脉血康联合顺铂对荷MHCC97H人肝癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响

目的：研究脉血康（水蛭素）联合顺铂对荷MHCC97H人肝癌裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用。方法：将60只接种高转移MHCC97H人肝癌裸鼠随机分成6组,每组10只。（1）阳性对照组：隔日腹腔注射2mg/kg顺铂注射液;（2）模型对照组：每日灌胃给予蒸馏水,0.2mL/10g体重;（3）低剂量脉血康组：脉血康每日口服灌胃0.5g/kg;（4）中剂量脉血康组：脉血康每日口服灌胃1.0g/kg;（5）高剂量脉血康组：脉血康每日口服灌胃2.0g/kg;（6）联合给药组：脉血康每日口服灌胃1.0g/kg,并隔日腹腔注射2mg/kg顺铂注射液。连续21天。用药后每3天各组裸鼠称重,并用游标卡尺测量每只裸鼠移植瘤的瘤结节最大直径a和最小径b,计算瘤体积,以相对肿瘤增殖率T/C%作为疗效评价指标。末次给药24h后处死动物,称重,拍照;分离瘤体,称重,甲醛固定。结果：与模型对照组比较,脉血康给药组、顺铂注射液组、联合给药组裸鼠皮下移植瘤的瘤重及相对肿瘤增殖率（T/C%）均明显减少,有显著的统计学差异（P（0.001）;不同剂量脉血康给药组之间及与阳性对照组比较,裸鼠皮下移植瘤的瘤重,相对肿瘤增殖率（T/C%）无统计学意义（P〉0.05）;联合用药组及不同剂量脉血康给药组与阳性对照组的裸鼠皮下移植瘤的瘤重,相对肿瘤增殖率（T/C%）比较,有较显著差异（P（0.05）。结论：脉血康对荷MHCC97H肝癌裸鼠皮下移植瘤的生长有明显的抑制作用,且与顺铂两者联合应用具有协同作用。     

复方苦参注射液对肺癌裸鼠移植瘤的抑制作用及其MMP-9、VEGF表达的影响

目的:探讨复方苦参注射液对人肺癌细胞H460裸鼠移植瘤的抑制作用以及对基质金属蛋白酶-9(MMP9)、血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:采用皮下种植人肺癌细胞H460的方法建立肺癌裸鼠移植瘤模型,给予复方苦参注射液治疗,观察药物对裸鼠移植瘤的抑制作用,并采用Western blot方法检测药物对裸鼠移植瘤组织中MMP-9、VEGF表达的影响。结果:复方苦参注射液可抑制裸鼠移植瘤的生长,低、中、高剂量抑制率分别为19.48%、50.11%、80.59%,各剂量组裸鼠移植瘤组织中MMP-1、VEGF蛋白表达水平较对照组均有不同程度的降低。结论:复方苦参注射液可抑制肺癌细胞的生长和转移,作用机制与降低MMP-9、VEGF蛋白表达有关。     

苦参碱及顺铂对人卵巢癌裸鼠移植瘤的生长抑制作用

目的：研究苦参碱、顺铂（DDP）单独及联合应用对人卵巢癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法：建立SKOV3细胞裸鼠移植瘤模型,随机分为4组,苦参碱组予苦参碱腹腔注射治疗;DDP组予DDP注射治疗;联合用药组予苦参碱和DDP注射治疗;对照组予生理盐水腹腔注射治疗。连续治疗3周后观察疗效并记录各组裸鼠及其皮下移植瘤生长情况,绘制肿瘤生长曲线,计算肿瘤体积和肿瘤生长抑制率。结果：移植人卵巢癌SKOV3细胞株的裸鼠均能成瘤,成瘤率100％,苦参碱对移植瘤有明显的抑瘤作用,抑瘤率迭57．56％。苦参碱组、DDP组、联合用药组治疗后的肿瘤体积及抑瘤率分别与对照组比较,差异均有非常显著性意义（P〈0．01）,与苦参碱组、DDP组比较,联合用药组肿瘤的体积明显减小（P〈0．05）,抑瘤率明显增高（P〈0．05）。结论：苦参碱对移植瘤有明显的抑瘤作用,苦参咸及顺铂联合应用对移植肿瘤生长抑制作用更强,二者具有协同抗癌作用。     

猫爪草总皂苷对人非小细胞肺癌A549细胞裸鼠移植瘤生长及EGFR、MMP-9表达的影响

目的:观察猫爪草总皂苷对人非小细胞肺癌A549细胞裸鼠移植瘤的抑制作用,及对表皮生长因子受体(EGFR)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法:建立A549裸鼠移植瘤模型,待肿瘤长到100mm3以上,开始分组、称重、给药,分别设猫爪草总皂苷高剂量组(1.73 g/kg)、中剂量组(0.86 g/kg)、低剂量组(0.43 g/kg),同时设环磷酰胺(CTX)阳性对照组(30 mg/kg×3)及水阴性对照组(30 m L/kg),每隔3 d测量肿瘤体积,绘制肿瘤生长曲线图;18 d后脱颈处死裸鼠,称瘤重,计算抑瘤率,病理常规HE染色,免疫组化法检测EGFR、MMP-9在瘤组织中的表达。结果:各治疗组移植瘤生长较水对照组缓慢,猫爪草总皂苷高剂量组瘤重与水对照组比较差异显著(P0.05),不同剂量猫爪草总皂苷的抑瘤率为13.8%-32.6%。猫爪草总皂苷高剂量组14 d和18 d的肿瘤生长体积、中剂量组18 d的肿瘤生长体积与水对照组相比差异显著(P0.05)。不同剂量猫爪草总皂苷组的EGFR、MMP-9的阳性表达率与水对照组相比有所降低,且呈剂量依赖性,其中高剂量组的EGFR阳性表达率与水对照组相比差异显著(P0.05)。结论:猫爪草总皂苷能较好地抑制A549裸鼠移植瘤生长,并下调瘤组织EGFR、MMP-9的表达。     

脉血康对荷MHCC97H人肝癌裸鼠皮下移植瘤VEGF表达的影响

目的:研究脉血康(水蛭素)对荷MHCC97H人肝癌裸鼠皮下移植瘤VEGF表达的影响。方法:将60只接种高转移MHCC97H人肝癌裸鼠随机分成6组,每组10只。(1)阳性对照组:隔日腹腔注射2mg/kg顺铂注射液;(2)模型对照组:每日灌胃给予蒸馏水,0.2mL/10g体重;(3)低剂量脉血康组:脉血康每日口服灌胃0.5g/kg;(4)中剂量脉血康组:脉血康每日口服灌胃1.0g/kg;(5)高剂量脉血康组:脉血康每日口服灌胃2.0g/kg;(6)联合给药组:脉血康每日口服灌胃1.0g/kg,并隔日腹腔注射2mg/kg顺铂注射液。连续21天。用药后每3天各组裸鼠称重,并用游标卡尺测量每只裸鼠移植瘤的瘤结节最大直径a和最小径b,计算瘤体积,以相对肿瘤增殖率T/C%作为疗效评价指标。末次给药24h后处死动物,称重,拍照;分离瘤体,称重,甲醛固定。运用免疫组化技术检测瘤体VEGF的表达变化。结果与模型对照组比较,脉血康给药组、顺铂注射液组、联合给药组裸鼠皮下移植瘤的瘤重明显减少,有显著的统计学差异(P<0.001);联合用药组与不同剂量脉血康给药组及阳性对照组的裸鼠皮下移植瘤的瘤重比较有显著差异(P<0.05)。脉血康给药各组、联合给药组裸鼠皮下移植瘤的VEGF表达水平均低于模型对照组,差异有显著性意义(P<0.01);阳性对照组与模型对照组比较无统计学差异(P>0.05)。结论:脉血康对荷MHCC97H肝癌裸鼠皮下移植瘤的生长有明显的抑制作用,与顺铂联合应用作用更强。其作用机制与下调VEGF基因表达有关。     

氧化苦参碱对人胃癌MGC-803细胞裸鼠皮下移植瘤

目的：通过观察氧化苦参碱（oxymatrine,OXY）对人胃癌MGC-803细胞系裸鼠移植瘤的抑制作用,观察氧化苦参碱对该移植瘤形态学的影响,阐述其抗肿瘤作用。方法：将60只裸鼠分为阴性对照组、阳性对照组、氧化苦参碱小剂量组、氧化苦参碱中剂量组、氧化苦参碱大剂量组,腹腔注射给药。观察荷瘤鼠肿瘤生长情况,分析氧化苦参碱对MGC-803细胞裸鼠皮下移植瘤增形态学的影响。结果：氧化苦参碱具有抑制MGC-803细胞裸鼠皮下移植瘤生长的作用,各用药组肿瘤平均体积明显小于阴性对照组,差异具有统计学意义（P〈0．05）;从第9天开始,阳性对照组与其他各用药组裸鼠体质量相比,差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论：氧化苦参碱对人胃癌MGC-803细胞系裸鼠肿瘤有抑制作用。     

补肾健脾方对人结肠癌移植瘤生长及血清血管内皮生长因子和基质金属蛋白酶7表达的影响

目的观察补肾健脾方对人结肠癌移植瘤生长及血清血管内皮生长因子(VEGF)和基质金属蛋白酶7(MMP-7)表达的影响,探讨其抗结肠癌的部分作用机制。方法裸鼠腋下接种人结肠癌细胞,建立人结肠癌裸鼠皮下移植瘤模型。随机分为模型组、5-氟尿嘧啶组和补肾健脾方低、中、高剂量组,各给药组给予相应药物,连续3周。各组处死6只荷瘤鼠,测量瘤体质量,计算相对抑瘤率;ELISA测定血清VEGF及MMP-7表达;剩余荷瘤鼠用于观察生存时间。结果补肾健脾方各剂量组瘤体质量较模型组均明显降低,荷瘤鼠生存时间较模型组明显延长;与模型组比较,补肾健脾方各剂量组VEGF、MMP-7表达均明显下降。结论补肾健脾方可抑制人结肠癌裸鼠皮下移植瘤生长、延长荷瘤鼠生存时间,其机制可能与下调VEGF、MMP-7表达有关。     

黄芪注射液对人鼻咽癌CNE2裸鼠移植瘤的抑制作用

目的探讨黄芪注射液对人鼻咽癌CNE2荷瘤裸鼠的抑瘤作用及其作用机制。方法建立人鼻咽癌CNE2裸鼠多植瘤模型,随机分为对照组,顺铂组,黄芪注射液高、中、低剂量组,分别ip生理盐水,顺铂,10.40、5.20、2.60 g/kg黄芪注射液,4周后处死CNE2荷瘤裸鼠。通过移植瘤生长曲线、终末瘤质量,计算黄芪注射液的抑瘤率;采用HE染色,于光镜下观察各组移植瘤组织细胞病理形态学变化;采用免疫组化法检测黄芪注射液对各组裸鼠移植瘤组织中凋亡相关蛋白p53、Bcl-2和Bax表达的影响。结果黄芪注射液高、中剂量组移植瘤体积明显低于对照组(P0.05),瘤质量明显低于对照组(P0.01),抑瘤率分别为39.90%、30.77%;黄芪注射液高、中剂量组移植瘤组织中p53、Bcl-2蛋白的表达低于对照组(P0.01);各组移植瘤组织中Bax蛋白表达均呈阴性。结论黄芪注射液对人鼻咽癌CNE2荷瘤裸鼠移植瘤具有抑制作用,其机制可能与诱导肿瘤细胞凋亡,降低肿瘤组织中p53和Bcl-2蛋白的表达有关。     

附子多糖对裸鼠胃癌移植瘤MMP-2，MMP-14表达的影响

目的:观察附子多糖对裸鼠胃癌移植瘤的生长抑制作用及对肿瘤组织基质金属蛋白酶-2(MMP-2),基质金属蛋白酶-14(MMP-14)表达的影响。方法:建立胃癌裸鼠移植瘤模型,随机分为模型组,5-氟尿嘧啶组(5-FU,0.01 g·kg~(-1)),附子多糖高、低剂量组(0.2,0.1 g·kg~(-1)),灌胃15 d。观察附子多糖对裸鼠胃癌瘤重的影响;光镜下观察肿瘤细胞的形态变化;酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中转化生长因子-β_1(TGF-β_1)含量;通过免疫组化、蛋白质免疫印迹法(Western blot)及实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测肿瘤组织中MMP-2,MMP-14蛋白及mRNA表达水平。结果:附子多糖高、低剂量组抑瘤率分别为52.83%,40.57%,与模型组比较,附子多糖高、低剂量组的瘤重显著降低(P0.01),附子多糖对裸鼠胃癌移植瘤的生长具有抑制作用;ELISA表明,与模型组比较,附子多糖高、低剂量组显著降低裸鼠胃癌血清TGF-β_1含量(P0.01);免疫组化表明,与模型组比较,附子多糖高、低剂量组MMP-2蛋白明显下调(P0.05,P0.01),MMP-14蛋白表达下降(P0.01);Western blot表明,与模型组比较,附子多糖高、低剂量组MMP-2,MMP-14蛋白表达下调(P0.01);Real-time PCR结果显示,与模型组比较,附子多糖高剂量组的MMP-2,MMP-14 mRNA表达下降(P0.05,P0.01)。结论:附子多糖可抑制裸鼠胃癌移植瘤的生长,抑制TGF-β_1表达,其抑瘤机制可能与下调MMP-2,MMP-14蛋白及mRNA的表达有关。     

补中益气汤对肺腺癌顺铂耐药细胞株裸鼠移植瘤作用及其机制的研究

目的探讨补中益气汤对肺腺癌顺铂耐药细胞株A549/DDP裸鼠移植瘤的作用机制。方法 60只裸鼠随机分为6组,空白对照组给予生理盐水0.5ml灌胃,其余5组以5×106/L的A549/DDP接种于裸鼠皮下,待成瘤后,分别给予生理盐水0.5ml灌胃,0.2ml顺铂腹腔注射同时生理盐水灌胃,0.2ml顺铂腹腔注射顺铂和高、中、低剂量的补中益气汤灌胃。观察A549/DDP细胞在各组裸鼠的致瘤率,计算抑瘤率;采用免疫组化方法、RT-PCR(real time PCR)检测移植瘤组织中PI3K、AKT的表达水平。结果补中益气汤高、中、低剂量组能不同程度的抑制移植瘤的生长,其中以高、中剂量组最显著,与顺铂组抑瘤率比较有明显的统计学差异(P0.05);移植瘤中PI3K、AKT蛋白表达和mRNA基因的表达在补中益气汤高、中、低剂量组中均有下降,高、中剂量组降低较多,与顺铂组和小剂量比较有统计学差异(P0.05)。结论补中益气汤联合顺铂对肺腺癌移植瘤的增殖有明显的抑制作用,补中益气汤能通过调控PI3K、AKT基因和蛋白的表达而干预顺铂的耐药机制,这种干预作用具有一定的量效关系。     

增免抑瘤方联合顺铂对铂类耐药卵巢癌抑瘤率影响的实验研究

目的观察增免抑瘤方对顺铂耐药卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用,并探讨其可能的作用机制。方法采用顺铂耐药人卵巢癌细胞株COC1/DDP构建裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为中药高、中、低剂量组,顺铂组,联合组(顺铂联合中药),对照组(生理盐水),连续给药3周,剥取瘤体计算瘤重及抑瘤率;定量RT-PCR及免疫组化测定Bcl相关X连锁蛋白(Bcl-associated x protein,Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病基因-2(B-cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)的表达;电镜观察瘤体细胞超微结构。结果联合组抑瘤率最高,为(59.26±6.86)%,与其他各组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。RT-PCR结果显示:促凋亡基因Bax mRNA联合组表达最高,对照组表达最低(P<0.01)。抑凋亡基因Bcl-2mRNA对照组表达最高,中药高剂量组表达最低,联合组Bcl-2mRNA的表达低于顺铂组(P<0.01)。免疫组化结果显示:联合组Bax蛋白的表达最高,Bcl-2蛋白的表达最低,与其他各组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。电镜下中药各剂量组与联合组均可见凋亡中、晚期的表现。结论增免抑瘤方辅助化疗可逆转耐药卵巢癌裸鼠对顺铂的耐药性,增强其抑瘤作用。其机制与上调Bax的表达,下调Bcl-2的表达,促进耐药卵巢癌细胞的凋亡有关。     

益肺散结方对小鼠Lewis肺癌组织Bcl-2、Bax、MMP-9表达的影响

目的探讨益肺散结方对Lewis肺癌荷瘤小鼠的抑瘤作用及其作用机制。方法建立Lewis肺癌荷瘤小鼠模型,将50只建模小鼠随机分为模型组、顺铂组及益肺散结方低、中、高剂量组,每组10只。模型组给予生理盐水灌胃,1次/d,连续21 d;益肺散结方低、中、高剂量组分别给予含生药0.5,1.0,2.0 g/mL的益肺散结药液灌胃,1次/d,连续21 d;顺铂组给予2 mg/kg顺铂腹腔注射,隔日1次,共21 d。干预结束后处死各组小鼠,剥离瘤组织并称瘤质量,计算抑瘤率;采用实时荧光定量PCR法检测肿瘤组织中Bcl-2和Bax mRNA的表达量,采用免疫组织化学法检测肿瘤组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达量。结果益肺散结方中、高剂量组和顺铂组瘤质量均明显低于模型组(P均0.05),且益肺散结方中、高剂量组和顺铂组抑瘤率均明显高于益肺散结方低剂量组(P均0.05),益肺散结方高剂量组和顺铂组瘤质量和抑瘤率比较差异均无统计学意义(P均0.05)。益肺散结方中、高剂量组移植瘤组织中Bcl-2 mRNA表达量和MMP-9蛋白表达量均明显低于模型组和益肺散结方低剂量组(P均0.05),而Bax mRNA表达量均明显高于模型组和益肺散结方低剂量组(P均0.05),益肺散结方高剂量组和顺铂组比较差异均无统计学意义(P均0.05)。结论益肺散结方对小鼠Lewis肺癌组织具有明显的抑制作用,其机制可能与上调Bax表达和下调Bcl-2、MMP-9表达有关。     

双氢青蒿素对宫颈癌U14裸鼠移植瘤的作用及对免疫抑制分子的影响

目的研究双氢青蒿素(DHA)对宫颈癌U14裸鼠移植瘤的作用及对免疫抑制分子的影响。方法小鼠左后肢近背部皮下注入U14小鼠子宫颈癌细胞建立宫颈癌移植瘤模型,随机分为对照组,顺铂组(2 mg/kg),双氢青蒿素低、高剂量组(100、200 mg/kg),1次/d,共10 d。考察双氢青蒿素对肿瘤生长及裸鼠体质量的影响,ELISA法检测IL-4、IL-6、TGF-β、PGE_2水平。结果与对照组比较,顺铂组小鼠体质量明显下降,而双氢青蒿素组明显上升(P0.05);顺铂组和双氢青蒿素高剂量组裸鼠瘤重和瘤体积显著降低(P0.05);顺铂组、双氢青蒿素组血清IL-4、IL-6水平差异无统计学意义(P0.05),而TGF-β_1、PGE_2水平显著降低(P0.05)。结论 DHA能抑制U14移植瘤的生长,同时下调U14移植瘤小鼠血清TGF-β_1和PGE_2水平,可为肿瘤化疗提供新思路。     

紫柏凝胶对宫颈癌裸鼠移植瘤生长及瘤组织E6、E7蛋白表达的影响

目的观察紫柏凝胶对宫颈癌裸鼠的抑瘤作用及对E6、E7、Rb、P53蛋白表达的影响。方法建立人宫颈癌Siha细胞荷瘤裸鼠模型,将成瘤裸鼠按随机数字表法分为模型组,顺铂组,紫柏凝胶高、中、低剂量组,每组7只。模型组不干预,顺铂组腹腔内注射0.5 mL顺铂(5 mg/kg),每4日1次,紫柏凝胶高、中、低剂量组分别在瘤体表面涂抹紫柏凝胶0.9428、0.4714、0.2357 g/kg,每日1次,连续用药28日。每日测量肿瘤体积、裸鼠重量、进食水量,停药24 h后处死裸鼠,完整取出肿瘤组织,称重并测量体积,将肿瘤组织切片后,行HE染色,行移植瘤组织病理学观察,并采用免疫组化SP的方法,检测肿瘤组织中E6、E7、Rb和P53蛋白表达水平。结果与模型组比较,紫柏凝胶中、高剂量组及顺铂组在治疗第22、28日肿瘤体积减小(P0.05),瘤重降低(P0.05),E6、Rb蛋白表达均降低(P0.05),紫柏凝胶高剂量组及顺铂组E7、P53蛋白表达均降低(P0.05)。与顺铂组比较,紫柏凝胶各剂量组瘤重升高(P0.05),抑瘤率降低(P0.05),E6、P53、E7、Rb蛋白表达均升高(P0.05)。与紫柏凝胶低剂量组比较,紫柏凝胶中、高剂量组瘤重降低(P0.05),抑瘤率升高(P0.05),E6、P53、E7、Rb蛋白表达均降低(P0.05)。结论紫柏凝胶对人宫颈癌Siha细胞移植瘤的生长具有明显抑制作用,其机制与下调致癌蛋白E6和E7的表达有关。     

熊果酸对卵巢癌干细胞荷瘤裸鼠耐药的逆转作用

目的探讨熊果酸对于卵巢癌干细胞荷瘤裸鼠耐药的逆转作用。方法选用人卵巢癌Skov3细胞通过无血清悬浮培养法富集干细胞,接种于裸鼠皮下,建立裸鼠人卵巢癌干细胞皮下移植瘤耐药模型。随机分为Skov3贴壁细胞组、干细胞组,熊果酸高、中、低剂量组,顺铂组,顺铂联合熊果酸组。连续给药14天,空白组给予0.9%Na Cl溶液。每天测量瘤体积,绘制肿瘤生长曲线,计算抑瘤率。给药结束后,取肿瘤组织,HE染色观察肿瘤细胞形态、结构,免疫组化检测ABCG2的表达,TUNEL法检测凋亡细胞。结果熊果酸可以抑制肿瘤组织生长,并且抑瘤率随剂量增加而上升,熊果酸与顺铂联用明显优于顺铂(P0.01)。不同剂量的熊果酸干预后,ABCG2的表达下调,肿瘤干细胞凋亡增多,均具有剂量依赖性。并且熊果酸联合顺铂组较单用顺铂组,ABCG2的表达明显被抑制,细胞凋亡数明显升高。结论熊果酸可以抑制卵巢癌干细胞荷瘤裸鼠的瘤体生长,通过下调耐药指标ABCG2,促进细胞凋亡,提高顺铂诱导的细胞凋亡来达到逆转耐药的作用。     

复方大七气汤联合顺铂对裸鼠卵巢癌皮下移植瘤Bcl-2/Bax表达的影响

目的:探讨复方大七气汤(compound Daqiqi decoction,CDQD)联合顺铂对裸鼠卵巢癌皮下移植瘤细胞凋亡相关因子Bcl-2/Bax的影响,为临床治疗提供理论依据.方法:将成功建立裸鼠卵巢癌皮下移植瘤模型的40只荷瘤鼠随机分为5组(n=8):模型对照组、CDQD低、高剂量组、顺铂组、顺铂联合中药组,给药3周后处死所有荷瘤鼠剥离瘤体,测瘤体积、瘤重并绘制肿瘤生长曲线、计算抑瘤率,以RT-PCR法和Western blot法检测Bcl-2(B细胞白血病/淋巴瘤-2基因)、Bax(与Bcl-2相关的x蛋白)mRNA及蛋白量的表达.结果:①瘤重显示CDQD各剂量组瘤重均有一定程度减轻,与DDP组相比无统计学意义,顺铂联合中药组低于其余各组(P＜0.01);肿瘤生长曲线显示与模型组比较,各用药组瘤体积均有不同程度缩小(P＜0.01).②RT-PCR结果显示促凋亡基因Bax mRNA的表达:与模型组比较,各用药组表达增高(P＜0.01),其中顺铂联合中药组表达最高,与其余治疗组相比较差异有统计学意义(P＜0.01);抑凋亡基因Bcl-2 mRNA在顺铂联合中药组表达最低(P＜0.01),CDQD高剂量组与顺铂组比较差异无统计学意义.③Western blot法显示与模型组比较,各用药组表达增高(P＜0.01),顺铂联合中药组中Bax蛋白的表达最高(P＜0.01),CDQD高剂量组与顺铂组比较差异无统计学意义;Bcl-2蛋白在顺铂联合中药组表达最低(P＜0.01);CDQD高剂量组与顺铂组比较差异无统计学意义.结论:CDQD对卵巢癌皮下移植瘤具有促凋亡作用,其机制可能与下调Bcl-2表达,上调Bax表达,促进肿瘤细胞凋亡有关;并且与顺铂联合用药具有增效作用.     

健脾养正消癥方对裸鼠胃癌移植瘤及肝转移灶的生长转移及相关基因的影响

目的:观察健脾养正消癥方对裸鼠胃癌移植瘤及转移灶的生长转移及相关基因的影响。方法:建立人胃癌裸鼠移植瘤模型,并随机分为模型组,阳性组(5-氟尿嘧啶,5-Fu组),健脾养正消癥方低、高剂量组。观察健脾养正消癥方对裸鼠胃癌移植瘤的抑瘤率及肝转移灶的情况。反转录酶-聚合酶链锁反应(RT-PCR)法检测健脾养正消癥方对胃癌原位移植瘤及肝转移灶中基质金属蛋白酶2(MMP-2),MMP-9,MMP-14,血管内皮生长因子(VEGF),RECK基因表达的影响。Western blot法检测健脾养正消癥方对胃癌原位移植瘤及肝转移灶中P-STAT3,MMP-2,MMP-9,MMP-14,VEGF,RECK基因表达的影响。结果:健脾养正消癥方高、低剂量组小鼠瘤体平均瘤重明显小于模型组(P0.01)。健脾养正消癥方作用于裸鼠胃癌移植瘤及其肝转移灶后,侵袭转移相关基因中MMP-2,MMP-9,MMP-14,VEGF表达下降,RECK基因表达上升;健脾养正消癥方作用于裸鼠胃癌移植瘤及其肝转移灶后,其相关蛋白P-STAT3,MMP-2,MMP-9,MMP-14,VEGF表达下降,RECK蛋白表达上升。结论:健脾养正消癥方对裸鼠胃癌原位移植瘤及肝转移灶生长具有抑制作用;健脾养正消癥方能够下调P-STAT3,MMP-2,MMP-9,MMP-14,VEGF等相关基因或蛋白的表达同时上调RECK基因或蛋白的表达。     

白鹤方对人胃癌裸小鼠原位移植瘤微血管密度、MMP-9表达的影响

目的观察白鹤方对人胃癌BGC-823裸鼠原位移植瘤生长和转移的抑制作用,以及对移植瘤组织微血管密度(MVD)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法 60只裸鼠建立人胃癌BGC-823原位移植瘤模型,随机分为白鹤方组、5-氟尿嘧啶(5-FU)组、白鹤方与5-FU联合治疗组和模型组,每组15只。白鹤方组给予白鹤方(0.2 g/ml) 0.5 ml灌胃,1次/d; 5-FU组予5-FU稀释液(6 mg/ml) 0.2 ml腹腔注射,1次/周;白鹤方与5-FU联合治疗组,予白鹤方(0.2 g/ml) 0.5 ml灌胃,1次/d,同时予5-FU稀释液(6 mg/ml) 0.2 ml腹腔注射,1次/周。模型组予0.9%NaCl溶液0.5 ml/d灌胃,1次/d。用药6周后结束实验,观察各组裸鼠原位移植瘤生长和转移情况,测瘤体质量,计算抑瘤率;电镜下观察移植瘤超微结构;免疫组化检测各组裸鼠移植瘤组织MVD和MMP-9表达情况。结果白鹤方组、5-FU组、白鹤方与5-FU联合治疗组移植瘤体质量明显低于模型组,抑瘤率分别为48.65%、47.64%和54.39%;电镜下观察发现,白鹤方组、5-FU组、白鹤方与5-FU联合治疗组胃癌细胞均出现凋亡表现;白鹤方组、白鹤方与5-FU联合治疗组移植瘤组织MVD和MMP-9表达低于5-FU组和模型组(P0.05)。结论白鹤方对人胃癌BGC-823裸鼠原位移植瘤生长和转移具有抑制作用,能降低移植瘤组织MVD,抑制微血管生成;可能是通过下调MMP-9表达而发挥作用。     

羟基红花黄色素A对人胃癌移植瘤裸鼠瘤组织bFGF蛋白及MMP-9表达的影响

目的:研究羟基红花黄色素A(hydroxy safflor yellow A,HSYA)对人胃癌裸鼠皮下移植瘤碱性成纤维生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)蛋白以及基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)mRNA及蛋白表达的影响。方法:采用BALB/C nu/nu裸小鼠接种人胃腺癌细胞株BGC-823右前肢腋部皮下建立裸鼠人癌移植瘤模型,随机分为模型组、阳性对照环磷酰胺组(2 g.L-1)、HSYA组(0.056,0.028 g.L-1),观察抑瘤作用,并采用实时荧光定量PCR(real time-fluorescent quantitation PCR,RTFQ-PCR)检测瘤组织中MMP-9 mRNA表达;酶联免疫吸附测定法(enzyme linked immunosorbentassay,ELISA)检测瘤组织中bFGF,MMP-9蛋白表达。结果:HSYA0.028 g.L-1组抑瘤效果明显,且其MMP-9 mRNA表达及bFGF与MMP-9蛋白表达与模型组比,均明显降低(P0.05)。结论:一定浓度的HSYA抑制肿瘤生长的机制之一可能与抑制bFGF,MMP-9的表达,减少瘤组织血管基底膜的降解,阻抑血管移行以减少血管生成有关。     

紫柏凝胶通过调节ERK及P38/MAPK信号通路下调宫颈癌荷瘤裸鼠E6、E7蛋白表达研究

目的:观察ERK及P38/MAPK信号通路在紫柏凝胶影响宫颈癌裸鼠移植瘤致癌蛋白E6、E7表达中的作用。方法:体外培养Siha细胞,成功建立人宫颈癌荷瘤裸鼠模型,随机分为模型组,顺铂组(腹腔内注射0.5 ml顺铂,4 d1次),紫柏凝胶高、中、低剂量组(外用紫柏凝胶0.9428、0.4714、0.2357 g/kg,1 d1次),试验期28 d。称取瘤重并测量瘤体积,HE染色观察移植瘤组织病理学变化,免疫组化SP法检测瘤体中的p-p38、p-ERK、E6及E7蛋白表达水平。结果:紫柏凝胶各组的裸鼠肿瘤体积均明显小于模型组(P<0.05),高、中、低剂量组抑瘤率分别为36.23%、31.24%和14.94%。HE染色紫柏凝胶各剂量组移植瘤组织出现明显坏死样改变。与模型组比较,高、中剂量紫柏凝胶组瘤组织的E6、E7蛋白表达水平降低(P<0.05),同时p-ERK及p-p38蛋白水平明显下降(P<0.05)。结论:紫柏凝胶对HPV(+)宫颈癌Siha细胞裸鼠移植瘤的生长具有明显抑制作用,可下调致癌蛋白E6和E7的表达,其机制可能与抑制ERK及P38/MAPK信号通路有关。