哇巴因抑制结直肠癌多药耐药细胞增殖及侵袭力的研究

  目的  探讨结直肠癌耐药细胞增殖及侵袭力与Na+, K+-ATP酶活性及其β1亚单位和P糖蛋白(P-gp)表达的关系, 及哇巴因增加化疗敏感性的可能机制。  方法  以人结直肠癌亲本细胞(SW480)和耐奥沙利铂细胞(SW480/OxR)为研究对象, 采用MTS法、Transwell小室、生化酶学、实时定量PCR(Real time quantitative, RT-PCR)及流式细胞技术等方法比较SW480细胞与SW480/OxR细胞的增殖及侵袭力、Na+, K+-ATP酶活性及其β₁亚单位和P-gp表达的差异, 观察哇巴因对SW480/OxR细胞上述指标的影响。  结果  与SW480细胞比较, SW480/OxR细胞增殖活力无明显变化(P > 0.05), 而细胞侵袭力却显著增加, Na+, K+-ATP酶活性下降, β₁亚单位表达下调, P-gp表达上调(P均 < 0.01);哇巴因能显著抑制SW480/OxR细胞增殖活力, 减弱其侵袭力, 下调SW480/OxR细胞P-gp蛋白表达, 上调SW480/OxR细胞β₁亚单位蛋白表达, 增加SW480/OxR细胞Na+, K+-ATP酶活性(P均 < 0.01)。  结论  Na+, K+-ATP酶活性下降可能源于β₁亚单位表达下调, 并参与结直肠癌的耐药; 哇巴因能部分逆转结直肠癌耐药细胞MDR, 可能与增加Na+, K+-ATP酶活性及下调P-gp表达有关。      

TRPV5 TRPV6对结肠癌SW480细胞生物学行为的影响

  目的  观察TRPV5和TRPV6蛋白表达水平对结肠癌SW480细胞内Ca2+水平及细胞增殖、凋亡、迁移等生物学行为的影响。  方法  给予TRPV5、TRPV6通道激动剂1-25（OH）₂D₃及抑制剂CuCl₂作用结肠癌SW480细胞后,采用免疫组织化学法、Western blot及实时荧光定量PCR技术检测TRPV5、TRPV6蛋白及TRPV5、TRPV6 mRNA表达的变化。使用高速离子成像系统观察结肠癌SW480细胞内Ca2+水平的变化;通过MTT法、TUNEL法及划痕修复法观察结肠癌SW480细胞增殖凋亡及迁移的变化。  结果  1-25（OH）₂D₃明显上调结肠癌SW480细胞TRPV5、TRPV6 mRNA及蛋白表达水平,使结肠癌SW480细胞内Ca2+水平增加,促进结肠癌SW480细胞增殖、迁移及抑制其凋亡（P＜0.05）。CuCl₂明显下调结肠癌SW480细胞中TRPV5、TRPV6蛋白及mRNA表达,使结肠癌SW480细胞内Ca2+水平降低（P＜0.05）,抑制结肠癌SW480细胞的增殖、迁移及促进细胞的凋亡（P＜0.05）。  结论  结肠癌SW480细胞中TRPV5和TRPV6蛋白表达水平的变化,能通过调控细胞内Ca2+水平影响细胞的增殖、迁移和凋亡等生物学行为。      

阻断CLC-3 氯通道对结直肠癌细胞株生存率和侵袭转移能力的影响及其分子机制*

目的:通过研究CLC-3 在结直肠组织中的表达,探讨CLC-3 对结直肠癌细胞株SW480、SW620 的细胞生存率、侵袭转移能力的影响及其潜在的机制。方法:采用RT-PCR 方法测定不同分期结直肠癌组织和正常结直肠组织中CLC-3 的mRNA 表达水平。运用CLC-3 阻断剂DIDS、NPPB阻断SW480、SW620 细胞的CLC-3 表达后,采用CCK-8 法实验检测细胞生存率,细胞侵袭实验检测细胞侵袭转移情况;并采用免疫印迹法测定阻断CLC-3 表达后SW480、SW620 细胞Wnt/ β -catenin 信号通路相关蛋白表达。结果:结直肠癌组织中CLC-3 mRNA 表达水平高于结直肠炎黏膜组织和正常结直肠组织（P < 0.05）,且CLC-3 mRNA 表达和结直肠分期相关。抑制CLC-3 表达后,SW480、SW620 细胞的生存率和侵袭转移能力降低（P < 0.05）,且β -catenin、C-myc 、cyclinD 1、Ki-67、survivin表达降低（P < 0.05）。 结论:CLC-3 高表达与结直肠的发生发展有潜在联系,其机制可能与Wnt/ β -catenin 有关,为CLC-3 作为治疗结直肠癌的潜在新靶点提供实验基础。      

结直肠癌与其淋巴结转移癌及结直肠癌细胞上皮-间质转化的对比研究

背景与目的:对上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的研究虽有大量文献报道,但研究数据仍有争议.本研究旨在探讨淋巴结转移的结直肠癌与结直肠癌细胞系SW480、SW620的EMT特征差异.方法:Real-time RT-PCR检测结直肠癌细胞系SW480和SW620 E-cadherin和vimentin的mRNA表达:免疫组织化学法检测30例配对结直肠癌及其转移淋巴结的石蜡组织标本中E-cadherin和vimentin的表达,HE染色观察30例配对结直肠癌及其淋巴结转移癌组织形态以及SW480和SW620的细胞形态.结果:SW480与SW620中E-cadherin和vimentin的mRNA表达差异有统计学意义(P=0.037),均以后者为高;E-cadherin和vimentin在结直肠癌与其淋巴结转移癌组织中的表达差异无统计学意义(P=0.108;P=0.660).部分淋巴结转移癌中E-cadherin的表达高于结直肠癌(4/30),且vimentin表达比结直肠癌弱,甚至表达缺失(6/30);结直肠癌与其淋巴结转移癌组织具有相似的形态学特征;SW480和SW620两者形态类似.结论:结直肠癌对比其淋巴结转移癌、SW480对比SW620发现EMT特征无显著差异,推测是由于淋巴结转移癌和SW620发生TEMT.     

过表达缺氧诱导因子-1α的结直肠癌裸鼠可视化模型的建立

目的:建立一种荧光可视化显像且稳定过表达缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)的裸鼠结直肠癌移植瘤模型。方法:对不同的人结直癌细胞系(SW480、SW620、LOVO及HCT116细胞)用缺氧诱导剂Co Cl2处理,根据HIF-1α被诱导表达的情况选择合适的靶细胞;将HIF-1α的c DNA序列克隆至慢病毒表达质粒p LV-TRC-EGFP,构建p LVHIF1α-EGFP慢病毒表达质粒,并包装过表达HIF-1α的慢病毒颗粒Lenti-HIF1α-EGFP。将Lenti-HIF1α-EGFP感染SW480细胞,嘌呤霉素筛选稳定过表达HIF-1α的细胞株SW480HIF-1α,Western blotting检测SW480HIF-1α细胞内HIF-1α及其下游蛋白VEGF、M1型丙酮酸激酶(pyruvate kinase expression M1,PKM1)的表达情况,Transwell实验检测其迁移能力。裸鼠腹腔注射SW480HIF-1α建立结直肠癌移植瘤模型,倒置荧光显微镜观察裸鼠腹腔移植瘤结节。结果:常氧条件下4种结直肠癌细胞均不表达HIF-1α,经Co Cl2诱导后,除SW480细胞系以外的细胞均可被诱导表达HIF-1α,故选择SW480细胞作为研究靶细胞。成功构建稳定过表达HIF-1α的细胞株SW480HIF-1α,SW480HIF-1α细胞内HIF-1α、VEGF和PKM1的表达水平均高于野生型SW480细胞,其迁移能力较野生型SW480细胞显著增强[观察视野内迁移细胞数:(250±11)vs(50±5)个,P<0.01]。SW480HIF-1α组裸鼠肠壁形成肿瘤结节数量显著多于SW480组[(15±4)vs(4±1)个,P<0.05]。结论:成功建立了高表达HIF-1α的荧光可视化裸鼠移植瘤模型,为进一步的相关功能学研究以及药物筛选提供条件。     

白介素22活化STAT3信号通路促进结直肠癌细胞的增殖及其可能机制

目的： 探究白介素22（interleukin-22,IL-22）对结直肠癌细胞增殖的影响,并阐明其信号通路机制。 方法： Real-time PCR检测结直肠癌细胞SW480和SW620中IL-22受体1（IL-22 receptor 1, IL-22R1 ）mRNA的表达;采用不同质量浓度IL-22(0、1、5、10 ng/ml) 处理结直肠癌细胞,MTT法及克隆形成实验检测IL-22对SW480和SW620细胞增殖的影响;IL-22处理SW480和SW620细胞不同时间后,采用Western blotting检测其STAT3、AKT、ERK、JNK、P38蛋白磷酸化的情况;观察特异性STAT3磷酸化抑制剂LLL12处理是否影响IL-22诱导的结直肠癌细胞的促增殖效应。 结果： IL-22R1 mRNA在结直肠癌SW480、SW620细胞中均有表达。IL-22剂量依赖性地促进SW480和SW620细胞增殖,10 ng/ml IL-22作用后,SW480与SW620细胞增殖倍数均明显增高\[（5.18±0.212） vs （2.64±0.27）,（8.14±0.61） vs （6.08±0.096）;均P<001\];且IL-22可提高SW480与SW620细胞克隆形成能力,细胞克隆数明显多于空白对照组\[（1 680.67±124.05） vs （730±64.29）,(2 668±116.37） vs （1 294±171.61）;均P<0.01\]。Western blotting证实IL-22能显著活化STAT3通路,而对AKT、ERK、JNK、P-38通路影响不明显;STAT3抑制剂LLL12处理后,IL-22对SW480和SW620细胞的促增殖效应明显减弱。 结论： IL-22通过活化STAT3信号通路促进结直肠癌细胞SW480和SW620的增殖。     

钙释放激活钙通道调节分子1促进结肠癌细胞系SW480的迁移和侵袭

  目的  探讨钙释放激活钙通道调节分子1（calcium release-activated calcium channel modulator 1,ORAI1）对SW480迁移和侵袭的影响及其机制。  方法  以ORAI1干扰慢病毒感染SW480细胞,用RT-qPCR和Western blot检测细胞中ORAI1mRNA和蛋白的表达,Transwell小室、黏附实验、血管形成及拟态分别检测细胞侵袭、迁移能力,同、异种细胞间黏附及血管生成能力,激光共聚焦显微镜检测细胞钙内流（store-operated Ca2+ entry,SOCE）,Western blot法检测细胞中ERK1/2、p-ERK1/2、MMP-2、VEGF和E-cadherin蛋白的表达。  结果  SW480转染ORAI1干扰慢病毒72h后,可见明显的荧光表达;较空病毒组和（或）对照组,干扰组ORAI1的表达降低（P < 0.01）;侵袭和迁移能力减弱（P < 0.01）;同种黏附能力增强（P < 0.05）;异种黏附能力减弱（P < 0.05）;血管生成能力减弱（P < 0.01）;SOCE内流峰值降低（P < 0.05）;p-ERK1/2、MMP-2和VEGF的表达降低（P < 0.01）、E-cadherin表达增加（P < 0.01）。  结论  ORAI1可以促进SW480的迁移和侵袭,其机制可能与SOCE增加有关。      

DADS下调肌动蛋白解聚因子抑制人结肠癌SW480细胞迁移与侵袭

  目的  研究二烯丙基二硫（diallyl disulfide, DADS）对人结肠癌SW480细胞肌动蛋白解聚因子（actin depolymerizing factor, ADF）表达及肿瘤细胞增殖、迁移与侵袭能力的影响。  方法  MTT、划痕愈合和侵袭实验分别检测DADS对SW480细胞增殖、迁移与侵袭的影响; RT-PCR、Western blot检测DADS对SW480细胞destrin与cofilin1表达的作用。  结果  MTT分析显示, 不同浓度DADS处理SW480细胞24、48、72、96 h后, 可呈时间-剂量依赖性抑制SW480细胞增殖（P < 0.05）。划痕愈合实验显示, 20、30、40、50 mg/L DADS处理48h后, 细胞迁移率分别为55.51%、34.72%、23.23%、12.87%, 较对照组75.86%与DMSO组72.58%明显降低（P < 0.05）, 表明DADS呈浓度依赖性抑制SW480细胞迁移。Transwell侵袭显示, 20、30、40、50 mg/L DADS作用24 h后, 穿膜细胞数呈剂量依赖性分别减少34.67%、50.54%、57.12%、64.59%（P < 0.05）。45mg/L DADS处理SW480细胞24、48 h后, destrin mRNA下调24.7%、60.1%, 蛋白下调30.1%、58.9%（P < 0.05）, 而处理前后cofilin1 mRNA与蛋白表达无显著性差异（P>0.05）。但SW480细胞处理1、15、30、60 min后, p-cofilin1表达呈时间依赖性分别下调18.9%、53.8%、62.1%、78.2%（P < 0.05）。  结论  DADS抑制人结肠癌SW480细胞迁移与侵袭可能与下调destrin和p-cofilin1有关。      

miR-7调控结直肠癌细胞对5-氟尿嘧啶敏感性的机制研究

目的 研究microRNA-7(miR-7)和5氟尿嘧啶(5-FU)联合对5-FU耐药结直肠癌(SW620/5-FU)细胞增殖、凋亡的影响,探讨miR-7表达对结直肠癌细胞5-FU敏感性的调控机制。方法 收集2019年5月—2021年7月手术切除的结直肠癌组织和癌旁组织;培养结直肠癌细胞系(HCT116、SW1116、DLD1、SW620)和正常结肠上皮细胞(NCM460),培养SW620细胞并构建5-FU耐药结直肠癌细胞(SW620/5-FU)。用RT-qPCR检测细胞和组织中miR-7的表达量。对SW620细胞和SW620/5-FU细胞均瞬时转染miR-7 mimic、miR-7 inhibitor和vector,分为miR-7 vector组(空载体组)、miR-7 mimic组(过表达组)和miR-7 inhibitor组(抑制组),以及与5-FU联合处理的miR-7 mimic+5-FU组和control组(空细胞组)。采用CCK-8法检测细胞增殖和5-FU半数抑制浓度(IC₅₀),流式细胞术检测各组细胞凋亡情况,Western blot检测各组的cle...     

USP7在结直肠癌组织中的表达及其通过调控Wnt/PCP通路对细胞增殖、凋亡的影响

目的:探讨泛素特异性蛋白酶7（ubiquitin specific protease 7,USP7）在结直肠癌组织中的表达及其通过调控Wnt/PCP通路对结直肠癌细胞SW480增殖、凋亡的影响和机制研究。方法:免疫组织化学法检测USP7在结直肠癌组织中的表达;qRT-PCR和Western blotting检测USP7在结直肠癌组织和结直肠癌细胞系中的表达;qRT-PCR和Western blotting检测沉默USP7在SW480细胞中的表达;细胞克隆形成实验检测SW480细胞增殖能力;Transwell迁移实验检测SW480细胞迁移能力;流式细胞术检测SW480细胞的凋亡情况;Western blotting检测Wnt/PCP通路相关蛋白的表达。结果:USP7在结直肠癌组织和结直肠癌细胞系中高表达（P＜0.05）;沉默USP7使SW480细胞中USP7的表达降低（P＜0.001）,细胞的增殖和迁移能力下降（P＜0.001）,细胞凋亡率增加（P＜0.001）;与shNC组相比,沉默USP7使Wnt7a蛋白和RhoA蛋白的表达水平显著下调（P＜0.001,P＜0.001）,JNK蛋白磷酸化程度显著降低（P＜0.01）。结论:USP7在结直肠癌组织和结直肠癌细胞系中高表达。沉默USP7抑制SW480细胞增殖、迁移并诱导细胞凋亡,可能与Wnt/PCP通路有关。     

Hyaluronan facilitates invasion of colon carcinoma cells in vitro via interaction with CD44

Hyaluronan (HA) and its biosynthetic enzymes, HA synthases (HAS1, 2, and 3) are thought to participate in cancer progression. We have shown previously that HA production and HAS3 expression are increased in metastatic colon carcinoma cells (SW620) when compared with cells isolated from a primary tumor (SW480). Because invasion of the extracellular matrix is a fundamental event in tumor growth and metastasis, we hypothesized that SW620 cells would show greater invasive capability than SW480 cells, that invasion is HA dependent, and that HA mediates invasion via interaction with a cell-surface receptor. Invasion into artificial basement membrane (Matrigel) was assessed in vitro. To assess HA functionality, HAS expression was inhibited in SW620 cells by transfection with antisense HAS constructs. Decreased HA secretion and retention in the transfectants were confirmed using competitive binding and particle exclusion assays. SW620 cells demonstrated greater invasion through Matrigel than did SW480 cells. Antisense transfection decreased Matrigel invasion by SW620 cells by >60%; addition of exogenous HA restored invasion. Because the cell-surface HA receptor CD44 has been implicated in cancer progression, HA-CD44 interaction was then inhibited by incubation with an anti-CD44 antibody. Anti-CD44 antibody impaired invasion into Matrigel by 95%. Taken together, these data suggest that pericellular HA is critical for colon carcinoma cell invasion and that this invasive capability is dependent on interaction with CD44.     

长链非编码RNARUNX1-IT1通过靶向miR-21对结直肠癌细胞迁移和侵袭的影响

目的：探讨长链非编码 RNA(lncRNA)RUNX1-IT1在结直肠癌中的表达及其对结直肠癌细胞侵袭和迁移的影响机制。方法：收集2017年1月—2019年1月于河北北方学院附属第一医院进行根治性手术切除的结直肠癌组织标本62例及其相应的癌旁正常组织标本,采用荧光定量PCR(qPCR)法检测结直肠癌组织和其相应的癌旁组织中lncRNA RUNX1-IT1的表达。并培养人结直肠癌细胞系(SW480、SW620、HCT-116)和人正常结直肠上皮细胞系(FHC),qPCR检测细胞系中 lncRNA RUNX1-IT1和 miR-21的表达水平,选择最适细胞系用于后续实验。通过上调或下调SW480细胞中lncRNA RUNX1-IT1和miR-21的表达后,采用qPCR检测lncRNA RUNX1-IT1和miR-21的表达水平,双荧光素酶报告基因实验验证lncRNA RUNX1-IT1和miR-21的靶向关系,Transwell实验检测SW480细胞侵袭和迁移能力。结果：qPCR检测结果显示,与癌旁正常组织比较,lncRNA RUNX1-IT1在结直肠癌组织中表达降低(P<0.05),而miR-21在结直肠癌组织中表达升高(P<0.05),且lncRNA RUNX1-IT1与miR-21在结直肠癌组织中的表达呈负相关(r=-0.275,P=0.031)。与正常结直肠 FHC细胞相比,lncRNA RUNX1-IT1在 3种结直肠癌细胞系中的表达水平均显著降低(均为P<0.05),而miR-21均显著升高(均为P<0.05),且SW480细胞最明显,故后续采用SW480细胞系进行实验。双荧光素酶报告基因实验证实lncRNA RUNX1-IT1靶向调节miR-21的表达;与对照组相比,过表达lncRNA RUNX1-IT1可抑制SW480细胞侵袭和迁移能力(P<0.05);抑制 miR-21表达可抑制 SW480细胞侵袭和迁移能力(P<0.05);上调 miR-21表达可逆转过表达 lncRNARUNX1-IT1对 SW480细胞侵袭和迁移的抑制作用(P<0.05)。结论：LncRNA RUNX1-IT1在结直肠癌中表达下调,lncRNARUNX1-IT1通过靶向miR-21调控SW480细胞侵袭和迁移。     

The expression and the functional roles of tissue factor and protease-activated receptor-2 on SW620 cells

Tissue factor (TF) is believed to play an important role in tissue repair, inflammation, angiogenesis, and tumor metastasis. Protease-activated receptors (PARs) are widely expressed on various cells including tumor cells and associated with many pathological mechanisms. In the present study, the expression of TF and PAR1, PAR2 on human colon cancer cells (SW620 and SW480) was investigated and their functional roles on the behavior of tumor cells were evaluated. It was demonstrated that SW620 and SW480 cells expressed TF at antigen, activity and mRNA levels. However, the highly metastatic cell line SW620 showed slightly higher TF expression than the low metastatic cell line SW480. The PAR2 antigen was strongly expressed on the membrane of SW620 cells, but not on SW480 cells. The PAR1 antigen was not observed in SW620 or SW480 cells, while PAR1 and PAR2 mRNA was detected in SW620 and SW480 cells. The migratory potential of SW620 was stronger than that of SW480 seen in Boyden chambers. PAR2 agonist (SLIGKV-NH2) and factor VIIa significantly stimulated SW620 cell proliferation, migratory activity, and interleukin 8 (IL-8) secretion compared to control. The stimulating effects of factor VIIa could be inhibited by anti-TF and anti-PAR2 but not anti-PAR1 antibodies. In summary, this study demonstrates that TF and PAR2 are strongly expressed on highly metastatic colonic tumor cells and are closely associated with the proliferation and migration of the cells. TF may elucidate its roles in colonic cancer invasion and metastasis via PAR2 pathway.     

CTHRC1增强结直肠癌细胞侵袭能力促进结直肠癌转移的机制研究

  目的  探讨胶原三股螺旋重叠蛋白1（collagen triple helix repeat containing 1,CTHRC1）对结直肠癌细胞生物学特性的影响及可能的调控机制。  方法  采用实时定量PCR技术检测上调或抑制miR-520d-5P的表达,探讨其对基因CTHRC1的调控作用,双荧光素酶实验验证miR-520d-5P与基因CTHRC1的3'UTR区之间是否相互结合。采用Western blot法检测6株不同结直肠癌细胞系及临床结直肠癌配对标本中基因CTHRC1的蛋白表达水平。构建稳定转染基因CTHRC1的结直肠癌细胞系;CCK-8、Transwell等方法检测稳定转染目的基因后结直肠癌细胞的增殖、侵袭能力的变化。  结果  在配对结直肠癌患者组织中发现,正常组织中miR-520d-5P的表达高于癌组织（P < 0.001）,基因CTHRC1的表达趋势相反（P < 0.001）,且两者的表达呈负相关。通过miR-520d-5P模拟类似物mimics及抑制物inhibitor的瞬时转染实验发现其对基因CTHRC1的蛋白表达有负向调节作用。双荧光素酶实验验证miR-520d-5P与CTHRC1的3'UTR之间存在相互结合。稳定转染基因CTHRC1后,细胞的增殖能力下降,但侵袭能力提高,差异具有统计学意义（P < 0.05）。在配对结直肠癌标本中,原发癌组织中基因CTHRC1的蛋白表达水平高于正常组织（P=0.003）。  结论  miR-520d-5P对基因CTHRC1蛋白表达具有负调控作用。基因CTHRC1可以增强结直肠癌细胞的侵袭能力,抑制结直肠癌细胞的增殖能力,且与miR-520d-5P具有临床相关性。      

TRPM8激活Calcineurin-NFATc3通路调节结肠癌细胞免疫逃逸

目的  探讨TRPM8调节结肠癌细胞免疫逃逸的机制。方法 采用qRT-PCR和Western blot检测结肠癌细胞系SW620和正常人结肠上皮细胞系CCD 841 CoN中TRPM8的表达水平。将干涉和过表达TRPM8载体TRPM8 siRNA和pcDNA3.1-TRPM8转染至SW620细胞，并设置相应对照组（Control siRNA组和pcDNA3.1组），用CCK-8、集落形成实验和流式细胞术检测细胞增殖和凋亡，酶标仪检测Calcineurin活性，Western blot检测Calcineurin-NFATc3信号通路相关蛋白的表达。采用CCK-8检测CD8⁺T细胞与SW620细胞共孵育的细胞活力，Western blot检测Calcineurin特异性抑制剂FK506处理SW620细胞后NFATc3和PD-L1蛋白表达。结果 与CCD 841 CoN细胞相比，TRPM8 mRNA和蛋白在SW620细胞中的表达均增加（P<0.01）。与Control siRNA组比较，干涉 TRPM8表达后SW620细胞活力、细胞增殖能力、Calcineurin活性，以及TRPM8、PD-L1和 NFATc3蛋白表达均降低（P<0.01），而细胞凋亡率和p-NFATc3蛋白表达均升高（P<0.01）；过表达TRPM8可增强细胞活力、细胞增殖能力和Calcineurin活性，上调TRPM8、PD-L1及NFATc3蛋白表达（P<0.01），下调p-NFATc3蛋白表达（P=0.002）。CD8⁺ T细胞与干涉TRPM8表达的SW620细胞共孵育后总细胞活力降低（P=0.002），而与过表达SW620细胞共孵育后总细胞活力增强（P=0.005）。FK506处理可抑制SW620细胞Calcineurin活性，下调NFATc3、PD-L1蛋白表达（P<0.01）。结论 TRPM8过表达可能通过激活Calcineurin-NFATc3信号通路而促进PD-L1表达，从而增强结肠癌细胞免疫逃逸能力，促进结肠癌细胞增殖。     

The leukocyte protein L-plastin induces proliferation, invasion and loss of E-cadherin expression in colon cancer cells

L-plastin, a gene that codes for an actin-bundling protein, is upregulated in the metastatic colon cancer cell line SW620, when compared to its premetastatic counterpart SW480. The aim of our study was to characterise the effect of L-plastin overexpression on SW480 cells in the context of the acquisition of a metastatic phenotype. SW480 cell lines overexpressing L-plastin were established (SW480-LPL). Analysis of these cell lines revealed significantly higher rates of proliferation and invasion than the control cell line (SW480-Ctrl). In addition, the expression of E-cadherin was lost from SW480-LPL cells. Treatment of SW480-LPL cells with cytochalasin B, an inhibitor of endocytosis, attenuated the loss of E-cadherin expression in these cells. The association of L-plastin overexpression with an increased rate of proliferation and invasion, and loss of E-cadherin expression in the SW480 colon cancer cell line indicates that L-plastin plays an important mechanistic role in colorectal cancer metastasis (supplementary material for this article can be found on the International Journal of Cancer website at http://www.interscience.wiley.com/jpages/0020-7136/suppmat/index.html).     

结肠癌来源外泌体通过HMGB1诱导中性粒细胞活化促进结肠癌细胞增殖、侵袭和迁移

目的 探讨结肠癌细胞来源外泌体在中性粒细胞和结肠癌细胞间的作用及其可能的作用机制.方法 体外培养中性粒细胞和结肠癌细胞SW480,分别用sh?NC和sh?HMGB1转染SW480细胞后分离相应外泌体SW480?exo、sh?NC?exo、sh?HMGB1?exo.各组外泌体分别处理中性粒细胞,同时设置PBS组;提取各组...