大鼠脑缺血再灌注后大脑皮质DNA裂解率变化及金纳多保护作用研究

目的探讨大鼠脑缺血再灌注损伤中大脑皮质ＤＮＡ裂解率的变化及金纳多的保护作用。方法采用四血管闭塞法制备大鼠脑缺血再灌注模型后，用二苯胺法测定脑缺血再灌注组及金纳多治疗组随缺血再灌注时间延长皮质ＤＮＡ裂解率变化。结果脑缺血后ＤＮＡ裂解率增加，单纯缺血组与假手术组相比Ｐ＜０．０１；再灌注后ＤＮＡ裂解率随时间延长进一步增加，再灌注２４ｈ达高峰，与３ｈ相比Ｐ＜０．０１；金纳多治疗组与盐水对照组相同时间点ＤＮ     

神经节苷脂对大鼠急性脑缺血再灌注损伤后细胞凋亡的影响

背景:大鼠急性脑缺血再灌注损伤后有细胞凋亡及凋亡相关基因的表达。目的:观察神经节苷脂对大鼠脑缺血再灌注损伤后细胞凋亡的影响。设计:随机对照动物实验。单位:吉林大学中日联谊医院神经内科。材料:实验于2002-04在吉林大学中日联谊医院动物实验室完成。健康雄性Wistar大鼠48只,鼠龄三四个月,体质量(220±50)g。大鼠随机分为缺血再灌注组和缺血再灌注 给药组(缺血前30min腹腔注射神经节甘脂GM-1),24只/组。其中又根据再灌注时间不同,每组分别分为3个时相点,即3h、6h和24h点,每个时相点8只大鼠。方法:①建立大鼠全脑缺血再灌注模型。②应用二苯胺法测定大鼠脑缺血后3h、6h、24h脑组织DNA裂解率变化,取大脑皮质100mg加0.9mL裂解液制成10%匀浆,加入离心管中,反复冻融,收集上清和沉淀,DNA裂解率=上清吸收值/(上清吸收值 沉淀吸收值)。③免疫组织化学方法观察蛋白激酶Cδ表达,以及神经节苷脂给药后的变化。主要观察指标:大鼠脑皮质DNA裂解率的变化及蛋白激酶Cδ表达强度的变化。结果:实验过程中盐水对照组再灌注6h时死亡1只,麻醉过量死亡,再灌注24h时死亡2只,分别予以补充。随着再灌注时间的延长,DNA裂解率变化明显增加,24h达高峰,蛋白激酶Cδ表达于再灌注6h达高峰,以后逐渐呈下降趋势;神经节苷脂组相应时间点的DNA裂解率及蛋白激酶Cδ表达明显减少。结论:神经节苷脂能抑制脑缺血再灌注后细胞凋亡的发生,并减少蛋白激酶Cδ的表达,对脑缺血再灌注损伤具有明显的保护作用。     

神经节苷脂对大鼠急性脑缺血再灌注损伤后细胞凋亡的影响

背景：大鼠急性脑缺血再灌注损伤后有细胞凋亡及凋亡相关基因的表达。 目的：观察神经节苷脂对大鼠脑缺血再灌注损伤后细胞凋亡的影响。 设计：随机对照动物实验。 单位：吉林大学中日联谊医院神经内科。材料：实验于2002—04在吉林大学中13联谊医院动物实验室完成。健康雄性Wistar大鼠48只，鼠龄三四个月，体质量（220&;#177;50）g。大鼠随机分为缺血再灌注组和缺血再灌注＋给药组（缺血前30min腹腔注射神经节甘脂GM—1），24只／组。其中又根据再灌注时间不同，每组分别分为3个时相点，即3h、6h和24h点，每个时相点8只大鼠。 方法：①建立大鼠全脑缺血再灌注模型。②应用二苯胺法测定大鼠脑缺血后3h、6h、24h脑组织DNA裂解率变化，取大脑皮质100mg加0．9mL裂解液制成lO％匀浆，加入离心管中，反复冻融，收集上清和沉淀，DNA裂解率=上清吸收值／（上清吸收值＋沉淀吸收值）。③免疫组织化学方法观察蛋白激酶C8表达，以及神经节苷脂给药后的变化。主要观察指标：大鼠脑皮质DNA裂解率的变化及蛋白激酶C8表达强度的变化。结果：实验过程中盐水对照组再灌注6h时死亡1只，麻醉过量死亡，再灌注24h时死亡2只，分别予以补充。随着再灌注时间的延长，DNA裂解率变化明显增加，24h达高峰，蛋白激酶C8表达于再灌注6h达高峰，以后逐渐呈下降趋势；神经节苷脂组相应时间点的DNA裂解率及蛋白激酶C8表达明显减少。 结论：神经节苷脂能抑制脑缺血再灌注后细胞凋亡的发生，并减少蛋白激酶C8的表达，对脑缺血再灌注损伤具有明显的保护作用。     

神经节苷脂QM-1对大鼠急性脑缺血再灌注损伤后细胞凋亡的影响

目的：研究神经节苷脂GM-1对大脑缺血再灌注损伤后细胞凋亡的影响。方法：建立全脑缺血再灌注模型，应用二苯胺法和免疫组织化学方法观察脑缺血后3h、6h、24h脑组织DNA裂解率变化及PKC6表达，以及GM-1给药后的变化。结果：随着再灌注时间的延长，DNA裂解率变化明显增加，24h达高峰，PKC5表达于再灌注6h达高峰，以后逐渐呈下降趋势；GM-1给药组相应时间点的DNA裂解率及PKC6表达明显减少。结论：GM-1能抑制脑缺血再灌注后细胞凋亡的发生，并减少PKC6的表达，对脑缺血再灌注损伤具有明显的保护作用。     

病变侧亚低温对大鼠局灶性脑缺血再灌注后凋亡相关蛋白变化的影响

目的:观察病变侧亚低温对大鼠局灶性脑缺血再灌注后生长抑制和DNA损伤诱导基因45(Gadd45)和Bcl-2蛋白变化的影响。方法:实验于2004-11/2005-07在哈尔滨医科大学病理教研室实验室完成。将雄性Wistar大鼠48只随机分为4组:①常温缺血组(n=20):采用改良线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血2h再灌注模型,再灌3,12,24,48和72h分别处死,每个时间点4只。②亚低温缺血组(n=20):造模和处死时间同常温缺血组,并于栓塞后30min实施病灶侧亚低温(设定制冷器温度为6～8℃,脑内缺血区温度为32℃左右)并持续4h。③假手术组(n=4):手术,但不栓塞,术后24h处死。④正常组(n=4):不干预。各组大鼠处死前进行神经功能缺陷评分(0～4分,评分越高,神经功能缺陷越重);苏木精-伊红染色观察组织病理变化;采用免疫组化的方法检测Gadd45和Bcl-2蛋白的表达。结果:48只进入结果分析。①神经功能缺陷评分:亚低温缺血组大鼠各时间点均明显低于常温缺血组(P<0.05)。②Gadd45表达:在再灌注3h表达增强,且随再灌注时间的延长而逐渐增强(P<0.05),至48h达高峰,其后又随之下降。亚低温缺血组各时间点表达明显少于常温缺血组(P<0.05)。③Bcl-2表达:再灌注3h增多,随再灌注时间的延长,其表达逐渐增多(P<0.05),至24h达高峰,其后又随之下降,亚低温缺血组各时间点表达明显高于常温缺血组(P<0.05)。结论:Gadd45在脑缺血再灌注损伤过程中,早期能修复受损的DNA,损伤加重时则促进细胞凋亡;Bcl-2在脑缺血再灌注损伤过程中主要起抑制细胞凋亡的作用。亚低温能减少Gadd45的表达,增加Bcl-2的表达;能明显减轻缺血所致的损伤,并能明显抑制细胞调亡;对大鼠缺血后神经功能的恢复有确切的疗效。     

全脑缺血再灌注对大鼠氧自由基和内皮素的影响

目的:观察全脑缺血再灌注对大鼠氧自由基和内皮素的影响。方法:50只健康雄性SD大鼠,体质量150～300g,抽签法随机分为5组,假手术组、缺血再灌30min组、缺血再灌1h组、缺血再灌6h组、缺血再灌12h组。采用4-VD法建立全脑缺血再灌注模型,用邻苯三酚自氧化和TPA比色法测定大鼠脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛含量;用放射免疫法测定血浆内皮素的含量。结果:与假手术组相比,缺血再灌注各组脑内SOD活性明显降低(P<0.05),丙二醛含量显著增高(P<0.05),再灌流1,6h组的丙二醛明显增高且有随时间延长不断升高趋势,SOD明显降低且有继续降低趋势。脑缺血再灌注后不同时间段内血浆内皮素含量均有所增加,且也有随时间延长而升高的趋势。结论:全脑缺血再灌注能增加大鼠体内氧自由基和内皮素含量,在12h内随时间的延长而增加。     

多聚(ADP-核糖)聚合酶不同时空的表达特征对缺血性脑损伤细胞修复的影响

目的:研究局灶性脑缺血再灌注后多聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)表达的时空变化及其作用。方法:采用改良线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型(MCAO-R,)运用免疫组织化学方法检测PARPM116000),PARP(r(Mr24000)和caspasse-3表达的时空变化,苏木精-伊红染色观察组织病理变化。结果:脑缺血2h再灌注12h,PARP(M116000)及caspase-3表达增r多,且随再灌时间的延长而表达逐渐增多(P<0.05),并向四周动态扩展。缺血3h组PARP(M116000)蛋白阳性表达也增强,但表达程度与r缺血2h组相比略有下降,在再灌注3d时表达最少。缺血6h组PARP(M116000)蛋白表达减少,且不随再灌注时间的延长而有明显变化。r而PARP(M24000)蛋白在缺血2h再灌注12h阳性表达增加,但不r随缺血时间及再灌注时间的延长而明显变化,呈平稳的低水平表达,与caspase-3的变化趋势也无相关性。结论:在脑缺血再灌注损伤中PARP活化的主要损伤作用是坏死而非凋亡。     

多聚（ADP-核糖）聚合酶不同时空的表达特征对缺血性脑损伤细胞修复的影响

目的：研究局灶性脑缺血再灌注后多聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)表达的时空变化及其作用。方法：采用改良线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型(MCAO-R)，运用免疫组织化学方法检测PARP(M，116000)，PARP(M，24000)和caspasse-3表达的时空变化，苏木精-伊红染色观察组织病理变化。结果：脑缺血2h再灌注12h，PARP(Mr116000)及caspase-3表达增多，且随再灌时间的延长而表达逐渐增多(P&;lt;0．05)，并向四周动态扩展。缺血3h组PARP(Mr16000)蛋白阳性表达也增强，但表达程度与缺血2h组相比略有下降，在再灌注3d时表达最少。缺血6h组PARP(Mr116000)蛋白表达减少，且不随再灌注时间的延长而有明显变化。而PARP(Mr24000)蛋白在缺血2h再灌注12h阳性表达增加，但不随缺血时间及再灌注时间的延长而明显变化，呈平稳的低水平表达，与caspase-3的变化趋势也无相关性。结论：在脑缺血再灌注损伤中PARP活化的主要损伤作用是坏死而非凋亡。     

蜂胶总黄酮对大鼠缺血再灌注后大脑皮质神经细胞凋亡和caspase-3与bcl-2及bax表达的影响

目的 观察蜂胶总黄酮对局灶性脑缺血大鼠大脑神经细胞凋亡及bel-2、bax、easpase-3表达的影响,探讨蜂胶总黄酮对脑缺血再灌注损伤的保护作用机制.方法 36只大鼠随机分为假手术组、模型组、蜂胶总黄酮组,每组再随机分成缺血再灌注后1 d和3 d组,首先制备大鼠大脑中动脉缺血模型,TUNEL法观察神经细胞凋亡率,应用免疫组化方法 观察大鼠大脑皮质各组bcl-2、bax、easpase-3表达阳性细胞数.结果 与模型组相比,蜂胶总黄酮组神经细胞凋亡指数降低(P<0.01),bel-2表达阳性细胞数升高(P<0.01),bax、easpase-3表达阳性细胞数均降低(P<0.05).结论 蜂胶总黄酮能促进大鼠缺血再灌注后大脑皮质bcl-2表达增强,减弱bax与easpase-3表达,从而能有效减少脑缺血/再灌注损伤引起的神经细胞凋亡,因此具有一定的神经保护作用.     

全脑缺血再灌注对大鼠氧自由基和内皮素的影响

目的：观察全脑缺血再灌注对大鼠氧自由基和内皮素的影响。方法：50只健康雄性SD大鼠，体质量150～300g，抽签法随机分为5组，假手术组、缺血再灌30min组、缺血再灌1h组、缺血再灌6h组、缺血再灌12h组。采用4-VD法建立全脑缺血再灌注模型，用邻苯三酚自氧化和TPA比色法测定大鼠脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛含量；用放射免疫法测定血浆内皮素的含量。结果：与假手术组相比，缺血再灌注各组脑内SOD活性明显降低(P&;lt;0．05)，丙二醛含量显著增高(P&;lt;0．05)，再灌流1，6h组的丙二醛明显增高且有随时间延长不断升高趋势，SOD明显降低且有继续降低趋势。脑缺血再灌注后不同时间段内血浆内皮素含量均有所增加，且也有随时间延长而升高的趋势。结论：全脑缺血再灌注能增加大鼠体内氧自由基和内皮素含量，在12h内随时间的延长而增加。     

护士长管理素质与护士工作压力相关性的调查与分析

目的 :探讨病房护士长的管理素质与护士工作压力的相关性。方法 :采用问卷调查法对 12 5名护士进行调查 ,调查结果用相关性分析进行统计学处理。结果 :护士长的管理素质与护士工作压力呈负相关。结论 :病房管理者只有努力提高自身的管理素质才能相应地减轻护士的工作压力     

老年脓毒血症患者胆碱酯酶水平与病情及预后的关系

目的探讨脓毒血症患者胆碱酯酶水平与患者病情及预后的关系。方法 2007年6月-2009年6月,将89例脓毒血症患者设定为脓毒血症组,进行血清胆碱酯酶测定及APACHEⅡ评分;另择82例健康人为正常组,测定血清胆碱酯酶值,比较两者之间差异;89例脓毒症患者按病况再分为存活组及死亡组,比较两者之间血清胆碱酯酶及APACHEⅡ评分差异。结果治疗前脓毒血症组胆碱酯酶水平明显低于正常组,有统计学意义（P〈0.01）;脓毒血症组APACHEⅡ评分与血清胆碱酯酶呈负相关;死亡组APACHEⅡ评分明显高于存活组,而血清胆碱酶低于存活组（P〈0.01）。结论胆碱酯酶同APACHEⅡ评分呈负相关,能明显反映脓毒症患者病情严重程度及预后。