呼吸道合胞病毒地方株SH蛋白基因序列分析

目的 :分析我国呼吸道合胞病毒 (RSV)地方株SH蛋白基因的遗传特点、变异特征。方法 :从本室保存的不同年份、不同地区、不同流行特征的呼吸道合胞病毒地方株中抽取 7株 ,分别用RT PCR扩增其SH蛋白基因并克隆到PTZ18R载体中进行了序列测定和分析。结果 :我国RSV地方株间SH蛋白基因相比较变异的部位及形式很相似 ,地方株间核苷酸全序列的同源性为 97.0 %～ 10 0 %。结论 :RSV在我国不同地区的不同流行特征与SH蛋白基因的变异无明显关系     

RSV与HRV在ALRTI住院儿童中的流行状况和临床特征比较

目的:了解RSV和HRV在ALRTI住院儿童中流行病学和临床特征的异同。方法:收集2007年9月~2008年8月ALRTI住院患儿NPA样本,进行病毒核酸检测,统计分析RSV和HRV检出病例的流行状况、临床特点。结果:1165名患儿检出RSV 315例(27.0%),HRV 202例(17.3%);性别之间检出率无统计学差异;RSV检出患儿平均年龄13.1±14.3月,1岁以下检出率最高,且明显高于同年龄段HRV检出率;HRV检出患儿平均年龄15.8±17.8月,1岁检出率最高,并高于同年龄段RSV检出率;RSV检出以11月份到次年2月份为高峰;HRV检出以4月份、9~12月份为高峰;与RSV比较,HRV检出病例临床特点除末梢血白细胞计数升高较多见外,其它均无差异;与单一RSV检出病例比较,RSV混合其它病毒检出病例并发症较多,且末梢血白细胞计数升高较多见;单一HRV检出病例未见发绀,其余临床特点与混合其它病毒检出病例无差异。结论:RSV和HRV是长沙地区ALRTI住院儿童的重要病原体,两者在年龄、季节分布上有不同,临床特点无明显差别。     

呼吸道合胞病毒毛细支气管炎患婴的肺功能研究

目的：观察婴儿呼吸道合胞病毒（RSV）毛细支气管炎的肺功能动态变化情况并探讨其临床意义。方法：采用美国森迪公司2600婴幼儿肺功能仪,对31例RSV毛细支气管炎急性期婴儿（按月龄分为3组）进行肺功能检查;其中有17例患儿在临床恢复期复查了肺功能,此17例患儿中10例在出院1周后又复查了肺功能。同时,对74例健康婴儿进行了肺功能检查。统计方法用两样本均数t检验,配对资料t检验。结果：毛细支气管炎急性期呼吸频率（RR）,潮气呼气峰流速（PTEF）,潮气呼吸峰流速／潮气量（PF／Ve),呼吸系统阻力（Rrs),每千克体重功能残气量（FRC／kg)增加,潮气呼吸吸气量（Vi),每千克体重吸气量（Vi/kg),潮气呼吸呼气量（Ve),到达潮气呼气峰流速时呼出的气量／潮气量（％V－PF）,呼出75％潮气量时的呼气流速／潮气呼气峰流速（25／PF）,呼吸系统顺应性（Crs),每千克体重顺应性（Crs/kg)减少,与同龄正常组比较差异有显著意义;潮气呼气中期流速／潮气吸气中期流速（ME／MI）,呼吸系统时间常数（Trs)无显著性差异。潮气呼吸流速－容量环变窄,呼气曲线升枝陡,高峰提前,峰值较高,降支凹陷,临床恢复期上述异常指标明显好转,但与正常组相比％V－PF,25／PF,Crs/kg仍低,余项达到正常水平,出院1周后复查,肺功能正常。结论：RSV毛细支气管炎急性期,肺功能呈现小气道阻力增高,阻塞性通气障碍改变,临床恢复期小气道功能仍有异常,但RSV造成的小气道功能异常还是能在较短时间内恢复。肺功能是监测本病病程及预后较理想的方法。％V－PF,25／PF,FRC／kg可作为观察本病病情变化的敏感指标。     

特异性脱氧核酶对小鼠呼吸道合胞病毒感染的抑制作用

目的 研究特异性抑制呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)N基因的脱氧核酶DZ1133在小鼠体内对病毒复制和气道炎症的影响.方法 RSV感染BALB/c小鼠滴鼻给予DZ1133及其变异体、反义寡核苷酸AS1133,空斑形成实验检测肺组织病毒滴度,RT-PCR检测病毒mRNA表达,支气管肺泡灌洗液白细胞计数,ELISA检测TNF-α、IL-12、IFN-γ和IL-10水平,肺组织病理学分析炎症情况.结果 0.2、0.4 mg和0.8 mg DZ1133治疗组小鼠肺组织病毒滴度分别为(2.75±0.21)×105、(1.86±0.20)×105PFU/g和(1.02±0.22)×103PFU/g,与感染对照组小鼠(7.94±0.42)×105PFU/g比较明显下降(P<0.01),上述各剂量治疗组小鼠肺组织病毒mRNA表达与感染对照组比较分别下降30.51%、47.38%(P<0.05)和53.97%(P<0.01).0.4 mg DZ1133治疗降低RSV感染小鼠支气管肺泡灌洗液中白细胞总数,改善肺组织病理学损伤(P<0.05),对TNF-α、IL-12、IFN-γ和IL-10水平无显著性影响(P>0.05).结论 特异性脱氧核酶DZ1133在小鼠体内有效抑制RSV复制、减轻气道炎症,是有效的抗RSV途径.     

潘生丁治疗合胞病毒肺炎的电镜观察

目的：分析潘生丁通过改善肺炎组织微循环而减轻肺泡病理变化之作用，方法；４０只６－７周龄Ｂａｌｂ／ｃ小鼠经鼻感染呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）成为ＲＳＶ肺炎，治疗组用潘生汀５０ｍｇ．ｋｇ＾－１．ｄ＾－１对照组用重酒石酸１００μｌ，均灌胃３天。感染第５天后连续日取材，电镜观察，另设４只小鼠为正常组。结果：ＲＳＶ肺炎病理改变严重，肺泡毛细血管出现淤血，微血栓，小鼠口服潘生丁肺泡上皮肿胀变性程度较轻，毛细血管ｆ     

抗呼吸道合胞病毒单克隆抗体的制备及其鉴定

目的制备抗呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）的单克隆抗体，并对其特性进行系统地鉴定。方法以活的ＲＳＶＬｏｎｇ株滴鼻（ＴＣＩＤ５０为１×１０－６，取１００ＴＣＩＤ５００１２５ｍｌ进行）加ＲＳＶ感染Ｈｅｐ２细胞（ＣＰＥ达～）腹腔注射免疫Ｂａｌｂ／ｃ鼠，用细胞融合技术制备能稳定分泌抗ＲＳＶ的单克隆抗体细胞株。结果细胞融合一次成功，融合率为９６％，抗ＲＳＶ抗体阳性孔率为６５％。鉴定１株杂交瘤细胞Ｆ３株，染色体数为９８条，抗体亚类属ＩｇＧ１，对ＲＳＶ抗原特异；在无补体存在的情况下其腹水抗体中和效价为１∶１２８，且具融合抑制活性，腹水融合抑制效价为１∶６４。结论Ｆ３株单克隆抗体为抗ＲＳＶＦ蛋白的ＭｃＡｂ。     

呼吸道合胞病毒NS1基因原核表达及其免疫原性分析

目的:原核表达呼吸道合胞病毒(RSV)非结构NS1蛋白,并对其免疫特性进行研究.方法 采用PCR技术获得NS1基因,将其插入pET41a(+)载体上,导人大肠杆菌后诱导表达;利用GST亲和层析柱对诱导表达的NS1蛋白进行纯化,免疫动物制备抗体,Western blot法鉴定抗体的特异性.结果 重组质粒经酶切鉴定和DNA序列测序完全正确,经IPTG诱导后融合蛋白在大肠杆菌BL21-DE3中得到高效表达,表达产物经超声破碎和GST亲和层析纯化获得重组蛋白,分子量约42 000 Mr,以抗NS1蛋白的多克隆抗体为一抗进行Western blot检测,结果只有RSV感染细胞的样品在15 000 Mr处有特异性带显示,其他病毒感染的细胞和阴性对照没有相应条带.结论 NS1基因得到高效表达,免疫制备得到的抗体与RSV感染细胞有特异性反应,与其他常见呼吸道病毒感染细胞无交叉免疫反应.     

Prevention of respiratory syncytial virus infection in high risk infants

The incidence of serious RSV illness in premature infants and in infants with CLD can be reduced. Prophylaxis in infants with CHD and cystic fibrosis seem prudent as well, and clinical trials are currently under way to evaluate the use of Synagis in these high-risk groups. Synagis is preferred for most high-risk children because of its ease of administration, safety and effectiveness. The dose for Synagis is 15 mg/kg i.m. monthly during RSV season.     

上海地区庚型肝炎病毒感染的分子流行病学

了解ＨＧＶ的感染及分子病毒学特征。方法设计针对ＨＧＶ基因组５－ＮＣＲ和ＮＳ３的引物，利用逆转录－聚链反就对上海地区不同人群进行血清ＨＧＶＲＮＡ的检测，并对ＰＣＲ产物进行测序，分析。结论庚型肝炎病毒在上海地区多为混合感染；ＨＧＶ基因组存在相对保守性。     

呼吸道合胞病毒实时荧光定量PCR检测

目的 建立一种快速、准确诊断人呼吸道合胞病毒(hRSV)早期感染的实时荧光定量PCR检测方法。方法 以hRSV最保守的N基因序列为参考,设计两对特异的引物和一条TaqMan荧光探针,在LightCycler定量PCR检测仪上对93例下呼吸道感染患儿进行hRSVRNA检测,并与病毒分离培养、常规PCR、巢式PCR方法和ELISA法相比较。结果 以PCR模板浓度来定义,该方法线形范围为1×10²~1×10⁷cDNAcopies/μl,灵敏度达1×10²cDNAcopies/μl,和巢式PCR相同,比常规PCR高10倍。用人脊髓灰质炎病毒Ⅰ型、柯萨奇病毒2型、甲型、乙型流感病毒、腺病毒7型作对照,均无预期扩增产物和荧光的产生;该方法在LightCycler和Rotor-Gene两种仪器上的定量结果具有一致性;采用该法对93例患儿行FQ-PCR检测出阳性44例(43.9%),ELISA方法检测阳性4例(4.3%),两者相关性不高。hRSV浓度的高低与患儿临床症状之间的关系不是很明显。结论 该方法可快速、灵敏、特异、定量检测hRSV,在hRSV感染的早期诊断和疗效监测方面具有良好的应用前景。     

ARDS in an HIV-positive patient associated to respiratory syncytial virus

We describe a clinical case of ARDS in an HIV infected patient. ARDS was associated to a respiratory syncytial virus infection that triggered a suspected Pneumocystis infection that despite missing etiologic proofs was treated with antimycotics. As rather limited information on RSV associated ARDS in HIV patients is available in the current literature, this case is of significant interest.     

基孔肯雅病毒的分子变异及其流行趋势

由基孔肯雅病毒(Chikungunya virus,CHIKV)引起的基孔肯雅热已从仅在非洲南部、东南亚和印度部分热带地区流行的蚊媒传染病传播至亚热带地区的多个国家.既往CHIKV的传播主要以埃及伊蚊作为传播媒介,2004年基孔肯雅热疫情在南亚地区的暴发流行中,出现了能够以地区分布更为广泛的白纹伊蚊为媒介传播病毒进化株...     

呼吸道合胞病毒蛋白G基因l核苷酸分析

目的:对河南省呼吸道合胞病毒(RSV)进行分离与鉴定.方法:选择2006年冬季至2007年春季河南省部分医院急性呼吸道感染患者,采集咽拭子,利用Hep-2细胞和Vero细胞进行病毒分离,对分离株用特异性RTPCR鉴定;对鉴定阳性的RSV毒株进行蛋白G全基因序列测定,并进行同源性分析,构建基因进化树.结果:共分离到4株RSV毒株,各分离株之间核苷酸同源性92%～99%;与A型RSV标准参考株的核苷酸同源性为86%～92%,与B型RSV标准株的同源性为70%.结论:2006年河南省RSV流行株为A型.     

999感冒灵颗粒抗呼吸道合胞病毒的初步研究

目的 探究999感冒灵颗粒在体外抗呼吸道病毒的作用.方法 采用细胞病变抑制法(CPE)及CCK-8法,观察在999感冒灵颗粒作用下,感染呼吸道合胞病毒( RSV)的HEp-2细胞的CPE变化情况以及吸光值,从而比较不同给药方式(直接灭活、抑制吸附、抑制增殖和阻断作用)及不同给药浓度下对 RSV的抑制作用.测定细胞的半数中毒浓度(TC50)、药物半数抑制浓度(IC50)以及治疗指数(TI).结果 细胞的TC50为25 mg/ml;直接灭活和抑制增殖均对RSV有明显作用( P ＜0.01 );采用直接灭活方式时,其 IC50为7.43 mg/ml,TI为3.36;采用抑制病毒增殖时,其IC50为4.42 mg/ml,TI为5.66. CCK-8 法结果显示,在阻断以及抑制吸附两种给药方式下,病毒抑制率与病毒对照组之间差异无统计学意义.结论 999 感冒灵颗粒在直接灭活以及抑制病毒增殖两种给药方式下对RSV有一定的抑制作用.     

小儿呼吸道合胞病毒肺炎心肌酶变化分析

目的:探讨小儿呼吸道合胞病毒感染肺炎患儿血清心肌酶谱变化趋势。方法:选取260例收治的RSV感染肺炎患儿。同时随机选取儿童保健门诊体检的健康儿童80例,作为对照组。根据病情把RSV肺炎患儿分为轻症组和重症组,检测各组儿童血清中乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸肌酸激酶(CK)和磷酸肌酸激酶同工酶(CK-MB)。结果:RSV肺炎组的心肌酶谱各指标均显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),RSV肺炎轻症组和重症组的心肌酶谱各指标之间比较,差异无明显统计学意义(P>0.05)。结论:RSV肺炎感染患儿血清中心肌酶谱各指标增高,但轻症和重症患儿之间无统计学意义,因此,不能依据心肌酶高低来评价RSV肺炎严重程度,故临床价值不高。     

干扰素治疗婴幼儿呼吸道合胞病毒肺炎的临床疗效

目的:观察分析干扰素治疗婴幼儿呼吸道合胞病毒(RSV)肺炎的效果.方法:选取该院2015年2月至2016年2月收治的70例婴幼儿呼吸道合胞病毒肺炎病例,运用双色球随机分组法分为观察组(n=35)和对照组(n=35),对照组患儿给予常规对症治疗,在此基础上观察组患儿给予干扰素治疗,观察两组患者治疗效果.结果:观察组患儿治疗有效率97.14％,高于对照组85.71％;CD8+、mIL-2R水平较治疗前明显降低,CD;水平较治疗前明显提高,差异显著(P＜0.05);不良反应发生率比较无明显差异(P＞0.05).结论:针对婴幼儿呼吸道合胞病毒肺炎,采用干扰素治疗疗效确切,有利于缓解临床症状,调节患儿免疫反应,不良反应少,安全可靠,值得临床积极应用.     

人呼吸道合胞病毒非结构蛋白研究进展

病毒的非结构蛋白是一类由病毒基因组编码、存在于病毒培养液上清但不存在于病毒颗粒中的蛋白。有的病毒的非结构蛋白可直接参与病毒基因组的复制和表达调控,也有的可通过与宿主细胞组分相互作用,间接协助病毒复制和感染。人呼吸道合胞病毒（human respiratory syncytial virus,hRSV）是世界各地儿童严重呼吸道感染中最重要的病原,且能重复感染患者。hRSV是单股负链病毒目副黏液病毒科肺病毒属的成员之一,包括A和B两个抗原亚型。其基因变异快,目前A亚型含有11个基因型,B亚型含有22个基因型[1]。