铁皮石斛茎节离体培养的研究

目的通过无菌茎段实现铁皮石斛快速繁殖。方法将铁皮石斛试管苗茎节接种于不同NAA浓度的MS培养基上诱导腋芽萌发,并在含不同激素配比和有机添加物的培养基上继代和诱导生根。结果NAA0.4mg/L,6-BA5mg/L时铁皮石斛腋芽萌发率达93.33%;NAA0.3mg/L,6-BA2mg/L时丛苗的生根率达96.67%,香蕉汁和土豆汁能够显著促进丛生芽的增殖和壮苗生根。结论建立了适合铁皮石斛茎段离体培养的快速繁殖体系。     

铁皮石斛快繁及多糖含量测定

目的测定铁皮石斛组培苗的多糖含量。方法对铁皮石斛进行组织培养,用苯酚-硫酸法测定铁皮石斛组培苗的多糖含量。结果铁皮石斛组培苗的多糖含量为25.09%。结论铁皮石斛组培苗的多糖含量达到2010版《中华人民共和国药典》的规定标准,具有一定的药用价值。     

铁皮石斛快繁技术体系研究

目的以铁皮石斛Dendrobium officinale带芽茎段为材料,对铁皮石斛的组织培养进行系统研究,以期建立铁皮石斛的快繁技术体系。方法采用植物组织培养的方法对铁皮石斛外植体的消毒方法、原球茎的诱导、增殖、分化、幼苗生根及瓶苗移栽等进行研究。结果铁皮石斛外植体最佳的消毒方式为75%乙醇消毒30 s,再用0.1%HgCl2消毒10 min;铁皮石斛带芽茎段原球茎诱导的最佳培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+2 g/LAC,诱导率达到34.98%;原球茎增殖的最佳培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.8 mg/L 2,4-D+2 g/LAC,增殖率达到89.6%;原球茎分化的最佳培养基为MS+1.2mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA+2 g/L AC,分化率达到89.6%;幼苗生根的最佳培养基配方为1/2 MS+2.5 mg/L NAA+15%土豆汁+2 g/LAC,生根率达到90.4%～92.8%;瓶苗移栽最佳方式为大苗、树皮块苔藓草做基质、基质中添加0.03 mg/L赤霉素,并接种适量菌根真菌Epulorhiza sp.。结论建立了铁皮石斛的快繁技术体系,为铁皮石斛的工业化生产奠定技术基础。     

铁皮石斛栽培技术的研究概况

综述了近年来国内关于铁皮石斛栽培技术的研究概况。     

铁皮石斛试管种苗产业化生产的技术因素分析

目的:研究铁皮石斛组织培养及栽培过程中的重要技术因素。方法:用铁皮石斛的茎段及种胚组织培养物,测定试管苗的分化、生根与生长状况。结果:通过胚培养了原球茎产生,通过茎段培养获得了丛生芽;在适当激素配比的基础上,椰子汁对促进芽的分化、丛芽及原球茎的增殖,香蕉提取物对促进苗的生根与生长起到重要的作用。结论:掌握铁石皮斛组织培养的关键技术要素可实现种苗产业化生产。     

铁皮石斛组织培养研究进展

铁皮石斛（Dendrobium candidum Wall.ex lindl）又名黑节草、铁皮兰,为多年生附生型草本植物,属国家2级保护的名贵濒危药材[1],《神农本草经》列为上品[2],在《本草纲目》中也被收录。现代药理研究表明,石斛具有抗肿瘤、抗衰老、增强人体免疫力和扩张血管的功效[3]。由于受特殊的生物学及生态学特性限制,其自然繁殖力极低、     

GC-MS法分析不同部位仿野生与组培快繁铁皮石斛中的挥发性成分

目的分析仿野生与组织培养快速繁殖(组培快繁)铁皮石斛茎、根和叶中的挥发性成分。方法铁皮石斛茎、根和叶液氮研磨成粉,气质联用(GC-MS)仪分析提取液中的成分和其相对含有量。结果铁皮石斛中共鉴定出90种挥发成分,主要为醛类、醇类、酯类、萜烯类、酮类、烷烃与芳香烃及其衍生物。其中,仿野生鉴定出72种,茎中24种、根中29种、叶中19种;组培快繁鉴定出68种,茎中23种、根中29种、叶中16种。其共有成分在茎中有11种,根中有10种,叶中有5种。此外,萘在铁皮石斛不同部位中的含有量都较高。结论仿野生与组培快繁铁皮石斛不同部位中挥发性成分的差异很大。     

金钗石斛的茎段组织培养与植株再生

目的：为了有效加速贵重药用植物金钗石斛的人工繁殖。方法：以带侧芽的金钗石斛茎段作外殖体；不同种类的培养基、同种培养基用于不同配比的激素进行培养，结果：以MS培养基附加6－BA（0.5mg/L）、NAA（0.2mg/L）诱导分化最佳，附加6－BA（3．0mg/L）、NAA（0．5mg/L），增殖最适，附加IBA（0．3mg/L）、NAA（0．1mg/L）对生根最适（生根率95％）。生根小苗在以椰渣，碎火山石块，碎砖块（1：1：1）的基质中覆以蕨长势良好，结论：为确保金钗石斛资源的保持和可持续利用提供有效途径。     

铁皮石斛组织培养研究进展

目的：探讨铁皮石斛种子无菌萌发的最佳条件、原球茎诱导试管苗的最佳配方、不同器官诱导芽分化的最佳条件、试管苗生根的最佳配方。方法：收集、整理、归纳近20年来国内外有关铁皮石斛组织培养的文献资料。结果：将文献中铁皮石斛种子无菌萌发的情况、原球茎诱导试管苗的情况、不同器官诱导芽分化的情况及试管苗生根的情况分别列表进行对照比较。结论：各种外植体都可诱导不定芽的分化,以MS培养基使用量为普遍,试管苗生杭率达到96.67%。     

曲茎石斛组织培养研究

目的:提供药用石斛可脱瓶移栽的粗壮试管苗,以提高移栽的成活率。方法:采用种子苗与茎段外植体苗不同培养基的双向培养,并对二者的生长特点进行比较。结果:外植体苗繁殖快,粗壮,但需原植株量大,种子苗生长周期长,细弱,但培养基数高。结论:二者结合培养对快速繁殖,提高成活率有利。     

铁皮石斛叶的研究进展

铁皮石斛叶为加工铁皮石斛鲜条(枫斗)的副产品。为避免资源浪费,进一步提高其综合利用率,文章从其化学成分、药理作用、毒理作用、产品开发等方面进行综述,为铁皮石斛叶进一步研究与开发利用提供参考。     

铁皮石斛对冠心病模型家兔心功能和血管变化的影响

目的：观察铁皮石斛对冠心病模型家兔心功能和血管变化的影响。方法：清洁级健康家兔30只随机分为对照组、模型组、铁皮石斛低剂量、中剂量、高剂量组5组,每组6只。模型组、低剂量、中剂量、高剂量组采用左冠状动脉放置缩窄环方法,制备冠心病模型。低剂量、中剂量、高剂量组以铁皮石斛按10 g·kg-1、20 g·kg-1、40 g·kg-1灌胃（ig）,每天1次,连续21天。对照组、模型组则给予等体积生理盐水。检测白细胞介素-8（IL-8）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、血管细胞间粘附分子-1（VCAM-1）、细胞间粘附分子-1（ICAM-1）水平、actin表达及心功能指标左室收缩压（LVSP）、左室舒张末压（LVEDP）、左室压力变化最大上升和下降速率 （±dp/dtmax）、动脉收缩压（BPs）和动脉舒张压（BPd）的变化并观察血管的形态学。结果：与对照组比较,模型组IL-8、TNF-α、VCAM-1、ICAM-1水平、actin表达升高或显著升高,差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）;LVEDP显著升高（P<0.01）,而LVSP、±dp/dtmax、BPs均降低（P<0.05或P<0.01）,血管壁变厚。与模型组比较,中、高剂量组IL-8、TNF-α、VCAM-1、ICAM-1水平、actin表达降低或显著降低,差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）;中、高剂量组LVEDP显著降低,差异有统计学意义（P<0.01）,而LVSP、±dp/dtmax、BPs均升高或显著升高,差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）,血管壁变厚得到改善。结论：铁皮石斛具有改善心功能作用,可能是通过改善和抑制血管病理改变、减轻血管损害而起作用。     

铁皮石斛集约化高产栽培技术研究

目的　寻求铁皮石斛人工集约化高产栽培技术的最佳途径。方法　利用铁皮石斛的试管苗对不同苗的大小、栽培基质、不同季节和不同的外源生长素作用下 ,比较其成活状况和产量。结果　在思茅地区铁皮石斛最佳栽培季节为每年 3月中旬至 6月中旬和 9月上旬至 11月下旬 ,其排列顺序依次为 3月中旬至 6月中旬 >9月上旬至11月下旬 >6月下旬至 10月下旬 >12月上旬至次年 3月上旬 ;施用外源生长素对促进产量效果明显 ;共生菌对提高移栽苗成活率有一定影响 ,但对提高产量无明显作用。结论　通过实验研究应用以上方法进行集约化栽培铁皮石斛可年产鲜品达 6× 10 3～ 1.2× 10 4 kg/ hm2 ,下地成活率达 92 .5 % ,较好地解决了铁皮石斛大田移栽成活率低及产量不理想等问题。     

铁皮石斛原球茎的诱导与增殖影响因素研究

目的:研究铁皮石斛原球茎诱导与增殖的最适培养基配方。方法:以铁皮石斛种胚为材料,以MS培养基为基本培养基,研究不同植物激素6-苄基腺嘌呤(6-BA)、萘乙酸(NAA)、2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸)和激动素(KT)或其组合及马铃薯提取液(PE)、香蕉提取液(BE)、苹果提取液(AE)和椰乳(CM)等有机添加物对铁皮石斛原球茎诱导和增殖的影响。结果:6-BA与NAA配比不利于种胚萌发,萌发度均低于MS培养基;添加10%的PE、CM有利于原球茎诱导;2,4-D对原球茎的生长和增殖不利,一定浓度的BA、KT和NAA有利于原球茎的增殖;KT浓度为1.0 mg/L时,原球茎40 d增殖倍数最高,达9.0;PE、CM、AE都能不同程度的促进原球茎的增殖,以10%的CM效果最好。结论:适宜铁皮石斛原球茎的诱导培养基为MS+10%CM+1.0 g/L AC;适宜铁皮石斛原球茎增殖的培养基为MS+1.0mg/L KT+0.2mg/L NAA+10%CM。     

铁皮石斛根尖诱导丛生芽研究

目的探索铁皮石斛根尖再生丛生芽的适宜条件及类原球茎的起源。方法切取0.3~0.5cm的根尖为外植体,以B5为基本培养基,附加不同种类和质量浓度的植物生长调节剂进行培养。结果诱导根尖形成了愈伤组织、类原球茎或直接转化成芽且获得再生植株。通过细胞学观察认为铁皮石斛的类原球茎是单细胞起源的体细胞胚。结论为铁皮石斛组织快繁建立新的体系。     

铁皮石斛人工种子制作及影响因素研究

目的建立铁皮石斛人工种子制作方法,并考察相关影响因素,为铁皮石斛的繁育提供一条新途径。方法以铁皮石斛原球茎为包埋体制作人工种子,考察胚乳、种皮组分对人工种子萌发和成苗的影响。结果以MS+0.5 mg/L BA+0.5 mg/L NAA+3 g/L AC+30 g/L海藻酸钠+3 g/L百菌清为基本胚乳,在2%CaCl2中反应15 min是铁皮石斛人工种子制作的较佳条件,胚乳中分别添加15 g/L木薯淀粉和10 g/L保水剂能明显提高人工种子的萌发率和成苗率,种皮中添加10 g/L纳米SiO2和10 g/L纳米TiO2均能明显提高萌发率,但添加10 g/L纳米SiO2成苗率最高。结论建立了铁皮石斛人工种子制作方法,获得了较高的萌发率和成苗率。     

DNA分子标记在铁皮石斛研究中的应用

铁皮石斛具有滋阴养胃、润肺止咳、抗癌和延年益寿等功效,是我国的名贵药材。近年来,由于过度采收及生境破坏严重,铁皮石斛资源非常紧缺;另外,目前市场上商品铁皮石斛掺假现象十分常见,严重影响了商品铁皮石斛的质量。综述了DNA分子标记技术在铁皮石斛研究中的应用进展,为铁皮石斛的精确鉴定及对其种质资源合理开发和保护提供了有效的分子技术依据。     

RP—HPLC法测定铁皮枫斗颗粒中柚皮素含量

目的：建立一种高效液相色谱法测定铁皮枫斗颗粒中柚皮素含量的方法。方法：色谱柱UltimateXB—C18（250mm×4．6mm,5μm）;流动相为0．2％H3PO4的水溶液与甲醇采用梯度洗脱;流速为1．0mL·min^-1;检测波长为280nm;柱温30℃。结果：柚皮素的回归方程为Y=3227．6X-1．7272（r=1．000）,线性范围：0．005～0．075μg,加样回收率：100．82％（RSD=1．06％,n=6）。结论：该法准确,阴性制剂无干扰,精密度高,重复性好。可用于铁皮枫斗颗粒中柚皮素的含量测定,并为其它铁皮枫斗相关制剂质量检测提供参考。     

铁皮石斛磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因的克隆及表达分析

目的克隆铁皮石斛Dendrobium officinale磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(pepc)基因,并对其在F型和H型铁皮石斛中的表达进行分析,为研究铁皮石斛pepc基因的结构、功能提供依据。方法基于GenBank上已知的pepc基因的同源序列设计引物,应用RT-PCR和RACE等方法,克隆铁皮石斛pepc基因全长。采用荧光定量PCR方法研究pepc基因在2种铁皮石斛中的表达。结果成功克隆了铁皮石斛pepc基因,登录号为JF423930,该基因全长为3 560 bp,其中cds序列为2 895 bp,与兰科植物的同源性为80%左右,与其他科属植物的同源性达到70%以上,编码964个氨基酸。pepc基因在F型铁皮石斛中的表达量为H型的5.55倍。结论成功克隆了铁皮石斛pepc基因,且F型铁皮石斛pepc基因的表达量高于H型。