基质金属蛋白酶组织抑制因子mRNA及蛋白在肝硬化组织中的定位

目的：了解基质金属蛋白酶组织抑制因子TIMP－1和TIMP－2蛋白及mRNA在肝硬化组织中的表达和分布状态。方法：以抗TIMP－1和TIMP－2单克隆抗体及TIMP－1和TIMP－2 cDNA探针为试剂,采用免疫组织化学法和原位杂交技术检测肝硬化组织中TIMP－1和TIMP－2蛋白和mRNA,结果：40例肝硬化患者肝组织中TIMP－1和TIMP－2蛋白以及mRNA表达的阳性率为100％,TIMP－1阳性的组织TIMP－2亦为阳性,且TIMP－1强度高于TIMP－2,而正常肝组织未见阳性表达,TIMP－1和TIMP－2蛋白及mRNA表达的阳性信号均位于肝细胞胞浆中,细胞核中无表达,结论：肝硬化患者的肝细胞中存在TIMP－1和TIMP－2蛋白及mRNA的表达,其表达强度与肝组织病理改变呈正相关,这可能是通过抑制基质金属蛋白酶（MMPs)的活性,使得细胞外基质（ECM）降解减少而引起肝硬化。     

基质金属蛋白酶-2及其抑制物在慢性肝炎和肝硬化肝组织中的表达

为进一步探讨基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和基质金属蛋白酶-2组织抑制因子（TIMP-2）在肝纤维化发生，发展过程中的作用，用免疫组织化学方法检测慢性肝炎和肝硬化肝组织中MMP-2和TIMP-2的表达及分布状态，并作定位及半定量分析。     

转化生长因子β1疫苗对肝纤维化大鼠基质金属蛋白酶-2及基质金属蛋白酶组织抑制因子-2表达的影响

转化生长因子β1（TGFβ1）是肝纤维化的启动、进展乃至肝硬化的形成中发挥核心作用的细胞因子，是激活肝星状细胞（HSC）并促进其表达细胞外基质（ECM）的关键因素。我们曾提出构建TGFβ1抗原编码序列与乙型肝炎核心抗原（HBcAg）编码序列的融合基因，将TGFβ1构建为疫苗，刺激机体产生抗体，中和自体产生的过量的TGFβ1，从而达到预防和治疗纤维化的目的。本研究旨在探讨该融合蛋白对实验性肝纤维化大鼠肝组织基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和基质金属蛋白酶组织抑制因子-2（TIMP-2）表达的影响，以期能进一步证实TGFβ1疫苗在肝纤维化治疗中的作用，现报道如下。     

基质金属蛋白酶及其组织抑制因子在肝脏疾病中的表达

基质金属蛋白酶(MMPs)是一组锌离子依赖酶，而组织金属蛋白酶抑制因子(TIMPs)是一组具有抑制MMPs的活性多肽。MMPs与TIMPs在正常状态下处于动态平衡，凋节肝内细胞外基质(ECM)的生成和降解，维持肝内ECM质和量的稳定。病理状态下，各种原因引起的MMPs、TIMPs失衡与肝炎、肝纤维化、肝硬化等肝病的发生发展有密切关系.     

基质金属蛋白酶及其组织抑制因子与糖尿病足

创面修复是一个复杂而有序的生物学过程,许多重要过程均受细胞因子和蛋白酶的调节。研究表明糖尿病患者足部伤口中基质金属蛋白酶(MMPs)表达增加,其抑制因子基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMPs)表达减少,导致伤口难以愈合。MMPs与TIMPs的比例可能比它们的绝对浓度更重要,是预测伤口愈合的重要指标,与伤口愈合时间呈负相关。局部应用强力霉素、一些含蛋白酶抑制剂的敷料以及促有丝分裂的牛血清提取物等均可通过抑制MMPs促进创面愈合。     

结缔组织生长因子和基质金属蛋白酶组织抑制因子-1shRNA表达质粒对肝星状细胞细胞因子表达及细胞外基质分泌的影响

目的 研究结缔组织生长因子(CTGF)和基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)的短发夹RNA(shRNA)表达质粒分别及共转染肝星状细胞(HSC)对CTGF、TIMP-1、I型前胶原(PCI)mRNA表达及细胞外基质(ECM)分泌的影响. 方法 筛选并成功构建靶向大鼠CTGF和TIMP-1有效RNA干扰靶位的shRNA表达质粒,分别及共转染转化生长因子β1刺激活化的大鼠HSC-T6细胞,荧光定量PCR检测各组细胞中CTGF、TIMP-1、PCI mRNA的表达;放射免疫法分析细胞上清液中Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、透明质酸(HA)和层黏连蛋白(LN)的含量.组间比较采取方差分析;多组间两两比较采用SNK-q检验. 结果 CTGFshRNA转染和双质粒共转染HSC-T6的CTGFmRNA相对表达量分别为0.59±0.03、0.62±0.01,与空白对照组、CTGFshRNA转染组的1和1.00±0.07比较,CTGF mRNA表达量均明显下降,F=66.515,P值均＜0.05,差异有统计学意义;而TIMP-1 shRNA组和双质粒共转染组的TIMP-1 mRNA相对表达量分别为0.66±0.04、0.68±0.03,与空白对照组、CTGFshRNA转染组的1和1.05±0.03比较,TIMP-1 mRNA表达量均明显下降,F=83.835,P值均＜0.05,差异有统计学意义;CTGFshRNA转染、TIMP-1shRNA转染和共转染组的PCI rnRNA相对表达量分别为0.55±0.02、0.57±0.02和0.41±0.01与空白对照组的1比较,PC I mRNA表达量均明显下降,F=709.905,P值均＜0.05,差异有统计学意义;双质粒联合转染对CTGF、TIMP-1、PC I的mRNA表达量抑制作用优于单质粒转染.CTGF shRNA转染、CIGF shRNA转染和双质粒共转染组的PCⅢ含量分别为(78.02±6.50) ng/ml、(79.03±5.47) ng/ml、(53.91±4.01)ng/ml,与空白对照组的(113.79±15.88)比较,PCⅢ含量均明显下降,P值均＜0.05,差异有统计学意义; CTGF shRNA转染、CTGF shRNA转染和双质粒共转染组的HA含量分别为(127.36±8.33)ng/ml、(116.55±3.37) ng/ml、(82.84±9.03) ng/ml,与空白对照组的(163.10±7.01)ng/ml比较,HA含量均明显下降,P值均＜0.05,差异有统计学意义CTGFshRNA转染、CTGF shRNA转染和双质粒共转染组的LN含量分别为(55.41±9.37)ng/ml、(49.77±6.70) ng/ml、(30.72±1.22) ng/ml,与空白对照组的(83.99±4.67) ng/ml比较,LN含量均明显下降,P值均＜0.05,差异有统计学意义.CTGF shRNA与TIMP-1 shRNA双质粒联合转染对PCⅢ、HA、HA分泌的抑制作用优于单质粒转染.结论 CTGF shRNA.TIMP-1 shRNA可明显抑制HSC的CTGF、TIMP-1、PCI基因表达及ECM的分泌,且shRNA联合干扰效果更显著,有望成为抗肝纤维化基因治疗的有效方法.     

血清基质金属蛋白酶及其组织抑制因子与肝纤维化

在正常肝脏纤维组织中存在着细胞外基质(ECM)的合成与降解的动态平衡。肝纤维化时纤维结缔组织的形成，是由于各种不同致病因子导致ECM合成与降解的失衡所致。基质金属蛋白酶(MMPs)是ECM降解的主要酶系，而其组织抑制因子(TIMPs)通过抑制MMPs，阻止ECM的降解，从而形成或促进肝纤维化。     

重型肝炎患者肝组织基质金属蛋白酶-1及其抑制因子-1 mRNA的表达

目的：观察重型肝炎患者基质金属蛋白酶－1（MMP－1）和金属蛋白酶组织抑制因子－1（TIMP－1）mRNA的表达以及胶原蛋白的沉积情况，从胶原降解的角度探讨重型肝炎致肝纤维化的机制。方法：重型肝炎肝组织标本20例，非肝病患者肝组织6例，用原位杂交法检测肝组织MMP－1和TIMP－1 mRNA-1 的表达，并作I、Ⅳ型胶原的免疫组化以及天狼红胶原染色。结果：与对照组比较，重型肝炎组的MMP－1 mRNA和TIMP－1 mRNA表达显著增加，肝组织胶原蛋白总含量和I、Ⅳ型胶原蛋白含量亦显著增加。肝组织胶原蛋白总含量和I、Ⅳ型胶原蛋白含量与MMP－1 mRNA表达无明显相关性，与TIMP－1 mRNA表达呈正相关。结论：重型肝炎患者肝纤维化的发生与金属蛋白酶抑制因子增加、抑制金属蛋白酶的活性、降低间质胶原蛋白的分解有关。     

金属蛋白酶组织抑制因子-1、-2在子宫内膜异位症中的表达

金属蛋白酶抑制因子(TIMPs)是体内基质金属蛋白酶(MMPs)的天然特异性组织抑制剂，通过抑制MMPs的活性及其产生，调控细胞外基质(ECM)的合成和降解，在妊娠分娩、伤口愈合、肿瘤浸润与转移等一系列生理病理过程中发挥重要作用。子宫内膜异位症(EMT)虽是一种良性妇科疾病，但却具有     

反义真核细胞转化生长因子βⅠ型受体与反义基质金属蛋白酶组织抑制因子-1联合作用对大鼠肝纤维化的影响

目的观察反义转化生长因子βⅠ型受体（TβRI真核表达质粒与反义基质金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）真核表达质粒联合作用对实验性大鼠肝纤维化的影响。方法构建大鼠反义真核细胞表达质粒，导入大鼠肝纤维化模型体内，通过I型胶原的免疫组织化学以及苦味酸-酸性品红染色观察两种反义质粒联合作用对大鼠肝纤维化的影响，用目标积分吸光度（A）值表示各实验组动物肝组织中蛋白的表达量。结果反义TβRI疗组、反义TβRI反义TIMP-1治疗组、反义TIMP-1治疗组、pcDNA3．1（＋）空质粒对照组、模型对照组、正常对照组TβRI白的A值分别为：（2．11±0．88）×10^5、（1．06±0．57）×10^5、（3．46±1．14）×10^5、（5．66±2．54）×10^5、（5．19±1．22）×10^5和（0．38±0．27）×10^5；TIMP-1蛋白的A值分别为：（1．10±0．22）×10^5、（0．30±0．12）×10^5、（0．65±0．15）×10^5、（2．05±0．36）×10^5、（1．97±0．28）×10^5和（0．10±0．12）×10^5；I型胶原的蛋白表达的A值分别为：（4．37±1．30）×10，、（0．90±0．32）×10^5、（3．40±0．91）×10^5、（6．90±1．61）×10^5、（7．34±1．68）×10^5和（0．41±0．21）×10s。反义TIMP-1治疗组TIMP-1蛋白表达量显著降低（P〈0．05），反义TβRI疗组TβRI白表达量显著降低（P〈0．05），两种反义质粒可有效抑制相应蛋白的表达；反义TIMP-1表达质粒与反义TβRI达质粒均可减少受损肝脏中I型胶原的沉积（P〈0．05），联合应用可进一步减少受损肝脏中I型胶原的沉积（P〈0．01）。在病理形态学方面的观察，反义TIMP-1表达质粒与反义TβRI达质粒均可使受损肝脏的病理形态有一定改善，联合应用可使受损肝脏的病理形态得到进一步的改善。结论反义TIMP-1表达质粒与反义TβRI达质粒对肝纤维化的发展均有一定的干预作用，联合作用可产生更有效的阻止作用。     

基质金属蛋白酶-9及其组织抑制因子-1在青年癫痫全面强直阵挛发作中的表达及意义

目的:探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其组织抑制因子-1(TIMP-1)与青年癫痫患者全面强直阵挛发作的关系。方法:对50例我院神经内科15~28岁的癫痫患者全面强直阵挛发作后3、6、12 h分别测定其血浆MMP-9、TIMP-1的水平,并与年龄匹配的稳定对照组、健康对照组比较。结果 :青年癫痫全面强直阵挛发作后3、6、12 h血清MMP-9水平为(64.69±15.23)、(90.21±22.74)、(67.51±18.36)μg/L,均高于稳定对照组[(44.27±13.55)μg/L]及健康对照组[(42.24±13.63)μg/L],差异有统计学意义(P0.05)。发作持续时间越长,MMP-9表达越高(均P0.05)。结论:青年癫痫患者发作后MMP-9/TIMP-1失衡,可能主要由于MMP-9的表达增高,而MMP-9水平与发作持续时间呈正相关,且不受抗癫痫药物影响。     

基质金属蛋白酶组织抑制因子1对小鼠成纤维细胞增殖和细胞外基质的影响

肺纤维化的主要病理改变为肺成纤维细胞 (ＬＦ)聚积和细胞外基质 (ＥＣＭ)积聚。ＬＦ在肺纤维化过程中有着重要的作用。ＬＦ几乎能合成全部有ＥＣＭ降解活性的基质金属蛋白酶 (ＭＭＰｓ)及其抑制剂 (ＴＩＭＰｓ) ,特别是ＴＩＭＰ 1 [1 ] ,当ＬＦ在静止状态下只能合成较低水平的ＴＩＭＰ 1 ,但其被激活后表达、合成并分泌大量的ＴＩＭＰ 1 ,阻止ＥＣＭ的降解 ,特别是其中胶原的降解 ,从而促进肺纤维化的形成和发展。因此 ,我们将人的正义和反义ＴＩＭＰ 1 (ｈＴＩＭＰ 1 )全长ｃＤＮＡ导入小鼠成纤维细胞 (ＮＩＨ3Ｔ3细胞 )中以期观察其对Ｎ…     

血清基质金属蛋白酶-2及其组织抑制因子-1与糖尿病高血压和肾病的相关性研究

目的探讨2型糖尿病患者（T2DM）血清基质金属蛋白酶-2（MMP-2）及其组织抑制因子-1（TIMP-1）在糖尿病高血压、肾损害发病中的作用.方法随机收集T2DM患者64例,其中,无合并症者24例,合并高血压者20例,合并肾病者20例以及健康对照者24例.以ELISA法测定MMP-2、TIMP-1的含量.结果糖尿病患者尤其是合并高血压和肾病患者血清MMP-2明显低于健康对照组（P＜0.01）,并且随病情发展呈逐渐降低的趋势.而血清TIMP-1随病情的发展则呈现明显升高趋势,无合并症组、合并高血压组和合并肾病组TIMP-1水平明显高于健康对照组（分别为P＜0.05,P＜0.01和P＜0.01）.结论MMP-2和TIMP-1可能参与了糖尿病高血压、肾损害的发生发展过程,对其检测可能为糖尿病及其并发症的早期诊断和治疗提供新的依据.     

慢性肝病患者血清基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶-2组织抑制因子与肝纤维化指标的关系

目的 观察慢性乙型病毒性肝炎（乙肝）和乙肝后肝硬化患者血清中的基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶-2组织抑制因子（TIMP-2）和肝纤维化指标（HA、LN、ⅣC）及其相关性。方法 检测36例慢性乙肝、36例乙肝后肝硬化和20例对照组的血清MMP-2及TIMP-2,同时检测上述肝病患者血清肝纤维化指标。分析MMP-2、TIMP-2和肝纤维化指标之间的相关性。结果 慢性乙肝重度、肝硬化A级、B级、C级患者血清MMP-2、TIMP-2分别较对照组、慢性乙肝轻度、中度明显升高（P〈0．001）;而慢性乙肝轻度、中度患者MMP-2、TIMP-2与对照组比较无显著性差异（P〉0．05）。慢性乙肝轻、中度之间MMP-2、TIMP-2比较无明显差异（P〉0．05）。血清MMP-2、TIMP-2水平分别与HA、LN、ⅣC有良好相关性;MMP-2与后三者的r值分别为0．928、0．909和0．826;TIMP-2与后三者的r值分别为0．688、0．556和0．644,P值均〈0．001。结论 TIMP-2、MMP-2在慢性肝病患者血清中明显升高,并且分别与肝纤维化血清学指标（HA、LN、ⅣC）有良好的相关性。MMP-2和TIMP-2可作为评价纤维化的指标之一。     

骨关节炎患者基质金属蛋白酶和转化生长因子-β的检测及其临床意义

骨关节炎 (ＯＡ)为最常见的关节炎 ,其病理特点为关节软骨进行性变性和破坏及骨赘形成。ＯＡ患者关节软骨细胞外基质合成与降解失衡是造成软骨变性的重要原因之一 ,其中基质金属蛋白酶 (ＭＭＰｓ)可能起决定性作用。转化生长因子 β(ＴＧＦ β)影响软骨代谢的机制与促进金属蛋白酶组织抑制因子表达有关。有研究表明 ,ＴＧＦ β是促进ＯＡ软骨修复的机制之一。我们对临床诊断为骨关节炎的患者进行血清ＭＭＰ 9和ＴＧＦ β的测定 ,并与正常人对照 ,探讨ＭＭＰ 9和ＴＧＦ β的临床意义。对象与方法1.对象 :2 0 0 0年 9月～ 2 0 0 2年 1月我院…     

基质金属蛋白酶及其组织抑制因子和肝纤维化

肝纤维化是各种病因引起的慢性肝病的共同病理归宿。慢性肝损伤过程中,肝星状细胞(HSC)在炎症和各种细     

胃肠安方对胃癌基质金属蛋白酶9及基质金属蛋白酶抑制因子1/2蛋白表达的影响

[目的]观察胃肠安方对人胃癌裸鼠原位移植瘤转移的抑制作用及其对基质金属蛋白酶9 (matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制因子(matrix metalloproteinases tissue inhibitor,TIMP)-1、TIMP-2蛋白表达的影响.[方法]建立裸小鼠胃原位癌模型,分为胃肠安方组及模型组,观察裸小鼠胃癌种植后肿瘤转移灶情况以及与肿瘤生长与转移密切相关的MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的影响.[结果]胃肠安方能够抑制胃癌生长与转移,与模型组比较,差异具有统计学意义(P＜0.05).胃肠安方组MMP-9蛋白阳性表达明显弱于模型组,TIMP-1及TIMP-2蛋白阳性表达明显强于模型组.[结论]胃肠安方具有抑制人胃癌裸鼠原位移植瘤转移作用,其抑制胃癌转移的部分作用机制与抑制MMP-9蛋白表达及上调TIMP-1、TIMP-2蛋白表达有关.     

血清和关节液中基质金属蛋白酶-3及其抑制因子-1的检测及临床意义

软骨破坏是骨关节炎（osteoarthritis，OA）的主要病理特征。关节软骨破坏有两种途径：一种是内在途径，即软骨细胞自身降解软骨细胞外基质；另一种途径是外在途径，如炎症滑膜、血管翳组织、浸润的炎症细胞，通过关节滑液（synovial fluid．SF）破坏软骨细胞外基质。两种途径中酶性降解细胞外基质是软骨破坏的主要原因。研究表明在各种蛋白酶中，     

转化生长因子β1和基质金属蛋白酶抑制因子-1在肝纤维化诊断中的作用及关系

目的通过检测慢性乙型肝炎患者血清TGFβ1和TIMP-1在肝纤维化不同阶段的表达情况,探讨TGFβ1和TIMP-1在肝纤维化诊断中的作用及相互关系。方法采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测40例慢性乙型肝炎患者和12名健康体检者血清TGFβ1、TIMP-1水平,RIA检测血清HA,LN、Ⅲ型前胶原氨基端肽（P．ⅢNP）水平,40例患者全部进行肝活组织检查,分析TGFβ1、TIMP-1与肝组织纤维化程度分期和炎症活动度分级的关系以及五项指标之间的相关性。结果血清TGFβ1、TIMP1在肝纤维化早期即明显升高,敏感性优于HA、LN、PⅢNP;且随肝纤维化程度的加重TGFβ1、TIMP-1逐渐升高（P＜0．05）;TGFβ1变化趋势与TIMP-1、HA、LN、PⅢNP均呈正相关（P＜0．01）,与TIMP-1相关性最强。结论TGFβ1、TIMP-1密切参与肝纤维化的形成过程,TIMP-1可能受TGFβ1调节,二者可作为早期肝纤维化的诊断指标。