酮氨酸氧化酶法测定糖化血清蛋白方法学研究

目的对酮氨酸氧化酶法全自动测定糖化血清蛋白(GSP)的方法进行评价.方法用日立7060全自动生化分析仪检测GSP,观察试剂稳定性、不精密度、线性范围、抗干扰性、准确性、样品贮存温度和贮存时间,建立参考值范围.结果该法180s达反应终点,线性达1266μmol/L(Y=0.9866 X+0.134,r=0.9997);批内CV1.54% ,批间CV3.20%;平均回收率101.7%;TG<9.8mmol/L,BIL<675μmol/L,Hb<200g/L,UA<3500μmol/L,Glu<100mmol/L时对测定结果无显著干扰.120例健康人血清GSP参考值范围(x±2s)110μmol/L～220μmol/L.结论本法线性宽、特异性强、精密度高,干扰因素少,是测定GSP的较好方法.     

以5-Br-PAPS为显色剂计算法测定血清总铁结合力

目的:建立以2-(5-溴-2-吡啶偶氮)-5-[N-正丙基-N-(3-磺酸丙基)氨基]苯酚(5-Br-PAPS)为显色剂计算法测定血清总铁结合力(TIBC)。方法:通过测定血清铁和血清未饱和铁(UIBC)含量,以血清铁和血清UIBC含量之和计算血清TIBC含量。结果:该法线性范围0μmol/L～180μmol/L,平均回收率为98.7%,批内变异系数(CV)和批间变异系数分别为0.028、0.035,与临床检验操作规程推荐的方法比较具有良好的相关性,线性回归方程和相关系数分别为Y=1.0034-0.87,r=0.9843。90例健康男性血清TIBC含量为46.4μmol/L～75.2μmol/L(x±2s),90例健康女性血清TIBC含量为50.9μmol/L～79.4μmol/L(x±2s)。结论:以5-Br-PAPS为显色剂计算法测定血清总铁结合力TIBC方法简便、灵敏可靠,适合临床应用。     

邻苯二甲酸酯及双酚A或氯化镉对睾丸巨噬细胞分泌白细胞介素-10的影响

目的研究邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)及双酚A(BPA)或氯化镉对大鼠睾丸巨噬细胞(TM)分泌细胞因子IL-10的影响。方法原代提取大鼠TM细胞,以50μg/ml脂多糖(LPS)作为激活剂,分别设1、10、100μmol/L DEHP、BPA和1、10、50μmol/L氯化镉单独染毒组以及0.5μmol/L DEHP+0.5μmol/L BPA、5μmol/L DEHP+5μmol/L BPA、50μmol/L DEHP+50μmol/L BPA、0.5μmol/L DEHP+0.5μmol/L氯化镉、5μmol/L DEHP+5μmol/L氯化镉、50μmol/L DEHP+25μmol/L氯化镉联合染毒组。作用细胞24 h后,采用ELISA及细胞因子抗体芯片方法检测TM细胞上清液中细胞因子白细胞介素-10(IL-10)的浓度。结果与LPS组比较,1μmol/L氯化镉、10μmol/L BPA或100μmol/L DEHP单独染毒组的IL-10蛋白均较低,差异有统计学意义(P0.05);且随着剂量的增加抑制作用逐渐增强。无论与LPS组还是与1μmol/L BPA单独染毒组比较,0.5μmol/L DEHP+0.5μmol/L BPA混合染毒组的IL-10蛋白降低,差异有统计学意义(P0.05)。抗体芯片结果显示50μmol/L DEHP+50μmol/L BPA混合染毒组的荧光值是100μmol/L DEHP单独染毒组的76.9%,是100μmol/L BPA单独染毒组的115.0%。无论与LPS组还是100μmol/L DEHP单独染毒组比较,50μmol/L DEHP+25μmol/L氯化镉混合染毒组TM细胞上清液中IL-10蛋白浓度均较低,差异有统计学意义(P0.05)。结论 DEHP及BPA或氯化镉单独作用能明显抑制TM细胞分泌IL-10蛋白。低剂量(0.5μmol/L)DEHP和BPA的联合作用为协同作用,中、高剂量(5μmol/L、50μmol/L)的联合作用为拮抗作用。而DEHP和氯化镉对IL-10蛋白的交互作用为协同作用。     

酶法测定糖化血清蛋白的初步评价

目的初步评价酮化氨基酸氧化酶法测定糖化血清蛋白(GSP)的临床应用性能。方法依据美国临床实验室标准化委员会颁布的《定量临床检验方法的初步评价;批准指南(EP10-A)》提供的方法,按特定的顺序连续5天测定高、中、低浓度质控品中的GSP,对酮化氨基酸氧化酶法测定GSP的方法进行初步评价。结果当质控品中的GSP浓度分别为186.5μmol/L、388.5μmol/L、590.5μmol/L时,其测定的回归方程为y=1.01x-2.80,相关系数r2=0.9994;绝对偏差分别是-0.1μmol/L、-8.2μmol/L、8.8μmol/L,总不精密度分别是1.31%、1.35%、0.67%。结论酮化氨基酸氧化酶法测定糖化血清蛋白的检测性能符合临床应用要求。     

火焰原子吸收法测定微量全血铜的正常参考值制订

目的:制订火焰原子吸收法测定微量全血铜的正常参考值。方法:综合均数加减标准差法与百分位数法并从诊断实际出发制订正常参考值。结果:全血铜均数为15.7μmol/L,标准差为5.79。第5百分位全血铜值为7.69μmol/L,第10百分位为8.30μmol/L,第20百分位为10.28μmol/L。正常参考值下限定为10.28μmol/L时,其灵敏度达79.17%,特异度达87.50%,符合率为85.83%。结论:以10.28μmol/L作为正常参考值下限为宜。     

循环酶速率法测定血清TBA在生化分析仪上的应用研究

目的探讨循环酶法胆汁酸(TBA)在BT-2000型全自动生化分析仪上的应用。方法采用循环酶速率法试剂,在BT-2000型全自动生化分析仪上进行批内、批间、回收及线性试验,并对130例健康人血清TBA进行测定,建立了实验室参考范围。结果批内、批间精密度结果平均值±标准差(μmol/L)及变异系数分别是7.74±0.23、2.83%,7.75±0.22、2.97%,批内、批间结果比较t=0.319、P=0.751,批内与批间测定结果比较无显著性差异;血清TBA测定结果的平均回收率分别是99.28%和95.61%;实验室参考值小于10.0μmol/L。结论在BT-2000型全自动生化分析仪上采用循环酶速率法测定血清TBA,具有速度快,方法简便的优点。     

儿童全血铅检测历年结果观察

历年来共检测10695例儿童全血铅,血铅浓度>0.48者2689人,占被检者的2511%;其中浓度在01483～0171μmol/L范围者占88.3%;01724～0195μmol/L者占8.6%;0.96～2112μmol/L者占2.94%;2117～3.13μmol/L者占0119%。     

老年医院下呼吸道感染患者锌、铬与细胞免疫功能的变化

目的 研究老年医院下呼吸道感染患者锌、铬与细胞免疫功能的变化.方法 测定52例老年医院下呼吸道感染组患者血浆、红细胞内微量元素锌、铬与T细胞亚群,同时与53例健康老年组作对照;血锌测定用光焰原子吸收法,血铬测定用无光焰原子吸收法,T细胞亚群检测应用间接免疫荧光法.结果 老年医院下呼吸道感染组血浆锌(12.68±3.26)μmol/L和铬(0.033±0.029)μmol/L、红细胞内锌(124.12±36.55)μmol/L和铬(0.412±0.025)μmol/L值较正常对照组(17.39±4.78)μmol/L和(0.068±0.036)μmol/L、(145.33±20.12)μmol/L和(0.666±0.038)μmol/L均下降,差异有统计学意义(均P<0.05);而且T细胞亚群显示功能减退及调节素乱的状况,即CD3(50.48±7.62)%、CD4(27.36±9.37)%及CD4/CD8(0.67±0.23)比值较正常对照组(64.33±4.82)%、(42.35±8.12)%及(1.57±0.22)%均有下降,而CD8(35.37±7.55)%较正常对照组(28.13±1.35)%增高,差异有统计学意义(均P<0.05).结论 某些老年医院下呼吸道感染患者存在着微量元素缺乏及细胞免疫功能障碍,有助于老年患者医院下呼吸道感染的防治.     

tBHQ对无机砷致人皮肤角质细胞损伤保护作用

目的探讨叔丁基对苯二酚(tBHQ)对亚砷酸钠(NaAsO2)致人皮肤角质细胞系HaCaT细胞损伤的保护作用。方法用Alamar Blue还原法检测细胞活力,用荧光探针2’,7’-二乙酰二氯荧光素(DCFH-DA)检测细胞内活性氧(ROS)的生成,用硫代巴比妥酸(TBA)法检测细胞内过氧化脂质降解产物丙二醛(MDA)的生成。结果NaAsO2(25、50μmol/L)单独处理后,各组细胞活力明显下降(P<0.01),分别为82%和59%;细胞经tBHQ(25、50μmol/L)预处理后,tBHQ 25μmol/L组细胞活力分别恢复至(101.44±1.63)%和(92.06±9.95)%,tBHQ 50μmol/L组细胞活力分别恢复至(98.88±2.03)%和(91.12±7.87)%;NaAsO2(25、50μmol/L)单独处理后,各组细胞内ROS水平明显上升(P<0.01),分别为对照组的1.64和3.86倍;细胞经tBHQ(25、50μmol/L)预处理后,tBHQ 25μmol/L组ROS水平分别下降为对照组的0.95和1.87倍,tBHQ 50μmol/L组ROS水平分别下降为对照组的0.79和1.69倍;NaAsO2(25、50μmol/L)单独处理后,细胞内MDA含量明显上升(P<0.01),分别为2.28、2.96 nmol/(mgμprot);细胞经tBHQ(25、50μmol/L)预处理后,tBHQ 25μmol/L组MDA含量分别下降为2.05、2.43 nmol/(mgμprot),tBHQ 50μmol/L组MDA含量分别下降为2.10、2.60 nmol/(mg.prot)。结论 tBHQ对无机砷致人皮肤角质细胞损伤具有保护作用,且具有一定的剂量-反应关系。     

2型糖尿病患者血尿酸和尿白蛋白排泄率的关系

目的 评价2型糖尿病患者血尿酸和尿白蛋白排泄率(UAER)之间的相关性.方法 将356例2型糖尿病患者依据UAER进行分组:UAER＜20 μg/min为无白蛋白尿组(182例),UAER 20～199 μg/min为微量白蛋白尿组(120例),UAER≥200 μg/min为大量白蛋白尿组(54例),并对血尿酸、UAER及相关临床资料进行分析.结果 无白蛋白尿组、微量白蛋白尿组、大量白蛋白尿组的平均血尿酸水平分别为(268±77) μmol/L、(298±90)μmol/L、(363±113)μmol/L(P＜0.05).将血尿酸值从小到大排序,四分位后分别为(220±36)μmol/L(107～255 μmol/L)、(287±24)μmol/L(256～315 μmol/L)、(333±54)μmol/L(316～363 μmol/L)、(416±65)μmol/L(364～613 μmol/L),相应的白蛋白尿(包括微量白蛋白尿和大量白蛋白尿)的患病率分别为32.5%、46.2%、48.7%、59.2%(P＜0.01).Pearson相关分析发现,UAER与血尿酸呈正相关(r=0.221,P＜0.05),另外还与体重指数、血甘油三酯呈正相关.调整年龄、性别、体重指数、高血压病史、胰岛素应用、吸烟、糖尿病病程、收缩压、舒张压、空腹血糖、血总胆固醇、血甘油三酯等因素后,血尿酸是白蛋白尿的独立危险因素(OR=1.56,P＜0.01).结论 2型糖尿病患者血尿酸与UAER独立相关.