贝前列素促进野百合碱诱导肺动脉高压大鼠肺动脉细胞凋亡

目的 探讨前列环素对肺动脉细胞凋亡的影响.方法 30只大鼠,随机分为对照组、野百合碱(MCT)组及贝前列素组.MCT组及贝前列素组腹腔注射60 mg/kg MCT,对照组腹腔注射等体积0.9％氯化钠注射液;第2天起,贝前列素组每天200μg/kg贝前列素灌胃.所有大鼠饲养21 d后,观察肺动脉血流动力学及右心肥厚、肺组织HE和TUNEL染色分别观察肺动脉重塑和肺动脉细胞凋亡,实时定量PCR及Western blot观察肺动脉内BAX、BCL-2和PDK mRNA和蛋白水平的改变.结果 贝前列素组大鼠的平均肺动脉压力,右心肥厚指数及肺动脉管壁厚度均明显低于MCT组(P＜0.05).贝前列素组大鼠肺动脉细胞凋亡较MCT组增加,肺动脉组织中BAX mRNA和蛋白水平均高于MCT组,而BCL-2与PDK mRNA和蛋白水平均显著降低.结论 贝前列素可以通过促进肺动脉细胞凋亡改善野百合碱诱导肺动脉高压大鼠的肺动脉重塑.     

野百合碱诱导大鼠肺动脉高压模型的建立

背景：目前尚缺乏简单易行、实用、操作性强的肺动脉高压动物模型。 目的：建立一种实用的注射野百合碱诱导的肺动脉高压动物模型。 方法：采用一次性皮下注射野百合碱60 mg/kg的方法制备SD大鼠肺动脉高压模型。 结果与结论：野百合碱注射后第1,2,3,4周,大鼠平均肺动脉压明显升高,右心室肥厚明显。光镜下可见肺小血管肌化程度增强,相对中膜厚度增加,肺血管密度减少,以上症状均随野百合碱注射时间的延长逐渐加重。证实此方法建立的大鼠肺动脉高压模型造模成功。     

黄芩素对野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠血管壁增厚的抑制作用

目的:观察黄芩素(baicalein)对野百合碱(monocrotaline,MCT)诱导的肺动脉高压(pulmonary artery hypertension,PAH)大鼠的治疗作用,并初步探讨其机制。方法 :28只雄性SD大鼠随机分为对照组、MCT模型组、黄芩素低剂量组和黄芩素高剂量组。除对照组外,其余各组大鼠皮下注射MCT建立大鼠PAH模型,黄芩素低、高剂量组于MCT注射2周后分别灌胃黄芩素50和100 mg·kg~(-1)·d~(-1),持续14 d,对照组灌胃等量生理盐水。造模4周后,测定大鼠右心室收缩压(right ventricular systolic pressure,RVSP)、右心室肥厚指数(right ventricular hypertrophy index,RVHI)和右心室质量指数(right ventricular mass index,RVMI);Masson染色检测肺组织纤维化程度;HE染色观察肺血管病理形态学变化;Western blot测定各组肺组织α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)蛋白水平及肺小动脉p38、ERK和JNK的磷酸化水平。结果:与对照组比较,MCT模型组大鼠的RVSP、RVHI和RVMI均明显升高(P0.01),肺组织纤维化明显,肺组织中α-SMA表达上调(P0.01),肺动脉壁增厚,肺小动脉p38,ERK和JNK磷酸化水平明显升高(P0.01);与MCT模型组相比,黄芩素高、低剂量组的RVSP、RVHI和RVMI明显降低(P0.01),肺组织纤维化和血管壁增厚明显改善,p38、ERK和JNK的磷酸化水平减少(P0.01)。结论:黄芩素可减轻MCT诱导的肺动脉高压,其作用通过抑制肺动脉壁增厚来实现,其分子机制可能与其抑制肺动脉的MAPK信号通路有关。     

人参皂苷Rg2对野百合碱诱导肺动脉高压模型大鼠的作用

目的 探讨人参皂苷Rg2(ginsenoside-Rg2)对野百合碱(monocrotaline,MCT) 诱导的肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension,PAH) 模型大鼠的作用.方法 将48只雄性SD 大鼠随机分为对照组、模型组、人参皂苷Rg2 (20、40、80 mg/kg) 组和波生坦(Bos,200 mg /kg) 组,每组8只.一次性腹腔注射MCT(50 mg/kg) 复制PAH 模型,此后按分组灌胃给药,每天1 次,连续28d.通过颈总动脉和右心室用八道生理记录仪测定右心室收缩压(right ventricle systolic pressure,RVSP)、平均动脉压(mean arterial blood pressure,MBP)、心率(heart rate,HR).处死动物后采集血浆测定内皮素-1(endothelin-1,ET-1)和一氧化氮(nitric oxide,NO)的水平并测定右心肥大指数.结果 野百合碱注射后第28天时,与对照组比较,模型组右心室压力、右心肥大指数明显升高,心率和平均动脉压明显减小;血浆ET-1水平明显增加,NO水平明显降低.人参皂苷Rg2能明显缓解这些变化.结论 人参皂苷Rg2对野百合就所致的肺动脉高压模型大鼠具有改善作用.     

血管紧张素-（1-7）对野百合碱诱导的肺动脉高压和肺血管重构的影响

目的：探讨血管紧张素-（1-7）［Ang-(1-7)］对野百合碱(MCT)诱导的肺动脉高压(PAH)模型中肺动脉压力和肺小动脉重构的影响。方法:雄性Sprague-Dawley大鼠60只,随机分为:对照组、PAH组、PAH+Ang-(1-7)组。PAH组和PAH+Ang-(1-7)组一次性颈部注射MCT60mg/kg,24h后经微泵持续泵入生理盐水或Ang-(1-7)(24μg·kg-1·h-1)共4周。对照组一次性颈部注射相同体积的生理盐水,24h后泵入生理盐水。4周后,测定大鼠的右室收缩压(RVSP)和右心室肥厚指数(RVHI),并运用图像分析软件,测定肺小动脉管壁厚度(WT)占动脉外径(ED)的百分比(WT%)及管壁面积(WA)占血管总面积的百分比(WA%)。通过放射免疫方法检测肺组织中一氧化氮(NO)浓度。Westernblotting分析肺组织内皮一氧化氮合酶(eNOS)和eNOSSer1177-phosphorylation的表达。结果:PAH组与对照组相比,RVSP、RVHI、WT%、WA%明显升高（P<0.01）,肺组织中NO浓度、eNOS、eNOSSer1177-phosphorylation的表达水平显著降低（P<0.01）;Ang-(1-7)干预后RVSP、RVHI、WT%、WA%明显降低（P<0.01）,肺组织NO浓度、eNOS、eNOSSer1177-phosphorylation的表达明显升高（P<0.01）。结论:在MCT诱导的肺动脉高压模型中,Ang-(1-7)可预防肺动脉高压的发生,同时抑制肺血管的重构,其机制可能与Ang-(1-7)升高肺组织NO浓度,上调eNOS的表达以及eNOSSer1177-phosphorylation水平有关。     

过表达miRNA-29a对野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压的作用

目的:检测微小RNA(miRNA)-29a在野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠肺动脉血管壁组织中的表达,研究过表达miRNA-29a对肺动脉高压大鼠的影响,并探讨其初步机制。方法:在野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠模型上,用实时荧光定量PCR测定肺组织miRNA-29a的表达水平;尾静脉注射miRNA-29a-mimic后,记录大鼠肺动脉压和体循环动脉压,苏木素-伊红染色观察肺动脉组织的形态,Western blot检测肺动脉组织中p-Akt与peNOS的蛋白水平。结果:野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠肺动脉血管壁组织中miRNA-29a呈低表达;过表达miRNA-29a后,大鼠肺动脉压明显下降,体循环血压无显著变化,肺动脉中膜增厚程度显著减弱,肺血管重构现象不明显,p-Akt与p-eNOS的蛋白水平上调。结论:过表达miRNA-29a对野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压具有改善作用,可能与激活PI3k/Akt-eNOS信号通路有关。     

血管紧张素转化酶2的研究进展

2000年,科学家们发现了一种与血管紧张素转化酶(ACE)具有较高同源性的酶,命名为ACE2(或ACEH)。ACE2与ACE均具有HEXXH锌离子结合结构域,也属于肾素-血管紧张素系统(RAS),但ACE2中还具有一个特异的collectrin结构域。ACE2不仅在心血管系统中发挥了重要的功能,而且作为SARS病毒入胞的受体在肺部疾病中发挥了一定作用。此外,由于其组织特异性,可能在生殖系统及胃肠道系统中也扮演了重要的角色。     

藏红花素缓解野百合碱诱导动脉型肺动脉高压大鼠右心室损伤的机制研究

目的观察藏红花素能否缓解野百合碱（MCT）诱导动脉型肺动脉高压（PAH）大鼠的右心室损伤,并探讨其可能的作用机制。方法40只雄性SD大鼠随机分为normal组、PAH组、crocin组及sildenafil组,每组10只。PAH组、crocin组及sildenafil组大鼠皮下注射MCT（50mg/kg）建立PAH模型。自注射MCT之日起,crocin组大鼠给予藏红花素（200mg/kg）、sildenafil组大鼠给予西地那非（30mg/kg）、PAH组及normal组大鼠给予等量生理盐水每日1次灌胃。4周后,测定各组大鼠右心室收缩压（RVSP）、平均肺动脉压（mPAP）、右心室肥大指数（RVHI）和右心室质量指数（RVMI）;组织染色观察右心室病理变化;检测右心室炎性因子（IL-1β、IL-6、TNF-α）、p38MAPK/NF-κB炎性通路、CCL2、CCR2及巨噬细胞标记物CD68的表达。结果与PAH组相比,crocin组及sildenafil组大鼠RVSP、mPAP、RVHI和RVMI降低（P<0.05）;右心室炎症细胞浸润和胶原纤维增生不明显;p38MAPK/NF-κB通路和炎性因子（IL-1β、IL-6和TNF-α）的表达下调（P<0.05）;CCL2/CCR2通路表达及CD68⁺巨噬细胞浸润减少（均P<0.05）。结论藏红花素可显著缓解MCT诱导PAH大鼠的右心室损伤,其作用与本实验剂量下西地那非的作用相当;藏红花素的部分保护机制可能与其对炎症的调节作用有关。     

过表达c-Met蛋白诱导内皮祖细胞分布于肺动脉高压大鼠肺组织

目的探讨过表达c-Met蛋白对内皮祖细胞(EPCs)在低氧性肺动脉高压(HPAH)大鼠中的分布情况。方法复制HPAH模型,原代培养大鼠骨髓源性EPCs并鉴定,构建带有c-Met基因的腺病毒并转染EPCs,细胞分为对照组、空载病毒组和c-Met过表达组,用real time PCR和Western blot检测c-Met mRNA和蛋白表达,用CM-Dil活细胞染色剂标记EPCs,通过尾静脉将各处理组EPCs输注到HPAH大鼠模型体内,1周后观察EPCs在主要脏器中的分布。结果对照组、空载病毒组和c-Met过表达组c-Met mRNA表达量分别为:0.19、0.17和1.85;c-Met蛋白的表达量分别为:0.24、0.17和0.82。正常EPCs组中细胞在肺脏、肝脏、脾脏和肾脏的阳性率分别是:1.7%、0.5%、7.9%和9.4%,空载病毒组细胞阳性率分别是:1.5%、0.4%、8.3%和8.5%,c-Met EPCs组细胞阳性率分别为9.3%、0.2%、1.3%和0.3%。c-Met EPCs组中肺脏的细胞阳性率明显升高,在肾脏和脾脏的分布明显下降(P0.001)。结论过表达c-Met蛋白促进EPCs优势分布于HPAH模型的肺组织。     

野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压对大鼠肺Hippo信号通路相关分子表达的影响

目的:研究野百合碱诱导大鼠肺动脉高压时肺Hippo信号通路相关分子表达的变化,探讨Hippo信号通路对肺动脉高压发生发展的意义。方法:45只SD大鼠随机分为对照组(n=15)和模型组(n=30),模型组一次性给予颈部皮下注射野百合碱(60 mg/kg)建立肺动脉高压模型,对照组注射相同剂量的生理盐水。4周后通过右心导管术检测右心室收缩压(right ventricular systolic pressure,RVSP),计算右心室肥厚指数(right ventricular hypertrophy index,RVHI)和右心室质量指数(right ventricular mass index,RVMI);HE染色观察肺小动脉重构,计算中膜厚度百分比(medialthickness/external diameter, M/E%);Masson染色检测肺组织纤维化;免疫组化检测肺小动脉中Yes相关蛋白(Yes-associated protein,YAP)、tafazzin(TAZ)和TEAD蛋白表达的变化;Western blot和RT-qPCR检测肺组织中YAP、TAZ和TEAD蛋白和mRNA表达的变化。结果:与对照组相比,模型组大鼠的血管壁显著增厚,M/E%明显增高(P0.01),肺组织纤维化明显;模型组的RVSP、RVHI和RVMI均明显高于对照组(P0.01);免疫组化染色结果提示模型组肺小动脉YAP、TAZ和TEAD的蛋白水平显著高于对照组,Western blot和RT-qPCR结果显示肺组织YAP、TAZ和TEAD的蛋白和mRNA水平同样高于对照组(P0.05)。结论:Hippo信号分子的激活可能促进了肺小动脉的重构,进而介导了野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压的发生发展。     

野百合碱诱导大鼠肺动脉高压时对肺血管壁Jagged2/Notch3信号分子表达的影响

目的:观察野百合碱诱导大鼠肺动脉高压时肺血管壁Jagged2/Notch3信号分子表达的变化,探讨Jagged2/Notch3信号在肺动脉高压发生中的作用和意义。方法:45只SD大鼠随机分为正常对照组(C组)、溶剂对照组(S组)和野百合碱模型组(M组),每组15只,通过一次性腹腔注射野百合碱50mg/kg建立肺动脉高压模型,溶剂对照组注射相同剂量的溶媒。4周时通过HE染色观察肺血管重构,通过右心导管测定平均肺动脉压(mPAP)和右心室收缩压(RVSP)。采用免疫组化和实时荧光定量PCR等方法检测肺血管壁Jagged2/Notch3/Hes5蛋白和mRNA表达的变化。结果:与正常对照和溶剂对照组相比,4周时野百合碱模型组的血管壁显著增厚,中膜厚度百分比增加(P<0.01);此外野百合碱模型组的mPAP和RVSP显著高于正常对照和溶剂对照组(P<0.01);免疫组化和实时荧光定量PCR结果提示Jagged2主要表达于肺小动脉内膜,Notch3、Hes5主要表达于肺小动脉中层平滑肌,与溶剂对照组以及正常对照组相比,野百合碱模型组肺小动脉的Jagged2、Notch3和Hes5表达显著增高。结论:Jagged2/Notch3信号分子的激活可能在野百合碱诱导肺动脉高压发生中起重要作用。     

氟西汀对BMPR2表达的影响以及对野百合碱诱导大鼠肺动脉高压的预防作用

目的探讨氟西汀对骨形态生成蛋白受体2(bone morphogenetic protein receptor 2,BMPR2)表达的影响以及对野百合碱(monocrotaline,MCT)诱导大鼠肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension,PAH)的预防作用。方法将24只Wistar大鼠随机分成三组:对照组、MCT组和氟西汀处理组。采用多导生理记录仪测量血流动力学相关指标,HE染色方法观察肺动脉的形态学改变,以及利用RT-PCR方法检测肺动脉BMPR2的表达。结果与对照组相比,MCT组肺动脉压力、肺动脉中膜厚度百分比以及右心肥厚指数均明显升高,BMPR2在肺动脉上的表达明显减少(<0.01)。给予氟西汀处理后,氟西汀明显抑制了MCT诱发的肺动脉压力的升高、肺动脉重构和右心肥厚,并逆转了BMPR2的表达(<0.05)。结论肺动脉的构型重建可能与BMPR2的表达减少有关。氟西汀可能通过逆转BMPR2的表达有效地预防MCT诱导的PAH。     

GATA-4参与调节对氯苯丙氨酸抑制野百合碱诱导大鼠肺动脉高压

目的研究GATA-4在对氯苯丙氨酸(4-Chloro-DL-phenylalanine,PCPA)抑制野百合碱(monocrotaline,MCT)诱导的大鼠肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension,PAH)中的调节机制。方法雄性SD大鼠[体重(180±10)g]40只,随机分为对照组(control)、野百合碱组(MCT)、PAPC低剂量组(P1,腹腔注射PCPA 50mg/kg)、PCPA高剂量组(P2,100mg/kg)。21d后,检测肺动脉压力等血流动力学指标。HE染色观察肺血管重构。Western blot检测肺组织GATA-4及MMP-13蛋白表达。结果与对照组相比,MCT诱导大鼠的平均肺动脉压力、肺血管壁面积比显著增加,肺组织GATA-4及MMP-13蛋白表达明显增多。PCPA抑制肺血管重构,剂量依赖性地降低GATA-4及MMP-13的表达水平。结论GATA-4参与MCT诱导的大鼠PAH肺血管重构。色氨酸羟化酶抑制剂PCPA抑制大鼠PAH肺血管重构可能与调控GATA-4相关。     

糖尿病大鼠胰腺血管紧张素受体Mas表达降低

 目的 糖尿病大鼠观察胰腺血管紧张素受体Mas在糖尿病发病机制中的可能作用。方法 选48周龄的雄性OLETF大鼠及年龄和性别匹配的同品系LETO大鼠行口服糖耐量试验。氧化酶法测定血糖,ELISA法测定血清胰岛素,血浆生化仪测定血清甘油三酯及总胆固醇。免疫组化检测Mas及血管紧张素转换酶2（ACE2）在胰腺的表达。应用淋巴细胞分离液分离胰岛细胞,QRT-PCR方法检测胰岛细胞Mas及ACE2的mRNA表达,Western印迹法测定大鼠胰岛细胞Mas及ACE2的蛋白表达。结果 OLETF大鼠的体重、甘油三脂、总胆固醇、空腹血糖及服糖后2h血糖、空腹胰岛素水平较LETO大鼠均显著升高（P<0.05～0.01）。Mas及ACE2在胰腺的内、外分泌腺均有表达。OLETF糖尿病大鼠其胰岛细胞Mas的mRNA及蛋白表达均明显低于LETO对照组（P<0.05）,两组间ACE2的mRNA及蛋白水平无显著差异。结论 糖尿病发生过程中胰腺Mas mRNA及蛋白水平的下降先于ACE2出现。Mas在胰腺的表达可能成为治疗胰腺疾病的靶点之一。     

血管紧张素转化酶2的病理生理作用

肾素血管紧张素系统在调节血压和水、盐代谢中发挥着重要作用.血管紧张素转换酶2是人类第一个血管紧张素转换酶同系物,可高效地水解血管紧张素Ⅱ,形成舒血管物质血管紧张素1-7.目前发现血管紧张素转换酶2与心血管、肾、肺等疾病有关,并且是严重急性呼吸器官综合征冠状病毒的功能受体.     

雌激素缺乏上调大鼠肾脏肾素和血管紧张素转化酶的表达

<正>肾素-血管紧张素系统(renin-angiotensin system,RAS)在慢性肾病(chronic kidney disease,CKD)发病进程中发挥重要作用,血管紧张素Ⅱ(angiotensin,AngⅡ)作为RAS的主要生物活性物质通过升高肾小体血管血压,造成肾小体血管上皮细胞、内皮细胞和系膜细胞的损伤,诱导CKD的发生。肾素在RAS中扮演蛋白水解酶作用,此外,肾素(原)还能与其受     

N-乙酰半胱氨酸对野百合碱诱导大鼠肺动脉高压作用机制的基础研究

目的:观察N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)对野百合碱(Monocrotaline,MCT)诱导的肺动脉高压(Pulmonary arterial hypertension,PAH)大鼠右心室重构的影响及其机制。方法:Wistar雄性大鼠适应性喂1周,随机分为正常对照组、MCT组、MCT+NAC组。MCT(60 mg/kg)皮下注射诱导PAH大鼠模型,实验组给予NAC[500 mg/(kg·d)],连续6周,第4周末测定大鼠平均肺动脉压(m PAP)、右心室收缩压(RVSP);分离大鼠左心室+室间隔(LV+S)、右心室(RV)并称重,计算RV/(LV+S)的比值。HE染色观察右心室病理学变化,天狼星红染色观察右心室胶原沉积的变化。RT-PCR和Western blot检测右心室collagenⅠ、collagenⅢ、NADPH氧化酶4(NADPH oxidase 4,NOX4)、核转录因子κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)mRNA和蛋白表达。结果:NAC连续给药4周后能明显降低MCT诱导的PAH大鼠RVSP及m PAP,减轻RV/(LV+S)的比值,改善右心室心肌细胞的病理变化,降低右心室胶原的沉积,抑制NOX4的表达和NF-κB的活化。结论:NAC能缓解野百合碱(MCT)诱导的肺动脉高压大鼠右心室重建,其机制可能是通过抑制NOX4介导的氧化应激损伤,和NF-κB所介导的胶原沉积有关。     

新生大鼠缺氧后脉络丛中血管紧张素转化酶的表达变化

目的:观察新生大鼠缺氧后脉络丛(CP)组织结构的病理改变及血管紧张素转化酶(ACE)的表达变化,探讨缺氧后脉络丛的病理变化与脑缺氧的关系.方法:将54只新生SD大鼠随机分为对照组(control)和缺氧组(hypoxia).利用缺氧箱(8％ 02,92％ N2)缺氧2 h制备新生大鼠缺氧模型.采用苏木精-伊红(HE)染...     

脱氢野百合碱诱导建立肺动脉高压犬模型的剂量研究

研究应用脱氢野百合碱（DHMC）建立肺动脉高压犬模型的合适剂量和技术细节.方法 32只比格犬随机分为4组,1.5mg/kg-1 DHMC组（n=8）、2.0mg/kg-1DHMC组（n=8）、3.0mg/kg-1DHMC组（n=8）、4.0mg/kg-1DHMC组（n=8）.取动脉血检测血氧饱和度,外周血检测血浆脑钠肽浓度.穿刺右颈静脉置管插入Swan-Ganz漂浮导管,测量肺动脉压力、肺循环阻力、右心输出量.体外将野百合碱转化为脱氢野百合碱后,经右心室途径分别注射上述剂量的脱氢野百合碱.8周后复测上述指标.实验过程中死亡的比格犬和实验8周时处死的比格犬,均取出肺组织行组织病理学检查.结果 1.5mg/kg-1 DHMC组肺动脉压力及肺循环阻力均未见明显改变,2.0mg/kg-1 DHMC组肺动脉压力、肺循环阻力均明显升高,3.0mg/ kg-1DHMC组肺动脉压力、肺循环阻力均明显升高,但死亡率62.5％,4.0mg/kg-1DHMC组均死于急性肺水肿.结论 脱氢野百合碱诱导肺动脉高压犬模型呈剂量相关性,小剂量建模不成功,大剂量死亡率高.     

移植骨髓间充质干细胞预防野百合碱诱导的肺动脉高压

背景：干细胞移植治疗肺动脉高压有一定疗效。 目的：观察骨髓间充质干细胞移植治疗肺动脉高压的效果及并探讨其作用机制。 方法：采用密度梯度离心法体外培养、纯化、扩增获得大鼠骨髓间充质干细胞,经荧光染料标记后备用。大鼠皮下注射野百合碱建立肺动脉高压模型,建模后1周将大鼠随机分为3组,干细胞移植组和肺动脉高压组大鼠皮下注射野百合碱建立肺动脉高压模型,1周后干细胞组大鼠经舌下静脉注射骨髓间充质干细胞悬液,肺动脉高压组注射等量不含干细胞的培养液,对照组皮下注射等量生理盐水。 结果与结论：移植后2周,与野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠相比干细胞移植组血流动力学参数及右心室与体质量之比明显改善(P < 0.05);肺血管重构程度减轻(P < 0.05)。荧光显微镜下发现干细胞组移植的骨髓间充质干细胞在大鼠体内能存活至少2周,部分干细胞能转化为血管平滑肌细胞。说明静脉移植骨髓间充质干细胞能明显改善野百合碱造成的肺动脉高压大鼠肺血管和右心室结构的损伤。