本法先使血浆中的脂蛋白快速富集浓缩，再将脂蛋白各组份分离纯化。即具备序列漂浮法分离样品量大的长处，又具有密度梯度法离心时间短的优点。使用ＢＥＣＫＭＡＮＬ８－８０Ｍ型超速离心机，Ｔｙｐｅ７０Ｔｉ转头，分离２８０ｍｌ血浆只需超速离心５ｈ。所得极低密度脂蛋白（ＶＬＤＬ）及低密度脂蛋白（ＬＤＬ）经琼脂糖电泳、聚丙烯酰胺电泳（ＰＡＧＥ）及载脂蛋白ＳＤＳ－聚丙烯酰胺电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）鉴定纯度良好。本文为超速离心分离制备大量血浆ＶＬＤＬ、ＬＤＬ提供了一种快速、经济的新方法。     

鸭血清脂蛋白的研究Ⅱ.鸭血清高密度脂蛋白的分离提纯与鉴定

利用硫酸右旋糖酐沉淀和区带头密度梯度超速离心一次即可获得总量达377毫克的鸭血清HDL,平均浓度为2.69毫克/毫升。样品经琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、免疫双扩散、免疫电泳、双向免疫电泳及分析超离心鉴定,证实为纯净的HDL。制备的鸭HDL仍保持其抗原性,对牛乳脂蛋白脂肪酶有激活作用。本法提纯鸭血清HDL耗时短,纯度高,产量大,重复性佳;提纯样品为深入研究HDL及其载脂蛋白结构、功能和代谢等创造了条件。     

脂质代谢紊乱患者血清脂蛋白氧化易感性的研究

目的：比较分析脂质代谢紊乱患者血清脂蛋白氧化易感性以及高密度脂蛋白（HDL）对低密度脂蛋白（LDL）氧化抑制能力。方法：采用密度梯度超速离心分离45例肾衰（CRF）、33例心肌梗死（MIS）、33例脑梗死（CI）和53例2型糖尿病（DM）患者的血清脂蛋白组分（VLDL,LDL,HDL）,用硫代巴比妥酸值（TBARS）分析脂（CI）和53例2型糖尿病（DM）患者的血清脂蛋白组分(VLDL,LDL,HDL),用硫代巴比妥酸值（TBARS）分析脂蛋白脂质过氧化程度,A234nm光吸收检测脂蛋白共轭双烯含量分析脂蛋白的氧化易感性,并与正常人（44例）进行了比较。结果：所有患者组VLDL的TBARS值均明显高于对照组,其中MIS组增高程度最为显著（与对照组相比,P＜0.001）;MIS组和DM组LDL、CI组和DM组HDL的TBARX值增高;患者组VLDL、DLD的氧化延滞时间也显著缩短,DM组缩短最为明显;但各组HDL与对照组相比无差异;此外患者组HDL对LDL氧化抑制能力均明显减弱,CRF组和MIS组减弱最为显著。结论：各种脂质代谢紊乱患者体内血浆脂蛋白均发生一定程度的氧化修饰,促进了动脉粥样硬化的发生发展。     

家族性淀粉样多发性神经性损害转甲状腺素蛋白的化学修饰

目的:建立一种分析血浆脂蛋白存有转甲状腺素(TTR)蛋白化学修饰的方法.方法:利用PCR方法诊断家族性多发性神经性损害(FAP)患者基因突变位点.密度梯度超速离心法分离正常健康人和FAP患者血浆脂蛋白.利用水晶震荡子分子之间亲和仪,分析TTR蛋白与脂蛋白之间分子亲和性.ELISA方法测定血浆脂蛋白,TTR浓度.用MALDI-TOF-MS方法比较血浆与脂蛋白含有,TTR蛋白的化学修饰程度.结果:PCR方法诊断FAP患者TTR蛋白基因突变位点.分析正常人血清TTR与脂蛋白具有亲和性;正常人血浆脂蛋白TTR蛋白含有TTR浓度与FAP患者之间无明显差别.FAP ATTRVal30Met杂合子患者血浆以及脂蛋白中含有TTR蛋白,分子质量发现4个主要TTR蛋白峰.结论:MALDI-TOF-MS方法能够分析血浆、血浆脂蛋白中含有TTR蛋白的化学修饰.     

鸭血清脂蛋白的研究Ⅵ.鸭HDL-apo CⅡ的分离纯化及鉴定

鸭血清HDL用DS和CaCl_2沉淀浓缩,再经角头密度梯度超速离心纯化。纯化的HDL经低温下脱脂得到apo HDL。然后经过Sephadex G-200柱层析和DEAE-纤维素离子交换柱层析得到apo CⅡ。后者经PAGE和SDS-PAGE鉴定为纯品。所获HDL-apo CⅡ可有效地激活LPL酶。     

超速离心密度梯度中间区带加样插入法进一步快速分离人血清脂蛋白

本文报告使用HITACHI80P—7系列制备型超速离心机,RP80T—3角度转子,溴化钠(NaBr)不连续密度梯度,密度范围1.00～1.30g/cm~3,采用中间区带加样插入法超离心技术,68000r/min(410.000g)离心3h,转子腔温态8℃,分离正常人血清脂蛋白,短时间一次分离即可获得血清脂蛋白VLDL、LDF、HOL、和LDS(缺乏     

肾癌细胞来源exosome的制备和免疫相关蛋白组成的初步研究

目的:分离纯化肾癌细胞分泌的exosome,检测exosome免疫相关蛋白的组成,探讨其潜在的临床应用价值.方法:体外培养人肾癌细胞株Rc-2.用超滤和蔗糖重水密度梯度超速离心法分离纯化exosome,透射电镜观察其形态,Western blot检测其免疫相关蛋白的组成.结果:用超滤和蔗糖重水密度梯度超速离心法成功分离出exosome.透射电镜下exosome为类圆碟形,具有双层膜结构,直径30-100 nm.exosome表达肾癌特异性抗原G250、热休克蛋白70(Heat shock protein70,HsP70)和细胞间粘附分子(Intercellular Adhesion Molecule-1,ICAM-1).结论:超滤和蔗糖重水密度梯度超速离心法可以分离纯化肾癌细胞分泌的exosome,exosome表达免疫相关蛋白G250、HSP70、ICAM-l.其负载肾癌特异性抗原,具有免疫原性,可望成为治疗肾癌的新疫苗.     

病毒性肝炎血浆脂蛋白胆固醇含量的变化

脂蛋白的主要功能是运送血浆的类脂质。用传统的电泳法和超速离心法可分成四类：乳糜微粒（CM）、α-脂蛋白（高密度脂蛋白HDL）、β-脂蛋白（低密度脂蛋白LDL）和前β脂蛋白（极低密度脂蛋白VL-DL）。HDL和VLDL由肝脏制造，因此，肝脏病时必然影响脂蛋白的代谢。本文用沉淀漂浮邻苯二甲醛法（PFO-PA）测定30例急性病毒性肝炎（下称急肝）患者血浆脂蛋白胆固醇的变化，并与30例正常人对照观察，现将结果报告如下。     

人血清脂蛋白的序列超速离心

1955年Havel结合制备超速离心与分离后各组份的化学成份分析,创造了逐渐升高血清密度并反复离心的方法,即序列超速离心法。可兼用于制备及定量,方法比较简单而且准确可靠,故一直为各家所沿用。我们根据此法的原理,参考美国德州动脉粥样硬化研究中心脂质实验室的具体方法,结合我院实际条件,对正常人血清作了序列超速离心。根据我们的