酶联免疫法筛查人类免疫缺陷病毒抗体在艾滋病诊断中的应用

目的 探讨酶联免疫法筛查人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体在艾滋病诊断中的应用效果.方法 选择2019年1—12月于医院接受HIV抗体筛查的1000例艾滋病疑似患者作为研究对象,所有患者均行酶联免疫法与金标斑点法检测,以初筛及印证试验联合诊断结果 为金标准,比较酶联免疫法与金标斑点法的诊断准确度、灵敏度、特异度.结果 酶联...     

免疫印迹法在献血员梅毒抗体筛查中的应用

目的研究梅毒螺旋体免疫印迹试验(TP-WB)在献血员梅毒抗体筛查中的应用价值。方法使用梅毒标准血清盘,分析2种TP-ELISA试剂和1种TPPA试剂检测的准确性及不足;使用WB法对无偿献血筛查的279份TP-ELISA试剂阳性标本进一步检测,分析ELISA阳性结果与WB结果的相关性及WB阳性条带的分布特征。结果在40份以TP-WB结果为金标准的血清盘中,XC和WT两公司的TP-ELISA试剂的检测灵敏度均为100.00%,高于TPPA的88.46%,但两公司试剂检测的特异性分别为92.86%与85.71%,均低于TPPA的100.00%;在筛查的279份TP-ELISA法检测阳性标本中,WB确认阳性216份,阳性率为77.42%;其中包括S/CO值5且两种ELISA试剂检测同时阳性的标本205份,其WB确认试验阳性率为100.00%,占216份WB确认阳性标本数的99.91%。有序Logistic回归分析显示,ELISA法S/CO值5和双试剂阳性,与WB检测阳性分别存在统计关联(P0.01);216份TP-WB阳性标本WB条带分布分析,其中TP17条带与梅毒抗体Ig M阳性、TP15条带与Ig G及Ig G+Ig M阳性分别存在统计关联(P均0.01)。结论 ELISA法双试剂阳性且S/CO值5,基本可确诊为梅毒,WB试验条带阳性结果对献血者感染状况的判断有一定的指导意义。     

胶体金快速法与酶联免疫吸附试验在人类免疫缺陷病毒抗体检测中的应用

目的 比较胶体金快速法与酶联免疫吸附试验在人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体检测中的应用价值.方法 选取2019年1—12月于都昌县疾病预防控制中心进行艾滋病咨询检测的58例疑似HIV感染患者作为研究对象,均采用胶体金快速法与酶联免疫吸附试验检测HIV抗体,以免疫印迹法的检测结果为金标准,比较上述两种方法的诊断效能.结果 ...     

重组抗原捕获酶联免疫试验在云南省哨点监测人群HIV-1新发感染检测中的应用评价

目的 探讨HIV-1重组抗原捕获酶联免疫试验(RAg-CEIA)在哨点监测人群HIV-1新发感染检测中的应用价值。方法 针对云南省2015年艾滋病哨点监测人群,选择HIV-1抗体确证阳性血浆样本中符合新发感染检测标准的样本,使用HIV-1 RAg-CEIA进行检测。通过标准化光密度(ODn)值识别HIV-1新近感染者,再估算人群的HIV-1新发感染率,比较HIV-1 RAg-CEIA与BED捕获酶联免疫试验(BED-CEIA)和限制性抗原亲和力酶联免疫试验(LAg-Avidity EIA)所得的检测和分析数据。结果 纳入研究的哨点监测血浆样本共计51 313份,其中HIV-1抗体阳性1 255份,应进行新发感染检测373份,实检测253份。使用HIV-1 RAg-CEIA、BED-CEIA和LAg-Avidity EIA检出的HIV-1新近感染样本数分别为88、78和54份,估算哨点监测人群新发感染率分别为0.33%(95%CI:0.26%～0.39%)、0.31%(95%CI:0.24%～0.38%)和0.31%(95%CI:0.22%～0.39%),三者之间两两比较差异无统计学意义(P=0.927)。在6类亚人群中,男男性行为者(MSM)的新发感染率可估算,分别为3.50%(95%CI:2.48%～4.52%)、3.92%(95%CI:2.76%～5.08%)和4.17%(95%CI:2.79%～5.55%),三者之间两两比较差异无统计学意义(P=0.763)。HIV-1 RAg-CEIA与BED-CEIA和LAg-Avidity EIA的样本检测ODn值均呈线性相关(Spearman相关系数分别为0.911、0.755)。结论 HIV-1 RAg-CEIA可以有效用于新近感染识别和新发感染率估算,提示该方法在HIV-1新发感染检测中具有良好的应用前景。     

酶联免疫双抗原夹心法检测梅毒螺旋体抗体

在我国近年来梅毒的发病率有逐年上升的趋势 ,研制出快速、简便、灵敏且特异的诊断方法是当前的主要研究方向。梅毒螺旋体感染机体后可产生两种抗体 ,一种是抗心磷脂抗体 ,即非特异性抗体 ,亦称反应素。主要检测方法有性病研究实验室试验 (VDRL )和血浆反应素环状卡片试验 (RPR     

微阵列酶联免疫技术诊断肺结核的临床应用

目的评价微阵列酶联免疫技术(Array-ELISA)在肺结核诊断中的临床应用价值.方法 应用结核分枝杆菌微阵列蛋白芯片试剂盒检测76例肺结核患者、27例肺部其他疾病患者和80例健康体检者的血清标本.结果 ArrayELISA诊断肺结核的敏感性、特异性、准确度、阳性预测值及阴性预测值分别为76.32％、97.20％、93.64％、95.08％和85.25％.肺结核组各单项抗体指标检测的阳性率高于干扰组和健康对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);4种抗体联合检测的敏感性、准确度和阴性预测值均高于单项抗体检测指标,差异有统计学意义(P＜ 0.05),特异性和阳性预测值二者差异无统计学意义(P＞0.05).结论 4种抗体联合检测的敏感性和准确度高,Array-ELISA技术操作简便快速,是辅助诊断肺结核的有效方法.     

全自动化学发光免疫分析仪在梅毒螺旋体抗体检测中的应用

目的 探讨全自动化学发光免疫分析仪在梅毒螺旋体抗体检测中的应用价值.方法 选择2019年2月至2021年2月于医院接受治疗的260例疑似梅毒患者作为研究对象,均采用全自动化学发光免疫测定法(CLIA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)及梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)测定血清中梅毒螺旋体抗体性质,以TPPA检测结果为金...     

143例HIV初筛阳性标本免疫印迹试验结果分析

目的 使用酶联免疫吸附法(ELISA)、硒标免疫层析法(Determine)及免疫印迹法(WB)对143例血清标本做初筛及确认试验。方法 操作及结果判断按照《全国艾滋病检测技术规范》施行。结果 143例初筛试验阳性经免疫印迹试验确认141例HIV—1阳性，且条带出现百分率gp^120、p^66为100％，gp^160、gp^41、p^51、p^34、p^55为90％以上，1例HIV—1合并gp^36出现。结论 初筛结果有假阳性须经确认试验才能得出准确结果。     

探讨酶联免疫吸附法和胶体金法在检测乙型肝炎表面抗原中的应用

目的:对酶联免疫吸附试验(ELISA)和胶体金法检测乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)做比较.方法:用两种方法检测0～65岁人群血清标本440例.结果 ELISA法检测出阳性标本25份,阳性率5.7％;胶体金法检测出HBsAg阳性标本23份,阳性率5.2％;两种方法阳性检出率差异无显著统计学意义.胶体金法与ELISA法...     

探讨酶联免疫吸附法和胶体金法在检测乙型肝炎表面抗原中的应用

目的 对酶联免疫吸附试验(ELISA)和胶体金法检测乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)做比较.方法 用两种方法检测0～65岁人群血清标本440例.结果 ELISA法检测出阳性标本25份,阳性率5.7％;胶体金法检测出HBsAg阳性标本23份,阳性率5.2％;两种方法阳性检出率差异无显著统计学意义.胶体金法与ELISA法...     

酶联免疫吸附试验对梅毒螺旋体的检验价值

目的分析酶联免疫吸附试验对梅毒螺旋体检验的临床价值。方法选取2016年12月-2017年12月天津市津南区疾病预防控制中心检测的梅毒患者100例,所有患者均采用两种试验方法进行检测,其中采用甲苯胺红不加热血清试验检测的患者为对照组,酶联免疫吸附试验检测的患者为观察组,比较两组检测准确率及观察组与TPPA法检测结果。结果观察组检测方式的准确率为97.00%,高于对照组的80.00%,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组准确率为97.00%,TPPA法检测准确率为100.00%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论对梅毒螺旋体感染患者实施酶联免疫吸附试验检测,临床疾病确诊率较高,对患者后续治疗能够提供有效的临床依据。     

艾滋病患者合并苍白密螺旋体感染的临床研究

目的 探讨人类免疫缺陷病毒(HIV)和苍白密螺旋体(TP)混合感染的临床特点.方法 收集45份HIV/TP合并感染血清和57份单纯HIV阳性血清和全血,进行淋巴细胞、血常规、肝功能等检测,分析两组实验室检测指标的差异.结果 HIV/TP合并感染患者外周血单核细胞数为(431.6±127.8)109/L,HIV感染者为(527.0±156.2)109/L,两组差异有统计学意义(t=2.116,P＜0.05),两组间其他检测指标T(CD3+)细胞、CD4+、CD8+T淋巴细胞数、CD4 +/CD8+比值、B淋巴细胞、NK细胞、白细胞计数、淋巴细胞、红细胞、血小板、血红蛋白、丙氨酸转氨酶、白蛋白、γ-谷氨酰转肽酶、总胆汁酸及总胆红素差异均无统计学意义.结论 HIV/TP合并感染患者外周血单核细胞显著低于单纯HIV感染者,测定HIV/TP患者外周血单核细胞变化,有助于评价合并感染患者感染的免疫状况.     

酶联免疫吸附试验监测梅毒的应用评价

目的：评价酶联免疫吸附试验（ELISA）对梅毒病人诊断的敏感性和特异性。方法：使用目前常用的梅毒密螺旋体感染诊断酶联免疫吸附试验（ELISA）对3718例2006-7-1至2007-7-1门诊及住院手术输血病人进行检测。若结果阳性再做梅毒简介血凝试验（TPHA）。结果：ELISA共检阳性37例,其中30例经临床诊断为阳性。结论：该方法灵敏度高,操作方便。     

34080例患者4项感染性疾病血清标志物检测结果分析

目的调查成都市金牛区人民医院就诊患者4传染性疾病血清标志物阳性情况。方法该院检验科2014年7月至2018年5月完成34080例患者的乙肝、丙肝、梅毒、艾滋病血清标志物结果进行分析。结果所有标本HIV抗体(抗-HIV1/2)初筛阳性率为0.32%、乙型肝炎表面抗原(HBsAg)阳性率为11.34%、丙型肝炎抗体(抗-HCV)阳性率为0.42%、梅毒螺旋体抗体(抗-TP)阳性率为3.08%,其中男性抗HIV1/2、HBsAg、抗-TP阳性率均高于女性(P<0.01);四项感染性疾病血清标志物中,抗HIV1/2、HBsAg、抗-HCV以30~59岁组阳性率最高,而抗-TP以≥60岁组阳性率最高。结论成都市金牛区人民医院手术、分娩及输血前患者四项感染性疾病血清标志物阳性检出率较高,且男性阳性率高于女性。     

醋酸甲羟孕酮间接竞争ELISA检测方法建立

目的 建立以单抗为基础的醋酸甲羟孕酮间接竞争ELISA检测方法。方法 将羧甲基羟胺盐酸盐和醋酸甲羟孕酮(MPA)反应生成MPA-3-(O-羧甲基)肟(MPS),MPS与牛血清白蛋白(BSA)偶联生成免疫原,采用淋巴细胞杂交瘤技术制备MPA单克隆抗体(MPA-McAb),建立水产品中MPA残留的间接竞争ELISA(ciELISA)检测方法。结果 经飞行质谱法测得MPS-BSA分子量为76 045.656 3,MPS与BSA偶联比为25.17;MPA-McAb最佳稀释倍数为1:400 00;包被抗原最佳质量浓度为1μg/mL;标准曲线呈线性,相关系数R²=0.983 7,IC₅₀=3.630 ng/mL;最低检测限为0.133 ng/mL;批内和批间变异系数分别为3.125%和3.557%;黄鳝鱼肉样的平均添加回收率为80.46%~101.00%;检测方法与甲羟孕酮、甲地孕酮的交叉反应(CR%)分别为0.26%,10.67%,与其他抗生素药物无交叉反应。结论 醋酸甲羟孕酮间接竞争ELISA检测方法可用于水产品中醋酸甲羟孕酮残留量检测。     

不同检测方法在特殊人群梅毒检测中的应用分析

目的比较TP-ELISA、TP-PA、RPR 3种梅毒检测方法,为选择梅毒感染状况筛查方法提供依据。方法采用梅毒特异性抗体的双抗原夹心法（ELISA）进行抗体（包括IgM、IgG）检测,并与RPR法检测结果进行比较。3种方法检测结果有反应性的标本,再用TPPA法进行确证。结果ELISA-IgM法有反应性率2.28%（9/394）,RPR法有反应性率3.30%（13/394）,ELISA-IgG法有反应性率13.20%（52/394）;ELISA法与TPPA法符合率97.9%（47/48）,RPR法与TPPA符合率25%（12/48）,IgM法与TPPA符合率14.58%（7/48）。ELISA法与RPR及IgM法差异有高度显著性。ELISA法与TPHA法差异无显著性。结论ELISA法能满足疾控机构监测的需要,可以在特殊人群梅毒感染状况检测中应用。     

艾滋病高危人群中传染性疾病检测情况分析

目的：了解支滋病高危人群中HIV、HBV、HCV和TP四种病原体的感染状况。方法：于泰安市内采集四类高危人群血清，通过酶联免疫吸附实验、明胶颗粒凝集实验和胶体金实验来检测血清中的这四种传染疾病病原体的相应抗体。结果：在艾滋病高危人群2257例标本中，检测出HIV感染者0例；其它三种病原体在高危人群中的感染状况分别是HCY感染者206例（9．13％），乙肝携带者174例（7．71％），梅毒感染者70例（3．10％）。结论：在本市的支滋病高危人群中HCV、HBV和TP都有较高的感染率。     

艾滋病患者粪便HIV-1 RNA的研究

目的研究艾滋病患者粪便HIV-1 RNA,分析其与血液HIV-1 RNA的相关性,并比较它们在治疗(抗反转录病毒治疗)和未治疗(未抗反转录病毒)患者中的区别。方法收集32例艾滋病患者粪便和血液标本,两者一一对应,根据临床资料将其分为治疗组和未治疗组,分析粪便和血液HIV-1 RNA的组内相关性和组间相关性。结果2组都表现出粪便HIV-1 RNA检出率低于血液且粪便中病毒载量低于血液,且2组间粪便和血液阳性率对比差异均有统计学意义(P<0.001),其中未治疗组粪便和血液的HIV-1 RNA阳性率较高。结论粪便中可以检测到HIV-1 RNA,其在未经过抗反转录病毒的患者中易检出,同一患者粪便中的HIV-1病毒载量比血液低。     

天津市低档场所女性性服务者HIV/TP/HCV感染情况调查

目的了解天津市低档场所女性性服务者（FSW）人类免疫缺陷病毒（HIV）、梅毒螺旋体（TP）、丙型肝炎病毒（HCV）的流行现状及影响因素。方法2013-2014年每年的4-6月对天津市3个区县采用分层多阶段整群抽样方法,对低档场所FSW进行问卷调查和血清学检测。结果共监测1 377人,平均年龄为（33.20±8.755）岁,艾滋病知识知晓率为60.7%（836/1 377）,最近1个月与客人发生性行为时每次均使用安全套的比例为81.4%（1 121/1 377）,最近1年接受检测比例仅为27.3%（295/1 081）;HIV、TP和HCV阳性检出率分别为0.1%（2例）、7.6%（104例）和1.4%（19例）。汉族（OR=0.261,95%CI=0.141~0.486）与最近1个月与客人发生性行为时每次均使用安全套（OR=0.491,95%CI=0.314~0.769）为FSW感染TP的保护因素,最近1年被诊断患过性病（OR=8.120,95%CI=2.815~23.423）为感染TP的危险因素。结论天津市低档场所FSW接受HIV检测的比例较低,艾滋病知识知晓率低,感染性病艾滋病的风险较大。     

Universal monoclonal antibody-based influenza hemagglutinin quantitative enzyme-linked immunosorbent assay

Seasonal and pandemic influenza infections remain a serious public health concern. Many health authorities recommend annual vaccination as the most effective way to control influenza infection. Accordingly, regulatory guidelines ask vaccine manufacturers to determine vaccine potency at the time of release and throughout shelf-life to ensure vaccine quality. The potency of inactivated influenza vaccine is related to the quantity of hemagglutinin (HA). Since 1970s, single radial immunodiffusion (SRID) assay has been standardly used for the quantitation of HA in influenza vaccine. However, SRID is labor-intensive, inaccurate, and requires standard reference reagents that should be updated annually. Therefore, there have been extensive efforts to develop alternative potency assays. In this study, we developed and tested a new HA quantitative enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) using a universal monoclonal antibody that can bind to HAs from various subtypes in group 1 influenza A virus (IAV). We analyzed the conserved stalk domain of HA via a library approach to design a consensus HA antigen for group 1 IAV. The antigens were expressed as a soluble form in E. coli and were purified by Ni-affinity chromatography. When tested with variety of HAs from IAVs or influenza B viruses (IBVs), the mAbs exhibited specific binding to group 1 HAs, with potential exception to H9 subtype. Among various conditions of pH, urea, and reducing agents, pretreatment of HA at low pH exposing the conserved stalk domain was crucially important for optimal ELISA performance. Calibration curves for various HAs were generated to determine accuracy, specificity, sensitivity, and linear dynamic range. The ELISA method shows high sensitivity and accuracy compared with the SRID assay. The HA group specific universal mAbs against the consensus stalk domain of HA are conducive to establishing an ELISA-based standard procedure for the quantitation of HA antigens for annual vaccination against influenza infection.