35～64岁农村女性CIN组织中HPV感染基因型的分析

目的比较农村妇女宫颈癌筛查出的宫颈上皮内瘤变(CIN)组织标本中人乳头瘤病毒(HPV)感染的基因型分布情况及其临床意义。方法采用聚合酶链式反应和基因芯片检测技术对20份宫颈正常组织标本、235份CINⅠ级、136份CINⅡ级和137份CINⅢ级组织标本进行23种HPV基因分型检测,并对受检者进行相关资料分析。结果宫颈正常组织检出HPV感染者2例,HPV感染率为10.00%(2/20);CINⅠ组织检出HPV感染者102例,HPV感染率为43.40%(102/235);CINⅡ组织检出HPV感染者110例,HPV感染率为80.88%(110/136);CINⅢ组织检出HPV感染者126例,HPV感染率为91.97%(126/137)。结论聚合酶链式反应与基因芯片检测技术可应用于CIN组织标本,一次可检测23种HPV基因型别,对我国农村女性CIN的HPV感染基因型分布研究,宫颈癌的防治及其疫苗的研发具有十分重要的意义。     

自建恒温扩增法HPV分型检测系统性能验证方法及性能评价

目的自建临床实验室HPV分型检测系统性能验证方法,评估恒温扩增法HPV分型检测试剂的分析性能及其临床应用价值。方法采用国家参考品、企业参考品以及本院收集的HPV分型阳性和阴性的样本,对恒温扩增法HPV分型定性检测试剂的准确度、精密度、特异性、检测限、样本携带污染等性能参数进行方法学性能验证和评价。结果准确度阳性参考品结果均为阳性,阳性符合率为100%,批内精密度Ct值的变异系数≤5%;与试剂盒检测范围外的HPV型别及病原体无交叉反应,检测结果均为阴性,阴性符合率为100%;15种HPV高危型检测限为20 copies/反应,符合国家标准检测限不高于10~4 copies/反应;阳性样本和阴性样本间无交叉污染,试剂无样本携带污染;与cobas 4800 HPV DNA全自动化检测系统进行比对符合率为100%,且1个月内检测结果具备一定的稳定性。结论定性检测项目在正式用于患者标本检测前必须对检测系统的分析性能做详细充分的评价,通过验证恒温扩增法HPV分型检测试剂可以满足目前宫颈癌筛查和临床疗效监测的需求,并且经济简便,适用于临床常规检测。     

HPV分型基因检测在女性生殖道感染中的应用

目的探讨女性生殖道人乳头瘤病毒（HPV）各种基因分型感染情况。方法采用HPV分型基因芯片检测系统．同时检测5种低危型和18种高危型HPV亚型。结果808例标本中共检出HPV阳性212例（26．2％），共检出15种HPV亚型，其中单纯低危型HPV亚型感染50例（6．2％），单纯高危型HPV亚型感染138例（17．1％），高危、低危亚型共同感染24例（3．0％）；检出感染单一HPV亚型160例（19．8％），感染两种亚型以上52例（6．4％）。低危型主要为HPV6、11，其次为HPV43；高危型主要为HPV16、18、58、33、59等亚型。结论HPV分型基因检测对于同源性很差的多种型别和HPV多型别混合感染的检测有其独特的优势，对于生殖道感染以及子宫颈癌的早期发现、预防及治疗具有重要意义。     

于宫颈癌病理组织的HPV基因型别探析

目的对子宫颈癌病理组织中HPV基因型别进行临床研究。方法应用基因芯片法对85例病理确诊的子宫颈癌石蜡包埋组织进行HPV基因型别分析。结果85例标本中，检出HPV阳性52例，其中HPV16型别31例，HPV18型别14例，HPV33型别2例，不同基因型混合感染3例，HPV16/18型别HPV16/59型别混合感染各1例。结论本次研究中以16和18基因型较多，表明，本次研究的病例与子宫颈癌相关的基因是比较集中的。     

宫颈鳞状细胞癌组织人乳头瘤病毒分型研究的意义

目的比较宫颈鳞状细胞癌组织中人乳头瘤病毒(HPV)感染基因型别的分布及其临床意义。方法采用基因扩增结合基因芯片技术对430例宫颈鳞状细胞癌组织标本进行23种HPV基因分型检测,并对受检者进行相关资料分析。结果430例宫颈鳞状细胞癌患者检出HPV感染者388例,感染率为90.23%(388/430),其中一型感染率为75.12%(323/430),多型感染率为15.12%(65/430)。结论宫颈鳞状细胞癌组织中HPV感染型别前7位出现频率依次为16、18、33、58、59、31、52型,这些型别是致宫颈鳞状细胞癌的主流型别。HPV基因芯片检测技术可适用于宫颈组织标本,一次可检测23种HPV基因型别,对我国女性宫颈鳞状细胞癌HPV感染的防治及其疫苗的研究具有十分重要的意义。     

基于半导体测序的人乳头瘤病毒核酸分型检测技术性能评估

目的:评价基于半导体测序法的人乳头瘤病毒(HPV)核酸分型检测技术性能,探讨其临床应用价值。方法:采用半导体测序技术检测30种HPVL1基因分型国家参考品、9种HPV全基因组分型国家参考品及500例已知HPV分型检测结果的临床宫颈脱落细胞DNA样本,评价该技术的分析性能及与临床检测等效性。结果:半导体测序法可准确分型检测16种HPV型别(HPV6、11、16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、68),检测范围内的16种HPV型别之间无交叉反应,与其他HPV型别及人类基因组DNA亦无交叉反应,最低检测限为10拷贝/μl(即50拷贝/反应),与已知结果的总体阳性符合率为99.33%(298/300),阴性符合率为100%(200/200),总符合率为99.60%(498/500),一致性系数(Kappa)值为0.99,两种检测方法具有较高的一致性。结论:基于半导体测序法的HPV核酸分型检测技术具有分型准确,特异性高,灵敏度高,检测通量高等优点,具有较高的临床应用价值。     

基因芯片对人乳头瘤病毒的快速检测和分型

目的针对HPV DNA亚型的异质性,建立HPV DNA亚型的基因芯片快速检测方法,为HPV感染病例提供诊断依据.方法18种HPV DNA亚型(HPV6 、16、18、31、33、35、39、11、45、51、52、53、56、58、42、59、66、68)特异性探针,固定于硝酸纤维素膜制备成基因芯片,生物素标记引物经通用引物介导PCR(GD-PCR)扩增HPV DNA,PCR产物与基因芯片经反向点杂交检测HPV亚型;同时采用荧光定量PCR检测HPV6、11、16和18亚型.结果31例标本中,基因芯片的阳性检出率为74.2%,其中HPV6/18、HPV11/16、HPV33/58和HPV6/11/33多重感染各1例(3.2%);荧光定量PCR阳性检出率为67.7%,与前种方法相比较,漏诊率为6.5%.结论HPV分型基因芯片可1次检测HPV多种亚型,灵敏度高和特异性强,有利于对HPV多重感染的诊断.     

882例健康体检妇女HPV感染状况分析

目的了解健康体检女性人乳头瘤病毒（HPV）感染型别分布及年龄特点,为宫颈癌防治提供理论依据。方法采用凯普医用核酸分子快速导流杂交基因芯片技术,对882例健康体检妇女进行生殖道21种HPV亚型感染筛查。结果 882例体检人群HPV总感染率为16.8%,21种亚型中有15种被检出,感染率最高的型别是HPV16,其他常见型别依次为52型、58型、53型、CP8304型、18型、68型、33型和66型,高危感染率为97.3%,低危感染率为2.7%,单一感染率为85.1%,多重感染率为14.9%。882例HPV感染率各年龄段检出率差异无统计学意义（P〉0.05）。结论甘肃地区健康体检女性HPV感染有相当比例,尤其是高危型,亚型分布且有一定区域性,对体检女性进行HPV分型检测有重要意义。     

泸州地区女性人乳头瘤病毒感染状况调查

目的应用膜杂交多重检测技术进行人乳头瘤病毒(HPV)基因分型诊断,以了解泸州地区女性HPV亚型的感染状况。方法采用膜杂交多重检测技术对泸州地区712例健康体检女性进行HPV感染定性检测和型别诊断。结果在712例标本中,共检出HPV阳性标本174例,阳性率为24.44%,共检出18种基因型,包括高危型HPV16、18、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、68、81、83和低危型HPV6、11、43。高危型以HPV16、58感染为主,低危型以HPV6感染为主。结论在不同地区的女性中HPV感染率和感染亚型均存在差异。     

浏阳地区女性人乳头瘤病毒(HPV)感染状况分析

目的了解本地区女性人乳头瘤病毒(HPV)感染状况,为预防HPV感染和宫颈疾病防治提供理论依据。方法应用导流杂交基因芯片技术(可以同时检查21种基因型别),对21例宫颈癌、59例CIN、38例宫颈炎症1、006例宫颈正常的共1 124例宫颈细胞标本进行HPV检测及基因分型,分析其感染情况及型别分布。采用卡方检验,对HPV阳性和阴性在不同程度宫颈病变的构成比进行分析。结果本组资料中总感染率为28.4%(319/1 124),存在多重感染。共查出20种基因型,HPV43型未查出。HPV的主要基因型别为HPV16(19.8%)、HPV58(18.3%)、HPV52(16.1%)、HPV18(6.3%)。HPV阳性与阴性组之间在宫颈正常、宫颈炎症、宫颈CIN和宫颈癌的发病总体构成比差异有统计学意义(χ2=150.4,P0.005)。结论 HPV16、HPV58、HPV52、HPV18为该地区HPV感染的主要型别,感染高危型HPV是引起宫颈CIN及宫颈癌的必要和关键因素。HPV检测能及早发现宫颈疾病,在有效防治宫颈癌前病变,降低宫颈癌症的发病率中有重要的意义。     

宫颈癌组织中HPV16/18感染与Hpa基因表达的相关性研究

目的:研究HPV16/18、Hpa基因在宫颈癌组织中的表达及二者的相关性。方法:采用免疫组织化学方法对宫颈癌石蜡标本45例、CINⅢ25例、CINⅠ～Ⅱ20例、正常宫颈组织10例进行HPV16/18及Hpa基因检测。结果:①HPV16/18在宫颈癌组织、ClNⅢ、CINⅠ～Ⅱ、正常宫颈组织中阳性表达率分别为86.7%、76.0%、25.0%、10.0%。宫颈癌组织中HPV16/18表达和阳性表达率普遍高于CIN组织和正常组织(χ2=11.91,P<0.05;χ2=20.53,P<0.01)。Hpa蛋白在宫颈癌组织、CINⅢ、CINⅠ～Ⅱ及正常宫颈组织中的阳性表达率分别为75.6%、28.4%、21.4%和10.0%。宫颈癌组织中Hpa阳性表达率普遍高于CIN组织和正常组织(χ2=31.169,P<0.05;χ2=12.94,P<0.05)。Hpa的表达与宫颈癌的淋巴结转移有关。②在宫颈病变中HPV16/18感染和Hpa基因表达之间呈正相关(χ2=4.288,P=0.038,r=0.363)。结论:宫颈癌组织中HPV16/18及Hpa基因的表达提示二者在宫颈癌的病因学中起作用,Hpa可作为判断宫颈癌预后的参考指标。     

分泌物HPV16,18阳性女性及其性伴侣两年跟踪检测结果分析

目的:探讨女性感染人乳头瘤病毒(HPV)16,18亚型后长期感染情况以及感染妇女的男性性伴侣的感染情况。方法:采用荧光定量PCR技术,对体检中发现的106例HPV16,18阳性妇女和其中57例HPV16,18阳性妇女的男性伴侣进行了每隔0.5年一次为期两年的HPV16,18跟踪检测。结果:106例阳性妇女0.5年、1年、1.5年及2年的复检阳性率(阳性例数/参检人数)分别为87.0%(80/92)、87.8%(72/82)、91.0%(71/78)和93.0%(53/57);HPV16,18阳性率有随时间推移而增高的趋势(但不具显著性P=0.194)。对57例阳性妇女及其男性伴侣从初查到每隔0.5年一次直至两年的检查中发现,男性感染者的女性伴侣均为阳性;女性感染者的男性伴侣的阳性率分别为35.1%(20/57)、38.3%(18/47)、48.0%(12/25)、52.6%(10/19)和66.7%(4/6);男性HPV16,18阳性率随其女性性伴侣的阳性持续时间推移而显著增高(P=0.049)。跟踪检测的女性HPV16,18两年转阴率约为35.4%。结论:性伴侣双方检测HPV16,18对于预防病毒传播、感染夫妇同期治疗及双方健康均有益。     

浙江省台州市黄岩区育龄妇女HPV感染及亚型分布调查研究

目的了解人乳头瘤病毒(HPV)在育龄妇女中的感染情况及其亚型分布。方法应用基因芯片技术对1308名育龄妇女HPV23种基因型进行检测,并结合其细胞学进行诊断。结果1308名女患者中共检出HPV阳性者225名,阳性率为17.20%,其中HPV-16型119人,HPV-58型29人,HPV-18型24人。同时,在对1308名患者进行细胞学检查中,发现宫颈上皮细胞病变(CIN)患者235名,其中63名为HPV-16型感染者,大多患者以宫颈上皮细胞低度病变为主。结论应积极控制HPV感染及有效治疗CIN在我国妇女宫颈癌的防治中具有重要意义。     

宫颈癌cyclin G1表达与HPV分子亚型感染的研究

目的:探讨宫颈上皮内瘤变(CIN)和宫颈癌中细胞周期蛋白G1(cyclin G1)的表达与人乳头状瘤病毒(HPV)分子亚型感染的关系。方法:收集正常对照组(正常宫颈组织)20例、CIN组44例和宫颈癌组28例,用免疫组化二步法检测活检或术后石蜡包埋标本中cyclin G1表达水平,用导流杂交基因芯片技术检测术前宫颈脱落细胞HPV分子亚型。结果:在正常对照组、CIN组和宫颈癌组中,cyclin G1阳性表达率呈上升趋势,各组间两两比较,差异有统计学意义(P<0.05);HPV、高危型HPV、HPV16感染率也均呈上升趋势,各组间两两比较,差异有统计学意义(P<0.05);在宫颈癌组中,cyclin G1的表达率与高危型HPV感染率(r=0.382,P=0.045)、HPV16感染率(r=0.519,P=0.005)均呈显著正相关。结论:cy-clin G1在宫颈癌中的高表达,可能与宫颈癌的发生有关;宫颈癌中cyclin G1与高危型HPV呈显著正相关,可能通过协同作用导致宫颈癌的发生。     

武汉地区HPV感染与宫颈病变的关系初探

目的:探讨武汉地区人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染常见基因型、多重感染与宫颈病变的关系。方法:用HPV基因芯片检测武汉市城区1 430例妇女宫颈脱落细胞HPV基因亚型,对569例HPV阳性者按病理结果分成5组:慢性炎症组、宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)Ⅰ组、CINⅡ组、CINⅢ组和宫颈癌组。分析HPV感染状况、HPV基因型分布、多重感染在各组宫颈疾病中的意义。结果:1 430例标本中检出HPV阳性569例,HPV总感染率为39.79%(569/1 430),宫颈病变中检出的HPV高危亚型在各病理组中分布不一,CINⅢ组和宫颈癌组以16、18型最多见。多重感染共138例,HPV多重感染检出率在炎症组为17.48%(54/309)、CINⅠ组为23.70%(32/135),CINⅡ组为36.07%(22/61),CINⅢ组为44.44%(20/45)、宫颈癌组为52.63%(10/19)。CINⅢ组及宫颈癌组HPV多型感染率明显高于CINⅡ组、CINⅠ组及慢性炎症组(P<0.05)。结论:武汉地区HPV感染的基因型别、多重感染与宫颈组织不同程度病变密切相关。     

HPV基因分型与宫颈组织病变的相关性

目的:探讨人乳头瘤病毒(HPV)基因分型与宫颈组织病变的相关性,为宫颈癌的筛查、防治提供理论依据。方法:采用基因芯片技术对2 160例宫颈可疑病变组织标本同时进行23种HPV基因亚型检测,包括18种高危型HPV和5种低危型HPV,并对筛查出的HPV阳性标本进行DNA测序确诊;以组织病理学诊断作为宫颈病变的金标准。结果:2 160例宫颈可疑病变组织标本经HPV基因分型检测筛查出746例阳性者,HPV感染率为34.54%(746/2 160);经组织病理学确诊395例为不同程度宫颈病变,病变率达18.29%(395/2 160)。395例宫颈不同程度病变组织中感染HPV308例,分别为174例低度鳞状上皮内病变(LSIL)感染HPV118例、198例高度鳞状上皮内病变(HSIL)感染HPV167例、23例宫颈癌感染HPV 23例。HPV16亚型在LSIL、HSIL及宫颈癌的检出率均为最高,依次为25.29%、57.14%、75.00%。结论:HPV亚型感染与宫颈组织不同程度病变密切相关,HPV基因分型诊断在宫颈癌筛查及防治过程中具有重要意义。     

宫颈上皮内瘤变LEEP治疗前后HPV16/18的变化及其意义

目的:探讨宫颈上皮内瘤变LEEP治疗前后HPV16/18的变化及其意义。方法:对通过宫颈活组织病理和阴道镜检查诊断为CIN并接受LEEP术治疗的200例患者检测在LEEP手术前及手术后6、18个月的HPV16/18水平。结果:LEEP术前CINI、CINⅡ、CINⅢ宫颈组织HPV16/18阳性率分别为42.0%、63.6%、81.8%,术后6个月三者HPV16/18阳性率分别为1.9%、15.2%、27.35,术后12个月检测HPV16/l8阳性率分别为0.0%、1.5%,18.2%。三组CIN患者术前与术后6、12个月的HPV16/18阳性率相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:LEEP手术可以显著减少HPV16/18的阳性率,有效预防宫颈上皮内瘤变。     

3753例妇女宫颈人乳头状瘤病毒感染状况分析

目的:探讨3753例妇科门诊就诊人群宫颈人乳头状瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染率以及基因亚型的分布特征。方法:采用核酸分子快速导流杂交基因芯片技术(flow-through hybridization and geno-typing technique,Hybri-Max)对3753例妇科门诊就诊患者的宫颈刷片标本进行HPV分型检测,并对HPV感染亚型进行分析。结果:3753例妇女中检测出HPV阳性591例,阳性率为15.7%,其中两种亚型混合感染114例,占总感染人数19.3%(114/591),3种及3种以上亚型混合感染18例,占4.7%(18/591)。人群中感染最多的亚型依次是HPV52(3.9%)、HPV16(3.8%)、HPV58(2.1%)和HPV18(1.2%)。各年龄段妇女HPV感染率差异无统计学意义(χ2=12.42,P0.05)。结论:妇科门诊就诊人群的HPV感染率为15.7%,且以高危型HPV感染为主,其中最常见的感染亚型是HPV52。     

基因芯片检测宫颈上皮内瘤变和浸润性鳞癌中HPV基因型别

目的:探讨宫颈上皮内瘤变(CIN)和浸润性鳞状细胞癌(SCC)中HPV的基因类型。方法:采用HPV DNA基因芯片检查77例存档宫颈标本(32例CIN和45例SCC)中HPV基因类型。结果:77例宫颈标本中HPV总的阳性率为72.7%,CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ及SCC的HPV阳性率分别为50%、60%、75%和80%,HPV感染中16型最多(73.2%),SCC中多重感染3例(6.7%)。结论:HPV感染与CIN和SCC密切相关,随着组织学分级的增加HPV阳性率呈增加的趋势,HPV-16型是主要的感染类型。基因芯片可同时检测多种HPV的基因型别,灵敏度高、特异性强,在防治宫颈上皮肿瘤中具有较大的应用价值。     

人乳头瘤病毒亚型感染导致宫颈病变的调查

【目的】通过调查不同亚型人乳头瘤病毒(HPV)感染与宫颈病变的关系,探讨HPV分型检测在宫颈疾病筛查中的应用价值。【方法】收集2017年1月至2018年9月在上海市第一人民医院宫颈疾病门诊就诊HPV分型检测阳性的全部患者共1851例。以病理学诊断为金标准进行阴道镜检查及宫颈组织活检,分析HPV各亚型的感染分布情况及其与宫颈病变的相互关系。【结果】在1851例患者中,以高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)感染为主,HPV16检出率居首位,其次为HPV52、HPV58、HPV53等,其中病理组织活检结果阳性患者共234例,检出宫颈上皮内瘤变(CIN)2级以上病变者77例。HPV16型感染者CIN2级以上比例为11.8%(45/380),高于HPV52、HPV58等其他高危亚型感染者2.4%(32/1328),差异有统计学意义(χ^2=61.60,P<0.001)。在年龄因素中,>35岁组HPV高危阳性比例为96.91%(1225/1264),高于≤35岁组94.38%(554/587),差异有统计学意义(χ^2=6.898,P=0.009)。HPV分型检测检出CIN1级以上病变为12.64%(234/1851),而液基薄层细胞学检测(TCT)检出CIN1级以上病变为8.59%(159/1851),TCT作为筛查手段其检出率低于HPV检测方法(χ^2=16.01,P<0.001)。【结论】HPV亚型感染依次以HPV16、HPV52、HPV58、HPV53、HPV18递减,HR-HPV感染与宫颈病变发生密切相关,且随着高危感染的升高,其宫颈病变程度也升高。HPV分型检测较TCT筛查宫颈病变检出率更高。