对二氯苯染毒雄性小鼠体细胞与生殖细胞染色体畸变分析

[目的 ]研究对二氯苯的遗传毒性作用。 [方法 ] 40只雄性昆明种小鼠随机分成 5组 ,每组 8只。实验组小鼠连续 5d分别以 180 0、90 0、45 0mg/kg剂量对二氯苯经口灌胃 ,阴性对照组小鼠以等量花生油灌胃 ,阳性对照组小鼠以40mg/kg剂量环磷酰胺腹腔注射。末次染毒 2 4h后处死动物 ,分析骨髓细胞以及精原细胞与初级精母细胞染色体畸变率。 [结果 ]对二氯苯各剂量染毒组雄性小鼠骨髓细胞以及精原细胞和初级精母细胞染色体畸变率与阴性对照组比较均无统计学显著性增高 (P >0 0 5 ) ,各剂量染毒组初级精母细胞常染色体早熟分离发生率与阴性对照组比较也均无统计学显著性差异 (P >0 0 5 ) ,但高剂量染毒组初级精母细胞性染色体早熟分离发生率非常显著高于阴性对照组 (P <0 0 1)。[结论 ]在本实验剂量下未观察到对二氯苯对骨髓细胞染色体结构畸变的诱发作用 ,但一定剂量对二氯苯可能对初级精母细胞性染色体早熟分离有一定的影响     

二硫化碳吸入染毒对大鼠睾丸组织病理改变及细胞凋亡的影响

[目的]观察二硫化碳（CS2）对雄性大鼠睾丸组织病理改变及细胞凋亡的影响。[方法]24只健康雄性Wistar大鼠随机分为4组，以不同浓度CS2（0、50、250、1250mg／m^3）吸入染毒，每天2h，每周5d，共10周。染毒结束后，取大鼠睾丸以HE染色，采用普通光镜、电镜及末端转移酶标记技术（TUNEL法）观察在CS2作用下，睾丸组织的病理变化及细胞凋亡的情况。[结果]随CS2染毒浓度的增加，大鼠睾丸间质水肿加重；高浓度组曲细精管生精细胞数目及层次明显减少。在低、中浓度组可见间质细胞内质网扩张，精原细胞、初级精母细胞的线粒体发生肿胀；高浓度组支持细胞、间质细胞、精原细胞、初级精母细胞及精子细胞均出现胞质空洞，精原细胞、初级精母细胞线粒体肿胀加重，精子细胞线粒体也出现肿胀，精子纵切面“9^＊2＋2”轴丝结构紊乱，微管溶解缺失。随CS2染毒浓度的增加，睾丸组织中细胞凋亡指数增高，中、高浓度组细胞凋亡指数与对照组比较有统计学意义（P〈0．05），异常增多的凋亡细胞以精母细胞为主。[结论]CS2可导致大鼠睾丸组织发生病理变化，生精细胞异常凋亡。     

CRISP2蛋白研究进展

CRISPs（cysteine rich secretory proteins）蛋白家族有4个成员,CRISP2是唯一在睾丸中表达的CRISPs成员,组织特异性较高。精母细胞表达和分泌CRISP2,不受雄激素的影响。CRISP2分布于生精上皮内,定位于精母细胞和支持细胞间的连接处,可以增强精母细胞连接到支持细胞上的能力;继而存在于圆形精子细胞及延长型精子细胞,可结合到精子尾部和头部顶体,并最终定位于精子尾部以及顶体。CRISP2可能与精子顶体RyR3受体结合调节Ca²⁺内流;此外,CRISP2可能还具有调节RyR受体之外的其他离子通道（如抑制K⁺通道）的功能。研究表明,CRISP2参与了精子成熟和获能的全程,也在精卵结合的过程中起一定作用。综述CRISP2蛋白在睾丸的表达和分布、调控以及作用。     

氟铃脲对小鼠骨髓细胞和生殖细胞染色体畸变作用分析

[目的]了解氟铃脲的遗传毒性作用.[方法]选取55只小鼠,随机分成实验组、阴性对照组和阳性对照组.实验组以不同LD50剂量氟铃脲对小鼠经口灌胃染毒,阴性对照组以5g/L羧甲基纤维素钠溶液经口灌胃,阳性对照组以40 mg/kg剂量磷酰胺腹腔注射.末次染毒6 h后颈椎脱臼处死动物,按常规制片制备骨髓细胞和睾丸初级精母细胞染色体,分析小鼠骨髓细胞和睾丸初级精母细胞染色体畸变率.[结果]氟铃脲各剂量染毒组雄性小鼠骨髓细胞和初级精母细胞染色体畸变率与阴性对照组比较差异均无统计学意义(X2=2.285,0.502,0.144,0.198,0.159,0.471,1.003,P＞0 05),各剂量染毒组初级精母细胞常染色体及性染色体早熟分离发生率与阴性对照组比较差异也均无统计学意义(X2=1.672,0.714,2.274,P＞0 05).[结论]在本实验剂量下未观察到氟铃脲对骨髓细胞和生殖细胞染色体结构畸变的诱发作用.     

弓形虫致雄性生殖激素异常对生精细胞凋亡的影响

[目的]研究弓形虫感染后对雄性小鼠黄体生成素(LH)、睾酮(T)水平的影响,进一步探讨其对雄性睾丸生殖细胞的损伤特点. [方法]选用10周龄雄性BALB/C小鼠72只,随机分为:正常对照组、弓形虫感染组(1×103、2×103、4×103、8×103)及阳性对照组(环磷酰胺).采用腹腔注射法,建立弓形虫感染模型,放射性免疫检测小鼠血清LH、T以及睾丸局部T水平;流式细胞仪检测睾丸生精细胞的凋亡情况并免疫组化SP法测定睾丸Bax、Bc1-2表达的变化. [结果]血清LH变化不明显,血清及睾丸局部的T水平降低(P＜0.05);睾丸细胞Bcl-2表达无明显改变,而生精细胞尤其是精母细胞的Bax表达明显增加;流式细胞仪检测正常对照组未出现明显的凋亡峰,实验组的二倍体出现明显凋亡,四倍体细胞减少. [结论]弓形虫感染导致生精细胞,尤其是精母细胞的大量凋亡可能与局部T水平的降低密切相关.     

子宫内膜异位症患者外周血单个核细胞T细胞亚群、mIL-2R表达及临床意义

[目的]探讨子宫内膜异位症患者外周血单个核细胞(PBMC)T细胞亚群、mIL-2R表达及临床意义。[方法]用生物素-链霉亲素(BSA)法检测T细胞亚群和mIL-2R表达水平,以PHA体外诱导PBMC中mIL-2R表达。[结果]子宫内膜异位症患者CD3 、CD4 、CD8 及CD4 /CD8 比值分别为(38.9±7.0)%、(29.2±6.6)%、(23.9±4.2)%、1.3±0.5;PHA诱导前后mIL-2R表达水平分别为(3.9±1.2)%和(21.7±5.3)%,与正常对照相比,差异有统计学意义(P﹤0.5)。[结论]子宫内膜异位症患者存在定程度细胞免疫功能低下表现,T细胞活化障碍,并参与子宫内膜异位症的致病过程。     

亚硒酸盐加入方法对沙门菌增菌效果的影响

[目的 ]观察亚硒酸氢钠在亚硒酸盐胱氨酸增菌培养基 (SC)中直接加入SC[1] ,与基础培养基灭菌冷却后再加入SC[2 ] ,对沙门菌的增菌效果。[方法 ]以实验室常用方法测定沙门菌及非沙门菌在两SC增菌培养基中生长的灵敏度及选择性 ,比较两培养基对粪便标本中沙门菌的检出率。[结果 ]SC[2 ]培养沙门菌及非沙门菌 ,出现可见生长的最低接种浓度 ,前者明显小于后者 ,呈现良好的选择性 ;SC[1]对沙门菌和非沙门菌增菌的选择性相对较差。对粪便标本中沙门菌的检出率SC[2 ]明显高于SC[1]。[结论 ]SC[2 ]方法配制培养基对沙门菌的选择性增菌作用明显优于SC[1]方法 ,有利于提高沙门菌的检出率。     

FOLFOX4方案治疗晚期胃癌的临床研究

[目的]研究FOLFOX4方案治疗晚期胃癌的疗效和毒副反应。[方法]观察82例晚期胃癌患者。41例治疗组患者予以FOLFOX4方案治疗:奥沙利铂85mg/(m·2d),静脉滴注2h,d1;亚叶酸钙200mg/(m2·d)静脉滴注2h,d1、2;5-FU 400mg/(m2·d),于亚叶酸钙滴完后快速滴注,d1、2;5-FU 600mg/(m·2d),持续泵入24h,d1、2。每2周重复,4周为1个周期。至少连用2个周期后疗效评定。41例对照组患者方案为:亚叶酸钙200mg/(m·2d)静脉滴注2h,d1～5;5-FU 0.75mg/(m·2d),于亚叶酸钙滴完后滴注,d1～5。[结果]治疗组完全缓解率(CR)为7.3%,部分缓解率(PR)为46.3%,总有效率(CR PR)为53.6%;对照组完全缓解率(CR)为2.4%,部分缓解率(PR)为22%,总有效率(CR PR)为24.4%。毒副反应主要为神经毒性、骨髓抑制和消化道反应。[结论]FOL-FOX4方案治疗晚期胃癌的疗效优于5-FU 亚叶酸钙方案,毒副反应患者可以耐受。     

亚甲基蓝离子液相光度法测定

亚甲基蓝(methylene blue)是一种具有平面结构的碱性生物染色剂,在药学上是一种吩噻嗪类药物,临床上用作亚硝酸盐、氰化物等特效解毒药.亚甲基蓝可通过阻断一氧化氮(NO)来抑制鸟苷酸环化酶,有助于治疗肝肺综合症患者的肺气管扩张^[1],还具有血浆灭活作用^[2].对亚甲基蓝的分析测定有光度法^[3]、离子缔合物荧光法^[4]、化学发光法^[5]等.本实验以离子液体溴化1-丁基-3-甲基咪唑([Bmim]Br)和(NH4)2SO4形成的双水相体系,研究亚甲基蓝的分配性能.     

早产儿辅助性T细胞亚群功能特点的初步观察

[目的]探讨早产儿辅助性T细胞（Th)亚群功能特点。[方法]以足月新生儿为对照，ELISA法检测21例早产儿外周血单个核细胞体外产生γ-干扰素（IFN-γ）、白细胞介素（IL-2，IL-4和IL-6）水平。[结果]早产儿外周血单个核细胞体外产生INF-γ，IL-2，IL-4和IL-6水平均明显低于足月儿，尤以IFN-γ和IL-2更为突出。[结论]早产儿Th(包括Th1和Th2)功能明显低于足月儿，但其Th1/Th2状态与足月儿相似，即Th2亚群功能占优势，相对强于Th1亚群功能。     

小鼠粗线期精母细胞T型Ca2+通道电流特性及氰戊菊酯对它的影响

[目的] 建立小鼠粗线期精母细胞T型Ca2+通道电流膜片箝记录方法,并观察拟除虫菊酯类杀虫剂氰戊菊酯的作用.[方法] 应用膜片箝技术,全细胞方式下记录小鼠粗线期精母细胞T型Ca2+通道电流,并用各种特异的通道阻断剂和激动剂确定电流特性,与体细胞T型Ca2+通道电流比较;通过胞外给药,观察氰戊菊酯对T型Ca2+通道电流影响.[结果] 当以Cs+、TEA+阻断K+电流,记录到一-60 mV激活,-20～-30 mV达到最大值的内向电流,该电流呈快速激活快速失活.加入Na+通道阻断剂TTX,对记录的内向电流无影响,表明该内向电流不含有Na+电流成分,是由Ca2+通道开放产生.另该电流对L型Ca2+通道激动剂BayK 8644不敏感,但对Cd2+、Nifedipine两种Ca2+通道阻断剂较敏感,提示其为T型Ca2+通道电流.与体细胞典型T型Ca2+通道比较,粗线期精母细胞T型Ca2+通道有自身特点.研究氰戊菊酯对记录的T型Ca2+通道电流的作用显示50 μM*L-1氰戊菊酯在加入后3～5min开始抑制T型Ca2+通道电流,于9～10 min达到最大抑制作用,并有明显的剂量-反应关系.[结论] 小鼠粗线期精母细胞主要存在T型Ca2+通道,而不含有L型Ca2+通道,但与典型T型Ca2+通道电流比较,精母细胞的T型Ca2+通道电流又有许多不同之处,如较特异的T型Ca2+通道阻断剂miberadil只有在较高浓度下,才显示抑制作用.相反,其对二氢吡啶类化合物(DHP)较敏感.氰戊菊酯对粗线期精母细胞T型Ca2+通道电流的抑制作用提示,作为农业生产中一种广泛使用的杀虫剂,应重视它对男性生殖健康的影响.     

铅对钾通道亚单位和NMDA受体亚单位的影响

[目的 ]研究低浓度铅对大鼠海马神经元钾通道亚单位和NMDA受体亚单位的影响及其作用机制。 [方法 ]应用全细胞膜片钳技术和原位杂交技术。 [结果 ]铅提高了动作电位的发放频率 ,抑制了K 通道电流 ,使IA 电流激活电压升高 ,失活时间常数延长 ;铅抑制了IH 电流的大小 ,使得IH 从超级化方向往去极化方向移动 ;增加了ID 的激活时程。铅暴露组 15d大鼠海马CA1,CA4 ,DG区 ,而 2 1d时海马CA4 ,DG区的NR1mRNA表达增强 ;铅暴露组 2 1d大鼠海马CA1,CA2 ,CA4 和DG区的NR2DmRNA表达增高 ;铅暴露组 15d大鼠海马CA1,CA4 ,DG区 ,而 2 1d时海马CA1,DG区的NR3AmRNA表达水平显著降低 ;没有观察到铅对NR2BmRNA表达的影响。还观察到铅可影响海马CA1、CA3 ,DG区的AMPA受体 ,以及CA1和DG区的Kainate受体。 [结论 ]低浓度铅暴露损伤了大鼠海马神经元和背根神经节钾通道亚单位和海马NMDA受体亚单位的mRNA的表达     

山东省城乡部分0～5岁儿童血清维生素A水平调查

[目的 ]了解山东省 0～ 5岁儿童血清维生素A水平、影响因素及其对常见疾病患病率的影响。 [方法 ]采用分层整群随机抽样方法 ,抽取 1市 2县共 613名 0～ 5岁儿童 ,向儿童家长了解儿童饮食状况与 2周内患病情况 ;采集儿童末梢血 ,采用微量荧光法测定血清维生素A含量。 [结果 ]儿童血清维生素A水平均值为 3 14 μg/L ,肯定、可疑亚临床维生素A缺乏患病率分别为 7 8%、3 2 9% ;血清维生素A含量愈低者 2周内发热、腹泻、急性呼吸道感染患病率愈高。[结论 ]儿童维生素A亚临床缺乏患病率较高 ,应采取有效措施 ,提高血清维生素A水平 ,以降低常见疾病儿童患病率 ,提高健康水平     

氯化镨对小鼠骨髓细胞微核率和核异常率的影响及硒的干预作用

[目的]观察氯化镨（PrCl3）对小鼠骨髓细胞微核率和核异常率的影响,以及亚硒酸钠（Na2SeO3）的干预作用。[方法]试验动物为5-6周龄昆明种小鼠;试验设置12个组,即5个氯化镨剂量组[7．5、15、30、60、120mg／（kg·bw）]、5个亚硒酸钠干预组[在5个PrCl,剂量的基础上分别加入0．05mg／（kg·bw）的亚硒酸钠]、2个对照组（阴性组为0．85％生理盐水,阳性组为叠氮化钠[（NaN3）,20mg／（kg·bw）对照组]。各组小鼠采用腹腔注射染毒或给药,运用微核测试技术和细胞核检测按照常规标准观察小鼠骨髓细胞的微核率（FMN）和核异常率（FAN）,比较亚硒酸钠干预组对小鼠骨髓细胞FMN和FAN的影响。[结果]在7．5～120mg／（kg·bw）的氯化镨剂量内,可致小鼠骨髓细胞FMN、FAN显著增高,并呈现剂量-效应关系（rFMN=0．885,FFAN=0．914）;将亚硒酸钠干预组与氯化镨剂量组两两对应相比较,亚硒酸钠干预组的小鼠骨髓细胞FMN及FAN均有下降,经t检验显示,除7．5mg／（kg·bw）组差异无统计学意义以外,其余4组差异均有统计学意义（P〈0．05或0．01）。[结论]氯化镨提高了小鼠骨髓细胞核FMN及FAN,具有遗传损伤作用;加入亚硒酸钠能够降低小鼠细胞核的FMN及FAN,具有明显的干预作用。     

绿清灵致突变性和亚慢性经口毒性的研究

目的　研究农药绿清灵的致突变性和亚慢性经口毒性。方法　按GB15670 -1995的方法进行Ames试验、小鼠骨髓微核试验、小鼠睾丸精母细胞染色体畸变试验和大鼠亚慢性经口毒性试验。结果　Ames试验各条件下均为阴性。各剂量组骨髓微核细胞率和睾丸精母细胞染色体畸变率与阴性对照组比较差异均无显著性 (P >0 0 5)。亚慢性经口毒性试验中 ,各剂量组在一般状态、体重、血常规、血液生化、脏器系数等指标均基本正常 ;高剂量组动物部分脏器 (心、肝、肾、肺、脾、脑 )和中剂量组动物部分动物脏器 (心、肝、肾、肺 )有不同程度的病理表现 ;经综合分析 ,绿清灵在本试验对SD大鼠亚慢性经口的最大无作用剂量为 4 2mg·kg- 1·d- 1。结论　本受试物在本试验剂量下无致突变作用 ,亚慢性经口的最大无作用剂量可为本农药安全性评价和进一步试验提供依据     

金标法进行鼠疫F1McAb亚类的鉴定

[目的]对实验室融合成功的6株杂交瘤株分泌的鼠疫F1单克隆抗体进行Ig亚类鉴定，为后面的抗体纯化工作作出准备。[方法]采用胶体金标记法鼠单抗亚型测定试剂盆进行检测。[结果]6株杂交瘤株的亚型分别为IgM、IgG2a、IgG2b、IgG3和两株IgG1，轻链全为κ链。[结论]采用金标法进行鼠单抗亚类鉴定．操作简便，结果清晰、稳定，不需特殊设备，值得采用。     

滕州市城区2～14岁儿童哮喘危险因素的病例对照研究

[目的]探讨滕州市城区儿童哮喘病发病的危险因素,为制订干预对策与措施提供依据。[方法]2004年9～10月,选择城区2～14岁儿童哮喘病人106例进行1∶1配对病例对照研究。[结果]进入多因素条件Logistic回归模型的有儿童呼吸道感染史、家族哮喘史、儿童过敏史、儿童特应性体质和家庭同居人口吸烟,5个变量的OR值分别为22.087、18.211、17.116、9.098和3.842。[结论]即有儿童呼吸道感染史、家族哮喘史、儿童过敏史、儿童特应性体质和家庭同居人口吸烟是儿童哮喘的危险因素。     

武汉市5岁以下儿童维生素A营养状况及其影响因素研究

[目的]了解武汉市5岁以下儿童维生素A营养状况及其影响因素,为制定相应干预措施提供依据。[方法]分层整群抽取武汉市5个中心城区和2个远城区的1270名0～5岁儿童进行问卷调查和血清维生素A含量测定。[结果]5岁以下儿童血清维生素A水平为(1.87±0.77)μmol/L。亚临床维生素A缺乏症发生率为3.39%,可疑亚临床维生素A缺乏症发生率为7.32%。维生素A缺乏在各年龄组之间有统计学差异,性别之间差异无统计学意义。母亲文化程度、家庭人均收入、近1周食用乳、蛋等、近1月服用维生素A制剂、2周内患呼吸系统疾病和腹泻是亚临床维生素A缺乏的影响因素。[结论]亚临床维生素A缺乏是5岁以下儿童维生素A缺乏的主要表现形式,建议将亚临床维生素A缺乏的预防和干预纳入儿童保健工作常规。     

亚硒酸钠对人乳腺癌细胞MCF-7的作用研究

[目的]探讨不同浓度亚硒酸钠对人乳腺癌细胞MCF-7的作用.[方法]0、0.5、2、8、32μmol/LNa2SeO3处理人乳腺癌细胞24h后,用MTT比色法检测不同浓度亚硒酸钠对人乳腺癌细胞MCF-7的作用;DNA Ladder抽提试剂盒提取DNA后凝胶电泳法观察亚硒酸钠诱导人乳腺癌细胞凋亡的作用.[结果]随着亚硒酸钠浓度的增加,其对人乳腺癌细胞增殖的抑制作用增强.不同浓度的亚硒酸钠作用MCF-7人乳腺癌细胞24h后,各组均未出现典型的DNA梯状条带.[结论]亚硒酸钠对人乳腺癌细胞增殖具有抑制作用;尚未发现其诱导凋亡的作用.     

Pea3转录因子组在女性肿瘤中的作用

Pea3转录因子组是ETS转录因子家族的一个亚组。ETS基因编码一个28个成员的人类转录因子家族,其中大部分转录因子可以促进转录,也有一部分转录因子对转录起抑制作用[1-2]。这些转录因子共有一个保守的氨基酸序列,即ETS结构域,根据ETS结构域及其在蛋白质中的位置和其他保守的功能序列,ETS家族被分为了13个组:Pea3、ETS、TEL、YAN、SPI、ERG、ELF、DETS4、ELK、GABP、ER71、ERF和ESE[2-3]。