COBAS Taqman HBVDNA的方法学验证

目的 评估COBAS Taqman HBV DNA分析系统的性能及临床应用。方法依据美国国家临床实验室标准化委员会（NCCLS）制订的临床化学方法评价方案（evaluation protocols），通过精密度、携带率、线性评价、仪器间比对、参考范围确认等试验，对COBAS Taqman HBV DNA分析系统的性能参数进行了评估。结果COBAS Taqman分析系统批内变异6．9％～8．6％，批间变异10．5％～18．7％，总变异10．8％～20．2％，线性范围6．0～10^7IU／ml，回收率98．7％～104．5％。仪器间比对相关性较好（r^2=0．998）。结论COBAS Taqman HBV DNA分析系统性能指标符合要求，操作简便、快捷，动力学范围广，是目前理想的HBV DNA检测方法。通过此次验证，建立了一套简便的核酸检测方法学评价方案，有利于临床实验室标准化操作的实施。     

荧光定量PCR仪检测乙型肝炎病毒核酸的性能验证及评价

目的荧光定量聚合酶链反应(PCR)仪检测乙型肝炎病毒核酸(HBV DNA)的性能验证及评价。方法参考ISO15189《医学实验室质量和能力认可准则(2012年)》,以及美国临床和实验室标准化协会(CLSL)EP系列文件的相关要求对实验室HBV DNA荧光定量PCR检测系统的精密度、正确度、可报告范围、抗干扰能力进行验证及评价。结果精密度:HBV DNA定量检测高浓度(106 IU/mL)和低浓度(103 IU/mL)标本的对数值批内变异系数分别为0.67%和3.65%,批间变异系数分别为1.72%和4.52%;正确度:标准物质标本检测结果的对数值与厂商给定靶值浓度的对数值差值在±0.4个Log值内;可报告范围:试验试剂在(2.22×10)～(2.22×108)IU/mL范围内具有良好的线性,线性回归方程为Y=1.027 X-0.408,R2=0.995,≥0.95;抗干扰能力:说明书浓度的干扰物质(血红蛋白、三酰甘油、胆红素)标本结果与不含干扰物质标本比较,其浓度的对数值偏倚CV7.5%,对数值差值在±0.4个Log值内。结论荧光定量PCR仪检测HBV DNA试剂的各项性能特征与厂家声明相符,满足预期用途,适用于临床常规检测。     

ABI ViiA 7 Taqman HBV-DNA检测系统性能验证

目的验证ABI ViiA 7Taqman HBV-DNA检测系统性能,确定该系统是否稳定、准确、可靠。方法参考美国临床实验室标准化协会(CLSI)颁布的相关文件,从精密度、准确度、线性、可比性等方面对ABI ViiA 7Taqman HBV-DNA检测系统进行性能评价;通过稀释标本直至低于检测下限进行定量检出限验证实验;并与质量目标要求和厂商声明的分析性能进行比较。结果ABI ViiA 7Taqman HBV-DNA分析系统的批内精密度(CV批内)分别为1.485%、1.990%和0.932%;总精密度(CV总)分别为1.876%、3.361%和1.891%;准确度最大偏移为-6.8%;r2为0.998 3,回归方程为Y=0.974 8 X+0.050 7,线性范围为1.00E2~2.00E8;定量检出限为100IU/mL;ABIViiA7与ABI7500两台PCR仪的可比性:P=0.115,r2=0.994,线性比对直线回归方程为Y=0.987 2 X+0.051 7。结论 ABI ViiA 7Taqman HBV-DNA检测系统具有优良的精密度、准确度、灵敏度、线性,与ABI7500检测系统有良好的相关性,可用于临床标本检测。     

临床常用线性评价方案的应用比较

目的熟悉美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)EP6-A线性评价方案的应用;探讨美国临床病理学家协会设备委员会(CAP-IRC)法、EP6-P、EP6-A线性评价方案的区别及适用性。方法按照EP6-A对采用电化学发光法检测的甲胎蛋白(AFP)、速率法检测的尿素和丙氨酸转氨酶(ALT)、免疫比浊法检测的载脂蛋白B(apo B)和荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测的乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBV DNA)进行线性评估;以尿素为例建立检测线性范围;比较CAP-IRC法、EP6-P、EP6-A方案评价apo B线性结果的异同。结果按照EP6-A,AFP、ALT和HBV DNA(对数)可直接判断呈线性;尿素的真实线性范围为5.305~46.975 mol/L。apo B目测法可判断呈线性;EP6-P判断呈非线性;CAP-IRC法判断呈非线性但在临床可接受范围;EP6-A判断呈非线性,但在一定范围内呈线性。结论推荐临床实验室使用EP6-A线性评价方案对各个检测项目进行线性评价保证检测结果的准确可靠。     

AutoLumo A2000检测系统检测17-α-羟孕酮的性能验证及评价

目的对AutoLumo A2000检测系统检测17-α-羟孕酮(17-α-OHP)的分析性能进行评价。方法参考美国临床实验室标准化协会(CLSI)系列文件,制订方法学评价方案,对AutoLumo A2000检测系统的精密度、灵敏度、线性范围、干扰试验和参考区间进行评价和验证。结果分析室内质控品QC1批内精密度为2.85%,批间精密度为1.25%,室内质控品QC2批内精密度为3.25%,批间精密度为2.65%;分析灵敏度为0.005 ng/mL;线性相关系数R 2为0.9998,在试剂参考范围内线性良好;高胆红素和高三酰甘油水平对检测结果无显著干扰,高血红蛋白水平对结果影响明显;参考区间偏倚为-4.34%。结论AutoLumo A2000检测系统检测17-α-OHP的分析性能良好,能够满足临床检测的需求。     

免疫定量分析仪MD-QMT001检测降钙素原的方法学性能评价

目的对免疫定量分析仪MD-QMT001检测降钙素原（PCT）的主要方法学性能进行验证与评价。方法参考美国临床和实验室标准化协会（CLSI）系列文件,结合实际工作设计验证方案,对免疫定量分析仪检测全血PCT的精密度、线性、可比性、抗干扰能力等4项分析性能进行验证和评价。结果该定量方法操作简便、快速,整个检测过程约17min;PCT定量时,批内、批间精密度为1.26%-3.96%;检测线性良好,相关系数r大于0.99,回归方程检验有意义（P〈0.05）,与厂商承诺范围接近;该定量法与半定量法检测结果一致性达92%;三酰甘油、胆红素对检测结果无明显影响,溶血可使检测结果显著偏高（P〈0.05）。结论该科室引进的降钙素原免疫定量分析仪操作简便、主要性能评价良好,可满足临床指导抗菌药物的应用等需要。     

临床医学实验室非配套试剂使用性能验证

目的:以AU产淀粉酶试剂(AMYX)为例,探讨临床医学实验室在使用非配套试剂前,进行多项要素性能验证的方法.方法:取低、高值两份临床新鲜血清样本,重复检测10次,计算均值、SD、CV％,评估使用AMYX试剂检测的批内重复性.检测高、低两个水平液态人基质血清质控物,1次/d共20 d,计算均值、SD、CV％,评估批间检测变异.收集在34～1 233U/L范围内的20份新鲜血清样本,使用配套试剂、AMYX分别双份检测,参照美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)EP9-A2提供的方法进行比对,验证准确度.用高、低值临床血清样本配制6个浓度混合样本,双份检测,参照美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)EP6-A进行AMYX线性范围的评价.使用AMYX试剂检测20份来自健康人的新鲜血清样本,验证正常参考范围是否适用.结果:AU产淀粉酶试剂(AMYX)的批内检测低值样本CV为2.87％,高值样本CV为1.49％.批间检测低水平质控物CV为1.80％,高水平质控物CV为2.00％.与配套试剂比较,y=0.98x-0.62,R2=0.998,以1/4CLIA'88TEa(30％)=7.5％为可接受标准,估计误差SE=9.4U/L＜ 37.5 U/L.在31.5～1 233 U/L范围内,AMYX检测结果符合一次方程,呈线性.20份来自健康人的新鲜血清样本检测结果均在正常参考值范围内.结论:AU产淀粉酶试剂(AMYX)与仪器配套试剂(AMY)检测结果可比,其批内、批间变异符合实验室要求,线性范围与厂家提供的一致,正常值参考范围适用,AMYX可用于临床实验室日常检测.     

荧光定量PCR仪检测HBV DNA结果比对分析

目的对Roche Light Cycler 480Ⅱ型荧光定量PCR仪(Roche 480)和ABI 7500检测乙型肝炎病毒DNA(HBV DNA)结果进行比对和偏倚评估,探讨不同检测系统间检测结果的可比性和偏倚的可接受性。方法按照美国临床实验室标准化委员会EP9-A2标准要求,以Roche 480为参比仪器,ABI 7500为实验仪器,对患者HBV DNA项目进行检测,通过比较这两种荧光定量PCR仪器间的系统误差,判断检测结果的可比性。结果Roche 480及ABI 7500检测HBV DNA具有良好的相关性(r=0.993 1),偏差在可接受范围内,系统误差临床可接受。结论 Roche 480及ABI 7500检测结果具有较好的一致性,可同时用于肝炎病毒DNA的检测。     

HemoCue(R) Hb201+快速血红蛋白测定仪的性能评价

目的 评估验证HemoCue(R) Hb201+快速血红蛋白测定仪的主要性能参数,初步评估其临床应用价值.方法 参考CLSI(原美国临床实验室标准化委员会NCCLS)EP15-A,EP6-A,EP7-P方案对该仪器的精密度、线性范围、干扰(胆红素、乳糜)进行评估,并进行静脉血与末梢血的比对试验、两种抗凝静脉血的比对试验及快速血红蛋白仪与SIEMENS ADVIA120,SYSMEX XE-2100两种全血细胞分析仪的方法学比对及偏倚评估.结果 该仪器批内CV0.9%～2.3%,批间CV 1.1%～2.4%,总CV 1.1%～2.5%;线性上限可达200 g/L;试验浓度内的干扰物(游离胆红素≤310 μmol/L、结合胆红素≤337 μmol/L、乳糜浊度≤1 540 FTU)对血红蛋白测定无干扰;静脉血与末梢血比对、两种静脉血比对及三台分析仪比对,相关系数r值在0.986～0.999之间,平均百分偏倚在0.17%～3.40%之间.结论 该仪器微量、快速,精密度和线性临床可接受范围,抗乳糜、抗黄疸干扰能力较好,末梢血、静脉血均适用,适合手术中或是急症输血患者的床旁检测.     

两种生化分析系统间结果的可比性研究

目的 通过对同一实验室两种生化分析系统进行方法对比及偏差评估试验,研究两者检测结果的可比性.方法先根据美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)(EP5-T2)文件要求,对美国贝克曼库尔特CX4 PRO及德国罗氏COBAS C501生化分析仪进行精密度试验;然后按照NCCLS(EP9-A2)文件要求,以CX4 PRO为对比方法,以COBAS C501为试验方法,用患者血清对天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TB)等20个生化项目进行检测,统计计算两方法间的相关系数和直线回归方程,并评估两分析系统间的偏差.结果 两分析系统的批内及总精密度(CV)与各自厂商提供的参数无统计学差异;20个检测项目的测定结果的预期偏差在临床上均可接受.结论 为确保检测结果准确一致,必须对同一实验室两种或以上生化分析系统进行方法比对及偏差评估试验,从而为临床提供可靠的检测数据.