谷胱甘肽S—转移酶异质性研究

本文以不同状态的大鼠肝细胞为对象,采用生化和病理学方法研究了谷胱甘肽S-转移酶(GST)的异质性。根据GST同工酶酶谱分忻、GST活性改变状况和GST同工酶表达活性的改变等结果,表明GST无论在正常状态或病理状态下均具有显著的异质性。     

谷胱甘肽S—转移酶与人类肝病

谷胱甘肽S-转移酶(简称GST)是一组很早以前就被熟知的酶,它在机体解毒机制中起关键性作用,同时还涉及其它一些重要的代谢过程和生物效应。该酶几乎含于所有的器官,但主要在肝肾之中,特别在肝中,其含量可高达10％,在细胞中则含于炮浆和微粒体内。由此不难看出,GST与肝脏的关系是很密切的,肝脏的物理性、化学性和生物性     

细胞凋亡与谷胱甘肽－S－转移酶、谷胱甘肽－S－转移酶－π关系的研究

经ＣＳＣ、ＤＥＮ、ＭＮＵ等致癌物转化和未转化的凋亡Ｒａｔ－１细胞谷胱甘肽－Ｓ－转移酶（ＧＳＴｓ）、谷胱甘肽－Ｓ－转移酶－π（ＧＳＴ－π）活性均较其相应的未凋亡细胞显著增高（Ｐ＜０．０５～０．０１）。经Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交证实，上述凋亡细胞ＧＳＴ－πｍＲＮＡ表达水平也增高，这可能是导致ＧＳＴｓ和ＧＳＴ－π活性增高的主要原因。由于ＧＳＴｓ可催化谷胱甘肽（ＧＳＨ）与众多亲电子物质结合而有重要解毒功能，故推测培养细胞因营养匮乏引起凋亡时，其自身代谢产生的有毒物质无法及时被清除而积聚，可能启动了细胞自身的防御体系，行使自我保卫功能，从而刺激ＧＳＴｓ活性增高。     

谷胱甘肽S—转移酶Pi基因与肿瘤

谷胱甘肽Ｓ－转移酶Ｐｉ基因与肿瘤廖名湘（医学分子生物学国家重点实验室。北京１００００５）谷胱甘肽Ｓ－转移酶（ＧｌｕｔａｔｈｉｏｎｅＳ－ｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ，ＧＳＴ）家族是一个属于Ⅱ相代谢解毒酶的同工酶大家族。根据这些同工酶Ｎ－末端氨基酸的同源性，作...     

抗人胎盘型谷胱甘肽S—转移酶在人大肠癌中的表达

用抗人胎盘型谷胱甘肽S—转移酶(GST—π)抗体的免疫金银染色技术检查46例大肠癌、29例大肠腺瘤以及24例正常大肠粘膜。实验结果表明:GST—π阳性物质为黑色颗粒。分布于细胞浆内。在正常大肠粘膜中GST—π分布存在一定的极性,但在大肠癌中此极性完全消失。GST—π在大肠癌、大肠腺瘤以及正常大肠粘膜组织中的阳性率分别为87.0%、58.6%、16.7%,用X~2检验每两组之间的差异均有显著性。由此可见,GST—π在大肠癌中可以作为一种标志酶。     

人胎盘型谷胱甘肽S－转移酶在胃癌及癌前病变组织中的表达

人胎盘型谷胱甘肽Ｓ－转移酶在胃癌及癌前病变组织中的表达齐春会，郭山春，李华，李春海谷胱甘肽Ｓ－转移酶（ＥＣ２，５，１，１８；ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅＳ－ｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ，ＧＳＴｓ）能够催化亲核活性物质与谷胱甘肽（ＧＳＨ）相结合，是一组具有结合、解...     

乳腺癌中胎盘型谷胱甘肽S－转移酶基因的扩增与异常表达

在国内首次制备并用光敏生物素方法标记胎盘型谷胱甘肽Ｓ－转移酶（ＧＳＴ－π）ｃＤＮＡ探针，应用斑点杂交技术检测２４例乳腺癌ＧＳＴ－π基因ＤＮＡ扩增与ｍＲＮＡ异常表达。结果发现，２４例乳腺癌中，３例（１２．５％）存在ＤＮＡ扩增，７例（２９．２％）存在ｍＲＮＡ异常表达，ＤＮＡ扩增和ｍＲＮＡ表达之间存在正相关性，二者均与患者年龄、肿瘤大小、淋巴结转移无明显相关，但ｍＲＮＡ异常表达与乳腺癌ＥＲ表达呈现负相关性。结果证实人乳腺癌中既存在ＧＳＴ－π基因ＤＮＡ扩增，又存在ｍＲＮＡ异常表达，提示ＧＳＴ－π与乳腺癌有密切关系。     

十二指肠钩虫谷胱甘肽转移酶AduGST-1基因的克隆和重组表达

目的克隆十二指肠钩虫谷胱甘肽转移酶（GST）AduGST-1基因,并在大肠埃希菌中表达获得重组AduGST-1。方法设计特异引物,以十二肠钩虫成虫cDNA为模板,通过PCR扩增AduGST-1基因。将获得的AduGST-1编码序列克隆至原核表达载体pETHF,构建重组表达质粒pETHF/AduGST-1。重组质粒转化至大肠埃希菌BL21（DE3）,用IPTG诱导表达、Ni亲和层析分离纯化重组AduGST-1,SDS-PAGE分析重组蛋白表达及纯化情况。结果成功扩增到AduGST-1全长编码序列,并登记到GenBank（accession no.JQ812812）。AduGST-1编码序列长度为624bp,编码307个氨基酸残基。成功构建了重组表达质粒pETHF/AduGST-1,在BL21（DE3）中表达并纯化了重组AduGST-1。结论首次报道从十二指肠钩虫中分离到GST基因,该基因可在大肠埃希菌中高效表达,并分离纯化了重组GST蛋白,为进一步研究AduGST-1功能与应用奠定了基础。     

乳腺癌中胎盘型谷胱甘肽S—转移酶基因的扩增与异常表达

在国内首次制备并用光敏生物素方法标记胎盘型谷胱甘肽Ｓ－转移酶（ＧＳＴ－π）ｃＤＮＡ探针，应用斑点杂交技术检测２４例乳腺癌ＧＳＴ－π基因ＤＮＡ扩增与ｍＲＮＡ异常表达。结果发现，２４例乳腺癌中，３例（１２．５％０存在ＤＮＡ扩增，７例（２９．２％）ｍＲＮＡ异常表达，ＤＮＡ扩增和ｍＲＮＡ表达之间存在正相关性，二者均与患者年龄、肿瘤大小、淋巴结转移无明显相关，但ｍＲＮＡ异常表达与乳腺癌ＥＲ表达呈现负相关性，     

P糖蛋白和谷胱甘肽—S—转移酶在肾细胞癌中的表达

探讨肾细胞癌与多药耐药的关系，方法：应用免疫组化方法，检测４例术前未进行化疗的肾细胞癌和１６例正常肾组织中的Ｐ糖蛋白和谷胱甘肽－２转移－π表达。结果：Ｐ－ａｇ和ＧＳＴ－π外地１６例正常肾组织中的表达率均匀１００％，在４４例肾细胞癌组织中分别为６３．６５和５４．５％Ｐｇ，Ｐ－ｇｐ和／或ＧＳＴ－π阳性表达率为７９．５％。     

四逆汤对缺血心肌谷胱甘肽S转移酶基因表达的影响

目的:探讨四逆汤对缺血心肌谷胱甘肽S转移酶(GST)基因表达的影响。方法:昆明种小鼠,随机分为对照组、缺血组、缺血加四逆汤组。提取各组心肌组织总RNA通过RT-PCR,以β-actin为内参照对GST基因的表达水平进行检测。结果:缺血加四逆汤组GST基因表达显著强于对照组及缺血组。结论:四逆汤能诱导GST基因的表达,GST能催化谷胱甘肽与亲电子物质发生结合反应。     

谷胱甘肽S转移酶M1基因多态性与直肠癌的相关性的初步探讨

目的探讨谷胱甘肽S转移酶M1基因多态性与直肠癌的关系。方法以聚合酶链反应方法,分析了56个直肠癌病人和性别、年龄配对的143个正常对照的谷胱甘肽S转移酶M1基因型及其对直肠癌的相关性。结果GSTM1基因缺失频率在病例组和对照组之间无有显著差异。结论GSTM1基因缺失可能不是结直肠癌发生的易感基因型。     

人胎盘型谷胱甘肽S—转移酶基因与肿瘤

胎盘型谷胱甘肽Ｓ转移酶（ＧＳＴπ）基因位于１１ｑ１３,其表达蛋白在肿瘤细胞耐药中起一定作用,过度表达的肿瘤患者化疗效果差。ＧＳＴπ基因与癌基因ＩＮＴ２,ＨＳＴＦ１,ｂｃｌ１常形成共扩增现象及在乳腺癌中的表达与雌孕激素受体呈负相关关系。ＧＳＴπ基因在人体多种肿瘤中都有异常表达,有可能成为肿瘤及癌前病变的标志酶,对判断肿瘤患者预后及选择治疗方案有临床意义     

食管癌谷胱甘肽硫转移酶M1基因多态性研究

谷胱甘肽硫转移酶(glutathioneS-transferase,GST)是细胞内重要解毒代谢酶,GSTM1基因是GST基因家族中的一个亚型,在人群中呈多态性分布。研究表明,GSTM1基因与肿瘤关系密切,GSTM1(-/-)基因型个体显著增加个体患癌的危险性[1]。我国潮汕地区是南方沿海食管癌高发区,GSTM1基因的分子流行病学研究,将有助于揭示食管癌发生的遗传因素。1　材料与方法1.1　标本　手术切除的新鲜癌组织标本取自于汕头大学医学院肿瘤医院经病检确诊为食管鳞癌的108例患者,其中男75例,女33例,平均年龄56.5岁,38例有吸烟史。另取汕头市职业病防治所112名正…     

蒙古族谷胱甘肽S-转移酶GSTT1和GSTM1基因多态性

目的 探讨内蒙古地区蒙古族谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase GSTs EC 2.5.1.18) GSTM1和GSTT1基因多态性分布特点,为内蒙古少数民族基因型研究提供相关数据。 方法 采用内对照聚合酶链反应技术（PCR）和凝胶成像分析方法,对555例内蒙古地区蒙古族个体的GSTT1、GSTM1基因缺失型频率进行了分析。结果 GSTM1基因缺失型、GSTT1缺失型在内蒙古地区蒙古族人群中检出频率分别为55.7%和65.9%。同时具有GSTM1缺失型和GSTT1缺失型个体的 检出频率为32.2%。结论 中国蒙古族人群GSTM1、GSTT1基因呈多态性分布,与汉族及其他少数民族存在一定差异。     

谷胱甘肽S－转移酶pi基因与表达载体pSV2－neo重组体的构建

７３４ｂｐ的ＧＳＴ－ｐｉｃＤＮＡ从质粒ｐＧＰ５中回收后，采用平端连接技术将其重组到真核表达载体ｐＳＶ２－ｎｅｏ上，筛选出正向连接重组体ｐＳＶ２－ＧＴ￣Ｓ和反向连接重组体ｐＳＶ２－ＣＴ￣ＡＳ。     

谷胱甘肽S—转移酶Pi基因与表达载体pSV2—neo重组体的构建

７３４ｂｐ的ＧＳＴ－ｐｉｃＤＮＡ从质粒ｐＧＰ５中回收后，采用平端连接技术将其重组到真核表达载体ｐＳＶ２－ｎｅｏ上，筛选出正向连接重组体ｐＳＶ２－ＧＴ＾ｓ和反向连接重组体ｐＳＶ２－ＣＴ＾ＡＳ。