芪蛭降糖胶囊对糖尿病肾病大鼠肾组织BMP-7及TGF-β1/smads信号传导通路的影响

目的：观察芪蛭降糖胶囊对糖尿病肾病（diabetic nephropathy,DN）大鼠肾组织骨形成蛋白-7（bone morpho-genetic protein-7,BMP-7）及转化生长因子（transforming growth factor,TGF）-β1/Smads信号传导通路的影响。方法：48只清洁级雄性Wistar大鼠按体重随机抽取40只,采用切除右肾加腹腔注射链脲菌素（ streptozotocin,STZ）的方法制备DN模型,另外8只大鼠行右肾假切术。造模成功后按尿微量白蛋白（ microAlbumin,mAlb）高低,两头随机抽取分为模型组、缬沙坦对照组、芪蛭降糖胶囊低剂量组、芪蛭降糖胶囊高剂量组。成模2 d起各组给予相应浓度和剂量的药物,给药12周时观察DN大鼠尿mAlb、α1微球蛋白（α1-MG）和血清肌酐（ Scr）、尿素氮（ BUN）。然后,处死所有动物,肾组织行HE染色、PAS染色和Masson染色,观察肾组织病理变化并半定量计算肾小管损伤指数（tubulointerstitial injury index,TII）,免疫组化法检测BMP-7、TGF-β1、Smad2、Smad7在肾组织的表达。结果：给药12周后,模型组大鼠尿 mAlb、α1-MG较假手术组显著增多（ P 〈0.01）,3个治疗组DN大鼠尿mAlb、α1-MG较模型组明显减少（P〈0.01）,2个中药治疗组的上述4项指标亦较对照组降低（P〈0.05-0.01）,且呈剂量依赖性。模型组大鼠Scr、BUN亦较假手术组显著升高（P〈0.01）,对照组与模型组相比无明显变化（P〉0.05）,但2个中药治疗组较模型组明显降低（P〈0.05-0.01）。 HE染色显示,3个治疗组大鼠肾组织病理损害明显减轻,2个中药治疗组大鼠肾组织病理改善比对照组更明显;PAS染色进行TII评分发现,3个治疗组大鼠TII显著低于模型组（P〈0.01）,2个中药治疗组TII明显低于对照组（P〈0.05-0.01）;Masson染色观察发现,3个实验组大鼠肾小管间质病变明显轻于模型组,2个中药治疗组大鼠肾小管间质病变轻于对照组;免疫组化法染色并对其灰度值测定发现,3个治疗组大鼠TGF-β1、Smad2在肾组织的表达低于模型组（P〈0.01）,2个中药治疗组大鼠TGF-β1、Smad2在肾组织的表达低于对照组（P〈0.05-0.01）;3个治疗组大鼠BMP-7、Smad7在肾脏组织的表达高于模型组（P〈0.01）,2个中药治疗组大鼠BMP-7、Smad7在肾组织的表达高于对照组（P〈0.05-0.01）。结论：芪蛭降糖胶囊可能通过干预BMP-7/TGF-β1/Smads信号转导通路抑制了TGF-β1信号的细胞内转导,而对DN肾间质纤维化起到治疗作用。     

骨成形蛋白-7在大鼠肾小管间质损害中的作用

目的观察单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠中骨成形蛋白-7(BMP-7)在肾小管间质中的表达部位、动态变化及其与肾小管间质损害的关系。方法60只Wistar大鼠随机分为正常大鼠组、假手术组和单侧输尿管梗阻组,分别于术后1d、3d、7d、14d处死。采用RT-PCR方法检测BMP-7mRNA、TGF-β1.mRNA表达水平,免疫组化方法检测肾小管间质中BMP-7、TGF-β1、α-SMA的蛋白定位、表达及其与输尿管梗阻后肾小管间质损害的关系。结果与对照组相比,BMP-7mRNA于术后第1天即出现表达下降并随梗阻时间延长递减;而TGF-β1mRNA则随梗阻时间延长而递增(P均<0.05)。BMP-7蛋白在对照组中高度表达,主要分布在肾小管及肾间质,肾小球内基本无表达。在梗阻组随着肾间质损害的加重,BMP-7蛋白表达呈进行性下降,第14天表达量最弱,几乎没有明显的阳性表达,而TGF-β1、α-SMA蛋白表达则逐渐增加(P均<0.01)。BMP-7与TGF-β1蛋白表达阳性面积成显著负相关(r=-0.875,P<0.05)。BMP-7与α-SMA蛋白表达阳性面积亦成显著负相关(r=-0.843,P<0.05)。结论BMP-7于肾小管间质病变早期即出现表达下调,早于肾间质纤维化的出现,其表达量与肾间质TGF-β1、α-SMA表达负相关且随间质病变进展进行性下降。BMP-7表达下调可能参与介导肾小管间质损害的发生发展。     

骨形态发生蛋白-7在幼年大鼠肾小管间质损伤中的表达及意义

目的：探讨单侧输尿管梗阻（UUO）幼年大鼠肾间质纤维化形成过程中骨形态发生蛋白-7（BMP-7）的表达趋势及其与转化生长因子-β1（TGF-β1）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的相关关系;观察血管紧张素转换酶抑制剂（ACEI）和血管紧张素受体拮抗剂（ARB）的干预作用。方法：采用单侧输尿管结扎制备UUO模型。3～4周龄幼年Wistar雄性大鼠随机分为对照组、模型组和干预组。于实验第3、7、14、28天取大鼠8只处死。HE及Masson染色观察肾组织的病理改变;免疫组化半定量检测各组大鼠肾组织BMP-7、TGF-β1及α-SMA蛋白表达。了解BMP-7与TGF-β1、α-SMA、肾间质纤维化程度的关系。结果：随梗阻时间延长,模型组BMP-7表达逐渐下降,TGF-β1、α-SMA表达进行性增高,干预组BMP-7表达较模型组显著增加（P〈0.05）;TGF-β1、α-SMA表达较模型组明显减少（P〈0.05）。模型组肾小管间质TGF-β1、α-SMA表达明显增高（P〈0.05）,BMP-7表达显著减少（P〈0.05）。与模型组相比,干预组肾小管间质TGF-β1、α-SMA表达显著减少（P〈0.05）,而BMP-7表达显著增多（P〈0.05）。BMP-7与TGF-β1、α-SMA、肾间质纤维化程度成负相关（r分别为-0.844、-0.787、-0.952,P均〈0.01）。结论：BMP-7表达减少伴随着肾小管上皮细胞转分化出现,提示BMP-7可能具有维持小管上皮细胞表型作用。苯那普利联合氯沙坦可能通过下调TGF-β1、α-SMA蛋白的异常高表达,上调BMP-7蛋白的异常低表达,直接或间接负性调控肾小管上皮细胞转分化,阻止肾间质纤维化进展。     

连黄降浊颗粒对自发性高血压大鼠肾组织TGF-β_1/smads信号传导通路的影响

目的:观察连黄降浊颗粒对自发性高血压大鼠(spontaneous hypertension rat,SHR)肾组织转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β_1/smads信号传导通路的影响。方法:雄性10周龄SHR40只,按体重随机分为4组:模型组、苯那普利对照组(对照组)、连黄降浊颗粒低剂量组(低剂量组)、连黄降浊颗粒高剂量组(高剂量组)各10只,采取切除所有大鼠右肾的方法制备高血压性肾损害模型。另取10只同周龄Wistar-Kyoto(WKY)大鼠同样切除右肾,作为正常血压对照组(WKY组)。造模1周后给予相应浓度和剂量的药物。给药第4周、8周末观察大鼠尿微量白蛋白(m Alb)、尿微量白蛋白与尿肌酐比值(m Alb/Ucr)和血清肌酐(Scr)。于第8周末处死所有动物,取其肾组织行HE染色、PAS染色和Masson染色,观察病理变化并半定量计算肾小管损伤指数(tubulointerstitial injury index,TII),免疫组化法检测骨形成蛋白-7(bone morphogenetic protein,BMP-7)、TGF-β_1、smad2、smad7在肾组织的表达。结果:造模1周以及给药第4周、第8周,4组SHRm Alb、m Alb/UCr、Scr随时间延长呈逐渐升高趋势,且差异均与WKY组差异有统计学意义(P0.01),而给药前4组SHR之间上述指标差异均无统计学意义(P0.05)。给药4周后,SHR中3个治疗组m Alb、m Alb/UCr、Scr显著低于模型组(P0.05),高剂量组明显低于对照组(P0.05)。8周时组间比较,低剂量组、高剂量组SHR上述指标明显低于对照组(P0.05),高剂量组低于低剂量组(P0.05)。HE染色、PAS染色显示WKY组大鼠肾组织形态大致正常。HE染色显示,3个治疗组SHR肾组织损害较模型组明显减轻,高剂量组病理改善更明显。PAS染色进行TII评分发现,3个治疗组大鼠TII显著低于模型组(P0.05),高剂量组明显低于模型组和低剂量组(P0.05)。TGF-β_1和Smad2在WKY组呈无或弱阳性,而BMP-7和Smad7呈强阳性表达。与模型组相比,TGF-β_1、Smad2在3个治疗组大鼠肾组织的表达下调(P0.05),2个中药治疗组大鼠肾组织的表达低于对照组(P0.05);3个治疗组BMP-7、smad7在肾脏组织的表达上调(P0.05),2个中药治疗组大鼠肾组织的表达高于对照组(P0.05)。结论:连黄降浊颗粒可能通过干预BMP-7/TGF-β_1/Smads信号转导通路抑制了TGF-β_1在肾组织的表达,而对SHR肾间质纤维化起到了治疗作用。     

p38 MAPK、NF-кB在肾小管间质纤维化中的作用研究

目的:探讨p38MAPK、NF-κB在单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾小管间质纤维化发生中的作用.方法:将30只雌性SD大鼠随机分为假手术组及模型组,模型组行UUO术.术后第5、10、15d分别处死两组中的5只大鼠,取左肾行HE和Masson染色,并用免疫组化方法检测肾小管间质中TGF-β1、p38MAPK、P-p38MAPK、NF-кB的表达.结果:HE和Masson染色显示模型组大鼠肾小管间质增宽,小管间质细胞增多,小管基底膜增厚皱缩纤维化,随时间进展,病变愈加明显(P<0.01).免疫组化结果显示:假手术组大鼠肾小管间质中仅有少量TGF-β1、p38MAPK、P-p38MAPK、NF-кB表达;模型组大鼠梗阻侧肾小管间质中TGF-β1、p38MAPK、P-p38MAPK、NF-кB表达明显增加(P<0.01).结论:p38MAPK、NF-кB可能参与UUO大鼠肾小管间质纤维化过程.     

美沙拉嗪对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质NF-κB和TGF-β1表达的影响

目的 观察单侧输尿管梗阻大鼠模型肾间质核因子κB (NF-κB)、转化生长因子β1 (TGF-β1)的表达变化,探讨美沙拉嗪干预后对其表达的影响.方法 将30只雌性SD大鼠随机分为假手术组(SOR组)、模型组(UUO组)、美沙拉嗪治疗组(MES组),每组10只.建立单侧输尿管梗阻大鼠模型72 h后灌胃给药:MES组给予美沙拉嗪(200 mg·kg-1 ·d-1)灌胃给药;SOR组、UUO组给予等量生理盐水灌胃给药.建模成功后第10天检测各组血肌酐、尿素氮,并取梗阻侧肾组织,行HE及Masson染色观察肾脏病理变化;免疫组织化学检测NF-κB p65和TGF-β1在肾间质的表达和变化.结果 ①UUO组术后第10天梗阻侧肾脏肾小管间质损害指数明显高于SOR组(P＜0.01),MES组则低于UUO组(P＜0.05).②UUO组大鼠肾间质NF-κB p65及TGF-β1表达增加,明显高于SOR组(P＜0.01),MES组则低于UUO组(P＜0.05).结论 单侧输尿管梗阻大鼠模型肾脏存在肾小管间质的炎症损伤和纤维化,美沙拉嗪通过抑制NF-κB p65和TGF-β1表达而减轻肾间质炎性损害和纤维化.     

祛毒颗粒对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的干预作用

目的：观察祛毒颗粒对单侧输尿管梗阻（unilateral ureteral obstruction,UUO）大鼠肾间质纤维化的干预作用,并探讨其作用机制。方法：将90只雄性Wistar大鼠随机分为5组：假手术组、模型组、尿毒清组（对照组）、祛毒颗粒低剂量组（低剂量组）、祛毒颗粒高剂量组（高剂量组）,每组18只,除假手术组,其余各组用单侧输尿管梗阻法（UUO）建立肾间质纤维化动物模型,术前1天起各组给予相应浓度和剂量的药物,分别在术后第3天、7天、14天分批处死大鼠,检测大鼠尿N-已酰-β-氨基葡萄糖苷（NAG）酶、血肌酐（Scr）和尿素氮（BUN）变化,梗阻侧肾组织行HE染色和Masson染色,HE染色观察肾组织病理变化并半定量计算肾小管损伤指数（tubulointerstitial injuryindex,TII）,Masson染色测定肾间质胶原面积,免疫组化法检测结缔组织生长因子（CTGF）、Ⅰ型胶原（ColⅠ）、肝细胞生长因子（HGF）、骨形成蛋白（BMP）-7在肾组织的表达。结果：与模型组及对照组相比,祛毒颗粒能明显降低UUO大鼠术后14d的尿NAG酶、Scr、BUN（P〈0.05）;对梗阻侧肾组织HE染色进行TII评分发现,不同时间点,2个试验组大鼠肾小管损伤指数低于模型组和对照组（P〈0.05～0.01）;Masson染色测定肾间质胶原面积,2个实验组大鼠肾间质胶原面积少于模型组和对照组（P〈0.05～0.01）;免疫组化法染色发现,与模型组和对照组相比,2个试验组大鼠CTGF、ColⅠ在肾组织的表达下调（P〈0.05）,HGF、BMP-7在肾脏组织的表达上调（P〈0.05）。结论：祛毒颗粒具有改善肾间质纤维化的作用,其机制可能与下调UUO大鼠致纤维化因子CTGF、ColⅠ在肾脏的表达,上调抗纤维化因子HGF、BMP-7在肾脏的表达有关。     

地龙组分对UUO大鼠BMP-7、Smad6、TGF-β_1表达的影响

目的:研究地龙组分对单侧输尿管结扎大鼠BMP-7、Smad6、TGF-β_1表达的影响,探讨地龙组分延缓肾纤维化的可能机制。方法:健康雄性wistar大鼠60只,随机分组:假手术组+模型组+地龙低剂量组+地龙高剂量组。采用单侧输尿管结扎法复制肾间质纤维化大鼠模型,取梗阻侧肾组织标本,免疫组织化学方法检测肾组织BMP-7、Smad6、TGF-β_1的表达。结果:地龙治疗组大鼠的肾间质纤维化有所改善;与模型组相比,地龙治疗组大鼠肾组织BMP-7、Smad6表达增多,TGF-β_1表达下降(P0.05)。结论:地龙组分通过上调BMP-7、Smad6表达,下调TGF-β_1的表达,来延缓肾纤维化的进程。     

防己黄芪汤对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织TGF-β1、BMP-7的影响

目的：研究防己黄芪汤对肾组织转化生长因子β1（TGF-β1）、骨形态发生蛋白-7（BMP-7）影响,进一步探讨其祛风化湿的作用机制。方法：采用大鼠单侧输尿管结扎（UUO）模型,予防己黄芪汤低、中、高剂量干预,设蒙诺对照组。肾组织切片染色观察病理,免疫组织化学方法、逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测TGF-β1、BMP-7蛋白及基因表达水平。结果：防己黄芪汤干预组大鼠的肾间质纤维化有所改善,与模型组比较,其肾组织TGF-β1表达下降、BMP-7表达上调。结论：防己黄芪汤下调UUO大鼠肾组织TGF-β1、上调BMP-7的表达,可能是其改善肾间质纤维化、发挥祛风化湿作用的机制之一。     

p38 MAPK、NF-κB在肾小管间质纤维化中的作用研究

目的：探讨p38MAPK、NF-κB在单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾小管间质纤维化发生中的作用。方法：将30只雌性SD大鼠随机分为假手术组及模型组。模型组行UUO术。术后第5、10、15d分别处死两组中的5只大鼠．取左肾行HE和Masson染色。并用免疫组化方法检测肾小管间质中TGF-β1、p38MAPK、P- p38MAPK、NF-κB的表达。结果：HE和Masson染色显示模型组大鼠肾小管间质增宽．小管间质细胞增多,小管基底膜增厚皱缩纤维化,随时间进展,病变愈加明显(P＜0．01)。免疫组化结果显示：似手术组大鼠肾小管间质中仅有少量TGF-β1、p38MAPK、P-p38MAPK、NF-κB表达；模型组大鼠梗阻侧肾小管间质中TGF-β1、p38MAPK、P-p38MAPK、NF-κB表达明显增加(P＜0．01)。结论：p38MAPK、NF-κB可能参与UUO大鼠肾小管间质纤维化过程。     

输尿管逆向注射重组腺病毒介导的BMP-7对大鼠肾间质纤维化的作用

目的：构建出具有转染后能表达活性的骨形成蛋白-7（BMP-7）的重组腺病毒,将其直接导入肾纤维化大鼠肾脏,观察其抗肾纤维化的作用。方法：无菌级雄性SD大鼠48只随机分为假手术组、单侧输尿管梗阻（UUO组）组、BMP-7治疗组,以免疫组织化学方法检测肾组织中α-SMA蛋白的表达水平,以逆转录-多聚酶链反应技术检测TGF-β1的表达水平。结果：免疫组化结果示：BMP-7组肾小管间质α-SMA表达显著减少（P〈0.05）。RT-PCR结果显示：TGF-β1随梗阻时间延长而逐渐增多,第28天,有所下降,但无统计学意义。在治疗组,BMP-7组比同一识相点UUO组TGF-β1表达减少（P〈0.05）。结论：BMP-7能够明显减轻肾间质纤维化,下调TGF-β1的表达,从而发挥其在单侧输尿管结扎模型中对肾脏的保护作用,延缓和抑制了肾间质纤维化的发展。     

单侧输尿管梗阻大鼠肾脏转化生长因子β受体亚型表达的变化

目的 探讨转化生长因子β（TGF-β）Ⅰ型受体（RⅠ）、Ⅱ型（RⅡ）受体以及下游Smad蛋白在单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠模型肾脏中表达及意义。 方法 90只雌性Wistar大鼠随机分为正常对照组（CON组）、假手术组（SOR组）和单侧输尿管梗阻组（UUO组）,分别于术后1、3、7、14、21 d处死,检测各组大鼠肾功能;PAS与Masson染色观察大鼠肾间质病理形态改变;实时定量PCR基因芯片分析正常大鼠和肾间质纤维化大鼠肾组织TGF-βⅠ、Ⅱ、Ⅲ型受体及Smad蛋白家族表达。筛选出差异表达的受体亚型,进一步应用实时荧光定量PCR、蛋白免疫印迹法、免疫荧光法检测和验证筛选出的差异受体亚型在不同分期肾间质纤维化大鼠肾组织的分布和表达。 结果 与CON组相比,UUO组大鼠的Scr及BUN于术后3 d开始升高（P < 0.05）,第21天达峰值（P < 0.01）;UUO组术后3 d肾间质可见明显炎性细胞浸润;14 d后出现明显肾小管萎缩;21 d可见明显肾间质纤维化。UUO组肾组织TGF-βⅠ型受体ALK-5、ALK-7和TGF-βRⅡ的mRNA表达于术后3 d上升并随梗阻时间延长逐渐增加（P < 0.05）,于14 d达到峰值（均P < 0.01）;ALK-6的mRNA表达于术后3 d下降（P < 0.05）并随梗阻时间延长逐渐减少,于14 d达谷值（P < 0.01）。ALK-5、ALK-6、ALK-7和TGF-βRⅡ蛋白表达与基因表达一致。Smad2/3及磷酸化（p）-Smad2/3的蛋白表达于术后3 d上升（均P < 0.05）并随梗阻时间延长逐渐增加,于14 d达到峰值（均P < 0.01）。 结论 在肾间质纤维化进展中不同TGF-β受体亚型存在不同的变化规律并与肾间质纤维化进展密切关联。     

丹酚酸A对慢性肾衰竭大鼠BMP-7/Smads/TGF-β_1信号通路的调控作用

目的:观察丹酚酸A对5/6肾切除(Platt法)大鼠肾组织骨形态发生蛋白-7(BMP-7)、转化生长因子β_1(TGF-β_1)/Smads信号通路的调节作用。方法:将40只大鼠随机分为:假手术组、模型组、丹酚酸A组、科素亚组,采用Platt法复制慢性肾衰竭大鼠模型,术后8周分别观察大鼠肾组织BMP-7、Smad6、TGF-β_1蛋白及基因的表达,p-Smad2/3、p-Smad1/5/8的蛋白表达。结果:各治疗组大鼠肾组织BMP-7、Smad6、p-Smad1/5/8的表达较模型组升高(P0.01 or P0.05),TGF-β_1、p-Smad2/3的表达较模型组明显减弱(P0.01 or P0.05)。结论:丹酚酸A可能是通过诱导BMP-7、Smad6、p-Smad1/5/8蛋白表达,抑制p-Smad2/3蛋白表达,调节BMP-7/Smads/TGF-β_1信号通路,抑制了TGF-β_1信号向细胞核内转导的通路,从而抑制细胞外基质增生,起到延缓肾纤维化的作用。     

绞股蓝总皂苷防治单侧输尿管结扎大鼠肾间质纤维化的实验研究

目的探讨绞股蓝总皂苷(GPs)对单侧输尿管结扎(UUO)大鼠肾组织结缔组织生长因子(CTGF)表达及肾间质纤维化的影响。方法采用UUO大鼠模型,将大鼠随机分为3组假手术组、模型组、GPs组。假手术组和模型组仅给予标准饲料30g,GPs组于术前3d至术后9d每天给予GPs200mg·kg-1·d-1灌胃,第9d处死各组大鼠。免疫组化法检测各组肾组织CTGF、转换生长因子β1(TGF-β1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;RT-PCR方法检测各组CTGFmRNA含量;Masson染色评定各组肾小管间质损害程度。结果模型组CTGF、TGF-β1、α-SMA的表达及肾小管间质损伤指数明显高于假手术组(P<0.01),而GPs组各项指标明显低于模型组(P<0.01)。各项指标作相关分析,CTGF与肾小管间质损伤指数(r=0.788,P<0.01)、TGF-β1(r=0.879,P<0.01)、α-SMA(r=0.940,P<0.01)为正相关关系。结论绞股蓝总皂苷可以抑制肾纤维化时结缔组织生长因子表达,从而遏制肾纤维化的进展。     

肾衰泻浊丸对慢性肾衰竭大鼠BMP-7／Smads／TGF—β1信号转导通路的影响

目的：通过实验研究观察肾衰泻浊丸对腺嘌呤致慢性肾衰竭（CRF）大鼠BMP-7／Smads／TGF-β1岛信号转导通路的影响,探讨肾衰泻浊九延缓CRF进展及抗肾间质纤维化的机制。方法：采用腺嘌呤致CRF大鼠模型,观察实验大鼠治疗后血清BUN、Scr的变化及肾脏病理变化;采用免疫组织化学法检测肾组织中TGF-β1,Smad6及BMP-7蛋白表达;采用WesternBlot法检测肾组织内的Smad6、BMP-7蛋白的表达,采用半定量RT—PCR检测肾组织内的TGF-β1 mRNA的表达水平。结果：肾衰泻浊丸能够明显降低CRF大鼠血清BUN、Scr水平,与对照组比较差异有统计学意义;能够减轻肾小管间质损伤;能够降低肾组织中TGF-β1蛋白的表达,增加Smad6,BMP-7蛋白的表达,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）;能够下调CRF大鼠肾组织中TGF—β1 mRNA的表达,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：肾衰泻浊丸可能是通过升高Smad6,BMP-7蛋白的表达,降低TGF-β1的蛋白表达,从而抑制了TGF-β1信号向细胞核内转导的通路;肾衰泻浊丸通过影响BMP-7／Smads／TGF-β1信号通路的转导而减轻肾间质纤维化可能是其延缓CRF进展的机制之一。     

转化生长因子-β1 在梗阻性肾病大鼠肾小管间质纤维化中的作用

目的探讨转化生长因子 (TGF) -β1在梗阻性肾病(UUO)大鼠梗阻肾中致肾小管间质进行性纤维化的作用.方法成年SD大鼠制成UUO模型,在梗阻后3、7、10、14 d处死.免疫组织化学染色法对其肾内α-平滑肌肌动蛋白(SMA)沉积量及侵入肾内的单核巨噬细胞数进行分析;逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)对大鼠TGF-β1 mRNA、金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP)-1 mRNA及IV型胶原(Col-IV) mRNA转录量进行分析.结果随梗阻时间延长,侵入梗阻肾内单核巨噬细胞数、α-SMA沉积、Col-IV mRNA及TIMP-1 mRNA含量增加;示肾小管间质存在进行性纤维化.同时TGF-β1 mRNA含量明显增加,差异统计学意义(P<0.05).结论 TGF-β1促使梗阻性肾病大鼠肾小管间质进行性纤维化.     

和解聚散方对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的防治作用

目的：研究和解聚散方对单侧输尿管梗阻（unilateral ureteral obstruction,UUO）大鼠肾间质纤维化的防治作用。方法：采用UUO建立大鼠肾间质纤维化模型,随机分为模型组、贝那普利组和和解聚散方组,另设假手术组;术后7d、14d、21d分批取材,检测血清肌酐、尿素氮,采用HE和Masson染色检测肾脏病理、免疫组化法检测肾组织TGF-β1的表达。结果：与模型组相比,和解聚散方组血清尿素氮、血清肌酐水平均降低（P〈0.05）,肾小管损害百分比和肾间质损害分值较低（P〈0.05）,肾组织TGF-β1表达减少（P〈0.05）。结论：和解聚散方可以降低尿素氮、血清肌酐水平,减轻大鼠肾间质纤维化的程度,下调UUO大鼠肾组织TGF-β1的表达,验证了和解聚散法的正确性。     

肾纤康对肾间质纤维化大鼠Smad信号通路的影响

目的：研究肾纤康对单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠肾组织转化生长因子β1（TGF-β1）、Smad2、Smad3、Smad7表达的影响,探讨肾纤康防治肾间质纤维化的作用机制。方法：将40只大鼠随机分为4组,即假手术组、模型组、肾纤康组、苯那普利组,采用左侧输尿管梗阻方法造模,用免疫组织化学方法作肾间质TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7检测,并观察肾脏病理学变化。结果：模型组和各治疗组肾间质TGF-β1、Smad2、Smad3面积比增加,Smad7面积比减少,与假手术组相比差异有统计学意义（P〈0.05）。与模型组相比,药物治疗组肾间质TGF-β1、Smad2、Smad3面积比减少,Smad7面积比增加,差异有统计学意义（P〈0.05）。肾纤康组与苯那普利组肾间质TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7面积比差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：肾纤康通过下调TGF-β1、Smad2、Smad3在肾间质的表达及增加Smad7的表达而抑制单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠肾间质纤维化,与肾纤康可调节TGF-β1/Smad信号转导通路有关,其作用与苯那普利差异无统计学意义。     

补体C5α受体和转化生长因子-β1在大鼠肾间质纤维化不同阶段肾组织的表达

目的：动态观测补体C5α受体（C5αR）和转化生长因子β1（TGF-β1）在单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠肾组织的表达变化,从而探讨C5αR在。肾小管间质纤维化发生中的作用机制。方法：将36只雄性SPF级SD大鼠随机分为模型组及假手术组。模型组行UUO术,假手术组仅游离输尿管,不结扎。术后第5、10、15天分别处死每组中的6只大鼠,取梗阻侧肾行苏木精-伊红（H—E）和Masson染色,并用免疫组织化学ELiVision^TMplus法检测肾小管间质中C5αR和TGF-β1的表达。结果：模型组第5天肾小管扩张,小管间质细胞部分变性,第10天小管间质细胞可见坏死,间质纤维增多,第15天可见弥漫的肾小管基底膜增厚皱缩,纤维化明显（P〈0．05）。免疫组织化学结果显示：假手术组大鼠肾小管间质中仅有少量TGF-β1和C5αR表达,随时间延长未见明显变化;模型组大鼠梗阻侧肾组织中C5αR和TGF-β1的表达随时间进展而明显增加（P〈0．05）,其中C5αR在梗阻早期（第5～10天）表达明显增多,而晚期（第11～15天）仅轻微增多。结论：模型组实验大鼠梗阻侧。肾组织中C5αR和TGF-β1表达随着梗阻时间延长而上调,提示C5αR可能在。肾间质纤维化早期通过介导TGF-β1的上调发挥作用。     

怡肾丸对单侧输尿管结扎模型大鼠肾脏TGF-β1及P38MAPK表达的影响

目的:观察不同时相单侧输尿管结扎(UUO)模型大鼠肾脏组织,通过测定肾脏组织TGF-β1及丝裂原活化蛋白激酶p38(P38MAPK)的含量,探讨怡肾丸是否是通过阻断P38MAPK信号传导通路来延缓肾间质纤维化的发展从而达到保护肾脏的目的。方法:采用UUO诱导的肾间质纤维化模型,分别于造模后3、7、14d三个时间点处死该时间点大鼠,并用免疫组化法检测大鼠肾脏TGF-β1及P38MAPK的表达。结果:(1)怡肾丸组对改善大鼠活动等均优于其余各组;(2)通过采用HE及Masson染色观察UUO大鼠肾小管间质组织形态学的改变;(3)免疫组化结果提示怡肾丸组及依那普利组肾小管上皮细胞TGF-β1及P38MAPK的表达低于模型组。结论:(1)P38MAPK的活性在大鼠梗阻性肾病组织中随时间增加明显增高,提示P38MAPK的活化与肾间质纤维化有正相关。(2)怡肾丸可能通过抑制TGF-β1及P38MAPK的表达,减轻炎症反应和纤维化程度,从而达到保护肾脏、延缓肾间质纤维化的作用。