金黄色葡萄球菌试管法血浆凝固酶试验影响因素的探讨

目的 探究金黄色葡萄球菌试管法血浆凝固酶试验的影响因素.方法 按《全国临床检验操作规程》方法操作,比较菌悬液的浓度、菌悬液介质、健康人血浆含抗凝剂种类以及血浆稀释度对试管法血浆凝固酶试验结果的影响.结果 当菌液的浓度分别为2、3、4 MCF和＞4 MCF时,含不同抗凝剂的人血浆凝块形成时间不一,只有当菌液的浓度＞4 MCF时,且该菌悬液与稀释度不超过1:4的血浆混合时,这些血浆都凝固的最短时间为3.5 h;用生理盐水或去离子水配制的菌悬液与含同种抗凝剂血浆的凝固效果无差异.结论 在金葡菌血浆凝固酶试验过程中,菌悬液浓度宜＞4MCF;菌悬液介质可选择无菌去离子水或生理盐水;当血浆稀释度≤1:4时,可在3.5h内观察结果;选择含肝素钠、枸橼酸钠和氟化钠抗凝剂的健康人血浆均可用于血浆凝固酶试验.     

用冰冻兔血浆作血浆凝固酶试验的探讨

血浆凝固酥试验阳性的金黄色葡萄球菌一般认为其致病性较强[1] 。血浆凝固酶试验常以兔血浆作为凝固物质 ,一些学者认为 ,做金黄色葡萄球菌凝固酶用的血浆不宜冰冻。但基层实验室由于种种条件限制 ,饲养动物有一定的困难 ,致使新鲜兔血浆的来源受到限制。为此 ,我们以兔血制成血浆后冰冻保存 ,与新鲜兔血浆作比较 ,并进行效期观察 ,现将结果报告如下。材料与方法1　血浆制备1 1　兔血浆制备 :无菌采取兔心脏血 ,以 1份灭菌的3 8%枸橼酸钠液抗凝剂加 4份兔血的比例充分混匀 ,离心 ,吸取上清液即为原兔血浆 ,分装成 1ｍｌ/支或 0 5ｍｌ/支 ;…     

探讨不同来源血浆对葡萄球菌凝固酶试验的影响

目的:选用不同来源、不同纤维蛋白原浓度血浆分别进行试管凝集法和玻片凝集法血浆凝固酶试验,评估其敏感性和特异性,并寻找理想的试验用血浆,减少其检测的漏检率。方法:分别用献血员、待产妇及1∶4稀释待产妇血浆对70株葡萄球菌菌株进行试管凝集法和玻片凝集法试验。结果:试管凝集法待产妇血浆较献血员血浆敏感性、特异性高,并且以1∶4稀释待产妇血浆结果阳性率最高、假阴性率最低。玻片凝集法以1∶4稀释待产妇血浆结果阳性率最高、假阴性率最低。结论:采用不同来源、不同纤维蛋白原浓度血浆直接影响试管凝集法和玻片凝集法血浆凝固酶试验的诊断效率,采用待产妇血浆明显优于献血员血浆。     

金黄色葡萄球菌确证试验的探讨

目的 比较3种生化试验对金黄色葡萄球菌的鉴定结果,探索更适用于金黄色葡萄球菌的鉴定方法.方法 以2011-2020年从食品样本中分离的138株葡萄球菌为研究对象,其中金黄色葡萄球菌23株,非金黄色葡萄球菌115株,对其进行血浆凝固酶试验、甘露醇试验及肠毒素检测,比较对金黄色葡萄球菌鉴定的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性...     

新生儿血培养凝固酶阴性葡萄球菌菌种分布及耐药监测

目的了解南方医科大学附属深圳市妇幼保健院新生儿血培养分离凝固酶阴性葡萄球菌（coagulase-negative staphylococci,CNS）菌种分布及耐药情况。方法采用全自动血培养仪和Phoenix100微生物分析系统进行培养和菌株鉴定,药敏试验采用K-B纸片扩散法。结果 2006年3月至2009年12月NICU血培养标本中共分离CNS 213株,其中溶血葡萄球菌73株（34.3%）,表皮葡萄球菌71株（33.3%）,人葡萄球菌45株（21.1%）,其他葡萄球菌24株（11.3%）;耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）检出率88.3%（188/213）,MRCNS药敏结果显示多重耐药;未发现对万古霉素耐药的CNS。结论新生儿血培养CNS菌种以溶血葡萄球菌和表皮葡萄球菌为主,MRCNS分离率逐年增高且呈多重耐药,万古霉素和替考拉宁是治疗MRCNS感染的首选药物,临床医生应根据CNS感染的种类和药敏结果合理使用抗生素。     

355株血浆凝固酶阴性葡萄球菌药敏试验

血浆凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)的致病性已越来越受到人们的重视，由于CNS极易产生耐药性，因此对于由CNS引起的感染，如何合理地选用抗生素，特别是对于那些尚不能开展细菌培养及药物敏感试验的基层医务工作者带来较大的困难。为了寻求最佳抗菌方案，遂统计了邵阳医专微生物室自2000年1月～2003年1月记录完整的355株CNS的药物敏感试验结果，报告如下。     

血浆凝固酶阴性葡萄球菌鉴定及耐药谱分析

目的比较几种血浆固酶阳性葡萄球菌鉴定方法,探讨质粒谱与耐药谱之间的关系。方法生化、粘质、耐药谱及质粒谱分析对来自医院１８８株血浆凝固酶阴性葡萄球菌（ＣＮＳ）进行了鉴定。结果头部葡萄球菌（头葡）、表皮葡萄球菌（表葡）、木糖葡萄球菌（木葡）、人型葡萄球菌（人葡）为其主要生化型。５０％菌株产生粘质,耐药率高达９４％。对万古霉素（ＶＡＮ）、氟哌酸（ＮＯＲ）、丁胺卡那霉素（ＡＫＮ）敏感。质粒检出率７３．９％。３种质粒谱常见。结论手术伤口、患者鼻咽部、医护人员及空气标本中ＣＮＳ之间有同源性。８０％以上头葡和木葡只携带１个５４ｋｂ质粒。携带有２．２、１．６ｋｂ,１．６、１．４ｋｂ成对质粒的ＣＮＳ大多具有同一耐药谱     

金黄色葡萄球菌凝固酶检测方法的比较评估

目的　探讨含不同抗凝剂的血浆、不同试验方法对金黄色葡萄球菌凝固酶试验的影响。方法　以法国生物梅里埃公司生产的葡萄球菌乳胶凝集试剂盒试剂筛选出6 8株金黄色葡萄球菌,分别采用EDTA K2 、枸橼酸钠抗凝人血浆做玻片法和试管法血浆凝固酶试验。结果　玻片法试验:枸橼酸钠抗凝人血浆凝固酶阳性率为98.5 3% ,EDTA K2 抗凝人血浆凝固酶阳性率为95 .5 9% ,二者差异无显著性(P >0 .0 5 )。试管法试验:EDTA K2抗凝人血浆与枸橼酸钠抗凝人血浆凝固酶阳性率均为97.0 6 % ;用试管法做EDTA K2 抗凝人血浆凝固酶试验,假阳性率最低,为3.33% ,与枸橼酸钠抗凝人血浆的凝固酶试验假阳性率(10 % )相比,差异有显著性(P <0 .0 5 )。结论　不同抗凝剂可影响玻片法、试管法血浆凝固酶试验的结果。     

血培养阳性报警时间对新生儿凝固酶阴性葡萄球菌血流感染的诊断研究

目的评价血培养阳性报警时间(TTP)对新生儿凝固酶阴性葡萄球菌血流感染的诊断价值,为临床治疗提供参考依据。方法回顾性分析2007年1月-2012年12月血培养凝固酶阴性葡萄球菌阳性的346例新生儿,分为血流感染组145例和血培养污染组201例;对所有新生儿进行血培养分析,比较血流感染患者与血培养污染患者TTP的差异,计算TTP对血流感染组与血培养污染组鉴别诊断的灵敏度、特异度、阳性预测值及阴性预测值。结果共调查1 345例新生儿,其中346例新生儿血培养凝固酶阴性葡萄球菌阳性,阳性率为25.72%;血流感染组新生儿的TTP为(9.35±4.53)h,血培养污染组新生儿的TTP为(17.45±7.69)h,两组差异有统计学意义(P<0.01)。结论血培养阳性报警时间是很好的辅助诊断新生儿凝固酶阴性葡萄球菌血流感染的方法,以TTP≤12h为折点,可有效的鉴别诊断新生儿凝固酶阴性葡萄球菌血流感染和血培养污染。     

金黄色葡萄球菌59株的再鉴定

目的 了解玻片法凝固酶试验在GPI卡鉴定金黄色葡萄球菌（SA）中的影响。方法 收集玻片法凝固酶试验阳性经Vitek32细菌仪鉴定为SA的59株菌，用Slidex Staph-kit，试管法凝固酶和玻片法凝固酶3种方法进行详细再鉴定。结果 玻片法凝固酶试验阳性59株中，Slidex Staph-kit鉴定SA31株，试管法凝固酶29株阳性，2株阴性，以玻片法凝固酶结果GPI卡鉴定准确率为52.5%。以试管法凝固酶结果GPI卡鉴定准确率为93.6%。结论 玻片法凝固酶试验容易出现假阳性，试管法凝固酶结果与Slidex Staph-kit结果相关性较高。葡萄球菌鉴定应做试管法凝固酶，有条件的医院可开展Slidex Staph-kit。提高SA鉴定的准确性。     

应用显色培养基快速检测血培养中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的 评价CHRMOgenic MRSA显色培养基在耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)所致血流感染的快 速诊断方面应用价值.方法 对2009年1-12月临床常规送检的血培养使用全自动仪器孵育,仪器报警阳性后及时取出血培养瓶,涂片镜检后如发现镜下细菌为革兰阳性球菌、呈葡萄状排列者,转种CHRMOgenic MRSA显色培养基;琼脂稀释法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的抗菌药物最低抑菌浓度,双重PCR方法检测菌株nuc、mecA基因;比较CH RMOgenic MRSA显色培养基鉴定结果与实验室常规鉴定及PCR方法鉴定结果.结果 2009年1-12月医院阳性血培养瓶中检出金黄色葡萄球菌72份,其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌48份,凝固酶阴性葡萄球菌491份,血培养分离MRSA耐药率除对万古霉素、替考拉宁、米诺环素较敏感外,对其他多种抗菌药物的耐药率均＞90.0％,CHRMOgenic MRSA显色培养基直接检测阳性血培养瓶中MRSA结果,与常规鉴定及PCR检测结果的符合率高,特异性为98.8％,敏感性为97.9％.结论 阳性血培养涂片镜检与CH RMOgenic MRSA显色培养基相结合,将实验室诊断MRSA血流感染的平均报告时间提前1d,是一种快速有效的简易方法,适于临床实验室的广泛应用.     

实时定量PCR检测人全血中金黄色葡萄球菌DNA方法的建立

目的建立实时定量PCR（RQ—PCR）快速检测人全血中金黄色葡萄球菌DNA的方法,以便早期定量评估肠屏障损伤所致肠道内细菌移位引起或加重的全身感染。方法对15份模拟全血标本及26份外科发热患者全血标本进行RQ—PCR检测。选择金黄色葡萄球菌高度保守的看家基因femA基因作为靶基因设计引物和Taqman探针,建立20ul的RQ—PCR反应体系,采用含靶基因扩增片段的重组质粒建立标准曲线,提取血标本中的细菌基因组DNA。结果引物和探针特异性好,检测限为10^0拷贝／ul（10^3CFU／ml）,灵敏度为99．7％,特异度为94．6％。标准曲线线性关系好,R。在0．9918—0．9997。不同浓度的金黄色葡萄球菌样本检测的平均准确性为（96．25±2．26）％,批内及批间重复性的平均变异系数分别为（8．06±0．07）％和（10．01±4．40）％。全血标本中金黄色葡萄球菌DNA平均回收率为（111．72±20．72）％。临床血标本RQ-PCR检测阳性率为15．4％（4／26）,血培养结果皆为金黄色葡萄球菌阴性。结论RQ—PCR可用于定量检测全血标本中的金黄色葡萄球菌DNA含量,具有快速、灵敏、特异性强、重复性好的优点。     

实时荧光PCR检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的研究

目的建立一种快速、准确检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的实时荧光聚合酶链反应（PCR）方法。方法收集临床诊断或疑似为败血症患者的血标本，直接提取细菌基因组DNA，确定其敏感性；以金黄色葡萄球菌nuc基因和MRSA的mecA基因为靶序列，合成引物，采用实时荧光PCR技术对上述基因进行检测，并将其结果与细菌常规培养结果对比，分析该方法检测MRSA的特异性、灵敏度、阳性预测值和阴性预测值。结果直接从血标本中提取细菌基因组DNA的灵敏度为10’CFU／mL。MRSA阳性血标本实时荧光PCR灵敏度为46．15％，特异性为100．00％，阳性预测值为100．00％，阴性预测值为56．25％。结论使用该方法快速检测临床血标本中MRSA的灵敏度不高，欲应用于临床快速诊断尚有若干问题需解决。     

凝固酶阴性葡萄球菌所致婴幼儿败血症

目的了解和探讨婴幼儿败血症的主要病原菌及耐药性现状,为临床诊断与治疗提供实验室依据。方法抽取败血症患儿的静脉血于增菌液培养瓶中生长后移种血平板,用法国生物梅里埃公司API系统鉴定328株分离菌。结果凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)203株,占分离菌的61.9%,其中表皮葡萄球菌115株(56.6%);溶血葡萄球菌45株(22.1%);里昂葡萄球菌43株(21.1%),耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)分离率为35.5%,MRCNS药敏结果显示多重耐药。结论凝固酶阴性葡萄球菌已成为新生儿血液感染的主要病原菌,MRCNS检出率高且呈多重耐药,糖肽类抗菌药物是治疗MRCNS感染的首选药。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药性分析

目的 了解耐甲氧西林金黄色葡萄球菌临床感染现状及其耐药性,为临床合理使用抗菌药物提供科学依据.方法 采用phonix-100对314株金黄色葡萄球菌进行鉴定和药敏试验,数据统计使用WHONET5.5软件及SPSS17.0软件进行.结果 共分离出314株金黄色葡萄球菌,其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA) 164株,占52.2％,甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA) 150株,占47.8％;标本来源以痰液为主,占58.3％,其次是伤口分泌物占29.3％;MRSA和MSSA对万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺无耐药,MRSA对阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素、利福平、环丙沙星、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶、克林霉素、红霉素、四环素耐药率分别为86.6％、89.6％、93.3％、43.3％、87.8％、6.7％、84.1％、84.1％、85.3％;MSSA对青霉素、阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素、利福平、环丙沙星、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶、克林霉素、红霉素、四环素耐药率分别为92.0％、0.7％、32.7％、32.7％、2.7％、10.0％、34.7％、36.0％、59.3％、22.0％;MRSA对大环内酯类、氨基糖苷类、氟喹诺酮类、四环素类、克林霉素耐药率明显高于MSSA.结论 MRSA分离率较高,耐药性严重,应引起重视,临床应根据药敏试验结果合理选择抗菌药物.     

表面增强拉曼光谱快速鉴别食品中的金黄色葡萄球菌

目的:建立采用表面增强拉曼光谱(SERS)技术快速鉴别金黄色葡萄球菌的方法,探讨该方法的可行性和应用价值。方法:根据SERS的增强效应,制备金纳米溶胶作为增强试剂,用不同的细菌样品验证SERS光谱鉴别金黄色葡萄球菌的能力。结果:采用36种不同的病原菌随机编号作为未知样品进行拉曼光谱扫描检测,通过聚类分析可达到种属鉴别。结论:金黄色葡萄球菌SERS快速鉴别方法的初步建立,为金黄色葡萄球菌感染诊断及食源性金黄色葡萄球菌污染的快速检测提供基础依据,可用于临床感染诊断及食品卫生监管、商品检验检疫等。     

金黄色葡萄球菌对莫匹罗星高水平耐药的研究

目的 了解金黄色葡萄球菌(SAU)对莫匹罗星高水平耐药(MUH)的状况,并探讨其耐药菌株对临床常用抗菌药物的耐药特性.方法 用美国BD公司Phoenix-100型全自动细菌鉴定药敏系统鉴定细菌及做药敏试验,该仪器可以同时检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(M RSA)和莫匹罗星高水平耐药的金黄色葡萄球菌.结果 共检出金黄色葡萄球菌382株,其中MUH菌株检出25株,检出率为6.5％,其中23株为MRSA,占92.0％;莫匹罗星高水平耐药的金黄色葡萄球菌对阿米卡星等15种临床常用抗菌药物耐药率较高,均＞80％,且呈多药耐药,但对万古霉素、利奈唑胺全部敏感,呋喃妥因耐药率也较低.结论 临床分离的金黄色葡萄球菌中,已出现莫匹罗星高水平耐药的菌株,临床应加强对该类菌株的监测,以减少耐药菌株的产生和流行.     

住院患儿MSSA与MRSA的分布特点及耐药性

目的比较住院患儿甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)与耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的分布及耐药特点,为临床经验治疗提供依据。方法回顾性分析2011—2015年某院住院患儿分离的金黄色葡萄球菌及其临床资料,比较MSSA与MRSA的分布及耐药特点。结果共分离金黄色葡萄球菌919株,其中MSSA632株(68.77%),MRSA 287株(31.23%)。MSSA与MRSA感染患儿中29d~1岁婴儿组所占比率最高,分别为65.03%、64.11%。MSSA和MRSA标本主要来自痰(80.38%、79.09%)。MSSA和MRSA主要分布科室均为儿童呼吸科(50.73%、45.89%)和儿童神经内科(22.98%、26.84%)。MSSA对除青霉素和红霉素外的抗菌药物耐药率均20.00%;MRSA对青霉素、苯唑西林、红霉素及克林霉素的耐药率均40.00%;MRSA对四环素、红霉素、克林霉素、左氧氟沙星、环丙沙星、莫西沙星、呋喃妥因及利福平的耐药率均高于MSSA。结论住院患儿分离的金黄色葡萄球菌以MSSA为主,1岁以内婴儿为主要分离人群;呼吸道标本来源的MSSA和MRSA主要分布科室相似,MRSA的耐药率普遍高于MSSA。     

金黄色葡萄球菌的耐药性调查分析

目的调查医院金黄色葡萄球菌(SAU)临床株的耐药现状,为临床医师合理使用抗菌药物提供科学依据。方法对医院感染性标本中培养分离的209株SAU的临床资料进行回顾性调查分析,SAU鉴定严格按《全国临床检验操作规程》进行;药敏试验采用K-B法,结果按美国临床实验室标准化研究所(CLSI)标准判定。结果耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)分离率达33.5%;药敏试验结果显示,SAU对多种抗菌药物均产生了不同程度的耐药性,对万古霉素和替考拉宁敏感率为100.0%。结论医院细菌室应提高检测水平,及时、准确地发出病原学检查和耐药性报告,为临床医师提供抗感染治疗的依据。