受体相关蛋白对实验性自身免疫性重症肌无力大鼠乙酰胆碱受体的作用

目的：探讨受体相关蛋白(Bapesyn)对实验性自身免度性重症肌无力(EAMG)动物终板乙酰胆碱受体的作用。方法：用基因工程的方法制备提取pcDNA-Rapsyn，并将其注入动物肌肉左大腿外侧，右大腿相应部位注射相同剂量的空白质粒(Vector)以方波刺激使其进入细胞膜内，2w后用单克隆抗体35（mAb35)诱导出EAMG模型并进行症状评估,mAb3S诱导48h后取双大腿外侧肌，用放射免疫法检测AChR，并计算出AChR的损失率。结果：在EAMG模型中，被pcDNA-Rapsyn预处理的肌肉从AChR损失率明显低于未经处理的肌肉。结论：Bapsyn蛋白对EAMG模型的AChR有保护作用。     

鼻腔给予乙酰胆碱受体治疗实验性自身免疫性重症肌无力

实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)是由乙酰胆碱受体(AChR)加弗氏完全佐剂(CFA)免疫动物后制成的人类重症肌无力(MG)动物模型。业已证明EAMG和MG都是针对神经肌肉接头后膜烟碱型AChR的自身免疫性疾病,AChR抗体的产生受AChR特异性CD4~+T辅助细胞调节。 MG临床上至今尚无特异性治疗方法。     

抗乙酰胆碱受体单克隆抗体A7诱导实验性重症肌无力

目的:探讨抗乙酰胆碱受体单克隆抗体A7(Anti-AChR mAbA7)对实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)的作用.方法:Lewis大鼠腹腔注射5ml 20倍浓缩的含Anti-AChR mAbA7培养上清液,建立EAMG被动转移模型.对照组腹腔注射同体积的PBS.每8 h监测体重和临床症状评分.48h后处死实验动物.用放射免疫法检测AChR,并计算出AChR的损失率.结果:Anti-AChR mAbA7诱导的EAMG模型AChR损失率高,为24.3%～45.2%.而且AChR损失率与临床症状评分相关(r=0.74,P＜0.01).Anti-AChR mAbA7攻击的位点在终板的AChR上.结论:Anti-AChR mAb A7可用作诱导EAMG模型而应用于重症肌无力的研究.     

鼻腔AChR耐受低调EAMG大鼠特异性T淋巴细胞反应

用乙酰胆碱受体加完全弗氏佐剂免疫前，鼻腔给予大鼠ＡＣｈＲ可有效地预防实验性鼻身免疫性重症肌无力。     

重症肌无力患者血清乙酰胆碱受体抗体与柠檬酸提取物抗体测…

目的研究重站肌无力（ＭＧ）病人血清乙酰胆碱受体抗体（ＡｃｈＲａｂ）与抗骨骼肌柠檬酸提取物抗体（ＣＡＥａｂ）的含量改变及临床意义，方法以固相酶联免疫吸附法测定１２３例ＭＧ病人血清ＡｃｈＲａｂ与ＣＡＥａｂ含量。结果，两种抗体的阳性率分别为７８％和２４．４％，明显高于健康献血员和非ＭＧ病人组（Ｐ〈０．０１），ＣＡＥａｂ在合并胸腺瘤组与临床无瘤组的阳性率分别为７１％和９．８％，差别有显著性（Ｐ〈０．０１）     

重症肌无力乙酰胆碱受体抗体与猴神经烟碱型乙酰胆碱受体之间的免疫结合反应

目的：探讨重症肌力（myasthenia gravis,MG)患的乙酰胆碱受体抗体（AChRab)与猴中枢神经烟碱型乙酰胆碱受体（神经-nAChR)之间的免疫结合反应。方法：从AChRab阳性的MG患血中提取纯化AChRab,再用免疫组化法探讨AChRab与猴CNS神经－nAChR之间的免疫结合反应。结果：首次表明AChRab可与猴CNS神经－nAChR之间免疫交叉结合,其阳性免疫结合反应广泛分布于猴CNS许多部位,如大脑皮层（Ⅱ,Ⅲ,Ⅴ层）,海马皮层,基底节,下丘脑,脑干运动核团,脑干网状结构,脊髓前角运动神经元,小脑深部核团和皮层哺齿野细胞等呈强或较强阳性反应。结论：MG患AChRab可与猴CNS神经－nAChR交叉结合。     

小儿重症肌无力血清乙酰胆碱受体抗体的测定及其临床意义

为研究小儿重症肌无力(MG)血清乙酰胆碱受体抗体(AchRab)的含量改变及其临床意义。采用固相酶联免疫吸附法检测血清AchRab的含量。结果MG患儿血清AchRab阳性率为81%,明显高于健康对照组和非MG病人组(P<0.01)。MG患儿治疗后血清AchRab的含量明显低于治疗前,其阳性率分别为55%和81%(P<0.05)。结果提示AchRab的测定可作为MG患儿早期诊断和疗效观察的指标。     

实验性重症肌无力小鼠模型的研究

目的:采用纯化乙酰胆碱受体(acetylcholine receptors, AChR)免疫小鼠建立实验性自身免疫性重症肌无力(experimental autoimmune myasthenia gravis, EAMG)动物模型.方法:以亲和层析法从电鳐电器官提取和纯化AChR,并用其免疫接种BALB/C和C57BL/6小鼠,观察接种动物的临床症状、电生理变化以及血清AChR抗体水平的情况.结果:与对照小鼠相比,发病小鼠出现临床肌无力症状,重复神经电刺激(repetitive nerve stimulation, RNS)显示动作电位波幅衰减,血清AChR抗体水平升高.结论:用电鳐电器官提纯TAChR作为免疫原,成功诱导产生EAMG小鼠模型,C57BL/6小鼠较BALB/C小鼠易感.     

ABC-ELISA测定重症肌无力患者血清抗乙酰胆碱受体抗体水平的研究

采用ABC-ELIsA法检测了50例重症肌无力(MG)患者,20例其它中枢神经系统(CNS)疾病患者及30例正常人血清。发现:临床对照及正常对照组乙酰胆硷受体抗体(AchRAb)均为阴性。50例MG中有21例阳性(42%),全身型MG阳性率明显高于单纯眼肌型(P<0.005),随着病程延长,病情好转,大多患者的AchR抗体OD值呈下降转阴趋势。个别病例抗体比值与临床不符,可能是由于AchRAb的异质性所造成。ABC-ELISA法简便、快速可靠,为MG深入研究提供了有效手段。     

重症肌无力乙酰胆碱受体抗体的研究

重症肌无力 (ｍｙｓｔｈｅｎｉａｇｒａｖｉｓ)是累及神经肌肉接头处乙酰胆碱受体抗体 (ａｃａｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅｒｅｃｅｐｔｏｒａｎｔｉｂｏｄｙ ,ＡｃｈＲａｂ)的自身免疫性疾病[1] 。近年来发现一系列的非ＡｃｈＲａｂ骨骼肌抗体[2 ] ,Ｋｙａｎｏｄｉｎｅ受体抗体及补体Ｃ9等均与重症肌无力的发病有关[3] 。其发病与患者体内异常增高的ＡｃｈＲａｂ造成骨骼肌终板上ＡｃｈＲａｂ数目减少及功能障碍有关。目前常用检测方法主要有放射免疫法 (ｒａｄｉｏｉｍｍｕｎｉｚａｔｉｏｎａｓｓａｙ ,ＲＩＡ )和酶联免疫吸附法 (ｅｎｚｙｍｅ…     

重症肌无力患者乙酰胆碱受体抗体与胸腺切除术后肌无力症状改善的相关性

目的探讨确诊有胸腺病理异常的重症肌无力（myasthenia gravis,MG）患者乙酰胆碱受体（acetylcholine receptor,AchR）抗体与胸腺切除术后肌无力症状改善的相关性及其临床意义。方法回顾性分析接受胸腺切除术治疗的144例MG患者的临床资料。根据胸腺切除术治疗后患者肌无力临床症状改善状况,将患者分为术后无效组（31例）与有效组（113例）,并比较2组的临床特征;比较AchR抗体阳性组（95例）与阴性组（49例）患者术后有效率的差异;分析MG患者AchR抗体与胸腺切除术后肌无力症状改善的相关性。结果术后无效组与有效组之间患者年龄、性别、疾病史、疾病分型、发病形式、发病前诱发因素、眼睑下垂与肌力下降症状、诊断性新斯的明实验与重复电刺激、血白细胞计数（WBC）、血沉（ESR）、胸腺病理、治疗药物等特征比较差异无统计学意义（均P>0.05）;2组吞咽与呼吸困难症状、C反应蛋白（CRP）、AchR抗体阳性率等特征比较差异有统计学意义（均P<0.05）;AchR抗体阳性组与阴性组患者术后有效率分别为69.47%（66/95）与95.92%（47/49）,2组比较差异有统计学意义（P<0.001）;相关性分析显示AchR抗体与胸腺切除术后肌无力症状改善呈负相关（r<-0.305,P<0.001）。结论胸腺异常合并AchR抗体阳性的MG患者胸腺切除术后肌无力症状改善相对欠佳,两者之间的关系有助于MG患者胸腺切除术的预后判断。     

实验性自身免疫性重症肌无力小鼠免疫功能状态的研究

目的：探讨实验性自身免疫性重症肌无力（EAMG）模型小鼠免疫应答特点。方法：根据临床症状及重复电刺激试验结果将造模小鼠分为成模组及未成模组,检测其免疫功能状态的改变,包括血清中乙酰胆碱受体抗体（AchRab）的水平,脾脏CD4^＋T细胞数量,用淋巴细胞增殖试验检测脾细胞经刀豆蛋白A（ConA）活化的非特异增殖能力,检测脾脏T细胞因子白细胞介素4（IL-4）,干扰素γ（IFN-γ）分泌水平。并与弗氏佐剂（CFA）对照组及正常对照组进行比较。结果：与未成模组、弗氏佐剂对照组及正常对照组相比,成模组小鼠AchRab显著增高,脾脏CD4^＋T细胞数升高;外周脾细胞对ConA刺激的非特异性增殖能力显著升高;脾脏T细胞细胞因子IL-4,IFN-γ显著升高,（均P〈0.01）,IFN-γ升高的程度高于IL-4（P〈0.01）。结论：EAMG发生是一个自身免疫应答参与的过程,体液免疫、细胞免疫应答参与了EAMG的发生。     

实验性重症肌无力大鼠模型的研究

目的 从丁氏双鳍电鳐的电器官分离乙酰胆碱受体(AChR)免疫大鼠,建立实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)动物模型.方法 参照徐氏法从丁氏双鳍电鳐的电器官提取AChR蛋白,并采用Folin-酚试剂法及酶联免疫吸附法检测提取蛋白的含量及活性;以提取的蛋白主动免疫Lewis大鼠,每天观察其临床表现,并于免疫后7周进行低频重复电刺激、单纤维肌电图及血清中AChRAb水平的检测.结果 提取蛋白的含量为35.4 mg/mL,AChR提取物可以与阳性血清中的AChRAb发生结合反应.免疫后1周左右,实验组有3只大鼠出现轻度的肌无力症状,持续2～5d自行缓解;免疫后5周左右实验组8只大鼠均表现出不同程度的肌无力症状.实验组大鼠低频重复电刺激阳性率达75%,其衰减率明显高于对照组.实验组大鼠单肌纤维动作电位平均连续差(MCD)值与正常对照组比较明显延长(P＜0.01),而福氏完全佐剂(CFA)对照组与正常对照组间MCD值无明显差异.实验组大鼠AChRAb水平明显高于CFA对照组(P＜0.01);实验组7只大鼠AChRAb的P/N值＞2.1,而CFA对照组P/N值均＜1.4.结论 从丁氏双鳍电鳐的电器官提取的AChR蛋白成功地诱导EAMG动物模型,可为重症肌无力进一步研究创造条件.     

重症肌无力患者手术前后血清乙酰胆碱受体抗体和白介素-6水平分析

[摘要] 目的 探讨重症肌无力（MG）患者血清乙酰胆碱受体抗体（AchRab）和白介素6（IL-6）水平在MG诊断中的价值及胸腺切除术后监测病情及判断预后中的作用。方法 对临床确诊为MG的9例患者测定术前和术后两年的AchRab和IL-6水平变化。 结果 9例MG患者术前血清AchRab水平显著高于正常对照,IL-6水平与正常对照比较无显著差异。胸腺切除术后两年内AchRab水平随着时间延长有下降趋势但与术前比较无统计学差异,术后血清IL-6水平随时间延长无明显变化。结论 血清AchRab水平升高可作为MG诊断的一个指标。胸腺切除术后AchRab和IL-6水平是否能作为监测病情及判断预后的指标有待进一步的深入研究。 [关键词] 重症肌无力 乙酰胆碱受体抗体 白介素-6     

重症肌无力患者血清乙酰胆碱受体抗体与柠檬酸提取物抗体测定及其临床意义

研究重症肌无力（ＭＧ）病人血清乙酰胆碱受体抗体（ＡｃｈＲａｂ）与抗骨骼肌柠檬酸提取物抗体（ＣＡＥａｂ）的含量改变及临床意义。方法以固相酶联免疫吸附法测定１２３例ＭＧ病人血清ＡｃｈＲａｂ与ＣＡＥａｂ含量。结果两种抗体的阳性率分别为７８％和２４．４％，明显高于健康献血员和非ＭＧ病人组（Ｐ＜０．０１）。ＣＡＥａｂ在合并胸腺瘤组与临床无瘤组的阳性率分别为７１％和９．８％，差别有显著性（Ｐ＜０．０１）。结论ＡｃｈＲａｂ的测定可为ＭＧ病人的早期诊断提供可靠的实验室依据，ＣＡＥａｂ的测定有助于合并胸腺瘤ＭＧ病人的早期发现。