ER Bcl-2在宫颈病变发生中的相关性研究

  目的  探讨ER、Bcl-2蛋白在不同程度宫颈病变中的相关性及意义。  方法  免疫组织化学检测慢性宫颈炎20例、低度宫颈上皮内瘤变30例、高度宫颈上皮内瘤变70例及80例宫颈癌组织中ER和Bcl-2蛋白的表达。  结果  ER在慢性宫颈炎组中阳性率为75%,随着宫颈病变程度的加重,其表达率逐渐降低（χ2=24.266,P < 0.01）,与慢性宫颈炎组比较,CINⅡ~Ⅲ组和宫颈鳞癌组差异有统计学意义,CINⅠ组差异无统计学意义（χ2=0.751,P=0.386）。与肿瘤组织类型及病理分级无关;BCL-2在宫颈鳞癌组中阳性率为75.38%,随着宫颈病变程度的加重,其表达率逐渐增高（χ2=27.715,P < 0.01）,与慢性宫颈炎组比较,CINⅠ组、CINⅡ~ Ⅲ组及宫颈鳞癌组差异均有统计学意义。与宫颈鳞癌病理分级相关（χ2=4.862,P=0.027）,与肿瘤组织类型无关（P=0.500）;CIN Ⅱ~Ⅲ组中联合表达阳性率为38.57%（27/70）,宫颈鳞癌组中联合表达阳性率为15.38%（10/65）,差异具有统计学意义（χ2=9.108,P=0.003）。CINⅡ~Ⅲ组中ER与Bcl-2蛋白表达存在相关（r=0.506,P < 0.01）,其余组中无相关关系。  结论  在宫颈病变的进展中,ER和Bcl-2表达呈相反趋势,在CINⅡ~Ⅲ组中有相关性,联合表达阳性可能是宫颈高度上皮内瘤变发生的主要机制之一。      

水通道蛋白AQP1、3、8在宫颈鳞状上皮组织癌变中的表达及其与预后的关系

目的揭示水通道蛋白1.3.8在维吾尔族妇女宫颈癌发生、浸润过程中的表达及其与宫颈癌预后的关系。方法在慢性宫颈炎和宫颈癌组织中采用实时荧光定量RT-PCR方法检测AQP1,AQP3和AQP8的mRNA表达,使用免疫组织化学技术研究在慢性宫颈炎、宫颈上皮内瘤变Ⅲ级和浸润癌组织中的定位表达。结果 AQP1、AQP3和AQP8mRNA在慢性宫颈炎组织、早期宫颈癌及晚期宫颈癌均有表达,表达量之间差异无统计学意义(P>0.05)。AQP1、AQP3和AQP8蛋白在慢性宫颈炎、宫颈上皮内瘤样病变Ⅲ级(CINⅢ级)和浸润癌组织中均表达,表达于细胞膜,阳性率的差异有统计学意义(P<0.05)。宫颈癌的临床分期、肿瘤直径和淋巴结转移可作为判断患者预后的独立因素。AQP1、3、8可能通过局部肿瘤体积生长影响患者预后。结论 AQP1、3、8在宫颈癌发生、侵袭过程中可能发挥重要的作用。     

CDCA3在下咽鳞癌中的表达及临床意义

  目的  探索与下咽鳞癌生长、转移及预后相关的分子标记物,为开发下咽鳞癌新的疗法提供理论依据。  方法  分析Oncomine肿瘤芯片数据库中细胞分裂周期相关蛋白3（cell division cycle associated protein 3,CDCA3）在头颈部鳞癌及癌旁组织中的表达差异,检测下咽鳞癌及癌旁组织中CDCA3的表达,分析其表达水平与下咽鳞癌患者临床病理特征及预后的关系。  结果  通过分析Oncomine肿瘤芯片数据库中CDCA3的DNA拷贝数,发现在肿瘤基因图谱（TCGA）数据集中,相比全血及正常头颈部组织,CDCA3的DNA拷贝数在头颈鳞癌组织中显著上调（P < 0.05）。下咽鳞癌组织中CDCA3的mRNA相对表达水平较癌旁正常黏膜表达水平升高（P < 0.05）。CDCA3的蛋白表达水平与肿瘤大小、淋巴结转移及TNM分期等临床病理特征相关（P < 0.05）。Kaplan-Meier生存曲线分析显示CDCA3阳性表达组患者的总生存期显著低于CDCA3阴性表达组（P < 0.05）。  结论  CDCA3在下咽鳞癌组织中高表达,与下咽鳞癌患者原发肿瘤大小、TNM分期以及淋巴结转移情况密切相关,是影响患者预后的独立危险因素。      

胃癌组织中SNCG和CXCR4 mRNA的表达及临床意义

  目的  研究SNCG和CXCR4在胃癌和正常胃黏膜组织中的表达,探讨其在胃癌发生、发展、浸润转移中的作用。  方法  应用RT-PCR法检测不同组织中SNCG和CXCR4 mRNA的表达情况。  结果  SNCG和CXCR4 mRNA在胃癌组织中的表达量明显高于正常胃黏膜组织（P < 0.01）;胃癌组织中SNCG mRNA的表达量与癌组织的浸润深度和淋巴结转移有关（P < 0.05,P < 0.01）,CXCR4mRNA的表达量与淋巴结转移有关（P < 0.01）;胃癌组织中SNCG mRNA与CXCR4 mRNA的表达量呈正相关（r=0.346,P < 0.05）。  结论  SNCG和CXCR4在胃癌组织中高表达,可能与胃癌的发生、发展、浸润、转移密切相关。      

EphB4及其配体EphrinB2在食管鳞癌中表达及其与血管生成的关系

  目的  探讨EphB4受体及其配体EphrinB2在食管鳞癌组织中的表达及其与血管生成的关系。  方法  应用免疫组织化学Envision plus法检测60例食管鳞癌和10例癌旁组织中EphB4受体及其配体EphrinB2的表达和VEGF的表达, 采用逆转录多聚酶链反应（RT-PCR）法检测60例食管鳞癌和10例癌旁食管组织中EphB4、EphrinB2和VEGF mRNA的相对含量, 并分析EphB4、EphrinB2和VEGF的表达的相关性。  结果  食管鳞癌组织中EphB4、EphrinB2、VEGF mRNA和蛋白的表达均高于癌旁正常食管黏膜, 差异有统计学意义（P < 0.05）。EphB4 mRNA和EphrinB2 mRNA表达正相关（r=0.541, P < 0.05）, EphB4 mRNA、EphrinB2 mRNA均和VEGF mRNA表达正相关（r=0.642, r=0.582;P均 < 0.05）。  结论  EphB4和EphrinB2在食管鳞癌中高表达, 与血管生成密切相关。      

组蛋白乙酰化修饰调控RAR-β2表达与宫颈病变的相关性

  目的  探讨组蛋白乙酰化修饰与RAR-β₂表达及宫颈病变发生发展的关系。  方法  收集正常宫颈、宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia,CIN）Ⅱ~Ⅲ和宫颈鳞状细胞癌（squamous cell carcinoma,SCC）组织,分别采用免疫组织化学和Western Blot方法检测AcH3、RAR-β₂和Involucrin的表达;分析组蛋白乙酰化水平与RAR-β₂表达及宫颈病变程度的关系。  结果  随着宫颈病变的进展,AcH3、RAR-β₂和Involucrin的表达逐渐降低,甚至缺失,组间差异有统计学意义（P＜0.05）;组蛋白乙酰化水平与RAR-β₂表达呈正相关（r=0.797,P＜0.05）,AcH3和RAR-β₂的表达均与宫颈病变程度呈负相关[r=-0.547_（AcH3）,r=-0.585_{（RAR-β2）},P＜0.05]。  结论  组蛋白乙酰化修饰与RAR-β₂表达调控有关,并可能参与宫颈癌的发生。      

CRIPTO-1在官颈鳞癌组织中的表达及临床意义

目的探讨CRIPTO-1在宫颈鳞癌组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组化和原位杂交法检测90例宫颈鳞癌、30例宫颈上皮内瘤变及30例正常宫颈黏膜组织中CRIPTO．1蛋白及mRNA的表达情况,并分析其表达与宫颈鳞癌临床病理特征的关系。结果CRIPTO-1蛋白在宫颈鳞癌组织中的阳性表达率（65．6％）高于宫颈上皮内瘤变组织（60．0％）及正常宫颈黏膜组织（10．0％）,差异有统计学意义（r=28．571,P〈0．001）。CRIPTO-1蛋白过表达与癌的浸润深度、淋巴结转移及TNM分期均关系密切（,分别为10．676、9．718及11．227;P均〈0．05）。CRIPTO-1mRNA在宫颈鳞癌组织中的阳性表达率（45．6％）高于宫颈上皮内瘤变组织（23．3％）及正常宫颈黏膜组织（10．0％）,差异有统计学意义（χ2=14．577,P=0．001）。CRIPTO．1mRNA过表达与癌的浸润深度、淋巴结转移及TNM分期均关系密切（χ2分别为13．741、4．720及30．170;P均〈0．05）。CRIPTO-1蛋白及mRNA的表达呈正相关关系（r=0．287,P=0．006）。结论CRIP—TO-1的过表达可能与宫颈鳞癌的发生、发展有关,并对判断宫颈鳞癌患者的生物学行为有-定意义。     

P14ARF、P16INK4a基因表达与高危型HPV感染的关系

目的探讨P14ARF、P16INK4a的基因表达与高危型人乳头瘤病毒DNA（HPVDNA）感染的关系。方法采用免疫组化EnVision法,对130例宫颈鳞癌、宫颈上皮内瘤变60例、20例正常宫颈组织进行P14ARF、P16INK4a蛋白基因检测,并采用原位杂交法检测130例宫颈鳞癌、宫颈上皮内瘤变60例、20例正常宫颈组织中的HPVDNA。结果宫颈鳞癌组中P14ARF、P16INK4a蛋白表达率分别为100．0％（130／130）和96．9％（126／130）;在60例宫颈上皮内瘤变组中其表达率分别为85．0％（51／60）、81．7％（49／60）;在20例正常宫颈组中其表达率分别为10．0％（2／20）、15．0％（3／20）,宫颈鳞癌组显著高于正常对照组（P〈0．01）;正常宫颈组与宫颈上皮内瘤变及宫颈鳞癌组P16INK4A和P14ARF的表达呈显著差异（P〈0．05）。HPV16／18在130例宫颈鳞癌中86例（66．2％）表达阳性;在宫颈上皮内瘤变中39例（65．0％）表达阳性;P14ARF、P16INK4a阳性率HPVI）NA阳性宫颈鳞癌、宫颈上皮内瘤变组与HPVDNA阴性宫颈鳞癌、宫颈上皮内瘤变组比较无显著差异（P〉0．05）。结论P14ARF、P16INK4a蛋白在宫颈上皮内瘤变及宫颈鳞癌组织中呈高表达,有较高的特异性和敏感性,可作为宫颈癌前病变及宫颈癌的诊断指标,     

宫颈鳞癌组织中RhoC蛋白的表达及意义

目的探讨宫颈鳞癌、宫颈上皮内瘤变及正常宫颈组织中RhoC蛋白的表达及其与临床病理因素的关系。方法应用免疫组化法检测60例宫颈鳞癌、40例宫颈上皮内瘤变和52例正常宫颈组织中RhoC蛋白的表达情况。结果宫颈鳞癌组织中RhoC蛋白的阳性表达率明显高于正常宫颈及宫颈上皮内瘤变组织（P〈0.05）;其高表达与宫颈鳞癌的临床分期、淋巴结转移有关（P〈0.05）,而与癌细胞的分化程度和患者年龄无关（P〉0.05）。结论 RhoC蛋白的高表达可能在宫颈鳞癌的发生发展过程中起一定作用,可望作为判断宫颈鳞癌转移能力的客观指标。     

NEK5在宫颈鳞癌组织中的表达及其临床意义

目的:本研究检测了NEK5在人宫颈鳞癌组织中的表达水平,分析其表达量变化对于临床病理发展的影响,旨在研究NEK5蛋白作为潜在的生物标志物用于预测宫颈鳞癌患者癌转移和预后的价值。方法:本研究收集了150对宫颈鳞癌及癌旁正常组织,制成组织芯片,运用免疫组化技术检测NEK5蛋白在组织中的表达水平。为进一步确认NEK5 mRNA在宫颈鳞癌病理发生发展中的表达变化,我们收集了140例新鲜冻存宫颈鳞癌及宫颈癌前病变组织,包括35例正常宫颈鳞状上皮组织,35例宫颈上皮内瘤变CIN Ⅰ 级组织,35例CIN Ⅱ-Ⅲ级组织及35例宫颈鳞癌组织,运用荧光定量反转录聚合酶链式反应（qRT-PCR）技术检测NEK5 mRNA的表达水平,分析其表达量的临床病理学意义。结果:相比癌旁正常组织,NEK5蛋白在宫颈鳞癌组织中表达量显著上调（P<0.001）;NEK5蛋白表达上调与宫颈鳞癌的分化程度、浸润深度、淋巴结转移与否均具有显著相关性（P<0.05）;COX多因素回归分析发现,NEK5蛋白表达水平、分化程度、浸润深度和淋巴结转移都是宫颈鳞癌预后的独立因素。qRT-PCR结果显示,NEK5 mRNA在正常宫颈鳞状上皮组织、上皮内瘤变CIN Ⅰ 级组织、CIN Ⅱ-Ⅲ级组织及宫颈鳞癌组织中的表达量依次增高,相比正常组织均具有统计学差异（P<0.05）。结论:我们的研究结果证实,在宫颈癌病理发生发展中,NEK5表达水平异常上调,提示其可作为宫颈鳞癌诊断的生物标志物。     

P16蛋白在子宫颈上皮内瘤变中表达意义与高危型HPV感染的相关性分析

  目的  研究P16蛋白在宫颈上皮内瘤变（CIN）中表达的意义, 探讨其与高危型人类乳头状瘤病毒（HPV）感染的相关性, 以期用P16蛋白的表达预测CIN进展。  方法  收集大连大学附属医院2009年1月至2011年5月宫颈活检及手术切除标本137例, 免疫组织化学方法检测P16蛋白的表达并评分, HC2方法检测高危型HPV-DNA, 并对数据进行分析。  结果  P16蛋白表达在慢性子宫颈炎伴鳞状上皮化生中均阴性（0/40）, CINⅠ阳性90.91%（20/22）, CINⅡ阳性为95.00%（19/20）, CINⅢ阳性为100.00%（25/25）, 浸润性鳞癌阳性为100.00%（30/30）。在慢性子宫颈炎伴鳞化中高危型HPV阳性1例, CINⅠ12例, CINⅡ14例, CINⅢ22例, 浸润性鳞癌29例。CIN中感染高危型HPV的病例, P16蛋白均呈阳性表达。  结论  P16蛋白可作为区分子宫颈癌及癌前病变与良性反应性增生的标记物, 其表达的分层现象能够很好的反映出CIN的分级, P16蛋白阳性表达的评分有助于区分出有高危发展倾向的CIN。      

S期激酶相关蛋白2与间隙连接蛋白43在子宫颈癌中的表达及其意义

目的 探讨S期激酶相关蛋白2(Skp2)和间隙连接蛋白43(Cx43)在子宫颈癌中的表达及其临床意义.方法 采用免疫组织化学SP法检测48例子宫颈癌、84例子宫颈上皮内瘤变(CIN)(CINⅠ～Ⅱ级45例、Ⅲ级39例)、28例慢性子宫颈炎患者Skp2和Cx43的表达.结果 子宫颈癌组织中Skp2表达水平高于CINⅠ～Ⅱ级组及慢性子宫颈炎组(P<0.05),而Cx43蛋白表达水平低于CINⅢ级组、CINⅠ～Ⅱ级组及慢性子宫颈炎组(P<0.05);Skp2的阳性表达与子宫颈癌分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05);Cx43的表达缺失与淋巴结转移有关(P<0.05);子宫颈癌组织中Skp2和Cx43的表达呈负相关.结论 Skp2与Cx43的表达程度与子宫颈癌的发生、发展密切相关,且两者之间可能存在相互作用.     

HPV基因型与宫颈病变的关系探讨

  目的  了解HPV基因型与宫颈病变的关系。  方法  选取2010年3月至2011年1月在广州中山大学第三医院妇科就诊并愿意接受HPV检查和问卷调查的妇女为对象。剔除标准:1）已切除子宫;2）已行宫颈锥切;3）不愿意参加本研究。入选360例,年龄为19~66岁,平均为35.6岁,户籍均为广州地区。利用核酸分子杂交技术检测21种HPVDNA。宫颈正常/炎症组为256例,CIN1组为34例,CIN2/3组为61例,宫颈癌组为9例。  结果  HPV感染率宫颈正常/炎症组为18.4%（47/256）,CIN1组为67.6%（23/34）,CIN2/3组为96.7%（59/61）,宫颈癌组为100%（9/9）。CIN1组、CIN2/3组HPV感染率均比正常/炎症组高（P < 0.001）;CIN2/ 3组的HPV感染率比CIN1组高（P < 0.001）。CIN主要感染类型依次为HPV16（44.2%）、HPV58（24.2%）、HPV52（11.6%）、HPV33（8.4%）。宫颈癌主要感染类型为HPV16（88.9%）。  结论  随着宫颈病变程度进展HPV感染率呈升高的趋势,HPV16、58、52、33相关的感染与宫颈癌前病变关系密切,应引起足够重视,其中HPV16感染易致病变进展及癌变发生。      

Survivin与PTEN在子宫颈癌中的表达及其临床意义

目的 探讨凋亡抑制蛋白Survivin、抑癌基因PTEN在正常子宫颈、子宫颈上皮内瘤样病变(CIN)和子宫颈癌组织中的表达及其与临床病理指标的关系.方法 应用免疫组织化学技术检测在15例正常子宫颈、15例CIN Ⅰ级、15例CINⅡ级、15例CINⅢ级和60例子宫颈癌组织中Survivin、PTEN的蛋白表达.结果 Survivin、PTEN在正常子宫颈组织中的阳性表达率分别为0、100.00%;在CIN Ⅰ级中的阳性表达率分别为20.00%、86.67%;在CIN Ⅱ级中的阳性表达率分别为33.33%、80.00%;在CINⅢ级中的阳性表达率分别为80.00%、40.00%;在子宫颈癌中的阳性表达率分别为86.67%、21.67%.统计学分析显示,Survivin阳性表达率:CINⅢ级高于CINⅡ级,差异有统计学意义(P<0.01),其余各组间差异无统计学意义.PTEN阳性表达率:CINⅢ级低于CIN Ⅱ级,差异有统计学意义(P<0.05),其余各组间差异无统计学意义.Survivin蛋白与PTEN表达与子宫颈癌的肿瘤最大径、局部浸润深度、淋巴结转移有显著相关性(P<0.05).Survivin、PTEN表达水平呈负相关.结论 子宫颈癌组织Survivin、PTEN在子宫颈上皮癌变过程及发展中起重要作用,并且与肿瘤临床病理有密切关系.

Abstract：

Objective To study the expression and clinical significance of Survivin and PTEN in cervical carcinoma. Methods The expression of Survivin and PTEN in 60 cases of cervical carcinoma, 15 cases of CIN Ⅰ , 15 cases of CIN Ⅱ, 15 cases of CIN Ⅲ and 15 cases of normal cervical tissues were detected by immunohistochemical staining. Results The expression positive rates of Survivin were 86.67 %, 80.00 %,33.33 %, 20.00 % and 0, respectively, and those of PTEN were 21.67 %, 40.00 %, 80.00 %, 86.67 % and 100.00 % in cervical carcinoma, CIN Ⅲ, CIN Ⅱ, CIN Ⅰ and normal cervical tissues, respectively. The expression positive rates of Survivin were increased along with normal cervical epithelium, CIN Ⅰ, CIN Ⅱ,CIN Ⅲ and invasive carcinoma of cervix;while those of PTEN were inverse order.Compared with the expression positive rates of Survivin and PTEN protein in the CIN Ⅱ group, those in the CIN Ⅲ group had significant differences (P <0.01 and P <0.05, respectively). Expressions of Survivin and PTEN were correlated to the size of focus(P <0.05), the depth of tumor and pelvic lymphnode metastasis (P <0.05), but not to clinical staging, pathological types, pathological grading and age(P >0.05). There was a negative correlation between the expression of PTEN and Survivin in cervical carcinoma. Conclusion The expressions of Survivin and PTEN are correlated with invasion and metastasis of cervical carcinoma, and be related to clinical pathotology.Survivin and PTEN may play a important role in the formation, proliferation, differentuation and metastasis of cervical carcinoma. They may be used as markers of early diagnose, efficacy and prognosis evaluation.     

AQP1、AQP3和AQP8在子宫颈癌中的表达研究

Objective: To probe expression and significance of AQP1, AQP3 and AQP8 in cervical carcinoma. Methods: The expressions of AQP1, AQP3 and AQP8 in SiHa cell line were examined by RT-PCR and immunofluorescence and in 35 cases of cervical carcinoma, 15 cases of CIN3 and 15 cases of control group by immunohistochemistry. Results: (1) AQP1, AQP3 and AQP8 expressed in SiHa cell line; (2)MVD of AQP1 were 43.6±17.8, 56.2±11.6, 70.8±21.1 in control group, CIN3 and cervical carcinoma group, respectively. The difference among three groups was significant(P<0.05). Positive rates of AQP3 were 13.3%, 26.7%, 48.6%, respectively, in control group, CIN3 and cervical carcinoma group. The difference between cervical carcinoma and control group was significant(P<0.05). Positive rates of AQP8 were 46.7%, 86.7%, 54.3%, respectively, in three groups. The difference among three groups was significant(P<0.05). Conclusion: Expression of AQP1, AQP3 and AQP8 in cervical carcinoma might be related with cervical carcinogenesis and development.     

上皮间质转换相关蛋白E-cadherin、Twist表达与子宫颈上皮恶变发生发展关系的研究

目的：探讨E-cadherin、Twist表达与子宫颈癌局部浸润及临床病理参数之间的关系.方法：应用组织芯片技术和免疫组织化学方法检测宫颈浸润癌34例、微小浸润癌30例、子宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasias,CIN）Ⅲ30例、子宫颈慢性炎症30例E-cadherin、Twist的表达,并与临床病理资料进行 分析.结果：E-cadherin在子宫颈慢性炎症、CINⅢ、微小浸润癌、浸润癌中的阳性表达率分别为87％（26/30）、60％（18/30）、40％（12/30）、18％（6/34）,其阳性表达率随病变级别升高而明显减少;而且浸润癌中E-cadherin在高分化组及TNMⅢ、Ⅳ期组明显高于中低分化组和Ⅰ、Ⅱ期组（P＜0.05）,与肿瘤体积、淋巴结转移无关（P＞0.05）;Twist在子宫颈慢性炎症、CINⅢ、微小浸润癌、浸润癌中的阳性表达率分别为30％（9/30）、40％（12/30）、70％（21/30）、79％（27/34）其阳性表达随病变级别增加而上升;Twist表达水平在肿瘤直径＞ 2cm组及中低分化组明显高于≤2cm和高分化组（P＜0.05）,有无淋巴结转移组和不同TNM分期组间差别无统计学意义无关（P＞0.05）;E-cadherin、Twist表达水平在子宫颈慢性炎症和浸润癌中两者的表达无相关性（P＞0.05）,在CINⅢ以及微小浸润癌中表达存在明显负相关（r=-0.6693,P＜0.05和r=-0.7946,P＜0.05）.结论：Twist和E-cadherin参与子宫颈上皮内病变进展和局部浸润癌的发展,Twist表达升高和E-cadherin表达缺失是子宫颈癌恶性进展的重要指标.     

乳腺癌中FoxP3表达与上皮间质转化的相关性及其意义

  目的  探讨乳腺癌组织FoxP3、TGF-β1的表达和上皮间质转化(EMT)的相互关系及其临床意义。  方法  免疫组织化学法检测74例乳腺癌组织中FoxP3、TGF-β1、E-Cadherin、N-Cadherin、Vimentin和Fibronectin的表达情况, 分析乳腺癌FoxP3蛋白表达与临床病理特征的关系, 以及FoxP3、TGF-β1的表达和EMT发生之间的关系。  结果  FoxP3与TGF-β1的表达率和EMT的发生率分别为36.5%(27/74)、39.2%(29/74)和40.5%(30/74)。乳腺癌FoxP3表达与淋巴结转移相关(P < 0.05), 与其他临床病理特征无关(P>0.05)。FoxP3和TGF-β1的表达之间存在相关性, 而TGF-β1可以促进EMT发生(P < 0.05)。  结论  FoxP3的表达与乳腺癌淋巴结转移和EMT的发生相关, 可能作为预测乳腺癌转移可能性的标记物。