人卵泡液蛋白质组学的研究进展

卵泡液是由卵母细胞、颗粒细胞和膜细胞等共同分泌的一种含多种蛋白质的生物液,其作为卵母细胞生长的微环境或培养基,直接影响到卵泡的发育和卵母细胞的成熟。过去十几年,对卵泡液蛋白质组学的研究主要集中于新蛋白筛选及疾病相关蛋白等的识别上。本文从卵泡液新蛋白的筛选、年龄相关生物学标志鉴定、确定卵泡成熟标志、疾病相关标志的筛选和体外受精(IVF)成功的标志等5方面介绍近年卵泡液蛋白质组学的相关研究。筛选和鉴定某些生殖和发育相关的关键蛋白,并可能成为卵泡液中的生物标志,可用于预测卵母细胞的质量、受精及胚胎发育潜能。     

卵母细胞及其胚胎发育潜能相关的生物标记物

卵母细胞发育潜能是在卵泡发育过程中逐步获得的,卵丘细胞(CCs)与卵母细胞紧密接触,卵泡液(FF)为卵母细胞提供良好的微环境.因此,CCs功能及FF成分组成可以反映卵母细胞的发育潜能.CCs为卵母细胞提供代谢所需的营养物质如丙酮酸、丙氨酸、胆固醇等,并在卵母细胞的成熟、排卵、受精过程中发挥重要的作用.FF作为卵巢体壁细胞与血浆之间的媒介,其内的代谢相关分子、激素类分子、活性氧分子及一些细胞因子与卵母细胞的成熟及发育潜能密切相关.综述与卵母细胞及其胚胎发育潜能相关的生物标记物,主要是CCs、FF中的相关因子,两者结合为胚胎学家选择最佳的卵子提供参考.     

PCOS患者糖脂代谢特点及其相关细胞因子参与卵泡发育的研究现状北大核心CSCD

多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)是常见的女性内分泌、代谢紊乱性疾病,其糖脂代谢异常与生殖功能障碍密切相关。卵巢是能量代谢活跃的器官,颗粒细胞的增殖,卵母细胞的发育成熟及排卵,都是耗能的过程,需要足够的能量供应。糖、脂类在颗粒细胞中被分解,通过缝隙连接为卵母细胞发育提供能量。PCOS患者糖脂代谢异常表现在卵巢颗粒细胞和卵泡液中信号分子及细胞因子、卵泡液中代谢产物的变化,影响卵泡发育及卵母细胞质量。本文就PCOS患者糖脂代谢特点及与糖脂代谢相关的细胞因子对卵泡发育和卵细胞质量的影响进行综述,为临床提供参考。     

生长分化因子9对卵巢功能的影响和调控

生长分化因子9(growth differentiation factor 9,GDF-9)是转化生长因子β(transforming growth factor beta,TGF-β)超家族的新成员。作为卵母细胞分泌的因子,GDF-9在女性生殖功能中的作用近年得到广泛讨论。研究发现GDF-9可参与调节颗粒细胞分化发育,相关功能蛋白、因子产生,生殖系统相关基因表达以及卵巢细胞代谢、凋亡等过程,从而在卵巢卵泡生长及卵母细胞成熟、排卵和黄素化等方面发挥重要作用。骨形态发生蛋白15(BMP-15)是一种与GDF-9具有高度氨基酸同源性和相似蛋白结构的卵母细胞源性因子,研究发现GDF-9可与BMP-15形成异源二聚体并发挥协同作用。目前认为,GDF-9是卵母细胞与颗粒细胞完成双向通讯重要的影响因子,参与两种细胞的同步化通讯和协调生长过程,其异常表达可能与女性生殖内分泌失调及随之引发的不孕存在一定关系。本文从GDF-9对卵母细胞发育的影响及在卵泡形成过程中的调控等方面,对其影响和调节卵巢功能的作用进行综述。     

生长分化因子9对卵巢功能的影响和调控

生长分化因子9(growth differentiation factor 9,GDF-9)是转化生长因子β(transforming growth factor beta,TGF-β)超家族的新成员。作为卵母细胞分泌的因子,GDF-9在女性生殖功能中的作用近年得到广泛讨论。研究发现GDF-9可参与调节颗粒细胞分化发育,相关功能蛋白、因子产生,生殖系统相关基因表达以及卵巢细胞代谢、凋亡等过程,从而在卵巢卵泡生长及卵母细胞成熟、排卵和黄素化等方面发挥重要作用。骨形态发生蛋白15(BMP-15)是一种与GDF-9具有高度氨基酸同源性和相似蛋白结构的卵母细胞源性因子,研究发现GDF-9可与BMP-15形成异源二聚体并发挥协同作用。目前认为,GDF-9是卵母细胞与颗粒细胞完成双向通讯重要的影响因子,参与两种细胞的同步化通讯和协调生长过程,其异常表达可能与女性生殖内分泌失调及随之引发的不孕存在一定关系。本文从GDF-9对卵母细胞发育的影响及在卵泡形成过程中的调控等方面,对其影响和调节卵巢功能的作用进行综述。     

细菌蛋白质组学的研究进展

细菌蛋白质组学是蛋白质组学研究技术在细菌学领域中的应用,其主要研究方法是双向凝胶电泳结合生物质谱技术.细菌蛋白质组学的研究包括细菌在不同环境状态下的反应机制、疫苗设计中候选蛋白的筛选、细菌的致病及酎药机制阐明、新的细菌鉴定及疾病诊断方法的开发等.本文简要综述了细菌蛋白质组学研究的一些新进展.     

卵泡液干细胞因子水平对卵母细胞发育、受精和卵裂影响的实验研究

目的探讨卵泡液中干细胞因子(SCF)水平对卵母细胞发育、受精和卵裂的影响。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测68例体外受精-胚胎移植患者卵泡液中SCF水平,分析其与卵母细胞发育、受精和卵裂的关系。结果卵泡液SCF水平为526±58ng/L,显著高于血清SCF水平(389±31ng/L)(P<0.01)。含成熟卵母细胞的卵泡液SCF水平为540±62ng/L,高于含未成熟卵母细胞者(515±55ng/L)(P<0.05);受精卵的SCF水平(538±61ng/L)高于未受精卵(519±56ng/L)(P<0.05);Ⅰ级和Ⅱ级胚胎的SCF水平(536±59ng/L、531±60ng/L)高于Ⅲ级和Ⅳ级胚胎(522±56ng/L、520±55ng/L)(P<0.05)。结论卵泡液SCF可促进卵母细胞发育,提高受精卵发育潜能。     

卵泡液细胞因子与体外受精-胚胎移植的关系

细胞因子是一类具有广泛生物学活性的激素样多肽,其在生殖过程中的作用日益受到人们的认识和关注,已成为一个崭新的研究领域.卵泡液作为卵子生长的微环境,包含了对卵母细胞生长发育有重要影响的细胞因子,如白血病抑制因子和白细胞介素-1等,它们之间形成复杂的网络体系,协同发挥生物活性功能,影响着卵母细胞的发育、成熟、受精、着床以及胚胎形成.该文综述了近几年来卵泡液细胞因子与体外受精-胚胎移植妊娠结局关系的研究状况.     

ZP1基因突变在空卵泡综合征中的研究进展

空卵泡综合征（empty follicle syndrome）发病机制尚不清楚,越来越多的研究聚焦于遗传因素,尤其是调控卵母细胞发育的相关基因。其中,透明带糖蛋白1(zona pellucida glycoprotein 1,ZP1)是透明带基质结构完整性的关键组成部分。由ZP1基因突变造成的透明带结构和功能的缺陷常会导致卵母细胞成熟障碍、脆性增加,进而造成反复取卵失败。现已鉴定出多种导致空卵泡综合征表型的ZP1基因突变。综述不同部位ZP1基因突变引起空卵泡综合征表型及其作用机制。     

骨形态发生蛋白15调控卵泡发育及与生殖内分泌疾病的关系

骨形态发生蛋白15（bone morphogenetic protein 15,BMP15）作为卵母细胞分泌因子,在调控卵泡发育过程中起着重要的作用。BMP15通过协同双调蛋白、上调卵丘扩张基因的表达,促进卵母细胞发育成熟;BMP15能增加颗粒细胞对卵泡刺激素（follicle-stimulating hormone,FSH）的敏感性,刺激颗粒细胞中Kit配体的表达从而促进颗粒细胞的增殖分化;BMP15通过调节卵泡凋亡相关因子的表达抑制卵泡闭锁;BMP15还可通过调节FSH受体及下游Smad信号通路介导对类固醇激素的调节。BMP15表达降低或基因突变,可能通过诱导颗粒细胞凋亡,阻碍早期卵泡发育及卵子发生过程,介导多囊卵巢综合征、早发性卵巢功能不全等多种疾病的发生。综述BMP15在卵泡发生过程中的作用及与相关生殖内分泌疾病的最新研究进展。     

高龄女性卵子微环境的代谢组学研究进展

代谢组学通过对所有小分子代谢物进行定性定量分析,寻找与生理病理变化相关的代谢物,为疾病的诊断及治疗提供新方法。卵子发育依赖卵泡液、卵丘细胞等微环境。在卵子发育过程中,微环境为卵子提供能量、营养等,并清除有害代谢物,减轻对卵子的损伤。高龄女性生育力下降表现为卵巢储备功能下降及卵子质量降低。随着年龄的增长,卵子微环境代谢组学发生改变,如糖代谢、脂代谢、蛋白质代谢等,影响卵子发育、成熟、受精及后续胚胎发育,是导致高龄女性生育力下降的原因之一。分析高龄女性卵子微环境代谢组学不仅可以反映其物质组成及代谢水平变化,还可以反映代谢物对卵子的影响,进而评估卵子的发育潜能,为预测高龄女性体外受精-胚胎移植助孕结局提供参考。     

卵母细胞的葡萄糖代谢研究进展

卵母细胞发育潜能受到其生长微环境的影响,因此对卵母细胞生长微环境的研究是生殖医学关注的热点。卵丘细胞、卵泡液等与卵母细胞紧密相联,组成卵母细胞生长微环境,为卵母细胞能量代谢提供所需物质,同时也分泌激素类物质、细胞活化因子等调节卵母细胞的生长发育。因此卵母细胞生长的微环境,与卵母细胞的质量有关。目前,关于卵母细胞生长微环境的研究很多,但不能忽略与其联系紧密的卵母细胞本身,由于科学技术及道德伦理的限制,对卵母细胞本身的代谢研究较少。更好地了解卵母细胞自身的代谢过程,才能明白生长微环境与卵母细胞的联系,及微环境如何影响调控卵母细胞的生长发育。综述卵母细胞的葡萄糖代谢,分别从葡萄糖的转运、代谢途径、代谢相关酶、葡萄糖与卵母细胞质量的关系4个方面阐述。     

颗粒细胞在卵母细胞发育成熟中的作用

卵泡的发育是涉及多种细胞、多个阶段的复杂过程,其中颗粒细胞和卵母细胞是构成卵泡的重要细胞,卵泡的形成需要颗粒细胞与卵母细胞间密切的相互作用。在促性腺激素等多种激素和信号分子作用下,颗粒细胞增殖、分化,并通过间隙连接与周围的颗粒细胞、卵母细胞、膜细胞进行物质交换和信号传递,卵母细胞也可分泌多种因子反作用于颗粒细胞。颗粒细胞与卵母细胞间的相互作用涉及多条信号通路,这些信号通路间同样存在相互影响,决定卵泡的成熟或闭锁。当这些信号通路被过度激活或抑制时,可影响细胞因子的生成或传递,从而引起颗粒细胞或卵泡的凋亡,具体机制尚未明确。本文就卵泡的形成,颗粒细胞与卵母细胞、膜细胞在发育过程中的相互作用以及涉及的重要信号通路进行综述。     

长链非编码RNA在卵泡与早期胚胎发育中的研究进展

长链非编码RNA（long non-coding RNA,lncRNA）是长度大于200 nt并且缺乏蛋白质编码能力的一类RNA分子。卵泡及早期胚胎发育与女性生殖健康密切相关,lncRNA在其中发挥重要作用。目前的研究认为lncRNA可能通过影响女性生殖干细胞的增殖和体外存活能力以及调节卵丘扩张和卵母细胞成熟参与卵泡发育。lncRNA也可通过影响颗粒细胞增殖、分化与凋亡在排卵、黄体形成和早期胚胎发育等阶段发挥重要作用。对lncRNA的深入研究有助于进一步了解卵泡及早期胚胎发育的分子机制,为评价女性卵巢储备及移植前胚胎质量提供新的诊断标准,同时为不孕症的治疗提供新思路。现就lncRNA在卵泡与早期胚胎发育中的研究进行综述。     

哺乳动物卵泡相关代谢组学研究进展

卵母细胞质量是决定辅助生殖结局的一项重要因素,创建一种简单可靠的卵母细胞质量评价体系有助于提高辅助生殖的成功率。新兴的代谢组学有望成为评估卵母细胞质量的新方法。目前,代谢组学已广泛应用于女性生殖相关的科学研究,通过对卵母细胞、颗粒细胞和卵泡液等样品中的中小分子进行定性和定量分析,研究者们寻找到多种与女性不孕相关的标志性代谢物,涉及糖类、脂质和氨基酸等多种物质的代谢,对于临床不孕症的诊断和治疗具有潜在的应用价值。综述近年哺乳动物卵泡相关的代谢组学研究。     

Identification of perilipin-2 as a lipid droplet protein regulated in oocytes during maturation

Lipid droplet proteins regulate the storage and utilisation of intracellular lipids. Evidence is emerging that oocyte lipid utilisation impacts embryo development, but lipid droplet proteins have not been studied in oocytes. The aim of the present study was to characterise the size and localisation of lipid droplets in mouse oocytes during the periovulatory period and to identify lipid droplet proteins as potential biomarkers of oocyte lipid content. Oocyte lipid droplets, visualised using a novel method of staining cumulus-oocyte complexes (COCs) with BODIPY 493/503, were small and diffuse in oocytes of preovulatory COCs, but larger and more centrally located after maturation in response to ovulatory human chorionic gonadotrophin (hCG) in vivo, or FSH + epidermal growth factor in vitro. Lipid droplet proteins perilipin, perilipin-2, cell death-inducing DNA fragmentation factor 45-like effector (CIDE)-A and CIDE-B were detected in the mouse ovary by immunohistochemistry, but only perilipin-2 was associated with lipid droplets in the oocyte. In COCs, perilipin-2 mRNA and protein increased in response to ovulatory hCG. IVM failed to induce perilipin-2 mRNA, yet oocyte lipid content was increased in this context, indicating that perilipin-2 is not necessarily reflective of relative oocyte lipid content. Thus, perilipin-2 is a lipid droplet protein in oocytes and its induction in the COC concurrent with dynamic reorganisation of lipid droplets suggests marked changes in lipid utilisation during oocyte maturation.