Sirt1参与异丙肾上腺素诱导的小鼠心肌肥大

目的:观察Ⅲ类组蛋白去乙酰基酶1(Sirt1)在异丙肾上腺素(ISO)诱导的小鼠心肌肥大中的表达及作用。方法:昆明小鼠随机分为正常对照组、ISO模型组和ISO+NAM(烟酰胺,Sirt1抑制剂)组。皮下注射ISO诱导小鼠心肌肥大。以心脏重量指数(心脏重量/体重)、HE染色、透射电镜以及脑钠肽(BNP)mRNA表达水平观察心肌肥大的变化。同时采用RT-PCR、Western blotting检测各组心肌Sirt1 mRNA、蛋白质的表达。结果:与对照组相比,心脏重量指数,HE染色,透射电镜以及BNP mRNA表达水平均显示皮下注射ISO可明显诱导小鼠心肌肥大;Sirt1在心肌肥大模型组表达显著增多(P0.01),其抑制剂NAM可明显减轻ISO诱导的心肌肥大(P0.05),并降低Sirt1的表达(P0.01)。结论:Sirt1的激活可能参与ISO诱导的小鼠心肌肥大。     

肝细胞特异性Sirt1缺失加重小鼠肝脏炎性反应

目的探究沉默信息调节因子1 (Sirt1)基因的缺失对小鼠肝脏炎性反应的影响及其作用机制。方法每周记录在高脂喂养下的野生型C57BL/6J雄性小鼠和肝脏特异性Sirt1敲除(Sirt1-LKO)雄性小鼠的体质量,用Western blot和q-PCR检测炎性因子的表达;给小鼠腹腔注射20 mg/kg LPS,用生存曲线来反映小鼠对炎性反应的敏感性。结果与对照组WT小鼠相比,Sirt1-LKO小鼠表现为体质量明显减轻(P<0.05)。另外,生存曲线KaplaneMeier图显示Sirt1-LKO小鼠对LPS刺激呈现低敏感性(P<0.05)。Sirt1-LKO小鼠原代肝细胞中NF-κB蛋白水平增高(P<0.05),及NF-κB下游靶基因炎性因子Tnfα和IL6明显上调(P<0.05)。结论肝细胞特异性Sirt1缺失加重肝脏炎性反应。     

妊娠早期小鼠子宫巨噬细胞分布和活性的变化

目的:通过研究妊娠早期子宫CD14+巨噬细胞数量、分布及酸性磷酸酶(ACP)活性变化,探讨巨噬细胞与母胎免疫耐受的关系.方法:用免疫组织化学方法和酶细胞化学研究小鼠妊娠早期子宫CD14+巨噬细胞及ACP的变化.结果:对照组CD14+巨噬细胞主要分布在子宫内膜.小鼠妊娠后内膜中数目减少,第3日最少;肌膜和外膜巨噬细胞增加,第2日达到高峰.CD14免疫反应阳性面积变化趋势与此类似.第3～5日期间ACP的活性下降并维持在较低的水平.结论:巨噬细胞在着床期抗原识别和处理能力受到了抑制,参与了妊娠早期母胎免疫耐受的形成.     

CCl_4诱导肝损伤小鼠一氧化氮、血栓素含量和白介素-1活性的变化

为了探讨一氧化氮 (ＮＯ)、血栓素 (ＴＸＡ2 )和白介素 1(ＩＬ -1)在肝损伤过程中的变化规律及其意义 ,我们用四氯化碳(ＣＣｌ4 )诱发小鼠的肝损伤模型 ,观察肝损伤不同时间血清的谷丙转氨酶 (ＧＰＴ)及谷草转氨酶 (ＧＯＴ)和肝组织中的前列环素 (6 ｋｅｔｏ ＰＧＦ1а)、血栓素 (ＴＸＢ2 )、肿瘤坏死因子 (ＴＮＦ)、白细胞介素 1(ＩＬ 1)及一氧化氮 (ＮＯ)的含量变化 ,从而进一步揭示了肝损伤的病理机制。1　材料和方法1 1　实验动物分组 :昆明种小鼠 (由同济医大附属梨园医院动物中心提供 )雌雄各半 ,体重 2 0± 2ｇ。随机分为 3组 ,每…     

mTOR/S6K1在2型糖尿病Wistar大鼠肝脏和肌肉的表达

目的应用Wistar大鼠制备2型糖尿病的动物模型,观察肝脏和肌肉组织mTOR/Rps6kb1(S6K1)表达的变化。方法雄性Wistar成年大鼠高脂饲料喂养8周,腹腔注射链脲佐菌素(STZ)25mg/kg,注射后第4周检测空腹血糖、胰岛素水平,对结果进行统计分析;解剖大鼠,取肝脏和肌肉组织,应用RT-PCR和Western blot检测肝脏和肌肉组织mTOR及S6K1表达。结果与正常对照组比较,模型组大鼠血糖值升高(0.05),胰岛素水平下降(0.05),肝脏和肌肉中的mTOR/S6K1蛋白和mRNA表达均升高(0.05)。结论 mTOR及S6K1在2型糖尿病大鼠肝脏和肌肉过表达,提示其可能参与2型糖尿病发病过程。     

游泳运动通过Sirt1信号减轻小鼠心肌梗死后心脏病理性重塑

目的：探讨游泳运动(Sw)调控沉默信息调节因子1(Sirt1)信号减轻小鼠心肌梗死(MI)后心脏病理性重塑的作用。方法：采用冠状动脉左前降支结扎制备小鼠MI模型,随机分为4组：假手术组、MI组、MI+Sw组和MI+Sw+EX527 (Sirt1抑制剂)组。游泳运动采用无负重游泳9周,检测左室内压最大上升和下降速率(±dp/dt_max),HE和Masson染色观察心肌结构和纤维化程度,TUNEL染色检测细胞凋亡率,RT-qPCR检测炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6的mRNA水平,Western blot检测cleaved caspase-3、Bcl-2、Bax、Sirt1、Ac-NF-κB和NF-κB蛋白水平。结果：与假手术组相比,MI组±dp/dt_max显著降低(P<0.01),心肌纤维排列紊乱、断裂,纤维化程度、TUNEL阳性细胞数以及TNF-α、IL-1β、IL-6的mRNA水平均显著增加(P<0.01),同时,cleaved caspase-3、Bax和Ac-NF-κB的表达增加,Bcl-2和Sirt1表达降低(P&...     

C1型尼曼-匹克症小鼠脊髓胶质细胞的活性变化

目的通过观察C1型尼曼-匹克症小鼠不同脊髓节段星形胶质细胞和小胶质细胞的活性变化,探讨Npc1基因突变对脊髓发育的影响。方法 Npc1~(+/-)小鼠交配繁殖产生Npc~(1-/-)(n=3)和Npc1~(+/+)小鼠(n=3),PCR检测新生小鼠的基因型;选取35日龄的Npc1~(-/-)和Npc1~(+/+)小鼠,采用免疫荧光方法观察对比脊髓不同节段(颈、胸、腰、骶)星形胶质细胞和小胶质细胞的活性变化。采用免疫双染色检测胶质细胞中炎性因子的表达情况,采用免疫印迹方法检测白细胞介素-1β(IL-1β)、SMI31和磷酸化的tau蛋白表达情况。结果在35日龄Npc1~(-/-)小鼠脊髓的各个节段,其背角和腹角的星形胶质细胞和小胶质细胞的活性均明显增强(P0.05),并伴随细胞炎性因子IL-1β表达量的显著增加;同时,脊髓神经丝蛋白和骨架蛋白tau蛋白发生超磷酸化。结论 Npc1基因突变引起脊髓神经胶质细胞发生病理性变化,可能是脊髓神经元病理性损伤的重要原因。     

L783白血病小鼠体内的免疫活性细胞和免疫球蛋白的变化

本文报道沪白 1号(SW1)近交系小鼠腹腔接种L783白血病小鼠脾脏细胞悬液后,胸腺、脾脏和淋巴结中T和B淋巴细胞百分率以及血清中 IgG和 IgM含量的变化。结果表明,淋巴器官除胸腺外,脾脏和淋巴结中的T淋巴细胞百分率明显增高,而B淋巴细胞显著下降。血清中Ig 含量未见明显变化。上述免疫活性细胞有规律性的变化为进一步研究白血病发病机理提供线索,并有可能作为考核抗白血病药物疗效的指标之一。     

兔腓肠肌表面肌电信号与肌肉收缩及运动中枢的关系

背景：以往的验证实验均采用电刺激方法诱发肌肉收缩,施加电流的影响使接收到的表面肌电信号混有外来电流成分,无法有效分析其与肌肉收缩,特别是与高位运动中枢的关系。 目的：观察新西兰兔腓肠肌表面肌电信号与肌肉收缩及高位、低位运动中枢的关系。 方法：在新西兰兔清醒状态下通过针刺右侧跟腱诱发腓肠肌收缩,局麻清醒状态下离断右侧坐骨神经,分别在针刺跟腱、钳夹离断的坐骨神经远侧断端、针刺腓肠肌和被动活动腓肠肌时,检测腓肠肌表面肌电信号的强弱及类型。局麻下于L3平面横断脊髓,针刺左侧跟腱诱发腓肠肌收缩,检测腓肠肌表面肌电信号的强弱和类型。 结果与结论：正常状态下经针刺跟腱诱发腓肠肌随意收缩时,可接收到400 μV、持续4 s的宽底随意波;横断脊髓后针刺跟腱诱发的反射性腓肠肌收缩接收到的信号小于100 μV、持续时间小于1 s;离断坐骨神经后刺激跟腱、神经和肌肉时,均未引起肌肉收缩,但可接收到强度小于10 μV、持续时间小于0.5 s的干扰波;被动活动关节牵拉腓肠肌时未检测到肌电信号活动。说明兔腓肠肌表面肌电信号产生于肌肉收缩之前,是以高位运动中枢为主、低位运动中枢为辅发放到肌肉的驱动电信号的综合,而非肌肉收缩本身产生。     

小鼠腹腔巨噬细胞膜结合IL－1和TNF活性研究

本文实验提示小鼠腹腔巨噬细胞（Ｍ）经体内或体外ＬＰＳ／ＳｉＯ２刺激后，其固定的完整细胞膜或细胞膜粗提物具有ＩＬＩ和ＴＮＦ活性。在１ｈ、１２ｈ两种刺激时间内，膜结合ＩＬ－１活性无显著变化，但膜结合ＴＮＦ活性则随刺激时间延长而有所降低。刺激后的Ｍ在经ｐＨ３．０的甘氨酸盐酸处理后，膜结合ＩＬ－１和膜结合ＴＮＦ活性均有下降，以ＩＬ－１活性下降较为明显。ＩＬ－１受体拮抗剂能完全阻断膜结合ＩＬ－１活性，对膜结合ＴＮＦ活性亦有轻度的抑制效应，提示在膜ＴＮＦ发挥作用过程中，膜结合ＩＬ－１可能也参与了这一过程。     

小鼠腹腔巨噬细胞膜结合IL—1和TNF活性研究

本文实验提示小鼠腹腔巨噬细胞（Ｍφ）经体内或体外ＬＰＳ／ＳｉＯ２刺激后，其固定的完整细胞膜或细胞膜粗提物具有ＩＬ－１和ＴＮＦ活性，在１ｈ，１２ｈ两种刺激时间内，膜结合ＩＬ－１活性无显著变化，但膜组合ＴＮＦ活性则随刺激时间延长而有所降低。刺激后的Ｍφ在经ｐＨ３．０的甘氨酸盐酸处理后，膜结合ＩＬ－１和膜结合ＴＮＦ活性均有下降，以ＩＬ－１活性下降较为明显。ＩＬ－１受体拮抗剂对完全阻断膜结合ＩＬ－１活性，     

干燥综合征小鼠中MDSCs数量及功能变化

目的通过检测干燥综合征(Sj?gren’s syndrome, SS)模型小鼠中髓系来源抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)数量及功能变化,旨在揭示干燥综合征发病机制,并为其临床治疗提供新依据。方法本研究选取公认的非肥胖性糖尿病(non-obese diabetic,NOD)小鼠作为干燥综合征模型,分别检测4、8、10和12周龄NOD小鼠唾液流量变化;HE染色观察NOD小鼠颌下腺淋巴细胞浸润情况;并采用流式细胞术检测不同周龄NOD小鼠MDSCs数量及功能变化。结果随着NOD小鼠干燥综合征病情的发展,其唾液流量逐渐减少,颌下腺淋巴细胞浸润灶的数量及浸润面积明显增加;外周血中MDSCs比例显著升高;与对照组小鼠相比具有SS样症状的NOD小鼠MDSCs表面的未成熟标志物表达量明显降低。结论 MDSCs数量和功能伴随SS的发展而改变。靶向MDSCs可能成为干燥综合征患者治疗的新靶点。     

多器官衰竭综合征小鼠模型的炎性细胞因子变化

MoniqueJetalCritCareMed．-1996；24（7）．-1096～1120多器官衰竭综合征（MOF）是急救科和外科死亡的主要原因，而巨噬细胞M的持续活化和全身性炎性细胞因子增加在MOF的发生机理中起重要作用。用小鼠模型研究了MOF时血清中细胞因子和M产生细胞因子能力的变化。以1mg／g体重的剂量腹腔注射酵母多糖，诱导C57BC／C雄鼠产生类似人MOF的症状。观察12天中的①小鼠的一般状况；②血清中IL－la，IL－18，TNG－a和IL－6，TNF－a的生物学活性；腹腔＊O及其在体外＊％（IO吵m！）刺激后产生细胞因子的能力等变化。酵母多糖诱导的小…     

严重烫伤小鼠胸腺细胞体内活性变化的实验研究

本实验观测了严重烫伤小鼠胸腺细胞乙酰氨基葡萄糖苷(NAG)酶活性和自发DNA合成能力以及胸腺指数的变化。结果发现,NAG酶活性逐渐增强,伤后12～72h均显著升高;自发DNA合成能力呈明显的先降后升双相变化;胸腺指数进行性减小,12h以后已显著低于对照。烫伤后胸腺细胞NAG酶活性的改变是胸腺萎缩、残留细胞功能代偿性增强的结果,自发DNA合成能力的变化也与此有关。这表明烧伤后很早胸腺细胞的体内活性就已受到内环境因素的影响。     

Bloom综合征细胞中DNA连接酶Ⅰ的活性变化

DNA连接酶Ⅰ和DNA多聚酶α在DNA复制中起作用,DNA连接酶Ⅱ和DNA多聚酶β在DNA修复中起作用。已报     

肌肉环状指基因1和肌肉萎缩盒F基因的研究进展

世界范围为攻克骨骼肌萎缩这一难题作了大量基础研究和临床实验,但收效甚微.Bodine等[1]报道2种基因可以造成肌肉的萎缩.敲除小鼠任何1个基因,都能有效地缓解肌肉的萎缩过程.其中1个基因名为肌肉环状指基因1 (muscle ring finger 1,MuRFl);另外1个名为肌肉萎缩盒F基因(muscle atrophy Fbox,MAFbx,atrogin-1).这2个基因都参与了泛素化-1种骨骼肌蛋白质降解过程.肌萎缩常常伴随许多疾病和条件,包括癌症恶病质、败血症、糖尿病、甲亢、肾衰、失神经支配、大面积创伤、失重、寄生虫感染等.这些情况的特征都归因于蛋白质降解增加与合成受阻.     

短期低频脉冲磁场诱导经典瞬时感受器电位通道1对局部肌肉肌力提升后的保持与衰减变化轨迹

背景：短暂的低频脉冲磁场刺激可诱导和激活经典瞬时感受器电位通道1,并可提升人体局部肌肉(如肱二头肌)的最大自主收缩力与力量耐力。目的：通过可激活经典瞬时感受器电位通道1的特定低频脉冲磁场作为肌力提升手段,并观察短期刺激对人体肱二头肌最大自主收缩力与力量耐力提升后的变化衰减过程。方法：选取普通成年健康受试者27例,随机等分为训练组、照射组、训练+照射组。训练+照射组每次接受10 min低频脉冲磁场刺激后即刻进行抗阻训练,照射组只进行10 min低频脉冲磁场刺激,训练组采用抗阻训练,试验时间为8周,在正式试验的第1-12天进行短期肌力提升方案及力量水平后测,随后6周观察各组最大自主收缩力与力量耐力的衰减变化过程。结果与结论：(1)所有被试者随着试验时间的不断推进,最大自主收缩力值变化显著(P <0.01),时间交互效应明显,组间无交互效应,时间与分组交互效应不显著。(2)与初测值相比,照射组肌力衰减最大自主收缩力跟踪的第1,2,3,4周均显著高于初测值;训练组肌力衰减最大自主收缩力跟踪的第1,4周均显著高于初测值;与后测值相比,照射组最大自主收缩力值肌力衰减跟踪的第5,6周显著低于后...     

茶多酚对酒精诱导的小鼠肝脂质过氧化和血清ALT活性变化的影响

目的: 研究茶多酚(TP)对酒精性肝损伤的防治作用。方法: 通过离体和整体实验,采用分光光度法和血清生化检测法,检测肝组织脂质过氧化产物丙二醛(MDA)水平和血清谷丙转氨酶(ALT)的活性。结果: 离体实验中,TP+酒精组肝MDA水平明显低于生理盐水+酒精组(P＜0.01)。整体实验中,TP+酒精组小鼠肝脏MDA水平和血清中ALT活性均显著低于生理盐水+酒精组(P＜0.05)。此外,灌酒精1h后再给TP组,小鼠肝脏MDA含量也明显低于酒精+生理盐水组(P＜0.01)。结论: 茶多酚能抑制酒精引起的小鼠肝组织MDA水平和血清ALT活性的升高,可能具有防治酒精性肝损伤的作用。     

重症肌无力被动转移小鼠腓肠肌运动终板的形态学研究

目的:观察重症肌无力(MG)小鼠腓肠肌运动终板的形态学变化,并改良运动终板处光镜及电镜下的制作方法。方法:采用AChR单克隆抗体mAb35腹腔注射C57BL/6幼年小鼠,建立MG被动转移模型。采用Karnovsky-Roots法行乙酰胆碱酯酶组织化学染色,并在电镜下观察小鼠腓肠肌运动终板超微结构处形态学改变。结果:小鼠注射mAb35后出现肌无力症状与MG患者表现相似;Karnovsky-Roots法染色后可见沿神经末梢分布的运动终板;实验组腓肠肌运动终板处超微结构发生病理改变,此种改变符合MG神经肌接头处运动终板的病理改变。结论:Karnovsky-Roots法显示乙酰胆碱酯酶简便、经济;而电镜检查是确定PTMG模型运动终板超微结构有无病理改变的最佳方法。二者结合可为今后有关MG运动终板的病理研究提供一种可靠的方法。