呼吸道合胞病毒肺炎患儿应用清肺口服液治疗前后炎症因子水平变化及意义

目的:探讨呼吸道合胞病毒(RSV)肺炎患儿应用清肺口服液治疗前后炎症因子水平变化及其意义。方法:选取2014年8月~2015年8月在我院诊治的呼吸道合胞病毒肺炎患儿6例为研究对象,选用酶联免疫吸附法(ELISA)对其治疗前后血清中IL-8及ICAM-1水平进行检测。结果:采用清肺口服液治疗后,患儿血清中IL-8水平相比治疗前下降明显(P<0.05),血清中ICAM-1水平相比治疗前升高明显(P<0.05)。结论:采用清肺口服液治疗呼吸道合胞病毒肺炎患儿,可显著降低其血清中IL-8水平,提升ICAM-1水平,此结果可能与清肺口服液所具有的免疫调节作用有关。     

菊花总黄酮对转染RSV的A549细胞RANTES及MCP-1表达的影响

【目的】探讨菊花总黄酮对呼吸道合胞病毒(Respiratory Syncytial Virus,RSV)转染 A549细胞诱导激活正常 T 细胞表达和分泌因子(regulated upon activation ,normal Tcell expressed and secreted ,RANTES)及单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein 1,MCP-1)释放作用影响。【方法】实验分为正常对照组,病毒对照组,菊花总黄酮组和巴韦林组。在人喉癌上皮细胞(Hep-2细胞)和气道上皮细胞(A549)分别加入菊花总黄酮和巴韦林的含药维持液,测定上述两种药物的最大无毒浓度；RSV 转染 Hep-2细胞,观察药物对 RSV 的病毒抑制作用；RSV 转染 A549细胞,ELISA 法测细胞趋化因子 RANTES 及 MCP-1含量。【结果】菊花总黄酮组50%有效率优于巴韦林组,差异有统计学意义(P <0.05)；菊花总黄酮组 RANTES、MCP-1明显降低,但高于正常细胞组,优于巴韦林组,差异有统计学意义(P <0.05)。【结论】菊花总黄酮能够抑制 RSV 活性,明显降低 A549细胞释放 RANTES、MCP-1,缓解患儿的呼吸道症状。     

呼吸道合胞病毒毛细支气管炎患儿血清Eotaxin、MCP-1测定的临床意义

目的:探讨呼吸道合胞病毒(RSV)毛细支气管炎(简称RSV毛支)患儿血清嗜酸性粒细胞趋化蛋白(Eotaxin)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的含量变化及临床意义.方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)分别测定28例RSV毛支患儿和28例健康儿童血清Eotaxin、MCP-1水平,并进行比较.结果:RSV毛支患儿急性期血清Eotaxin、MCP-1水平明显高于对照组,恢复期Eotaxin、MCP-1水平下降,但仍高于对照组.Eotaxin、MCP-1水平的升高程度与病情严重程度相关,且两者呈正相关.结论:Eotaxin、MCP-1参与毛支的发病,监测血清Eotaxin、MCP-1浓度,可以反映RSV毛支惠几呼吸道炎症活动情况及疾病的严重程度.     

124名老年人呼吸道合胞病毒抗体测定(摘要)

呼吸道合胞病毒(简称RSV)在呼吸道感染中占相当重要地位。1983年应用微量补体结合试验(简称补结)对杭州地区529人,分不同年龄组进行RSV抗体测定,发现老年组RSV抗体水平显著低于成人,因此再收集老年人血清124份,同期收集成年人血清107份作对照。老年人RSV抗体调查国内尚未     

RSV下呼吸道感染患儿血清miR-146a、 miR-155的表达及意义

目的探讨呼吸道合胞病毒(RSV)下呼吸道感染患儿血清微小RNA-146a(miR-146a)、miR-155的表达及意义。方法选取该院97例RSV下呼吸道感染患儿作为试验组,同时随机选取101例健康儿童作为对照组。检测2组肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-10、超敏C-反应蛋白(hs-CRP)、miR-146a、miR-155水平;分析miR-146a、miR-155与炎症因子的相关性及影响RSV下呼吸道感染的因素。结果试验组血清miR-146a、miR-155、TNF-α、IL-6、IL-10和hs-CRP水平均高于对照组(P<0.05);miR-146a、miR-155水平均与TNF-α、IL-6、IL-10和hs-CRP水平呈正相关(P<0.05);高水平的miR-146a、miR-155均是影响RSV下呼吸道感染的独立危险因素(P<0.05)。结论RSV下呼吸道感染患儿血清miR-146a、miR-155水平较高,二者均是RSV下呼吸道感染的影响因素,有望成为治疗RSV下呼吸道感染的潜在靶点。     

孟鲁司特钠治疗婴幼儿感染合胞病毒毛细支气管炎的疗效观察

目的观察孟鲁司特钠治疗婴幼儿呼吸道合胞病毒(RSV)感染性毛细支气管炎的临床疗效。方法选取2018年9月～2019年2月我院收治的呼吸道合胞病毒(RSV)感染性毛细支气管炎患儿100例,以随机数字表法分为对照组和观察组各50例。对照组予布地奈德混悬液吸入治疗,观察组予孟鲁司特钠口服治疗,比较两组临床疗效、临床症状(咳嗽、呼吸困难、肺部啰音及气促症状见效时间)改善情况、炎性标志物水平(CysLTs水平及ECP水平)。结果观察组治疗总有效率为96.0%,高于对照组的82.0%,差异有统计学意义(P0.05);观察组咳嗽、呼吸困难、肺部啰音及气促症状见效时间等症状改善情况优于对照组,差异有统计学意义(P0.05);治疗后,两组患儿的CysLTs水平及ECP水平明显较治疗前低,且观察组CysLTs水平及ECP水平改善优于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论婴幼儿呼吸道合胞病毒(RSV)感染性毛细支气管炎以孟鲁司特钠治疗疗效较好,可有效改善临床症状,降低炎性因子水平,值得临床推广。     

RSV感染气液相界面培养人支气管上皮细胞模型的建立及其对HMGB1和pMLKL表达的影响

目的 构建呼吸道合胞病毒(RSV)感染气液相界面(ALI)培养的人支气管上皮细胞(hBEC)模型,为深入研究呼吸道病毒致病机制提供更接近体内环境的细胞模型;通过分析RSV感染对高迁移率族蛋白1(HMGB1)和磷酸化混合系列蛋白激酶样结构域(pMLKL)表达的影响,探讨RSV感染损伤支气管上皮的致病机制.方法 将hBEC...     

蛭丹化瘀中药配方颗粒冲剂与饮片煎剂体外抗RSV作用比较

目的　了解蛭丹化瘀中药配方颗粒冲剂与饮片煎成的蛭丹化瘀口服液在体外抑制呼吸道合胞病毒(RSV)作用是否相同。方法　观察RSV在两种制剂、不同药物浓度下对HEp -2细胞的致病作用。结果　蛭丹化瘀中药配方颗粒冲剂完全抑制RSV复制的最小浓度为 2 75mg/ml ;中药饮片煎成的蛭丹化瘀口服液完全抑制RSV复制的最小浓度为 2 75mg/ml。结论　两种制剂在体外抑制RSV复制作用强度相同 ,中药配方颗粒在加工过程中未改变药物的药性。     

急性呼吸道感染患儿MP、RSV和ADV血清流行病学调查

目的探讨济宁地区2000～2005年6年间急性呼吸道感染(ARI)患儿肺炎支原体(MP)、呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV)的感染情况。方法用ELISA方法检测患儿血清中特异性IgM抗体。结果患儿血清标本MP、RSV和ADV的阳性率分别是31.37%、40.64%、22.03%;RSV和ADV在婴儿及学龄前儿章患儿中的阳性率显著高于学龄期儿童,MP在学龄期儿童感染率较高;MP和RSV感染率男女差异显著(P<0.005)。结论济宁地区儿童ARI人群中MP、RSV和ADV的感染率较高,临床上应重视ARI的病原学研究,检测早期出现的特异性IgM抗体,对临床诊断有重要价值。     

痰热清对呼吸道合胞病毒感染人支气管上皮细胞分泌胸腺基质淋巴细胞生成素作用的体外研究

目的探讨痰热清对体外呼吸道合胞病毒(RSV)感染人支气管上皮细胞(NHBE)分泌胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)的影响。方法用Hep-2细胞扩增病毒,并进行毒力鉴定。建立RSV感染NHBE体外细胞模型。酶联免疫吸附(ELISA)法检测RSV感染NHBE后TSLP水平。将痰热清以不同给药方式(预防给药、直接灭活、治疗给药方式)干预RSV感染NHBE,ELISA法检测TSLP水平变化。结果实时荧光定量RT-PCR方法鉴定细胞模型建立成功。(1)RSV对NHBE分泌TSLP的影响:相同感染时间内(12h、24h、48h、72h、96h、120h),随着感染滴度增加(10TCID50、50TCID50、100TCID50、500TCID50、1000TCID50),各感染组TSLP分泌水平均呈上升趋势,与正常细胞对照组比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。相同感染滴度内(10TCID50、50TCID50、100TCID50、500TCID50、1000TCID50),随着感染时间增加(24h、48h、72h、96h、120h),各感染组TSLP分泌水平均呈上升趋势,与12h组比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。(2)痰热清对RSV感染NH-BE分泌TSLP的影响:在12h、24h、48h、72h给药时间内,痰热清、利巴韦林的不同给药方式与病毒对照组比较,均下调TSLP水平(P<0.05),以预防给药方式最为明显。预防给药方式下,痰热清组较利巴韦林组下调TSLP的作用更明显(P<0.05)。结论 RSV能诱导NHBE分泌TSLP,痰热清可抑制RSV引起的TSLP分泌增加,以预防方式给药明显,痰热清可在病毒感染的控制中起到重要作用。     

金纳米链与人喉癌Hep-2细胞共培养自由进出细胞的形式

背景：金纳米颗粒对肿瘤细胞具有杀伤效应。目的：观察金纳米链对人喉癌Hep-2细胞增殖的影响。方法：首先运用葡萄糖体系合成法制备金纳米链溶胶,然后MTT法检测不同终浓度（10%,25%,50%,75%,95%）金纳米链溶胶对人喉癌Hep-2细胞增殖的影响,并通过电镜观察金纳米链进出Hep-2细胞的过程。结果与结论：金纳米链在75%和95%高浓度时对Hep-2细胞增殖有一定的抑制,但并没有随着浓度的增加而加重,均属于一级范围,表明金纳米链对人喉癌Hep-2细胞无毒性。金纳米链在与Hep-2细胞共培养8h后即能以胞吞的方式进入细胞,48h后大部分出胞,能够自由进出细胞。     

Inhibition of human respiratory syncytial virus infectivity by a dendrimeric heparan sulfate-binding Peptide

Respiratory syncytial virus (RSV) interacts with cell surface heparan sulfate proteoglycans (HSPGs) to initiate infection. The interaction of RSV with HSPGs thus presents an attractive target for the development of novel inhibitors of RSV infection. In the present study, a minilibrary of linear, dimeric, and dendrimeric peptides containing clusters of basic amino acids was screened with the aim of identifying peptides able to bind HSPGs and thus block RSV attachment and infectivity. Of the compounds identified, the dendrimer SB105-A10 was the most potent inhibitor of RSV infectivity, with 50% inhibitory concentrations (IC(50)s) of 0.35 μM and 0.25 μM measured in Hep-2 and A549 cells, respectively. SB105-A10 was found to bind to both cell types via HSPGs, suggesting that its antiviral activity is indeed exerted by competing with RSV for binding to cell surface HSPGs. SB105-A10 prevented RSV infection when added before the viral inoculum, in line with its proposed HSPG-binding mechanism of action; moreover, antiviral activity was also exhibited when SB105-A10 was added postinfection, as it was able to reduce the cell-to-cell spread of the virus. The antiviral potential of SB105-A10 was further assessed using human-derived tracheal/bronchial epithelial cells cultured to form a pseudostratified, highly differentiated model of the epithelial tissue of the human respiratory tract. SB105-A10 strongly reduced RSV infectivity in this model and exhibited no signs of cytotoxicity or proinflammatory effects. Together, these features render SB105-A10 an attractive candidate for further development as a RSV inhibitor to be administered by aerosol delivery.     

近红外照射下金纳米链及Anti-EGFR/Au共轭物对人喉癌Hep-2细胞的抑制

背景：金纳米颗粒在近红外激光照射下对肿瘤细胞具有杀伤效应。目的：评价金纳米链及anti-EGFR/Au共轭物近红外照射对人喉癌Hep-2细胞的生长抑制和热杀伤作用。方法：取对数生长期的Hep-2细胞,随机分为空白对照组、单纯照射组、金纳米链照射组和anti-EGFR/Au照射组,加入不同培养液后,各照射组进行近红外激光照射。观察照射后细胞凋亡情况和凋亡程度。结果与结论：倒置显微镜下观察显示空白对照组和单纯照射组Hep-2细胞仍具有活性,金纳米链照射组有明显的损伤,但anti-EGFR/Au照射组损伤程度更重。流式细胞分析显示金纳米链照射组及anti-EGFR/Au靶向照射组均有不同程度的Hep-2细胞凋亡,且照射时间越长,凋亡细胞越多。说明金纳米链近红外照射可以杀伤人喉鳞癌Hep-2细胞,anti-EGFR/Au靶向照射比金纳米链照射效果更好,并呈现一定照射时间的依赖性。     

奥曲肽对Hep-2细胞增殖的抑制作用

目的喉癌是喉部最常见的恶性肿瘤,喉癌的发病率目前有逐年提高的趋势。近年来的研究表明,奥曲肽对许多实体肿瘤及正常组织有抗增生作用,还具有抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡的作用。本实验旨在研究奥曲肽对喉癌Hep-2细胞增殖和凋亡的作用及其机制的初步探讨。方法通过MTT比色试验和测定细胞生长曲线研究奥曲肽对Hep-2细胞增殖的作用,经流式细胞仪检测研究奥曲肽对Hep-2细胞凋亡和细胞周期的影响。结果奥曲肽浓度在0.05μg/ml-20μg/ml范围内对Hep-2细胞均有抑制作用,48 h时最显著,但血清组与无血清组比较,抑制率明显下降(P0.05)。无血清组奥曲肽浓度在0.1μg/ml的奥曲肽抑制作用最为显著,为24.67%(P0.01,vs con-trol)。在奥曲肽作用下72 h内,Hep-2细胞的生长曲线有明显下降(P0.05),奥曲肽浓度在0.05μg/ml和0.1μg/ml范围内,Hep-2细胞生长曲线较低平。经流式细胞仪检测,Hep-2细胞出现G0/G1阻滞,0.1μg/ml的奥曲肽最显著(73.97±0.48)%(P0.05);实验组G2/M期细胞比例亦有下降(P0.05 vs control);而实验组与对照组S期细胞的比例无显著性差异(P0.05)。结论本研究结果提示奥曲肽抑制Hep-2细胞增殖可能是通过诱导G0/G1阻滞和诱导细胞凋亡而实现的,为喉癌的综合治疗提供了理论依据。     

铁碳纳米粒介导顺铂对喉癌细胞敏感性的研究

背景：应用纳米技术对化疗药物进行靶向性改进是增加肿瘤对化疗药物敏感性的有效手段之一。目的：观察铁碳纳米粒搭载顺铂对喉癌Hep-2细胞的抑制作用及对细胞Caspase3,SurvivinmRNA表达的影响。方法：分别应用铁碳纳米粒和（或）顺铂的生理盐水分散液干预喉癌Hep-2细胞,以生理盐水干预的细胞作为对照。结果与结论：MTT检测结果显示,顺铂可明显抑制Hep-2细胞的生长,与铁碳纳米粒联合应用对Hep-2细胞的抑制作用更强;表现为细胞生长不贴壁,增殖缓慢,出现凋亡征象。RT-PCR结果显示,共培养5d,铁碳纳米粒和顺铂联合及顺铂单独处理的Hep-2细胞Caspase3mRNA水平明显增高,而SurvivinmRNA水平明显降低,以铁碳纳米粒和顺铂联合作用效果更明显,而单独应用铁碳纳米粒对Hep-2细胞无影响。提示铁碳纳米粒搭载顺铂能够增加喉癌Hep-2细胞对顺铂的敏感性,提高药物化疗效果。     

重组人红细胞生成素对人多发性骨髓瘤患者铁调节蛋白Hepcidin mRNA表达的影响

本研究探讨人多发性骨髓瘤血清对肝腺瘤细胞系Hep-3b细胞铁调节蛋白hepcidin表达的影响,及白介素-6(IL-6)单克隆抗体或重组人红细胞生成素(rhEPO)对其的抑制作用。在Hep-3b细胞培养液中按10%终浓度加入人多发性骨髓瘤患者血清,共培养后用逆转录聚合酶链式反应半定量方法检测Hep-3b细胞hepcidin mRNA的表达水平。在上述培养体系中,加入人IL-6单克隆抗体或rhEPO观察hepcidin mRNA表达的变化。结果表明,未治疗的多发性骨髓瘤组hepcidin mRNA表达量高于正常对照组及缺铁性贫血组,这种升高作用能被IL-6单克隆抗体或rhEPO完全抑制。对多发性骨髓瘤患者短期随访中,规律治疗能稳定血红蛋白,降低患者血清对Hep-3b细胞hepcidin mRNA的影响。结论:未治疗的多发性骨髓瘤患者血清能促进肝腺瘤细胞系Hep-3b细胞hepcidin表达,这种促进作用可被人IL-6单克隆抗体拮抗,提示IL-6可能导致Hep-3b细胞hepcidin表达量升高,从而造成慢性病性贫血(anemia of chronic disease,ACD)。这种促进作用也能被rhEPO抑制,提示rhEPO可能对ACD有治疗作用。在多发性骨髓瘤患者短期随访中,血红蛋白水平稳定,患者血清对Hep-3b细胞hepcidin mRNA的影响减小,这表明治疗使病情稳定,改善了ACD。     

AKTl基因沉默抑制Hep-2细胞体外侵袭能力的研究

目的研究AKTl基因沉默对人喉癌细胞系Hep-2体外侵袭能力的影响。方法利用阳离子脂质体将AKTlsiRNA转染Hep-2细胞,RT-PCR和Westernblot分析各组细胞AKTl,MMP-2mRNA和蛋白表达,划痕实验观察细胞迁移能力,Transwell小室细胞测定细胞侵袭能力。结果AKTlsiRNA可抑制AKTlmRNA转录和蛋白表达水平;AKTl基因沉默后细胞迁移运动能力明显减弱,穿模细胞数明显减少（P〈0．01）;MMP-2mRNA和蛋白表达下调。结论AKTlsiRNA可通过下调MMP-2表达抑制Hep-2细胞体外侵袭能力。