研究缺血对失神经支配骨骼肌萎缩的影响

目的　研究缺血对失神经支配骨骼肌萎缩的影响。方法　选用 SD大鼠 2 4只 ,建立右下肢缺血加腓肠肌失神经支配的动物模型 (实验组 ) ,左侧为对照组。术后 2、4周取双侧腓肠肌 ,另取 6只正常大鼠腓肠肌作正常对照 ,观察组织学、肌电图及酶组织化学的变化。结果　术后 2、4周 ,实验组肌细胞直径比正常对照组减少 5 1.1%和 6 3.6 % (t =2 .94,P <0 .0 5 ) ,截面积减少 5 3.6 %和 6 2 .0 % (t =2 .88,P <0 .0 5 )。实验组肌细胞线粒体呈空泡状、数量减少 ;肌质网明显扩张退变。肌肉出现纤颤电位 ,和对照组比 ,其波幅无明显差异 (t=2 .11,P<0 .0 5 )。术后 2周实验组的 Na,K- ATP酶活性比正常对照组增高 74.6 % ,术后 4周则下降至对照组的 88.0 % (t=7.6 4,2 .2 4,P<0 .0 1、<0 .0 5 )。术后2周 Ca- ATP酶活性比正常对照组下降 2 8.32 % ,术后 4周下降至 35 .8% (t=2 .98、2 .2 1,P<0 .0 5 )。结论　缺血可加速失神经支配肌肉萎缩的发生与发展     

微RNA与失神经骨骼肌萎缩

微RNA(miRNA)是一类由内源性基因编码、长约22 nt的非编码单链RNA分子.近年研究表明,miRNA不仅涉及细胞增殖、分化、凋亡、发育等诸多生理过程,而且对许多疾病发生发展,甚至预后起着关键作用,有的miRNA还可作为临床疾病诊断和预后的标志物.该文就miRNA在失神经骨骼肌萎缩中的作用研究进展作一综述.     

安氟醚麻醉大鼠不同时期脑Ca2+-ATP酶活性变化

目的动态观察安氟醚吸入麻醉大鼠不同时期各脑区Ca2+-ATP酶活性变化和行为学变化,探讨安氟醚的麻醉作用机制.方法 40只SD雌性大鼠随机均分为五组诱导期组、麻醉期组、恢复期组、清醒期组和对照组.分光光度法测定不同时期大脑皮层、脑干、海马Ca2+-ATP酶活性.结果在诱导期各脑区Ca2+-ATP酶活性即开始下降(P＜0.05);麻醉期降至最低(P＜0.01);恢复期又开始升高,但仍低于对照组水平.其中,仅脑干Ca2+-ATP酶活性降低有显著性差异(P＜0.05);清醒期基本恢复至对照组水平(P＞0.05).且行为学变化与脑Ca2+-ATP酶活性变化有关.结论安氟醚的麻醉效应可能与其抑制脑Ca2+-ATP酶活性相关,麻醉深浅与抑制的程度一致.     

不同部位骨骼肌失神经支配后超微结构变化的实验研究

目的：探讨长期失神经支配后萎缩骨骼肌神经修复手术疗效欠佳的机制。方法：12例臂丛神经损伤后1、2、3、6、12和18个月患者，术中切取小指展肌和肱二头肌的失神经骨骼肌，以相同部位的正常骨骼肌作对照，观察失神经骨骼肌超微结构和计数肌卫星细胞数量变化。结果：失神经支配后2个月，骨骼肌细胞的超微结构基本正常，肌纤维周围无明显增生的胶原纤维，可见到运动终板，肌卫星细胞数量多；6个月，肌丝断裂，排列紊乱现象明显增多，细胞核体积变小，染色加深，细胞核固缩，肌纤维周边出现较多的成纤维细胞和脂肪细胞以及增生的胶原纤维；12个月后，未见类似运动终板的结构，肌卫星细胞体积缩小，数量减少，小指展肌较肱二头肌中肌卫星细胞含量下降速度快。结论：失神经经支配晚期骨骼肌纤维中运动终板消失和胶原增生以及肌卫星细胞含量的迅速下降可能是影响疗效的主要因素之一。     

大鼠失神经支配骨骼肌萎缩的实验研究

目的　观察大鼠失神经支配骨骼肌组织学、电生理及酶组织化学改变 ,探讨反映肌肉萎缩程度的指标。方法　选用SD大鼠 ,建立失神经支配腓肠肌模型 ,观察术后肌细胞直径及截面积 ,运动终板超微结构、纤颤电位波幅、Na 、K ATP酶及Ca2 ATP酶活性变化。结果　肌细胞直径及截面积随失神经支配时间延长呈进行性下降 ;运动终板 4周内改变不明显 ,16周后消失 ;纤颤电位波幅在 8周内维持在高水平 ,12周后呈进行性下降 ;Na 、K ATP酶活性随失神经支配时间延长呈进行性下降 ;Ca2 ATP酶活性在 8周内维持在较高水平 ,12周后明显下降。结论　肌细胞直径及截面积可作为反映肌肉萎缩的可靠形态学指标 ,纤颤电位波幅可作为潜在电生理指标 ;Na 、K ATP酶活性是可靠酶组织化学指标。     

不同剂量龙血生肌温敏凝胶对失神经支配创面促愈合的实验研究

目的:观察应用不同剂量的龙血生肌温敏凝胶对大鼠失神经支配创面促愈合的影响,明确最佳剂量。方法:健康SD大鼠80只,建立失神经支配创面动物模型,随机分成4组,高剂量组、中剂量组、低剂量组、对照组各20只,高、中、低剂量组分别用相应剂量(0.8、0.4、0.2 g/mL)的龙血生肌温敏凝胶,对照组使用凡士林纱布外敷创面,观察创面愈合的大体情况,计算创面愈合所需的时间及其愈合率,采用HE染色检测各时间点创面组织切片的成纤维细胞数量。结果:高、中、低剂量组及对照组创缘皮肤血供均良好,无明显红肿发炎及坏死征兆;创面愈合时间及愈合率对比,高剂量组及中剂量组相近,均比低剂量组及对照组优(P 0.05),而低剂量组又比对照组愈合快(P 0.05)。高中低剂量组的成纤维细胞数量在5个时间点均比对照组显著增多(P 0.05),高、中剂量组的成纤维细胞数量在造模后第11天比低剂量组显著增多(P 0.05)。结论:龙血生肌温敏凝胶对失神经支配创面有促愈合作用,中高剂量的龙血生肌温敏凝胶疗效最佳。     

经皮电刺激对失神经骨骼肌中NF-κB表达变化的影响

目的 研究电刺激对失神经骨骼肌萎缩中NF-κB表达变化的影响,探讨电刺激防治失神经骨骼肌萎缩的作用机理.方法 选用wista大鼠54只,制作成标准的右侧坐骨神经离断、腓肠肌失神经支配模型,随机分为对照组和电刺激组,检测肌湿重,RT-PCR和Westem Bloting,检测不同时段的NF-κB,mRNA和蛋白质表达水平变化.结果 失神经支配后,腓肠肌湿重持续降低,NF-κB,mRNA和蛋白质表达持续增加（P＜0.05）.电刺激组肌湿重比对照组同时间点明显增加（P＜0.05）,NF-κB,mRNA和蛋白质表达则明显降低（P＜0.05）.结论 电刺激可以通过干预NF-κB表达而有效防治失神经骨骼肌萎缩.     

中医不同治法对骨质疏松症大鼠骨密度及骨骼肌Ca2+-Mg2+-ATP酶影响的比较研究

目的观察中医不同治法对糖皮质激素诱导骨质疏松症大鼠骨密度、骨骼肌Ca2+-Mg2+-ATP酶变化的影响,探讨中医防治骨质疏松症的作用机制。方法将120只雌雄各半的大鼠随机分为正常对照组、模型对照组(模空组)、补肾中药组、健脾中药组、活血化瘀中药组和骨疏康中药组6个组。用地塞米松肌注造模。实验结束后,腹主动脉取血处死大鼠,用酶联免疫法测定大鼠骨骼肌Ca2+-Mg2+-ATP酶,用双能X线骨密度仪测大鼠离体股骨上1/3骨密度。结果①与正常组比较,模空组大鼠离体股骨上1/3骨密度显著降低(P<0.01);与模空组比较,各治疗组大鼠股骨上1/3骨密度均有不同程度的升高,其中以补肾中药组升高程度最为显著(P<0.01),其余各治疗组骨密度较模空组升高程度比较无统计学意义。②与正常组比较,其他各组大鼠骨骼肌的Ca2+-Mg2+-ATP酶显著降低(P<0.01);与模空组比较,各治疗组大鼠骨骼肌的Ca2+-Mg2+-ATP酶均明显升高(P<0.01);补肾组大鼠骨骼肌的Ca2+-Mg2+-ATP酶升高最为明显,明显高于骨疏康组、活血组、健脾组,差异具有非常显著性(P<0.01);活血组大鼠骨骼肌的Ca2+-Mg2+-ATP酶升高程度最低,与补肾组、健脾组、骨疏康组比较具有统计学差异(P<0.01);健脾组和骨疏康组升高程度也比较明显,但二者比较无统计学意义。结论补肾、健脾方法对骨质疏松症大鼠的骨密度和Ca2+-Mg2+-ATP酶具有一定调节作用。     

神经端侧缝合法防治失神经肌肉萎缩的实验研究

目的研究采用周围神经端侧缝合法防治失神经肌肉萎缩的作用。方法取Ｗｉｓｔａｒ雌性大白鼠２８只,分成３组。（１）实验组：切断大鼠左侧腓总神经,将其远断端与外膜已开窗的胫神经行端侧缝合,共２８侧。（２）失神经组：大鼠右侧腓总神经切断后,将两断端翻转固定为失神经对照侧,共１４侧。（３）正常对照组：大鼠右侧腓总神经不作处理,共１４侧。术后７个月,各组取胫前肌称肌湿重,并检测再生神经结构及肌纤维截面积。结果实验组与正常对照组之间,各项数据无显著性差异（Ｐ＞０．０１）。失神经组与实验组及正常对照组之间,其差异有非常显著性意义（Ｐ＜０．０１）。结论实验证实,神经端侧缝合法是防治失神经肌肉萎缩的一种有效方法     

二氮嗪对长时程低温保存移植鼠心ATP酶的影响及意义

目的观察线粒体ATP敏感性钾离子通道开放剂二氮嗪(Diazoxide,DE)对移植鼠心心肌细胞膜Na+-K+-ATPase和肌浆网Ca2+-ATPase活性的影响,并探索DE处理后Celsior液对长时程低温保存鼠心的作用。方法SD雄性大鼠192只随机分为4组,即A组(单纯Celsior液保存5h)、B组(30μmol/L DE+Celsior液保存5h)、C组(30μmol/L DE+Celsior液保存8h)、D组(30μmol/L DE+Celsior液保存10h)。利用改良Heron法大鼠颈部异位心脏移植模型,供体鼠心按各组要求保存后移植于受体,观察移植心脏30s内复跳率、心率;检测心肌细胞膜Na+-K+-ATPase和肌浆网Ca2+-ATPase活性;观察心肌超微结构。结果(1)复跳率和心率:心脏移植术后30s复跳率各组均无显著性差异;B组、C组心率明显较A组、D组快,A组、D组心率差异无显著性意义。(2)两酶活性测定:B、C、D3组心肌细胞膜Na+-K+-ATPase活性随着保存时间的延长呈显著递减性降低,但仍高于A组,仅D组与A组差别无显著性意义;B组、C组肌浆网Ca2+-ATPase活性显著高于D组、A组,D组与A组差别无统计学意义。(3)心肌超微结构:各组心肌结构保护均较好,肌纤维排列整齐,肌节清,线粒体肿胀不明显;B、C、D3组线粒体嵴结构较为清楚。(4)D组和A组各指标差别均无显著性意义。结论移植鼠心在长时程冷缺血期间,DE对心肌组织ATP酶活性有较好的保护作用,此作用随着保存时间的延长而减弱。且DE处理后Celsior液冷保存鼠心10h仍与国际公认的Celsior液安全冷保存时间5h效果相当。     

不同神经损伤方式对面瘫后肌纤维亚型病变影响的实验研究

目的 探讨面瘫时不同神经损伤方式对面部不同类型肌纤维去神经肌萎缩的影响。方法 采用组织化学等方法分析在不同神经损伤方式情况下，面部肌肉不同类型肌纤维的病理变化。采用电生理方法检测神经损伤后不同时期肌纤维电刺激收缩阈值和最大收缩力。结果 三叉神经支配可以明显减轻Ⅱa、Ⅱb型肌纤维的去神经肌萎缩，肌纤维的电刺激收缩阈值和最大收缩力得以较好维持；而对Ⅰ型肌纤维萎缩的影响不明显。结论 临床修复运动神经时应同时对伴发的感觉神经损伤进行修复，这对进一步提高面瘫的临床治疗效果提供了一定的理论指导。     

高压氧保存对离断肢体保护作用实验研究

目的 :探讨高压氧 (HBO)保存对离断肢体的影响。方法 :大鼠右后肢离断后 ,分别放在HBO下和室内空气中保存 ,测定骨骼肌Na+ -K+ -ATP酶和Ca2 + -ATP酶活性并观察骨骼肌超微结构改变。再选用大鼠 30只进行肢体离断后原位再植 ,随机分为对照组、HBO组、室内空气组。于再植术后 2 4h测定每份血清肌酸磷酸激酶、乳酸脱氢酶、谷草转氨酶的含量。到术后第 10d评价肢体成活率。结果 :HBO中保存对酶活性和超微结构的影响皆明显优于室内空气中保存。再植术后 2 4h血清酶含量 ,高压氧组较室内空气组低 (P <0 .0 1)。HBO组成活率为 10 0 % ,而室内空气组为5 0 % ,有显著差异 (x2 =6 .6 7,P <0 .0 5 )。结论 :HBO保存对大鼠离断肢体具有保护作用。     

氨哮素防治失神经骨骼肌萎缩的临床研究

目的临床研究应用氨哮素防治失神经骨骼肌肌萎缩的效果及副作用。方法随机选用双盲安慰剂对照的研究方法，对７１例因臂丛神经损伤而致肱二头肌完全失神经支配的患者，服用氨哮素（６０μｇ，每日２次）３个月。采用肌电图，肌肉ＡＴＰ酶组织化学染色，肌动蛋白、肌球蛋白免疫组织化学染色等检测手段，分别检测用药前后肱二头肌纤颤电位、肌纤维面积和收缩蛋白含量的变化。并观察患者用药前后心、肺、肝、肾及出凝血功能的变化。结果氨哮素对失神经肱二头肌纤颤电位的衰减、Ｉ型和ＩＩ型肌纤维面积的萎缩、肌动蛋白丧失的抑制率分别为３００％、６６％、６０％和５０％（Ｐ＜０．０５）。对心、肺、肝、肾及出凝血功能均无明显影响。结论氨哮素是一种能防治失神经骨骼肌萎缩的安全而有效的药物     

不同浓度右美托咪定对大鼠肠系膜动脉平滑肌细胞BKCa通道的影响

目的 评价不同浓度右美托咪定对大鼠肠系膜动脉平滑细胞大电导钙激活钾通道(BKCa)的影响.方法 SD大鼠,雌雄不拘,体重180～220 g,经两步法酶消化分离肠系膜动脉平滑肌细胞.选取10个肠系膜动脉平滑肌细胞,采用单通道内面向外式膜片钳技术进行记录,钳制电压为40 mV,游离钙离子浓度为10-7 mol/L,采用浓度累积法加入右美托咪定,分别于0(基础值)、10-9、10-8、10-7、10-6、10-5 mol/L右美托咪定时记录BKCa开放概率(NPo)、电流幅度(Am)、平均开放时间(To)和平均关闭时间(Tc).结果 与基础值比较,10-7、10-6、10-5 mol/L右美托咪定时NPo升高,且呈浓度依赖性,10-9、10-8、10-7、10-6、10-5 mol/L右美托咪定时Tc缩短(P＜0.05或0.01);与10-9mol/L右美托咪定比较,10-8mol/L右美托咪定时Tc缩短(P＜0.05),不同浓度右美托咪定时Am和To 差异无统计学意义(P＞0.05).结论 10-7、10-6、10-5 mol/L右美托咪定可呈浓度依赖性地激活大鼠肠系膜动脉平滑肌细胞BKCa通道,是其降压作用的机制之一.     

The influence of changes in extracellular and intracellular sodium concentration on detrusor contractility

OBJECTIVE: To determine the role of Na+-Ca2+ exchange in the regulation of isolated detrusor smooth muscle contractility. MATERIALS AND METHODS: Isolated guinea-pig detrusor strips were used to record isometric tension generated by; (a) electrical-field stimulation to elicit nerve-mediated responses; and (b) adding carbachol or superfusing with a high-K+ solution. The [Na+] gradient between extracellular and intracellular compartments was altered by: (i) reducing superfusate [Na+] in stages from 140.2 to 10.2 mm; (ii) addition of the cardiac glycoside strophanthidin (200 microm). RESULTS Reducing extracellular [Na+] reversibly reduced the magnitude of nerve-mediated contractions but increased the resting tension and magnitude of carbachol-induced contracture. The mean (sd) [Na+] required for a half-maximum effect on attenuating contractions, at 85.9 (6.2) mm, and developing contracture, at 59.1 (14.3) mm, were significantly different. The time constants of changes to nerve-mediated contractions and carbachol contracture were also significantly different, at 147 (5) vs 1207 (386) s, respectively. These differences suggest that separate mechanisms influence nerve-mediated contraction and contracture in low-Na+ solutions. Exposure to the cardiac glycoside strophanthidin produced a similar effect to low-Na+ solutions for carbachol contracture. Low-Na+ solutions had no significant effect on contractures induced by high extracellular [K+]. CONCLUSION Reducing the transmembrane [Na+] difference increases intracellular [Ca2+]. This increase is largely accommodated in intracellular stores, that can be released by exogenous carbachol. The results are consistent with the presence of a functional Na+-Ca2+ exchanger in the surface membrane. The lack of effect of low-Na+ solutions on contractures evoked by membrane depolarization is consistent with this conclusion. The reduction of the nerve-mediated contraction by low-Na+ solution might result from blockade of the nerve action potential.     

氨哮素延缓臂丛神经损伤后骨骼肌萎缩的机理研究

目的 探讨氨哮素对臂丛神经损伤后骨骼肌萎缩的延缓作用及其机制。方法 建立大鼠一侧臂丛神经损伤模型，技术后服药的不同分成两组。（１）氨哮素组：术后灌服氨哮素（１０ｍｇ／ｋｇ．ｄ＾－１），６只大鼠。（２）对照组：术后灌服等量蒸馏水，７只大鼠。术后６周取两组手术侧的肱二头肌，观察萎缩肌肉的肌湿重、总蛋白含量的变化；用ＴＵＮＥＬ法检测凋亡肌细胞的百分率，并用免疫组化法检测肌萎缩时Ｆａｓ、Ｃａｓｐａｓｅ－８ｐ２１的表达。结果 （１）氨哮素组：失神经侧的臂围明显大于对照组失神经侧，两组差异有显著性意义（ｔ＝５．４９，Ｐ〈０．０１）。肌湿重和总蛋白含量也明显高于对照组（ｔ＝７．５４，Ｐ〈０．０１；ｔ＝３．８１，Ｐ〈０．０５）。（２）肌细胞凋亡率：氨哮素组：萎缩肌肉内肌细胞的凋亡程度明显轻于对照组，两组差异有显著性意义（Ｔ＝８     

遗传高钙尿结石大鼠肾小管上皮细胞基底膜钙转运蛋白的异常表达及意义

目的 观察肾小管上皮细胞基底膜钙转运蛋白细胞膜钙泵1b(PMCA1b)和钠钙交换体.(NCX1)在遗传性高钙尿结石(GHS)大鼠肾组织的表达及其在特发性高钙尿症(IH)发病中的作用.方法 雄性遗传高钙尿结石大鼠和正常野生型SD大鼠各6只,采用实时荧光定量PCR检测PMCA1b和NCX1 mRNA表达,westem blot方法 检测其蛋白表达.结果 GHS大鼠与正常对照(NC)组大鼠的NCX1在mRNA水平和蛋白水平比较差异均无统计学意义(P＞0.05);GHS大鼠与NC大鼠的PMCA1b在mRNA水平比较差异无统计学意义(P＞0.05),GHS大鼠的PMCA1b蛋白平均相对吸光度值(A)为(0.18±0.05),NC组为(0.43±0.07),差异有统计学意义(P＜0.01).结论 PMCA1b蛋白表达下降可能是特发性高钙尿症形成的发病机制之一.     

H_2O_2诱导人类肝细胞、内皮细胞细胞凋亡时Ca~(2 )流变化的对比研究

探讨过氧化物诱导人类肝细胞（ＬＯ２细胞）、内皮细胞（ＥＶＣ３０４细胞）凋亡时Ｃａ２＋流变化不同特点和意义及丹参提取物Ｒｘａ通过Ｃａ２＋信号系统介导的细胞保护效应。方法用膜联蛋白荧光素（Ａｎｎｅｘｉｎ－Ｖ－Ｆｌｕｏｓ）与碘化丙啶（ＰＩ）双标记流式细胞术（ＦＣＭ）分析Ｈ２Ｏ２作用不同时限Ｒｘａ处理组与未处理组凋亡细胞指数分布;用全细胞膜片钳放大系统显微荧光检测术同步分析同期Ｃａ２＋流变化。结果Ｈ２Ｏ２诱导细胞凋亡时ＬＯ２细胞［Ｃａ２＋］ｉ、Ｃａ２＋跃升,Ａｎｎｅｘｉｎ－Ｖ＋细胞指数均较ＥＶＣ３０４细胞为高;［Ｃａ２＋」ｉ＞４００ｎｍｏｌ／Ｌ后１～２小时可观察到细胞凋亡早期膜翻转现象。Ｒｘａ组［Ｃａ２＋］ｉ、Ａｎｎｅｘｉｎ．Ｖ＋和ＰＩ＋细胞指数均较未处理组为低。结论Ｈ２Ｏ２可诱导ＬＯ２、ＥＶＣ３０４细胞Ｃａ２＋依赖性细胞凋亡;［Ｃａ２＋］ｉ＞４００ｎｍｏｌ／Ｌ可能为细胞凋亡启动的早期信号;ＬＯ２细胞较ＥＶＣ３０４细胞抗凋亡能力为差;Ｒｘａ能有效降低［Ｃａ２＋］ｉ,减轻细胞损伤程度。     

大鼠失神经腓肠肌细胞内FoxO3a及MuRF-1的表达规律

目的 探讨失神经大鼠腓肠肌细胞中叉头蛋白转录因子3a(fork-head protein,FoxO3a)及MuRF-1的表达规律.方法 72只Wistar大鼠随机分为12组,每组6只,切断大鼠右侧坐骨神经,左侧行假手术,分别于术后0、1、2、3、4、5、6、7、10、14、21、28d各处死一组大鼠,取右侧腓肠肌,于-70℃冰箱保存.分别使用实时荧光定量PCR法和Western Blot法对其中的FoxO3a和MuRF-1的基因和蛋白进行检测.结果 MuRF-1的基因表达在失神经第4天达到峰值(18.12倍),失神经14d后下降至正常.FoxO3a的基因表达在失神经第6天达到峰值(7.06倍),而后虽缓慢下降,但仍高表达.FoxO3a和MuRF-1的蛋白含量随失神经时间的延长逐渐升高.结论 FoxO3a和MuRF-1的表达和蛋白改变与失神经骨骼肌萎缩关系密切,可以作为药物治疗和基因治疗的靶点之一.