皮层机能定位教学实验方法的改进

大脑皮层机能定位实验是列入我国大中专医学院校生理教学大纲的项目。但是,沿用至今的开颅法实验,由于损伤性大、麻醉程度深等缺点,严重影响了本实验的开出率和成功率。 我们教研组自1977年开始试用不开颅的针形电极刺入法进行实验,基本克服了上述缺点。最近又利用这一方法对50只家兔皮层     

大鼠大脑中动脉线栓法制备局灶性脑缺血模型的研究现状

制备局灶性脑缺血模型的方法有很多种,常用的有电凝或夹闭大脑中动脉(MCA)、光化学诱导血栓形成、颈动脉注射血凝块栓子等。目前国内外广泛应用的另一种方法是血管内线栓闭塞法(线栓法)大脑中动脉阻塞(MCAO)模型。由于该方法不需要开颅,创伤小,手术时间短,术后动物存活期较长,缺血部位恒定,且可以准确控制缺血及再灌注时间,所以线栓法MCAO模型,目前广泛应用于实验研究,现将该模型的研究现状作一概述。1动物品系、体重和鼠龄的选择尽管一些体积较大的动物,如猫、狗、兔都用于脑缺血研究,但是大多数实验室选择大鼠或沙土鼠作为研究对象,…     

颅骨骨缝与大脑表面关系的解剖学研究

目的研究颅骨骨缝与大脑表面的解剖位置关系,为开颅手术等提供更加精确的定位。方法对6具尸体的头颅标本(12侧)进行解剖观察,并记录数据和留取图像资料。结果外侧裂位于鳞状缝的下方,与外侧裂线不重叠,外侧裂线平均高于外侧裂。左侧中央沟位于上、下中央沟点连线上,右侧中央沟的中段与上、下中央沟点连线基本重叠,上、下两端稍偏向连线之后,冠状缝与中央沟的距离上宽下窄。结论了解颅骨骨缝与大脑表面的解剖位置关系对神经外科开颅手术中从正确的颅骨骨瓣成形至快速地到达颅内特定部位有一定帮助。     

大鼠大脑皮层至海马的传入联系

海马为边缘皮层(古皮层),在结构和机能上与大脑皮层的关系均甚密切。二者在结构上到底有无直接纤维联系,我们曾用HRP(辣根过氧化酶)法对海马至大脑皮层的传出联系进行了研究,结果表明,大鼠海马发出纤维投射到大脑皮层广泛区域;那么,大脑皮层有无纤维传入到海马,为此,我们仍用HRP法进行了探讨。     

家兔膈神经运动及感觉神经元胞体的位置-HRP法

<正> 分布到膈肌的膈神经运动纤维起于脊髓颈段的下位运动神经元胞体群,称为“膈核”。家兔的膈核最早由Kohnstamm(1898)、Marinesco(1898)和Sano(1898)所定位。在较早的研究中,用神经溃变法探明家兔膈核位于C_4、C_5和C_6节段。近年开始用HRP法研究,但对膈核在脊髓里的准确位置至今仍有争论。鉴于目前有关脑干呼吸中枢的生理学研究多数以兔和猫为实验动物,因此本研究用较敏感的二盐酸联苯胺显示HRP颗粒的方     

电针结合康复训练对缺血脑卒中大鼠Notch1与Notch4表达的影响

目的探讨电针结合康复训练治疗对脑卒中大鼠神经功能及大鼠大脑皮层Notch1与Notch4表达的影响。方法 60只SD大鼠随机分为3组:假手术组(S)、模型组(M)与电针+康复训练组(E),采用大脑中动脉阻塞法(MCAO)建立局灶性脑缺血动物模型。采用Longa法评定实验大鼠的神经功能缺损程度,免疫组织化学方法与Western blot和real time PCR方法检测大鼠大脑皮层Notch1与Notch4表达。结果与模型组相比,电针+康复训练组大鼠在实施治疗后,Longa评分明显改善(P0.01)。与假手术组相比,模型组大鼠大脑皮层Notch1与Notch4蛋白与mRNA表达水平显著升高(P0.01);而与模型组相比,电针+康复训练组大鼠大脑皮层Notch1与Notch4蛋白与mRNA表达水平升高更为显著(P0.01)。结论电针结合康复训练改善脑卒中大鼠的神经功能可与上调大鼠大脑皮层Notch1与Notch4的表达相关。     

C_6与美加明对抗烟碱引起惊厥的作用比较

烟碱可以引起惊厥,EEG表现为癲痫样放电。C_6和美加明都是神经节N_1受体阻断 剂,二者都能对抗烟碱引起的惊厥。本实验比较了两种药物在中枢不同部位的抗惊厥作用。 实验用记录大鼠脑电图方法进行。实验Ⅰ系在脑完整情况下进行。实验Ⅱ在开颅后在中脑上、下四叠体处切断,阻断神经传递。实验Ⅲ系开颅后游离一侧大脑皮层,保持其血液供应,银球电极记录游离皮目脑电变化,电极置放于双侧额、顶、枕部及海马。     

大脑皮层组织移植研究的发展与现状

<正> 脑组织移植的研究已有整整一个世纪的历史。早在1890年,Thompson 就在纽约医学杂志上发表了题为“成功的脑移植”的报告,他将成年猫和狗的大脑皮层组织分别移植到成年狗的大脑皮层,2周后切片在显微镜下观察到移植块内大部分组织已坏死,但有少量移植的神经元存活。Saltykow(1905)行幼兔大脑皮层移植,移植物存活8天。Del Conte(1907)首次试图将哺乳动物(兔)胚胎脑组织作     

液氮低温冷冻引起脑组织病理改变的实验研究

冷冻疗法是近代治疗学的一项新进展,多用于治疗浅表性疾患或肿瘤,而治疗内脏肿瘤尤其是治疗颅内肿瘤的实验研究,国内未见系统的报告。为配合冷冻切除脑瘤工作的开展,我院自1979年6月开展对脑的局部冷冻的动物实验,其结果如下。材料及方法采用体重2.5～3kg重的健康家兔12只,分四组进行实验(每组各3只)。1组:未冷冻的正常兔脑组织(对照组)。2组(离体标本组):将健康家兔处死后立即取其蚕豆大之大脑组织一块,迅     

蛛网膜下腔出血引起模型大鼠大脑感觉皮层S1区胶质细胞活化

目的研究蛛网膜下腔出血(SAH)对大鼠大脑感觉皮层S1区胶质细胞的影响。方法利用单丝尼龙线穿刺大脑中动脉(MCA)法制备大鼠SAH模型,通过神经功能评分判断大鼠神经系统损伤程度,采用实时定量PCR检测大鼠大脑感觉皮层S1区肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)的mRNA水平,利用ELISA检测大鼠皮层S1区TNF-α和IL-1β蛋白水平,采用免疫组织化学染色检测大鼠皮层S1区小胶质细胞/巨噬细胞标志物离子钙结合接头蛋白分子1(Iba-1)以及星形胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达。结果 SAH导致大鼠神经功能严重受损,SAH手术同侧的大脑皮层S1区TNF-α和IL-1β水平增加,对侧有轻度增加,免疫组织化学染色可以观察到SAH手术可以导致大脑皮层S1区Iba-1和GFAP表达明显增强。结论 MCA穿刺法制备的SAH模型可以引起大鼠大脑皮层S1区胶质细胞活化和TNF-α、IL-1β水平增加。     

一种新型兔胫骨在体力学加载模型的构建

目的建立一种新型兔胫骨在体力学加载模型,为组织工程支架原位成骨的实验研究提供依据。方法 6个月龄新西兰兔10只,雌雄不限,体质量2.5~3.0kg。采用新西兰兔制备直径3.2mm的胫骨孔状缺损,植入组织工程支架材料,并于缺损两端约1.4cm处行克氏针穿刺术,用于施加压缩载荷;选择1只兔胫骨标本进行Micro-CT断层扫描,采用有限元Mimics 10.01软件建立仿真模型,于上位克氏针两端施加压缩应变(ε1)0~5 000με,计算缺损部位整体应变ε2,拟合ε1-ε2关系曲线。术后10d处死3只实验动物,取材手术侧胫骨,进行离体标本加载实验,验证有限元分析的结果;术后2周对其余实验动物术侧胫骨施加正弦压缩载荷(10Hz,1000με,10min/3d),持续2周,检测动物模型的可行性。结果有限元分析结果可以为在体加载提供数据支持,标本实验验证了有限元分析的可靠性;参照有限元结果,该在体加载模型可以准确地控制加载参数,并且动物实验表明,该模型制备稳定,动物损伤较轻,具有大规模开展实验的可行性。结论通过有限元建模与标本实验相结合是建立动物实验模型的一种有效手段,在体加载模型能够为力学因素干预组织工程支架原位成骨的相关实验研究提供支持。     

大鼠海马至顶叶、额叶和颞叶皮层的传出纤维投射

在结构上,海马属于古皮层,是最靠近大脑新皮层的脑组织;在功能上,它属于学习记忆、情绪反应和行为活动的重要中枢。然而大脑皮层的额叶和颞叶与这些功能的关系更为密切,大脑皮层的顶叶又与注意(attention)活动有关。由此提示,无论从结构上或功能上来看,有关海马至大脑皮层传出联系都是比较紧密的。但是,有关海马至大脑皮层传出联系的报导不多,而有关鼠的资料更属罕见。为此,我们应用辣根过氧化酶(HRP),轴浆逆行传递法观察了大鼠海马向顶叶、额叶和颞叶皮层的直接纤维投射。     

淀粉样蛋白膜内片段疫苗对APP转基因小鼠的治疗研究

目的依据淀粉样蛋白膜内片段(intramembranous fragments of amyloid-β,IF-Aβ)的膜定位和小分子特点,在体研究IF-Aβ疫苗对淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)转基因(transgenic,Tg)小鼠的治疗作用,以期寻找较Aβ42更安全有效的治疗阿尔茨海默病(alzheimer’s disease,AD)的治疗疫苗。方法分别用PBS、KLH-IF-Aβ(50μg/只)、KLH-IF-Aβ(100μg/只)和KLH-Aβ42(100μg/只)免疫对照组、IF50组、IF100组和Aβ42组6月龄APP Tg C57BL/6J小鼠,共4次2.5月;水迷宫检测APP Tg小鼠认知功能变化;ELISA检测血清抗体和脾细胞释放γ-干扰素;组织学检测模型鼠大脑老年斑的变化;评价免疫APP Tg小鼠大脑淋巴细胞浸润情况。结果免疫4个月后,IF-Aβ疫苗对APP转基因小鼠具有良好的体液和细胞免疫原性;IF50组小鼠的认知功能加强,大脑皮层区老年斑有所减少,大脑皮层和海马区无明显的淋巴细胞浸润;IF100组小鼠的认知功能下降,大脑皮层老年斑明显减少,大脑皮层和海马区出现明显的淋巴细胞浸润;Aβ42组小鼠认知功能有所提高,大脑皮层老年斑明显减少,大脑皮层和海马区出现淋巴细胞浸润。结论在合适的免疫剂量下,与Aβ42比较,IF-Aβ对APP转基因模型小鼠的治疗更加安全有效,为AD免疫治疗的临床研究开辟了一个新的良好前景。     

窦房结自律细胞对低氧的耐受性

用常规玻璃微电极技术引导兔离体窦房结自律细胞(SN-AC)动作电位(AP),比较低氧(含氧5.2ppm)和充氧(含氧8ppm)台氏液灌流条件下SN-AC电活动的特点,探讨低氧对SN-AC机能活动的影响。     

基于粒子图像测速技术的急性高眼压兔眼在体实验研究

目前对于在体眼内房水流动的实验研究较少,相关技术也不成熟。本研究旨在利用粒子图像测速(PIV)技术,探索急性高眼压下兔眼前房这种低速流场的在体测量实验方法和关键技术。研究内容包括急性高眼压兔眼造模、在体测试眼球准备和PIV系统搭建三个部分。重点探究用于兔眼PIV实验的荧光粒子最佳注射方案,以及图像折射和呼吸影响带来的图像采集误差修正方案。研究结果显示,采用15μL荧光粒子溶液从虹膜下方缓慢注入兔眼前房后回笼等待13 h,使粒子借助房水循环均匀分布在前房,即可进行在体PIV实验测量;实验时,需使用带超声耦合胶的方形水槽盖在眼上进行摄像;对测量结果进行后处理计算前,可采用最大互信息算法对数据进行校正。最终研究结果表明,在用PIV技术对急性高眼压兔眼进行在体前房房水流场测试时,选定合适的荧光粒子注射方案及图像采集修正方案对于得到良好的实验效果至关重要。     

健康人大脑和小脑空间记忆认知功能的fMRI研究

本研究应用功能磁共振成像(functional magnetic resonance imaging,fMRI)技术,检测了健康人大脑和小脑参与空间记忆的认知过程。通过对10名右利手健康志愿者进行一项短时空间记忆任务作业的同时进行脑功能磁共振扫描,实验采用组块设计,任务与对照任务交替进行,数据采用SPM99软件进行数据分析和脑功能区定位。结果显示:当统计阈值设定为P<0.0001时,大脑皮层和右侧小脑一起被显著激活;大脑皮层所激活的脑区有双侧顶叶的楔前叶、顶上小叶、缘上回(BA7/40,BA:Brodma-nn Area),双侧前额上、中、下回(BA6/9/47),双侧枕叶和枕颞交界处(BA18/19/37),右侧海马回;左侧中脑黑质及被盖部也被激活。上述结果提示:小脑和大脑皮层一起参与了空间记忆的认知过程。     

比较线栓法和电凝法制作小鼠大脑中动脉栓塞模型（英文）

目的:目前制作脑缺血模型的的方法主要包括四血管栓塞法、线栓法、光化学法等,每种方法都各有利弊。为了制作一个适合细胞移植治疗缺血性脑损伤的动物模型,本实验比较了电凝法和线栓法制作的小鼠大脑中动脉栓塞模型。方法:本实验采用电凝法和线栓法建立小鼠大脑中动脉栓塞模型。氯化三苯基四氮唑染色确定缺血坏死区。行为学实验评价模型的效果。结果:电凝组缺血坏死区局限在小鼠大脑皮质,而线栓法小鼠缺血坏死区的位置不恒定,而且成活率非常低,不能满足进一步的实验需求。在角落实验与圆筒实验,电凝组与假手术组之间有明显的行为学差异。结论:电凝法可成功建立大脑中动脉栓塞模型,为细胞移植治疗缺血性脑损伤奠定基础。     

N-甲基-D-天冬氨酸受体NR1亚基调控大脑皮层神经元放射状迁移

目的探讨N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体在大脑皮层发育过程中参与调控皮层神经元放射状迁移的情况。方法通过在体子宫内胚胎电转基因和RNA干扰技术(RNAi),在发育的大鼠胚胎脑内干扰NMDA受体的NR1亚基表达,结合荧光免疫组织化学技术,追踪基因转染上的神经元在大脑发育过程中的迁移途径和特征。结果转染上对照质粒的皮层神经元能通过放射状迁移,在出生后第7天(P7)之前迁移到皮层的正确位置,即2～3层,而干扰NR1基因表达后的神经元则不能正常地放射状迁移至皮层的2～3层,P7时仍停留在皮层深层位置,甚至发生区。结论 NMDA受体在大脑皮层神经元放射状迁移过程中起关键性作用,有助于理解胚胎发育过程中迁移的机制并为预防控制神经元迁移异常提供依据。     

比较线栓法和电凝法制作小鼠大脑中动脉栓塞模型

目的:目前制作脑缺血模型的的方法主要包括四血管栓塞法、线栓法、光化学法等,每种方法都各有利弊.为了制作一个适合细胞移植治疗缺血性脑损伤的动物模型,本实验比较了电凝法和线栓法制作的小鼠大脑中动脉栓塞模型.方法:本实验采用电凝法和线栓法建立小鼠大脑中动脉栓塞模型.氯化三苯基四氮唑染色确定缺血坏死区.行为学实验评价模型的效果.结果:电凝组缺血坏死区局限在小鼠大脑皮质,而线栓法小鼠缺血坏死区的位置不恒定,而且成活率非常低,不能满足进一步的实验需求.在角落实验与圆筒实验,电凝组与假手术组之间有明显的行为学差异.结论:电凝法可成功建立大脑中动脉栓塞模型,为细胞移植治疗缺血性脑损伤奠定基础.     

医用臭氧水对兔膝关节骨性关节炎软骨p38MAPK、ERK与JNK表达的影响

目的观察医用臭氧水对兔膝关节骨性关节炎关节软骨有丝分裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、细胞外信号调节激酶(ERK)与c-jun氨基末端激酶(JNK)表达的影响。方法成年新西兰大白兔36只,随机分为对照组12只、骨性关节炎组12只与医用臭氧水治疗组12只。采用Hulth法将骨性关节炎组与医用臭氧水治疗组实验动物制成膝关节骨性关节炎模型。待造模成功后,医用臭氧水治疗组向兔膝关节腔内注射医用臭氧水2ml,注射浓度为20μg/ml,一周一次,共治疗3次,骨性关节炎组兔关节腔内注射空气;对照组实验动物不作处理。在造模成功时和处死前测定兔膝关节活动度,末次干预1周后,用空气栓塞法处死实验兔,取下实验兔右膝关节软骨进行组织匀浆,采用Western blot与real time PCR方法测定关节软骨中p38MAPK、ERK和JNK的含量变化。结果与对照组相比,造模成功后的骨性关节炎组和医用臭氧水治疗组兔膝关节活动度显著降低(P0.01);与骨性关节炎组相比,采用医用臭氧水治疗后,医用臭氧水治疗组兔膝关节活动度显著升高,膝关节软骨组织中p38MAPK、ERK和JNK的蛋白与m RNA表达水平均显著降低(P0.01)。结论医用臭氧水能明显降低早期骨性关节炎关节软骨中p38MAPK、ERK和JNK的表达水平,这可能是臭氧水治疗骨性关节炎的重要机制之一。