壳聚糖纳米粒用作基因递送载体的初步研究

目的初步研究基因壳聚糖纳米粒的性质和转染活性。方法用复凝聚法制备纳米粒;用透射电镜观察形态;用纳米粒度分析仪测定粒径、多分散度和zeta电位;用荧光分光光度法测定基因包封率;用凝胶阻滞分析和荧光扫描测定基因在纳米粒中的位置;用体外基因转染实验定性评价纳米粒的转染活性。结果纳米粒形态多呈球形,平均粒径为218.9 nm,多分散度为0.276,zeta电位为+21.2 mV;基因包封率为99.6%;凝胶阻滞分析和荧光扫描表明基因几乎全部被包裹在纳米粒内部,表面吸附很少;体外基因转染实验表明基因壳聚糖纳米粒能够转染人胚胎肾细胞(HEK293)和肝癌细胞(HepG2),基因能够在这两种细胞中表达。结论壳聚糖纳米粒能将基因递送到细胞内并且基因能够表达,因此可以用作基因药物载体。     

Apoptin基因壳聚糖缓释微球载体的制备及其对A375细胞的凋亡诱导作用

为制备以羧甲基壳聚糖为基质材料的apoptin基因缓释微球载体,并研究其对A375细胞的凋亡诱导作用,采用超声波法制备羧甲基壳聚糖-DNA微球载体,并用扫描电镜对其进行了表征观察,然后将羧甲基壳聚糖-apoptin DNA微球转染人黑素瘤细胞A375,并通过RT-PCR、MTT和凋亡细胞DNA提取等方法对细胞的转染情况及细胞凋亡作了体外检测。结果表明,携带apoptin基因的羧甲基壳聚糖微球直径为200~300nm,成球性较好;此apoptin微球载体能有效地转染A375细胞,诱导A375细胞发生凋亡,从而抑制瘤细胞生长。     

壳聚糖载药纳米粒研究进展

目的介绍壳聚糖载药纳米粒近年来的研究进展。方法总结壳聚糖纳米粒的制备方法、释药特性、生物摄取及其应用。结果不同的制备方法可得到不同粒径和表面特性的壳聚糖纳米粒。壳聚糖纳米粒改变了壳聚糖的摄取机制，广泛应用于药物的器官靶向、DNA转染效率提高、药物的非注射途释给药等方面。结论壳聚糖纳米粒作为一种新型的药物载体，具有重要的研究开发价值。     

载基因壳聚糖纳米粒的制备及其特性的研究

目的制备壳聚糖纳米粒,并连接上质粒,研究壳聚糖纳米粒的特性及其对DNA的结合及保护能力。方法采用离子交联法制备壳聚糖纳米粒,并用喷金扫描电子显微镜检测,了解粒径的分布与形态;通过静电吸附作用连接上pGenesil-1质粒(报告基因);经琼脂糖凝胶电泳分析壳聚糖纳米载体与质粒DNA的结合能力,及不同pH值的壳聚糖纳米粒对质粒DNA的结合能力;并通过DnaseⅠ消化壳聚糖纳米-质粒结合物以观察壳聚糖纳米载体对质粒的保护作用。结果喷金扫描电镜检测证实壳聚糖纳米粒呈均匀分散的球形颗粒,平均直径为5nm;琼脂糖凝胶电泳的结果显示壳聚糖纳米粒能有效地结合载体pGenesil-1质粒;不同pH值的壳聚糖纳米粒对质粒的保护作用不同,当pH值<7时壳聚糖纳米载体能100%结合质粒;DnaseⅠ消化试验证实壳聚糖纳米载体对质粒DNA有保护作用。结论采用离子交联法制备出粒径较小、均匀的壳聚糖纳米粒,并且壳聚糖纳米粒能有效地连接上质粒并对其有保护作用。     

聚乳酸/乙醇酸共聚物纳米基因载体的制备及转染效率考察

目的：为了制备转染效率高的新型基因载体，本实验制备由聚酰胺一胺型树状大分子（PAMAM）与聚乳酸／乙醇酸共聚物（PLGA）复合的新型基因载体，并评价了其转染效率。方法：采用溶剂挥发法制备了PAMAM-PLGA新型基因载体，并且通过考察纳米基因载体粒径，粒子形态，稳定性，zeta电位、pH值等，从而确定了最佳的制备工艺。用电泳实验和绿色荧光蛋白标记方法研究了它的转染效率。结果：新型基因载体能够很好的携带DNA进入细胞。结论：在适合的制备工艺条件下可以制备出粒径大约100nm，分散系数为0.088的新型纳米基因载体，其转染效率要高于单纯的PAMAM。     

壳聚糖纳米粒子介导TFPI基因转染的实验研究

目的：评价壳聚糖纳米粒子携带组织因子途径抑制因子（tissue factor pathway inhibitor,TFPI）基因转染的效率及其细胞毒性。方法：制备壳聚糖纳米粒子-TFPI基因复合物，检测其粒度。zeta电位。包埋效率。以Lipofectamine2000为对照，观察血管平滑肌细胞系A10对壳聚糖TFPI基因纳米复合物的摄入速度和数量；利用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测体外转染效果；应用噻唑蓝（MTT）评价壳聚糖纳米粒子的体外细胞毒性。结果：壳聚糖TFPI基因纳米复合物的平均粒径约为141nm，zeta电位为6．8mV；其DNA包埋效率和DNA含量分别为（98．8±34）％和（38．1±2．3）％。A10细胞的摄入和转染实验显示其效率与商品化的细胞转染试剂Lipofectamine2000相近，但是其毒性远低于Lipofectamine2000。结论：壳聚糖纳米粒子可高效携带TFPI基因转染平滑肌细胞，而且对细胞基本无毒性。     

壳聚糖及其衍生物作为基因载体的研究进展

壳聚糖对DNA 有很好的结合和保护作用, 对生物体无毒、相容性好, 本身具有一定的抑制微生物和抗癌作用, 可通过复凝聚法制备, 而且还很容易改性制成不同途径给药的基因治疗载体. 该文介绍壳聚糖及其衍生物近年来作为基因载体的研究进展, 总结壳聚糖基因载体的制备 方法 、作用机制、转染效率的影响因素及改进 方法 和需解决的问题. 壳聚糖基因载体是一种新型基因载体, 具有广阔的发展前景.     

新型阳离子聚合物非病毒载体介导野生型p53基因体外转染效果的研究

目的:研究新型阳离子聚合物非病毒载体———尿刊酸修饰的壳聚糖(UAC)介导野生型p53(wt-p53)基因体外转染人肝癌细胞系HepG2的效果。方法:载体UAC包裹含绿色荧光蛋白(GFP)报告基因和wt-p53治疗基因的质粒(pEGFP-p53)转染HepG2细胞,利用流式细胞术和荧光显微术检测细胞内GFP的表达,优选最佳转染条件;采用RT-PCR法检测细胞内p53mRNA的表达,流式细胞术评价基因转染对细胞周期的影响,Western blot法检测细胞内p53及其下游细胞周期调控蛋白的表达。结果:在低pH(pH=6.9)条件下,采用低壳聚糖分子量(20000)的UAC作为载体,与pEGFP-p53形成高N/P(N/P=30)的UAC/pEGFP-p53复合物转染HepG2细胞,可获得最佳转染效果;载体UAC介导wt-p53基因转染细胞后,p53mRNA表达水平明显上调,G0/G1期出现显著阻滞,p53、p21和Rb蛋白表达水平明显上调,cyclin D1和CDK4蛋白表达水平明显下调。结论:载体UAC可成功介导wt-p53基因转染HepG2细胞,并诱导其产生细胞周期阻滞。     

顺铂联合HSV-tk自杀基因对肝癌细胞HepG2的生长抑制作用

目的研究HSV-tk自杀基因联合顺铂对人Hep G2细胞株的杀伤作用。方法使用脂质体携带p AFP-TK-IRES2-EGFP质粒转染Hep G2细胞;Hep G2细胞在转染HSV-TK基因后,继续添加顺铂,用CCK-8试剂检测HSV-tk基因联合顺铂对Hep G2细胞杀伤效果。结果重组质粒p AFP-tk-IRES2-EGFP成功转染Hep G2肝癌细胞;HSV-tk自杀基因联合顺铂对Hep G2细胞的杀伤作用大于单独使用顺铂或HSV-tk自杀基因(P<0.05)。结论实验成功评价了顺铂联合HSV-tk自杀基因对Hep G2肝癌细胞株的杀伤效果,为肝癌的临床治疗方法提供了实验依据。     

尿刊酸偶联壳聚糖基因载体的合成和表征

本文将活化的尿刊酸(urocanic acid，UA)与壳聚糖(chitosan，CTS)上的氨基反应合成一种新型非病毒基因载体——尿刊酸偶联壳聚糖(urocanic acid-coupled chitosan，UAC)，通过红外(FT-IR)、核磁共振(¹H NMR)和元素分析对UAC结构进行确证。用正交实验对取代度的影响因素进行考察，结果表明，随着UA投料量的增加和活化时间的延长，UAC的取代度也随之增大；通过琼脂凝胶电泳阻滞实验分析UAC/质粒DNA(plasmid DNA，pDNA)的复合能力及对DNase I酶抗降解能力，结果证明UAC与pDNA有较好的复合能力和抵制DNase I酶降解能力；通过测定UAC/pDNA复合物粒径和对zeta电位的分析，结果证明复合物具有良好的稳定性和易于进入细胞的性质；体外细胞转染是通过荧光显微镜观察UAC介导pDNA在体外培养HepG2细胞中的表达，结果显示，UAC能介导pDNA转染HepG2细胞并在细胞中表达绿色荧光蛋白，其转染效果较CTS明显增强。因而UAC是一种制备工艺简单，具有应用前景的非病毒基因载体。     

子宫中隔切除术后预防粘连方法探讨

目的 探讨子宫中隔并不孕患者宫腔镜术后不同处理方法预防宫腔粘连的效果.方法 55例子宫中隔并不孕患者行腹腔镜监护下宫腔镜子宫中隔切除术(TCRS),术后针对不同患者采用不同术后处理措施,包括宫腔放置与不放IUD,是否进行人工周期治疗,部分患者术后使用GnRH-a类药物治疗术后第1、3个月行宫腔镜检查随访,宫内放置IUD的患者;于术后第3个月取环.结果 54例患者术后进行宫腔镜检查随访,其中40例分别于术后第1、3个月完成了术后2次宫腔镜检查,另14例只完成一次检查.宫腔术后放环与否对术后宫腔形态影响无差异(P>0.05),术后使用人工周期治疗患者较未使用者子宫内膜厚,此两者术后第3个月宫腔镜检查发现宫底创面均已有内膜覆盖.使用GnRH-a类药物患者术后官腔形态满意.结论 TCRS术后宫腔放置IUD无助于预防术后粘连的发生;术后人工周期治疗应更个体化并有针对性的使用GnRH-a类药物治疗.术后及时进行宫腔镜检查随访可防止术后宫底新粘连的形成.     

欧洲药典适用性认证介绍

目的介绍欧洲药典适用性认证程序,为国内药品监管机构和原料药生产企业提供信息,促进我国原料药生产企业的国际化。方法通过查阅调研欧盟相关药品法规和与EDQM同行面对面的交流,详细了解欧洲药典适用性认证的组织机构和具体程序。结果与结论欧洲药典适用性认证程序在对原料药的质量控制有重要作用,加强了药典的监管力度,进一步保证了原料药的质量、安全性和有效性。     

住院患者精神用药情况调查分析

目的：了解目前住院精神患者的药物使用情况。方法：采用一日法调查西安市精神卫生中心403例住院精神患者诊断和治疗情况，并与上海市精神卫生中心2004年调查结果相比较。结果：①传统精神药物使用显著减少，新型精神药物使用占据首位；②抗精神病药物使用趋向小剂量化；③本组联用丙戊酸盐类药物显著增多；④我院精神药物使用情况与上海精神卫生中心比较有显著差异。结论：近年来精神药物使用情况已发生了显著变化，与新型精神药物疗效好，副作用少，患者依从性高有关。     

不同方法治疗慢性宫颈炎的疗效分析

目的慢性宫颈炎是妇科最常见的疾病之一,可引起盆腔脏器炎症,并且与宫颈癌的发生关系密切。本文诣在探讨不同方法在慢性宫颈炎中的疗效。方法回顾性分析新乡市中心医院收治的210例宫颈炎患者,采用药物保妇康栓、聚焦超声治疗及宫腔镜下宫颈电切术的临床效果进行统计分析。结果宫颈电切术治疗有效率为97.9%,明显高于另外两组,差异有统计学意义。结论宫腔镜下宫颈电切术治愈慢性宫颈炎,并且切除宫颈移行带,减少宫颈癌发生。     

片剂溶出度影响因素分析

目的:考察片剂溶出度的影响因素,提高片剂溶出度,从而提高产品质量。方法:通过实验,研究各种参数对片剂溶出度的影响,选择出最佳工艺条件,如改进处方、控制颗粒硬度和大小、控制压力等工艺参数,用于指导大型生产,提高片剂溶出度。结论:崩解剂及润滑剂的用量对片剂溶出度影响较大,颗粒的硬度及大小、粘合剂的温度,压片压力对片剂的溶出度亦有影响;片剂直径大小对片剂溶出度影响不大。     

槲皮素代谢产物定性检出条件研究

目的:研究给予大鼠槲皮素后血浆中代谢产物的定性检出条件。方法:给予大鼠槲皮素单体(100mg.kg-1)后腹腔静脉取血,血浆样品经2mol.L-1盐酸(甲醇-水溶液)水解,采用高效液相色谱法对血浆样品中代谢产物进行定性分析。结果:大鼠给药后3h内取血、血浆样品经盐酸水解处理4h,可稳定检测槲皮素和异鼠李素,样品在—20℃条件下贮存稳定。结论:血浆样品采集时间、盐酸水解时间及贮存方式等不同均可影响代谢产物的有效检出。     

甲泼尼龙佐治毛细支气管炎疗效观察

目的探讨甲泼尼龙与布地奈德治疗毛细支气管炎的疗效。方法将182例毛细支气管炎患儿随机分成三组,三组均采用综合治疗,A组62例用甲泼尼龙静脉滴注,B组60例雾化吸入布地奈德,C组60例用静滴氢化可的松,观察三组喘憋、哮鸣音消失和住院时间。结果A组喘憋、哮鸣音消失时间及住院时间均比B,C组缩短（P〈0.05）。结论甲泼尼龙静滴治疗毛细支气管炎有效、安全、方便,明显加快治愈过程,优于布地奈德与氢化可的松。     

新疆维吾尔自治区基层医院平均住院日调查分析

目的 通过对新疆维吾尔自治区14个县乡级医疗机构住院患者平均住院日及影响因素进行分析,为县乡级医疗机构进一步提高医疗管理质量提供依据.方法 将2009-2010年1504例县乡级医院住院患者平均住院天数,按性别、年龄、院别、付费方式、疾病分类进行描述性统计和秩和检验分析.结果 不同性别间及院别间平均住院日差异均有统计学意义(均P＜0.05),男性平均住院日为10.39 d,女性为8.69d,乡级医院为9.27d,县级医院为9.50 d.不同年龄间平均住院日差异有统计学意义(P＜0.05),小于15岁组、15 ～24岁组、25～44岁组、45 ～65岁组、大干65岁组平均住院日分别为8.10 d、7.66d、8.83 d、10.26 d和11.33 d.自费患者平均住院日为8.39 d,新农合组为9.10 d,商业保险组10.17 d,社会基本医疗保险患者则为11.08 d.不同疾病分类间平均住院日差异明显,妊娠类平均住院日最短,为6.73 d,而肿瘤患者则为14.26 d.结论 不同性别、不同年龄段、不同疾病分类及不同付费方式间平均住院日存在差异,县级医疗机构和乡级医疗机构住院患者平均住院日也存在差异.     

住院患者抗菌药物不合理使用分析

目的了解该院住院患者不合理使用抗菌药物情况。方法随机抽取2009年住院使用抗菌药物病历544份。依据《抗菌药物临床使用原则》等相关规定进行评价,统计、分析抗菌药物不合理使用现象。结果该院住院患者抗菌药物不合理使用率为31.8%,不合理现象主要表现有选药不当、高起点用药、用法用量不当等。结论该院住院患者抗菌药物不合理使用现象严重,医院应采取措施加强监管,促进抗菌药物合理使用。     

对天津市北辰医院医务人员药品不良反应认知度调查分析

药品不良反应(ADR)监测工作是对上市药品安全性的再评价,是公众安全合理用药的保障,是药品监督管理工作的重要组成部分。本中心对天津市北辰医院103名医务人员进行了药品不良反应相关知识认知度调查,并对调查结果进行统计分析,为相关部门的药品监管工作提供依据和参考。