革兰阳性菌引起的血培养阳性标本直接细菌鉴定和药敏的方法探讨

目的探讨革兰阳性菌引起的血培养阳性标本直接细菌鉴定和药敏的可行性。方法将血培养瓶放入Bact/Alert 3D全自动血培养仪中,阳性报警后涂片染色,选革兰阳性菌143份进行试验,抽取培养液,利用梯度离心法,用VITEK 2 Compact全自动鉴定药敏仪直接做鉴定和药敏试验。用传统法的鉴定和药敏结果对直接法的鉴定和药敏结果进行评估。结果 143株革兰阳性菌中包括金黄色葡萄球菌46株、溶血葡萄球菌33株、表皮葡萄球菌25株、人葡萄球菌20株、粪肠球菌11株、屎肠球菌8株,鉴定符合率分别为100%、97.0%、100%、85.0%、91.0%、87.5%,总符合率为97.1%。革兰阳性菌引起的血培养阳性标本药敏用直接法与传统法进行比较总符合率为96.4%,大部分药敏符合率>95.0%,非常重大错误率为0.1%,重大错误率0.7%。结论 Bact/Alert 3D全自动血培养仪阳性标本,涂片为染色革兰阳性菌梯度离心后直接用VITEK 2 Compact全自动鉴定药敏仪直接做鉴定和药敏试验是可行的,并可缩短临床报告时间,为临床诊断和治疗提供依据,有较高的应用价值。     

葡萄球菌凝固酶试验玻片法结果最佳判读标准的探讨

目的探讨葡萄球菌凝固酶试验玻片法结果的最佳判读标准。方法对临床标本分离的70株葡萄球菌属细菌,以聚合酶链反应（PCR）法检测葡萄球菌凝固酶基因（金标准）,同时以乳胶凝集法快速检测金黄色葡萄球菌(Slidex Staph Plus),试管法、玻片法检测葡萄球菌凝固酶。经VITEK Ⅱ全自动分析仪鉴定细菌到种。结果70株葡萄球菌属细菌中,PCR法检测葡萄球菌凝固酶基因56株为阳性;Slidex Staph Plus与PCR法相对应的56株为阳性;试管法检测与前2种方法相对应的54株为阳性,2株为假阴性;玻片法为强阳性;VITEK Ⅱ全自动分析仪鉴定56株为金黄色葡萄球菌（与PCR法同）。另14株菌经鉴定为溶血性葡萄球菌。玻片法以粗大颗粒状或明显大絮片状凝集为血浆凝固酶试验阳性的判断,其准确度为80.00%,假阳性率为20.00%。结论葡萄球菌凝固酶试验玻片法结果最佳判读标准：以10 s内血浆中呈不可磨散的明显团块状凝集,液面清亮,在无菌生理盐水中不凝集为阳性。     

葡萄球菌的耐药性分析

为了解我院葡萄球菌感染及耐药情况,对近两年来从标本分离出的葡萄球菌进行了回顾性分析。报告如下。1 材料与方法1.1 菌株来源门诊及住院病人的血、尿、痰、咽拭子、耳分泌物、胸腹水、伤口分泌物、前列腺液等标本中培养分离出葡萄球菌,共111株。1.2 菌种鉴定经涂片、革兰氏染色、凝固酶试验、O-F 试验初筛,将葡萄球菌分为凝固酶阳性、阴性两大类。再根据全国临床检验操作规程做相关的生化管,直至鉴定到种。     

一株不典型金黄色葡萄球菌的鉴定

对一株不典型金黄色葡萄球菌进行了鉴定,菌株为山东省卫生防疫站下发质控菌种。实验部分一、菌种:半固体菌种,直观无金黄色色素。二、初步鉴定:将菌种做革兰氏染色,接种羊血琼脂平板,生化反应及血浆凝固酶试验。结果:染色镜检为革兰氏阳性散状球菌,羊血琼脂平板37℃24h培养不溶血,24—72h未出现金黄色色素,血浆凝固酶试验阳性,发酵葡萄糖、     

2007-2010年综合医院血培养病原菌分布及耐药性分析

目的 了解2007-2010年医院血液培养病原菌的分布及耐药性,为临床合理选用抗菌药物提供依据.方法 采用BacT/ALERT3D全自动血培养仪器,阳性标本转种血平板及巧克力平板,ATB Expression鉴定仪系统鉴定菌种及药敏试验,采用WHONET5.4软件对4741份血培养进行回顾性分析.结果 检出病原菌613株,阳性率为12.93％,其中革兰阳性球菌368株,占60.03％,革兰阴性杆菌171株,占27.90％,真菌74株,占12.07％;葡萄球菌属对利奈唑胺、万古霉素、呋喃妥因敏感,耐药率为0,革兰阴性菌(除鲍氏不动杆菌)对碳青霉烯类药物敏感性较好,凝固酶阴性葡萄球菌中耐甲氧西林菌株占92.86％,金黄色葡萄球菌中耐甲氧西林菌株占61.54％,大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶检出率分别为22.50％、20.00％.结论 血培养阳性标本检出病原菌主要是凝固酶阴性葡萄球菌,多种菌株耐药率高,临床予以重视.     

应用显色培养基快速检测血培养中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的 评价CHRMOgenic MRSA显色培养基在耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)所致血流感染的快 速诊断方面应用价值.方法 对2009年1-12月临床常规送检的血培养使用全自动仪器孵育,仪器报警阳性后及时取出血培养瓶,涂片镜检后如发现镜下细菌为革兰阳性球菌、呈葡萄状排列者,转种CHRMOgenic MRSA显色培养基;琼脂稀释法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的抗菌药物最低抑菌浓度,双重PCR方法检测菌株nuc、mecA基因;比较CH RMOgenic MRSA显色培养基鉴定结果与实验室常规鉴定及PCR方法鉴定结果.结果 2009年1-12月医院阳性血培养瓶中检出金黄色葡萄球菌72份,其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌48份,凝固酶阴性葡萄球菌491份,血培养分离MRSA耐药率除对万古霉素、替考拉宁、米诺环素较敏感外,对其他多种抗菌药物的耐药率均＞90.0％,CHRMOgenic MRSA显色培养基直接检测阳性血培养瓶中MRSA结果,与常规鉴定及PCR检测结果的符合率高,特异性为98.8％,敏感性为97.9％.结论 阳性血培养涂片镜检与CH RMOgenic MRSA显色培养基相结合,将实验室诊断MRSA血流感染的平均报告时间提前1d,是一种快速有效的简易方法,适于临床实验室的广泛应用.     

血培养阳性标本的病原菌种类和药敏分析

目的探讨血培养阳性标本的病原菌的种类和药敏情况,为临床诊治提供科学依据。方法采用BACTEC9120全自动血液培养仪进行血培养,使用DL-96细菌测定系统对阳性标本进行细菌鉴定及药敏试验,对结果进行回顾分析。结果 652例血培养共检出113株病原菌,阳性率为17.3%,以大肠埃希菌、凝固酶阴性葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌为主。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌的检出率分别为11.1%和39.1%。未发现万古霉素耐药葡萄球菌。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产超广谱β-内酰胺酶的菌株分别占75.0%和31.2%。结论血培养病原菌种类复杂,及时检测病原菌种类和耐药性分析,指导临床准确使用抗菌药物。     

VITEK 2 Compact鉴定仪和VITEK MS质谱仪直接对血培养阳性标本细菌进行鉴定的探讨

目的探讨用VITEK 2 Compact鉴定仪和VITEK MS质谱仪直接对血培养阳性标本进行细菌鉴定的可行性。方法对临床血培养阳性标本分离的259株细菌进行试验,用VITEK 2 Compact鉴定仪和VITEK MS质谱仪进行直接鉴定,同时用API板条传统法鉴定的结果作为标准结果,将两直接鉴定结果与标准结果进行比对。结果革兰阴性杆菌和革兰阳性球菌用VITEK 2 Compact鉴定仪直接鉴定符合率分别为94.4%(134/142)、89.7%(105/117),鉴定仪直接鉴定总符合率为92.3%(239/259);用VITEK MS质谱仪直接鉴定符合率分别为80.3%(114/142)、70.9%(83/117),质谱仪直接鉴定总符合率为76.1%(197/259)。结论对血培养阳性标本进行离心处理,用VITEK MS质谱仪进行鉴定作为临床初级报告,用VITEK 2 Compact鉴定仪进行直接鉴定和药敏作为正式报告,2种方法互为补充、相互促进,为临床及时、合理和有效的抗菌素治疗提供可靠依据。     

呼吸内科下呼吸道感染病原菌的耐药性分析

目的调查医院呼吸内科下呼吸道感染常见病原菌耐药状况。方法对2008-2010年呼吸内科患者送检痰标本分离培养用VITEK-2Compact微生物鉴定系统鉴定菌种和药敏试验,采用WHONET5.4版本软件对数据进行统计分析。结果共分离病原菌1150株,革兰阴性杆菌664株,占57.7%,主要为铜绿假单胞菌、不动杆菌属、克雷伯菌属、大肠埃希菌;革兰阳性球菌270株占23.5%,主要为金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌,216株,占18.8%;真菌主要为白色假丝酵母菌。结论呼吸内科感染病原菌耐药性较为严重,应不断加强耐药性监测,合理使用抗菌药物。     

葡萄球菌属临床分布及耐药性监测

目的了解医院的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)感染的临床分布及耐药性,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法菌种鉴定采用常规方法涂片、革兰染色镜检、触酶试验、血浆凝固酶试验确认及ATB细菌鉴定系统对标本进行细菌鉴定,药物敏感试验采用纸片扩散(K-B)法。结果 2008年1月-2010年12月共分离金黄色葡萄球菌144株占70.9%,凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)59株占29.1%;临床科室分布,ICU金黄色葡萄球菌71株占35.0%,CNS 30株占14.8%,呼吸内科金黄色葡萄球菌52株占25.6%,CNS 23株占11.3%,皮肤科金黄色葡萄球菌21株占10.3%,CNS 6株占3.0%等。结论监测葡萄球菌属的耐药状况,准确检出耐甲氧西林葡萄球菌(MRS),尤其是MRSA,在指导临床合理用药,隔离治疗感染者,预防MRS医院传播等方面具有重要作用。     

1465份血液普通细菌培养的病原菌分布及耐药性分析

目的探讨引起血液感染的病原菌的分布情况以及耐药率。方法血液培养标本用BACTEC9120全自动血液培养仪进行培养，阳性标本用德灵MicroScan Walk-Away96全自动微生物鉴定仪进行鉴定和药敏试验。结果在1465份血液培养标本中分离出病原菌154株，阳性检出率为10．53％。病原菌以革兰阳性球菌居首位（51．30％），革兰阴性杆菌次之（30．52％），真菌（15．58％），革兰阳性杆菌（2．60％）。分离率居前十位的为大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、人葡萄球菌、白色念珠菌、肺炎克雷伯菌、热带念珠菌、溶血葡萄球菌、肺炎链球菌、甲型副伤寒沙门菌。结论血液培养病原菌以革兰阳性球菌为主，革兰阴性杆菌次之；革兰阳性球菌对万古霉素、吗啉恶酮及奎奴普丁／达福普丁的耐药率最低；而革兰阴性杆菌对亚胺培南耐药率较低。     

婴幼儿血培养标本的病原菌分布及药敏结果分析

目的:了解该院婴幼儿血培养标本病原菌的分布情况及药敏特点。方法:回顾性分析该院2007年1月～2009年1月的2 278份血培养标本,应用BACT/ALERT 120全自动血培养仪进行检测,阳性菌株分离后用ATB Expression半自动微生物鉴定仪及配套的鉴定药敏板条进行鉴定药敏试验。结果:2 278份婴幼儿血培养标本共检出病原菌148株,总阳性率为6.50%;其中革兰阳性球菌121株(81.76%),以凝固酶阴性葡萄球菌为主,占阳性球菌的90.90%(110/121),其余分别为口腔链球菌6株,金黄色葡萄球菌3株,肺炎链球菌2株;革兰阴性杆菌27株(18.24%),分别为肺炎克雷伯菌15株(10.14%),大肠埃希菌11株(7.43%),不动杆菌1株。革兰阳性球菌对青霉素G的耐药率高达97.50%,对红霉素的耐药率为78.75%;未检出对万古霉素、呋喃妥因、米诺环素耐药的菌株。革兰阴性杆菌对阿莫西林、替卡西林、哌拉西林的耐药率分别为81.90%、78.45%、7.69%;对碳青霉烯类抗生素高度敏感,未检出对亚胺培南和美洛培南耐药的菌株。凝固酶阴性葡萄球菌对甲氧西林耐药率为82.64%;革兰阴性杆菌中肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌产ESBLs的分别为66.67%和58.33%。结论:该院婴幼儿血培养病原菌以革兰阳性球菌,尤其是凝固酶阴性葡萄球菌为主,且耐药菌株比例高,因此,加强血培养的检测和药敏试验对指导临床医师合理使用抗生素非常有必要。     

凝固酶阴性葡萄球菌致新生儿败血症的耐药性分析

目的探讨凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)致新生儿败血症的病原学及耐药性现状,为临床诊断与治疗提供实验室依据。方法对139例CNS致新生儿败血症血培养的病原学及耐药性进行回顾性分析。结果 218份血培养细菌阳性标本中,共分离出CNS 139株,占63.8%;耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)70株,检出率为50.4%,MRCNS多药耐药现象严重,对磺胺甲噁唑/甲氧苄啶的耐药率高达92.9%,对环丙沙星、庆大霉素、克林霉素的耐药率在57.1%~68.6%,与MSCNS相比差异有统计学意义(P<0.01);MRCNS与MSCNS对红霉素和青霉素的耐药率均>80.0%,MRCNS对米诺环素的耐药率较低,为4.3%,未见耐万古霉素菌株。结论 CNS已成为新生儿血液感染第1位的病原菌,检出率高且呈多药耐药;万古霉素仍是MRCNS的最佳药物;临床应根据血培养和药敏结果选用敏感抗菌药物,以减少耐药菌株产生,提高治疗效果。     

恶性血液病与实体瘤化疗合并败血症36例分析

目的了解恶性血液病与实体瘤化疗合并败血症细菌学类型、体外抗生素的敏感性及其变化规律,为临床经验使用抗生素提供参考。方法合并发热住院的肿瘤病人124例,其中恶性血液病96例,实体瘤28例。在使用抗生素前常规做血培养、体外分离细菌菌株并测定对抗生素的敏感性。结果单份血标本,培养阳性率为18.7%,一次抽2份血标本,培养阳性率为30.6%,两者差异具有显著性(P<0.05)。感染菌种G-菌19例(52.8%),G+菌16例(44.4%),白色念株菌1例(2.8%)。常见的致病菌为大肠埃希菌、葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌。2004年葡萄球菌、肠球菌感染有上升趋向。体外药敏试验显示耐药菌株增加,主要是针对头孢类、喹诺酮类抗生素耐药。结论连续2次以上的血标本能明显提高血培养的阳性率。恶性血液病与实体瘤化疗患者主要感染的是内源性细菌,以G-菌为主,G+菌感染和耐药菌株有上升趋势,其原因与不合理使用广谱抗生素及医院交叉感染有关。     

血培养报阳时间及病原菌分布

目的了解血培养阳性标本的菌群分布及报阳时间,为实验室病原菌诊断及临床制定治疗方案提供依据。方法收集2015年5—11月某院临床各科室送检的血标本,记录血培养报阳时间并将所获得病原菌鉴定至菌种。结果从血培养标本中共分离157株病原菌,其中革兰阳性球菌占31.85%,革兰阴性杆菌占57.32%,真菌占10.83%。培养阳性病原菌及其报阳的中位时间分别为:肠杆菌科细菌0.50 d,非发酵菌0.63 d,肠球菌属0.60 d,链球菌属0.80 d,葡萄球菌属1.01 d,真菌1.44 d。结论血培养阳性标本报阳时间从早到晚依次是:肠杆菌科细菌、肠球菌属、非发酵菌属、链球菌属、葡萄球菌属、真菌。引起血流感染的病原菌均在4 d内仪器阳性报警,大多数病原菌在1 d内报阳性。     

血培养常见病原菌分布及耐药性分析

目的 了解血培养中常见病原菌构成及对抗菌药物的耐药性.方法 对2008-2010年血培养结果进行回顾性分析.结果 2308份送检血培养标本检出病原菌241株,阳性率为10.4％,其中革兰阳性菌96株占39.8％,革兰阴性菌145株占60.2％,未发现耐万古霉素葡萄球菌及耐碳青霉烯类肠杆菌科.结论 临床医师应根据药敏结果合理选用抗菌药物,对控制医院感染和减少多药耐药菌株的出现意义重大.     

两种细菌鉴定法在临床血液检验中的应用

[目的]比较直接法与常规法对血培养阳性标本进行细菌鉴定及药敏试验的一致率,证明血培养阳性标本快速直接药敏试验的准确性和可行性。[方法]对2009年6月～2010年6月期间360份阳性血液标本进行直接药敏试验和常规药敏试验比较。[结果]360例血培养标本经血培养仪报警为阳性的135例,其中经常规法鉴定出G-杆菌102株,G+球菌33株,直接法鉴定出G-杆菌89株,G+球菌25株。两种方法菌种鉴定总一致率为83.7%,其中肠杆菌科鉴定一致率为86.3%,G+球菌一致率75.7%。两种方法对所有阳性标本细菌药敏结果的总一致率较高,对G-菌及G+菌药敏结果无显著差异。[结论]血培养阳性标本直接药敏试验结果是快速和准确的,它能够缩短阳性血培养的报告时间,降低病人的死亡率。     

新生儿败血症的病原菌临床分析

目的通过分析重庆市妇幼保健院70例新生儿败血症的致病菌种类及致病菌药敏试验,明确该院新生儿败血症主要的致病菌及有效抗生素,为有效治疗新生儿败血症提供有力指导。方法回顾性分析重庆市妇幼保健院确诊为新生儿败血症患儿的血培养及体外致病菌药敏试验结果。结果金黄色葡萄球菌28株（40.0%）,大肠埃希茵16株（22.9%）,表皮葡萄球菌12株（17.1%）,腐生葡萄球菌8株（11.4%）,草绿色链球菌4株（5.8%）,肠球菌2株（2.8%）。金黄色葡萄球菌对苯唑西林敏感（96.4%）,大肠埃希菌对头孢噻肟敏感（87.5%）,表皮葡萄球菌对环丙沙星敏感（75.0%）,腐生葡萄球菌对万古霉素敏感（87.5%）,草绿色链球菌对青霉素敏感（100.0%）,肠球菌对多西环素敏感（100.0%）。结论葡萄球菌属是新生儿败血症的主要致病菌,尤其是金黄色葡萄球菌,但其对苯唑西林治疗较为敏感。大肠埃希菌也是导致新生儿败血症的主要致病菌,对头孢噻肟治疗敏感。     

医院感染败血症病原菌8年变迁及耐药性分析

目的探讨医院感染败血症病原菌分布及耐药性变迁特点。方法血液培养采用全自动血培养仪,VITEK-AMS微生物鉴定仪进行病原菌鉴定和药敏试验。结果病原菌构成比中,革兰阳性菌呈上升趋势,其中以凝固酶阴性葡萄球菌构成比上升最为明显,但金黄色葡萄球菌构成比明显下降;革兰阴性菌和真菌构成比呈下降趋势;对革兰阳性菌和革兰阴性菌最敏感的药物分别为万古霉素和亚胺培南。结论医院感染败血症病原菌以革兰阴性菌为主,革兰阳性菌呈上升趋势,尤其是凝固酶阴性葡萄球菌成为医院感染败血症最主要的病原菌,病原菌对临床常用抗菌药物有较高的耐药性。     

两种血培养瓶在昆明市某医院近5年艾滋病患者血流感染病原分析中的应用

目的了解昆明某医院近5年住院艾滋病患者血流感染病原分布。对比两种血培养瓶对不同病原菌的检出情况。 方法对2013-2017年住院艾滋病患者使用两种血培养瓶(普通血培养和分枝杆菌/真菌血培养)的培养结果进行回顾分析。 结果普通血培养阳性率5.8%,病原菌前5位为马尔尼菲篮状菌、新生隐球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌。分枝杆菌/真菌血培养阳性率12.8%,病原菌前5位为分枝杆菌、马尔尼菲篮状菌、新生隐球菌、大肠埃希菌、凝固酶阴性葡萄球菌。 结论2013-2017年艾滋病患者血流感染病原菌以真菌为主,马尔尼菲篮状菌和新生隐球菌为真菌感染的主要菌种;应用分枝杆菌/真菌血培养瓶,分枝杆菌检出率4.8%,分枝杆菌是引起艾滋病患者血流感染仅次于真菌的病原菌,分枝杆菌引起的血流感染不容忽视;普通血培养瓶配合分枝杆菌/真菌血培养瓶的使用可以增加艾滋病患者血流感染病原菌检出机会。