氯沙坦含药血清对肾小管上皮-间充质转分化的抑制作用

目的:肾小管上皮细胞-间充质转分化(epithelial-to-mesenchymal transition,EMT)是肾小管间质纤维化(tubulointerstitial fibrosis,TIF)的关键发病机制,而肾小管间质纤维化是慢性肾脏病进展为终末期肾病(end-stage renal dis-ease,ESRD)的重要共同通路。血管紧张素ⅡAT1受体阻断剂氯沙坦对于延缓慢性肾脏病进展有一定的作用,但其能否抑制肾小管上皮细胞-间充质转分化继而抑制肾间质纤维化尚不清楚。本实验通过体外TGF-β1诱导HK-2细胞向间充质细胞转分化,观察氯沙坦对肾小管上皮细胞-间充质转分化的抑制作用及其可能机制。方法:在体外使用TGF-β1诱导HK-2细胞表型改变并给予氯沙坦大鼠含药血清干预。氯沙坦大鼠含药血清按照既定的操作程序获取。HK-2细胞行E-cadher-in,Vimentin,β-catenin和ZEB1免疫荧光染色及Western blot分析。结果:TGF-β1诱导肾小管上皮细胞HK-2转化为间充质细胞,细胞形态由卵圆形变为长梭形,上皮标志物E-cadherin表达下调,间充质标志物Vimentin表达上调,上皮细胞-间充质转分化相关分子β-catenin在胞浆、胞核的积聚增多以及ZEB1表达增强;氯沙坦大鼠含药血清能够部分抑制TGF-β1诱导的HK-2转化为间充质表型,并维持HK-2细胞的上皮表型,抑制E-cadherin的表达下调和Vimentin的表达上调;同时抑制β-catenin在胞浆、胞核的积聚以及ZEB1的表达。结论:研究结果提示氯沙坦可抑制体外的肾小管上皮细胞-间充质转分化,其机制可能与氯沙坦抑制β-catenin/ZEB1通路有关。     

丹酚酸B对输尿管梗阻大鼠肾小管上皮细胞转分化的影响

目的:探讨丹酚酸B对输尿管梗阻大鼠肾小管上皮细胞转分化影响及作用机制.方法:雄性SD大鼠,建立单侧输尿管梗阻模型(UUO).设假手术组、模型组、治疗组(丹酚酸B 30 mg·kg-1·d-1)术后第9天处死各组大鼠.采用光镜观察肾间质纤维化、炎细胞浸润,免疫组化观察肾组织转化生长因子-β1(TGF-β1)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Vimentin蛋白表达的变化.结果:(1)治疗组大鼠肾间质纤维化程度较模型组明显减轻;(2)UUO模型第9天时大鼠肾组织TGF-β、α-SMA和Vimentin表达明显增强,炎细胞浸润明显增加.采用丹酚酸B治疗后,肾组织TGF-β1、α-SMA和Vimentin表达的异常增强能得到有效抑制,炎细胞浸润明显减少.结论:丹酚酸B具有减轻肾组织纤维化的作用,而这一作用与其能有效抑制炎细胞浸润和TGF-β1过度表达,进一步阻押肾小管上皮细胞转分化(EMT)有关.     

泽泻对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织补体C_3及肾纤维化的影响

目的：探讨泽泻对单侧输尿管梗阻（unilateral uretreal obstructire,UUO）大鼠肾小管上皮细胞间充质转分化（epithelial-to-mesenchymal transition,EMT）的作用及其机制。方法：采用单侧输尿管梗阻方法制作大鼠肾间质纤维化模型。30只雄性SD大鼠随机分为假手术组、UUO组和泽泻治疗组。术前3d开始,泽泻治疗组给予中药泽泻9g·kg-1·d-1饮片溶于适量生理盐水中灌胃用。术后14d处死大鼠,观察梗阻侧肾组织病理损害和间质纤维化,免疫组化检测α-SMA、E-cadherin、补体成分C3在肾组织中的表达。结果：UUO组大鼠肾间质纤维化明显,泽泻干预后肾间质纤维化程度减轻。免疫组化结果表明UUO组大鼠C3和α-SMA表达明显增加,E-cadherin表达明显减少;泽泻干预后,C3和α-SMA的表达明显低于UUO组（P〈0.05）,E-cadherin的表达高于UUO组（P〈0.05）。结论：UUO大鼠肾小管上皮细胞的C3表达增加,中药泽泻能减轻UUO大鼠C3的表达,抑制肾小管上皮细胞EMT。     

骨形态发生蛋白-7在幼年大鼠肾小管间质损伤中的表达及意义

目的：探讨单侧输尿管梗阻（UUO）幼年大鼠肾间质纤维化形成过程中骨形态发生蛋白-7（BMP-7）的表达趋势及其与转化生长因子-β1（TGF-β1）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的相关关系;观察血管紧张素转换酶抑制剂（ACEI）和血管紧张素受体拮抗剂（ARB）的干预作用。方法：采用单侧输尿管结扎制备UUO模型。3～4周龄幼年Wistar雄性大鼠随机分为对照组、模型组和干预组。于实验第3、7、14、28天取大鼠8只处死。HE及Masson染色观察肾组织的病理改变;免疫组化半定量检测各组大鼠肾组织BMP-7、TGF-β1及α-SMA蛋白表达。了解BMP-7与TGF-β1、α-SMA、肾间质纤维化程度的关系。结果：随梗阻时间延长,模型组BMP-7表达逐渐下降,TGF-β1、α-SMA表达进行性增高,干预组BMP-7表达较模型组显著增加（P〈0.05）;TGF-β1、α-SMA表达较模型组明显减少（P〈0.05）。模型组肾小管间质TGF-β1、α-SMA表达明显增高（P〈0.05）,BMP-7表达显著减少（P〈0.05）。与模型组相比,干预组肾小管间质TGF-β1、α-SMA表达显著减少（P〈0.05）,而BMP-7表达显著增多（P〈0.05）。BMP-7与TGF-β1、α-SMA、肾间质纤维化程度成负相关（r分别为-0.844、-0.787、-0.952,P均〈0.01）。结论：BMP-7表达减少伴随着肾小管上皮细胞转分化出现,提示BMP-7可能具有维持小管上皮细胞表型作用。苯那普利联合氯沙坦可能通过下调TGF-β1、α-SMA蛋白的异常高表达,上调BMP-7蛋白的异常低表达,直接或间接负性调控肾小管上皮细胞转分化,阻止肾间质纤维化进展。     

金属蛋白酶组织抑制剂1在大鼠肾小管间质损害中的表达及其意义

目的 观察单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠模型中金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP-1)在肾小管间质中的表达部位、动态变化及其与肾小管问质损害的关系。方法 制备UUO大鼠模型,采用免疫组织化学方法检测UUO术后第1、3、5、7、14天肾小管间质中TIMP-1、α-平滑肌肌动蛋白(SMA)、增殖细胞核抗原(PCNA)和单核巨噬细胞抗原(ED)-1的表达及其与输尿管梗阻后肾小管间质损害的关系。结果 UUO术后第1天肾间质可见少量TIMP-1表达细胞,第3～7天TIMP-1表达明显增加,主要表达于肾小管上皮细胞和肾间质。UUO术后第3天肾小管PCNA表达达高峰,随后下降,而肾间质PCNA水平于第7～14天仍较高。UUO术后第3天肾间质成纤维细胞及肾小管上皮细胞可检出α-SMA表达并随时间递增。α-SMA阳性面积与肾间质相对面积成正相关(r=0.924,p<0.01)。TIMP-1表达与间质相对面积(r=0.835,P<0.05)及α-SMA阳性面积(r=0.922,P<0.01)成正相关。结论 TIMP-1蛋白质于肾小管间质病变早期表达于肾小管间质,早于肾间质纤维化出现,其表达量与肾间质α-SMA表达及肾间质相对面积呈正相关并随病变进展逐渐增加。TIMP-1在肾小管上皮细胞和问质细胞的高表达及肾小管上皮细胞和间质细胞增殖可能参与介导UUO术后肾小管间质损害。     

辛伐他汀减轻UUO大鼠肾纤维化及可能机制的研究

目的本研究旨在探讨辛伐他汀改善输尿管梗阻(UUO)大鼠肾组织纤维化以及可能的机制。方法 30只SD大鼠,随机分为假手术对照组(Sham组)、模型组(UUO组)和辛伐他汀治疗组(Sim组),治疗组术前3 d予20 mg·kg~(-1)·d~(-1)辛伐他汀生理盐水混悬液3 mL灌胃治疗,对照组及模型组予等体积生理盐水灌胃。成模后7 d处死各组大鼠。行HE、Masson、PAS染色方法光镜下观察大鼠肾脏病理改变;免疫组化观察Wnt4和β-catenin蛋白在肾组织的表达; Western blotting检测各组大鼠肾皮质β-catenin、Wnt4、GSK-3β、p-GSK-3β、CollagenⅠ、α-SMA和E-cadherin蛋白在各组大鼠肾组织的相对表达量。结果与Sham组相比,UUO组大鼠肾组织纤维化病变明显,肾组织β-catenin、Wnt4、α-SMA、p-GSK-3β、CollagenⅠ蛋白的表达明显增多(P 0.05),E-cadherin蛋白表达减少(P 0.01),与UUO组相比,Sim组肾组织α-SMA、CollagenⅠ、Wnt4、β-catenin和p-GSK-3β蛋白表达减少(P 0.05),E-cadherin蛋白表达多(P 0.05)。结论辛伐他汀能改善肾脏纤维化病变,可能与其抑制Wnt4/β-catenin信号通路的激活和传导有关。     

维甲酸抑制大鼠单侧输尿管梗阻模型肾间质纤维化

目的探讨维甲酸对大鼠单侧输尿管梗阻(UUO)模型肾间质纤维化的影响。方法建立大鼠UUO模型前2d治疗组和对照组分别每天给予10mg/kg全反式维甲酸或溶媒皮下注射。观察模型第3、7和12天肾小管损害百分比、肾间质纤维化程度、肾间质巨噬细胞数、肾间质α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、胶原Ⅲ和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)mRNA的表达。结果维甲酸显著减轻肾小管损害和肾间质纤维化(P<0.01)。治疗组肾间质巨噬细胞数和肾间质α-SMA表达显著低于对照组(P<0.01)。维甲酸显著抑制胶原Ⅲ和MCP-1mRNA表达(P<0.01)。结论维甲酸减少大鼠UUO模型肾间质巨噬细胞浸润、降低胶原Ⅲ和MCP-1mRNA表达、抑制α-SMA蛋白的表达,从而减轻肾间质纤维化。     

法舒地尔对糖尿病大鼠肾小管上皮细胞转分化的影响

目的 观察法舒地尔对糖尿病大鼠肾小管上皮细胞转分化的影响并探讨其机制。 方法 将实验性Wistar大鼠随机分为正常对照组、糖尿病组、法舒地尔治疗组。3个月后处死动物,PAS染色法观察肾小球病理变化,Masson染色法观察肾间质病理变化;免疫组化观察肾脏皮质ROCKⅠ、α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、E钙黏蛋白（E-cadherin）的变化和β连环蛋白（β-catenin)的细胞定位改变;Western印迹法观察肾脏皮质p-MYPT1、α-SMA、E-cadherin、胞膜β-catenin蛋白的变化;实时定量PCR法观察ROCKⅠ、E-cadherin和总β-catenin的mRNA变化。 结果 法舒地尔治疗可改善肾间质纤维化状况。与正常对照组相比,糖尿病组大鼠肾皮质内p-MYPT1、α-SMA蛋白表达增强（均P < 0.01）;E-cadherin、胞膜β-catenin的蛋白表达减弱（均P < 0.01）;ROCK1、总β-catenin mRNA表达增强（均P < 0.01）;E-cadherin mRNA表达减弱（P < 0.01）。与糖尿病组相比,治疗组p-MYPT1、α-SMA蛋白表达减弱 （均P < 0.01）;E-cadherin、胞膜β-catenin的蛋白表达增强（均P < 0.05）;ROCK1、β-catenin mRNA表达减弱（均P < 0.01）;E-cadherin mRNA表达增强（P < 0.01）。 结论 法舒地尔可能通过抑制Rho激酶活性减轻糖尿病大鼠肾小管上皮细胞转分化和肾间质纤维化,该作用可能与法舒地尔恢复肾小管上皮细胞的黏附特性与紧密连接复合体有关。     

冬虫夏草通过诱导血色素加氧酶-1表达抑制肾小管间质纤维化

目的：观察冬虫夏草对单侧输尿管梗阻（unilateral ureteral obstruction,UUO）模型大鼠肾小管间质纤维化进展的保护作用。方法：72只雄性清洁级SD大鼠随机分为4组：假手术组,UUO模型组,UUO加冬虫夏草治疗组,UUO加冬虫夏草和血色素加氧酶抑制剂卟啉锌[（zinc（a）protoporphyrinη,znpp）]治疗组。各组大鼠分别于术后（建模后）第3、7、14天分批处死,留取手术侧（模型组梗阻侧）肾脏组织。采用HE、Masson染色、荧光定量PCR、免疫组织化学染色评价肾小管间质纤维化损伤程度并检测肾脏组织血色素加氧酶-1（hemoglobin oxygenase-1,HO-1）,α平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle ac-tin,α-SMA）mRNA及蛋白表达变化情况。结果：冬虫夏草治疗组相对于UUO模型组,肾脏病理损伤及进展程度明显减轻且HO-1的表达上调,α-SMA的表达下调（P〈0.05）,而冬虫夏草加HO-1抑制剂znpp后,以上作用明显减弱。结论：冬虫夏草可以通过诱导血色素加氧酶的表达减轻肾小管间质纤维化程度。     

补体C5α受体和转化生长因子-β1在大鼠肾间质纤维化不同阶段肾组织的表达

目的：动态观测补体C5α受体（C5αR）和转化生长因子β1（TGF-β1）在单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠肾组织的表达变化,从而探讨C5αR在。肾小管间质纤维化发生中的作用机制。方法：将36只雄性SPF级SD大鼠随机分为模型组及假手术组。模型组行UUO术,假手术组仅游离输尿管,不结扎。术后第5、10、15天分别处死每组中的6只大鼠,取梗阻侧肾行苏木精-伊红（H—E）和Masson染色,并用免疫组织化学ELiVision^TMplus法检测肾小管间质中C5αR和TGF-β1的表达。结果：模型组第5天肾小管扩张,小管间质细胞部分变性,第10天小管间质细胞可见坏死,间质纤维增多,第15天可见弥漫的肾小管基底膜增厚皱缩,纤维化明显（P〈0．05）。免疫组织化学结果显示：假手术组大鼠肾小管间质中仅有少量TGF-β1和C5αR表达,随时间延长未见明显变化;模型组大鼠梗阻侧肾组织中C5αR和TGF-β1的表达随时间进展而明显增加（P〈0．05）,其中C5αR在梗阻早期（第5～10天）表达明显增多,而晚期（第11～15天）仅轻微增多。结论：模型组实验大鼠梗阻侧。肾组织中C5αR和TGF-β1表达随着梗阻时间延长而上调,提示C5αR可能在。肾间质纤维化早期通过介导TGF-β1的上调发挥作用。     

洋川芎内酯A 对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的作用及机制研究

目的:探讨洋川芎内酯A(SenA)对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾脏病变的保护作用。方法:50只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、SenA低剂量(20 mg/kg)组、SenA高剂量(40 mg/kg)组及阳性对照(厄贝沙坦,20 mg/kg)组,行UUO术制备单侧输尿管模型,并于术后21天处死大鼠。根据试剂盒说明书检测血清尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)的含量,HE染色法观察肾脏病理改变,免疫组化法检测肾组织α-SMA及CollagenⅠ蛋白的表达,Western blotting检测各组大鼠肾皮质Wnt4、β-catenin、p-GSK-3β、E-cadherin的表达水平。结果:与模型组比较,SenA低、高剂量组及阳性对照组大鼠血清中Scr、BUN含量明显降低(P<0.05),肾脏病变情况得到不同程度的改善。同时,SenA可明显减少大鼠肾组织中α-SMA和CollagenⅠ蛋白的分泌(P<0.05),下调Wnt4、β-catenin及p-GSK-3β的表达水平(P<0.05),并伴有E-cadherin蛋白表达显著上调(P<0.01)。结论:SenA可通过下调Wnt4/β-catenin信号通路,抑制肾组织细胞外基质沉积并改善肾功能,最终改善UUO模型大鼠肾间质纤维化的病变进程。     

Histone methyltransferase MLL1 accelerates the development of renal fibrosis via promoting the epithelial-mesenchymal transition of HK-2 cells

Objective To investigate the possible effects of histone methyltransferase MLL1 on renal interstitial fibrosis and epithelial-mesenchymal transition (EMT). Methods Forty-two male SD rats were randomly divided into normal group, sham operation group and unilateral ureteral occlusion (UUO) group, and then UUO group was further divided into group 1 d, 1 week, 2 week, 3 week and 4 week after operation. The expression of MLL1, E-cadherin, α-SMA, Vimentin and Col3α1 in UUO rat kidney tissue as well as TGF-β1 stimulated HK-2 cells were detected by real-time PCR and Western blotting. siRNA-MLL1 plasmids was used to inhibit the expression of MLL1 and the protein levels of MLL1, α-SMA, Vimentin, E-cadherin, Col3α1 and H3K4me3 induced by TGF-β1 stimulation were detected by Western blotting. The level of H3K4me3 in promoter region of EMT related genes was observed by chromatin immunoprecipitation (CHIP). Results Compared with normal and sham operated groups, the loss of renal function in UUO group was more obvious with the obstruction time (P＜0.05). The renal fibrosis was most obvious 1 week and 2 weeks after the rats underwent the UUO operation (all P＜0.05), with the highest protein expressions of MLL1, E-cadherin, α-SMA, Vimentin and Col3α1 (all P＜0.05). Compared with the control group, 3 ng/ml TGF-β1 induced the highest expression of MLL1 and the most obvious EMT in HK-2 cells (all P＜0.05). Moreover, the EMT and the high level of H3K4me3 in HK-2 triggered by TGF-β1 were all inhibited by siRNA-MLL1 plasmids transfection (all P＜0.05). Conclusions MLL1 can enhance the occurrence of EMT induced by TGF-β1 in HK-2 cells by increasing the level of H3K4me3 in the promoter region of α-SMA and Vimentin.     

Protective effect of emodin on renal interstitial fibrosis in mice of unilateral ureteral obstruction via PI3K/Akt/mTOR signaling pathway

Objective To investigate the effect and mechanism of emodin (EM) in renal interstitial fibrosis of unilateral ureteral obstruction (UUO) mice. Methods Male C57BL/6J mice were randomly divided into 4 groups, including sham operation group (n=8), UUO operation group (n=8), UUO operation+losartan (LST) group (n=8) and UUO operation+EM group (n=8). The mice in each group were ingested the suspensions by gavage for 14 days after surgery. Mice in UUO+LST and UUO+EM groups were given 10 mg?kg-1?d-1 LST and 20 mg?kg-1?d-1 EM, respectively. LST and EM were mixed with 0.5% sodium carboxymethyl cellulose. Mice in sham group and UUO group were given 0.5% sodium carboxymethyl cellulose. The mice were sacrificed at the 14th day. Interstitial fibrosis was observed by HE, Masson and PAS stain. Real-time PCR was used to detect LC3, Beclin-1 and mTOR mRNA. Protein expressions of TGF-β1, α-SMA, E-cadherin, LC3, Beclin-1, PI3K, p-Akt and mTOR were detected by Western blotting. The autophagy was observed with transmission electron microscopy in the renal tissue. Results Compared with sham mice, UUO mice at the 14th day displayed obvious renal fibrosis. Meanwhile, UUO mice had increased expressions of TGF-β1 and α-SMA (all P＜0.01), and decreased expressions of E-cadherin (P＜0.01). Their renal expressions of PI3K, p-Akt and mTOR were also raised (all P＜0.01). Compared with those in UUO group, in UUO+LST group and UUO+EM group, expressions of autophagy protein LC3 and Beclin-1 were increased (all P＜0.01), and the number of autophagic was increased. Additionally, expressions of TGF-β1 and α-SMA were reduced in UUO+LST group and UUO+EM group (all P＜0.01), while the expression of E-cadherin was increased by emodin treatment (P＜0.05). And expressions of PI3K, p-Akt and mTOR were decreased in UUO+LST group and UUO+EM group (all P＜0.05), meanwhile renal tissue fibrosis significantly reduced. Conclusions Emodin can promote autophagy, ameliorate renal interstitial fibrosis and protect renal function through PI3K/Akt/mTOR signaling pathway.     

CIP4在肾间质纤维化中的表达及作用

目的 观察骨架调节蛋白CIP4（Cdc42 interacting protein-4）在肾纤维化过程中表达水平、细胞内定位及高表达的CIP4基因对人肾小管上皮细胞E钙黏蛋白（E-cadherin）、波形蛋白（vimentin）的表达和β连环素（β-catenin）酪氨酸磷酸化水平的影响。 方法 体外实验以人近端肾小管上皮细胞（HK-2细胞）为研究对象,10 μg/L TGF-β1刺激72 h诱导HK-2细胞转分化; Western 印迹法检测各组细胞内CIP4、E-cadherin、vimentin蛋白的表达;RT-PCR法检测细胞内CIP4 mRNA表达水平;激光共聚焦显微镜观察CIP4在细胞内定位。体内实验以SD大鼠为研究对象,5/6肾切除法制作慢性肾纤维化模型;常规检测BUN和Scr水平;Masson染色检测肾组织纤维化水平;免疫组化法检测肾组织内CIP4蛋白的表达和分布。脂质体法介导含野生型CIP4的重组真核表达质粒pcDNA3.1-CIP4或pcDNA3.1-Zeo（空载体）转染HK-2细胞,Wetern 印迹法检查转染的效率。稳定转染成功后,Wetern 印迹法检测正常组、pcDNA-CIP4转染组和空载体转染组细胞内E-cadherin、vimentin蛋白的表达和β-catenin酪氨酸磷酸化水平。 结果 正常HK-2细胞表达E-cadherin和少量的CIP4,几乎不表达vimentin。TGF-β1干预组细胞vimentin蛋白表达增加（P ＜ 0.05）,E-cadherin蛋白表达减少（P ＜ 0.05）,CIP4 mRNA和蛋白表达均显著增多（P ＜ 0.05）。CIP4在正常细胞内大部分在细胞膜,少量在细胞质,在转分化的HK-2细胞表达显著增多,并向细胞质和细胞核聚集。假手术组大鼠肾功能正常,肾组织内未见明显纤维化组织,CIP4在肾小管表达较少,肾小球内几乎不表达;模型组大鼠BUN和Scr增高,肾组织内可见明显纤维化组织,CIP4在肾小管表达明显增加。pcDNA3.1-CIP4转染组较正常组和空载体转染组细胞内CIP4表达增多（P ＜ 0.05）,β-catenin酪氨酸磷酸化水平和vimentin蛋白表达增加（P ＜ 0.05）,而E-cadherin蛋白表达减少（P ＜ 0.05）。 结论 CIP4高表达可能参与肾小管上皮细胞-间充质细胞转分化,促进肾间质纤维化。     

A porcine model of relief of 3 days unilateral ureteral obstruction: study on the damage and self-repairing capability of the kidney

Objective To explore the reversibility of early stage tubular interstitial injury as well as the timing of reparation through the pig relief of unilateral ureteral obstruction (R-UUO) model. Methods Eight three-month-old female Guangxi BA-MA mini pigs were selected for the construction of R-UUO models. Five time points were set which were UUO 0 day, UUO 3 days, R-UUO 7 days, R-UUO 14 days, and R-UUO 21 days. Renal function, histological structure, and protein expressions of α-smooth muscle actin (α-SMA), vimentin and E-cadherin were evaluated at different time points. Results After 3 days of UUO, compared with UUO 0 day, serum creatinine levels were increased obviously and the kidney tissues presented varying degrees of damage. The expressions of α-SMA and vimentin were increased and E-cadherin expression was decreased (P＜0.05). Following R-UUO after 3 days of UUO, compared to UUO, serum creatinine levels were significantly decreased. Renal pathological tissue damage was repaired. The expressions of α-SMA and vimentin were decreased and E-cadherin expression was increased (P＜0.05). Conclusions The pig R-UUO animal model may provide a good platform to study the kidney injury and repair. The tubular injury may be fully reversed and repaired when removing the pathogenic factors if the renal tubular injury was at an earlier stage.     

γ-干扰素对梗阻性积水肾间质纤维化的治疗作用

目的 探讨γ干扰素(IFN-γ)对梗阻性肾积水肾间质纤维化的抑制作用及其可能的机制.方法 将65只雄性SD大鼠随机分成4组:治疗组(20只)、模型组(20只)、药物对照组(20只)、假手术组(5只).在建模和给药后的第3、7、14、21、28天,每组各随机处死动物4只(假手术组1只).采用苏木素-伊红(HE)和Masson染色观察病变肾脏间质纤维化的情况;采用聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测肾组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)的mRNA表达情况;免疫组织化学法观察以上三种蛋白的变化.结果 模型组大鼠术后肾间质逐渐出现纤维化改变,并随梗阻时间的延长逐渐加重,TGF-β1、α-SMA和Col-Ⅰ的mRNA和蛋白表达亦逐渐升高.第14天,模型组TGF-β1和α-SMA的表达量达到高峰,28 d时各指标的表达均达到最高,TGF-β1、α-SMA和Col-Ⅰ分别为51.84%、72.59%和68.73%.治疗组各指标在不同时间点均低于模型组,第28天时,三项指标依次为33.84%、32.59%和48.73%,与模型组比较P＜0.05.Banff评分显示治疗组间质纤维化程度明显减轻(P＜0.01).其余两组未见肾间质纤维化改变.结论 IFN-γ具有减轻积水后肾间质纤维化程度的作用,该作用与其下调TGF-β1的表达、抑制肌成纤维细胞(MyoF)激活和减少Col-Ⅰ生成有关.     

intermedin对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的影响

目的 观察intermedin( IMD)对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化的影响.方法 雄性Wistar大鼠40只,按随机数字表法分为假手术组(n=10,行左输尿管分离术)、模型组(UUO,n=10)、氯沙坦组(n=10)和IMD组(n=10),后3组行左输尿管结扎术.各组大鼠分别于术后第14、21天随机选取5只,腹主动脉采血并留取梗阻侧肾组织之后处死.HE、Masson染色观察肾组织病理变化;比色法测定血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)及新鲜肾组织羟脯氨酸(Pro)含量;免疫组化方法检测肾组织中转化生长因子β1 (TGF-β1)、IMD的表达水平,并进行半定量分析.结果 与假手术组相比,不同时间点UUO组血BUN、Scr、肾组织Pro含量及TGF-β1、IMD的阳性表达均显著升高(P＜0.05);与UUO组相比,氯沙坦组血BUN、Scr、肾组织Pro含量及TGF-β1、IMD表达均降低(P＜0.05),IMD组除IMD表达增加外,其余均降低(P＜0.05).结论 IMD可减轻UUO肾间质纤维化,改善肾功能,其机制可能与拮抗纤维化炎性介质TGF-β1有关.     

依贝沙坦对单侧输尿管梗阻小鼠肾脏整合素连接激酶表达的影响及意义

目的研究依贝沙坦（Irb）对单侧输尿管梗阻（UUO）小鼠肾脏整合素连接激酶（ILK）表达的影响,并探讨其与肾小管上皮间充质转化的关系。方法将雄性CD-1小鼠随机分为假手术对照组（C,n=20）、UUO组（UUO,n=40）和Irb治疗组（UUO＋Irb,n=40）,分别于术后1、3、7和14d处死小鼠。Masson染色观察肾间质纤维化。免疫组化检测小鼠肾组织ILK、上皮细胞钙黏蛋白（E-cadherin）和α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达。Western印迹观察小鼠肾组织ILK蛋白表达。荧光实时定量PCR（real-time PCR）检测ILK、E-cadherin、α-SMA和纤连蛋白（FN）mRNA表达。结果与C组相比,UUO组术后1d ILK mRNA及蛋白表达均增高;术后3d FN mRNA表达上调,E-cadherin mRNA及蛋白表达明显减少,α-SMA mRNA及蛋白表达显著增加。与UUO组相同时间点比较,Irb治疗组ILK、FN及α-SMA表达均被显著抑制（P均＜0．05）;E-cadherin表达则增高（P＜0．01）。ILK蛋白表达与α-SMA蛋白表达呈正相关（r =0．707,P＜0．01）,与E-cadherin蛋白表达呈负相关（r=-0．919,P＜0．01）。结论Irb能减轻肾脏纤维化,抑制肾小管上皮细胞转分化,这可能与其抑制肾小管细胞ILK表达有关。