红霉素耐药肠球菌ermB基因与转座子Tn1545和Tn917的关系

目的研究158株儿童临床标本中分离的肠球菌对红霉素耐药性及其转座子Tn1545和Tn917介导的耐大环内酯类抗生素eFmB基因的特点。方法采用琼脂稀释法对红霉素进行最小抑菌浓度（MIC）测定，用PCR检测肠球菌ermB、，蝴基因、Tn1545和Tn917。结果158株红霉素MICC50和MIC90都为256μg／ml，红霉素耐药率为94．9％（150株／158株）。在150株红霉素耐药株中，ermB基因的总携带率为70．7％，其中粪肠球菌、屎肠球菌、坚韧肠球菌、鸟肠球菌和海氏肠球菌其ermB基因的携带率分别为：78．3％、58．1％、100％、100％、100％，粪肠球菌eFmB基因的携带率高于屎肠球菌（f=6．884，P=0．009）；粪肠球菌未检测到，啪基因，只有1株屎肠球菌检测到，卿基因。106株ermB基因阳性红霉素耐药株中，46．2％的菌株eFmB基因同时存在于转座子吼1545和Tn917：ermB基因单纯存在于转座子Tn1545的43株，占40．6％；ermB基因单纯存在于转座子Tn917的1株，占0．9％。结论儿童临床标本中分离出的肠球菌耐大环内酯类抗生素的主要耐药基因为ermB基因．并且ermB基因主要是通过转座子Tn1545来携带其对大环内酯类抗生素的耐药。     

解脲脲原体分群、tetM四环素耐药基因、intTn916接合型转座子遗传标记研究

目的了解解脲脲原体(U.urealyticum,UU)生物分群、tetM四环素耐药基因、intTn916接合型转座子遗传标记状况。方法对54株UU菌进行了分群、tetM四环素耐药基因、intTn916接合型转座子遗传标记检测。结果54株UU中检出Ⅰ群47株(87.0%)、Ⅱ群6株(10.5%)、Ⅰ群 Ⅱ群1株(1.8%);tetM耐药基因检出36株(63.2%);intTn916接合型转座子遗传标记检出42株(73.7%)。结论本组UU以Ⅰ群为主,tetM基因、intTn916接合型转座子遗传标记携带率高。     

动物源性和人源性的肠球菌对抗生素耐药性及ermB基因相关性研究

目的 了解大环内酯类耐药基因在人源和动物源性肠球菌之间水平转移的可能性. 方法 采用KB法和琼脂稀释法检测52株动物源性和55株儿科临床分离肠球菌对8种抗生素的敏感性;PCR检测肠球菌的ermB、mefA、tetM、aac(6')/aph(2")基因以及Tn1545的整合酶int基因;PCR扩增联合测序对比人源性和动物源性ermB等位基因的同源性;接合实验研究ermB基因在不同种属、不同来源的肠球菌之间水平转移. 结果 两种来源肠球菌对红霉素的耐药率高达80%以上;ermB是肠球菌对红霉素耐药的主要基因,在人源性和动物源性肠球菌的检出率分别为61.82%(34/55)和53.85%(28/52);已测序菌株中53.0%的北京临床分离株与69.5%的动物分离株携带同一ermB等位基因EF525477;通过接合实验,ermB基因可以在不同来源、不同种属分离株之间进行传递. 结论 动物源性和人源性肠球菌对红霉素和四环素都有高耐药率;滤膜实验证实ermB基因在体外条件下可以在动物源性肠球菌和人源性肠球菌之间传递,但传递频率比较低.动物源性和人源性肠球菌及不同种属的肠球菌有相同ermB等位基因,提示其ermB耐药基因在动物源性和人源性肠球菌水平传递存在的可能性.     

儿童社区获得性呼吸道感染的病原学研究

目的探讨儿童呼吸道感染的病原学特点,以期为临床治疗提供依据.方法采集1784名呼吸道感染患儿咽拭标本常规细菌培养和/或PCR法支原体,K-B法测定流感嗜血杆菌、肺炎链球菌耐药性,以套式-聚合酶链反应及PCR技术进行肺炎链球菌耐药基因TEM基因、ermB基因和mefA基因检测,加DAN测序分析.结果 129例细菌培养阳性,依次为流感嗜血杆菌、肺炎链球菌、肺炎克雷伯杆菌、金黄色葡萄球菌、阴沟肠杆菌、不动杆菌属;153例支原体阳性,以肺炎支原体、人型支原体为主,少数为肺炎衣原体.其中流感嗜血杆菌、肺炎链球菌对青霉素、克林霉素、红霉素、阿奇霉素、阿莫西林/克拉维酸、复方甲基异恶唑、头孢菌素及红霉素等10种常用抗生素均不同程度耐药,但对氯霉素和万古霉素均敏感;肺炎链球菌β内酰胺酶基因(TEM)、红霉素耐药基因(甲基化酶基因ermB)表达阳性,但未表达红霉素耐药基因(外排基因mefA).结论流血嗜血杆菌和肺炎链球菌本地区呼吸道感染儿童主要致病菌,对常用抗生素有不同程度耐药,肺炎支原体和人型支原体也是重要致病原;肺炎链球菌耐药可能是通过表达TEM基因和ermB基因实现的.     

肺炎链球菌的耐药基因及其分子生物学检测

目的肺炎链球菌对β-内酰胺类,大环内酯类抗生素的耐药率在世界各地以较快速度上升,其流行趋势已引起医学界的普遍关注,但不同地区差异较大。肺炎链球菌的β-内酰胺耐药性主要由青霉素结合蛋白变异所致,非pbp基因突变也会导致β-内酰胺耐药性,大环内酯耐药性肺炎链球菌的耐药表型MLS型,M型分别由耐药基因ermB和mefA介导。分子生物学方法的应用使肺炎链球菌耐药性的发生得到较全面的阐述,同时对耐药基因的检测也更快速和准确。     

肺炎链球菌的耐药基因及其分子生物学检测

目的 肺炎链球菌对β-内酰胺类,大环内酯类抗生素的耐药率在世界各地以较快速度上升,其流行趋势已引起医学界的普遍关注,但不同地区差异较大.肺炎链球菌的β-内酰胺耐药性主要由青霉素结合蛋白变异所致,非pbp基因突变也会导致β-内酰胺耐药性,大环内酯耐药性肺炎链球菌的耐药表型MLS型,M型分别由耐药基因ermB和mefA介导.分子生物学方法的应用使肺炎链球菌耐药性的发生得到较全面的阐述,同时对耐药基因的检测也更快速和准确.     

广州地区肺炎住院患儿感染肺炎链球菌的血清型分布及耐药性研究

目的了解广州地区肺炎住院的患儿感染肺炎链球菌的耐药性及血清型分布情况。方法用吸痰法采集患儿痰标本进行涂片，革兰氏染色镜检，合格痰标本划线接种血平板，用E-test法检测分离到的肺炎链球菌对青霉素、阿莫西林、头孢曲松、头孢呋辛、亚胺培南、氧氟沙星、万古霉素、红霉素和克林霉素9种药物的耐药性，采用K-B法检测四环素、复方新诺明的耐药性，并采用荚膜肿胀技术对分离到的79株肺炎链球菌进行血清分型。结果79株肺炎链球菌中青霉素耐药肺炎链球菌（PRSP）11．4％，青霉素中介肺炎链球菌（PISP）77．2％，青霉素敏感肺炎链球菌（PSSP）11．4％，对红霉素、克林霉素的耐药率分别为100％和93．7％，对阿莫西林、氧氟沙星、万古霉素的耐药率均为0，对头孢曲松、头孢呋辛、亚胺培南的耐药率分别为3．8％、72．2％、2．5％。79株肺炎链球菌中只有1株PSSP仅对红霉素耐药．78株肺炎链球菌对两种以上药物耐药．多重耐药率为98．7％（78／79），同时对克林霉素、红霉素、四环素、复方新诺明耐药的菌株65株，占82．3％（65／79）。79株肺炎链球菌血清型分别为19F（70．9％），23F（16．5％），6B（5．1％），4（2．5％），15B（2．5％），不能分型（2．5％），7价疫苗涵盖率为94．9％（75／79）。结论广州地区肺炎住院患儿肺炎链球菌对大环内脂类抗生素红霉素和林可酰胺类抗生素克林霉素耐药情况严重，对二代头孢菌素头孢呋辛耐药率居高，临床治疗儿童肺炎链球菌感染的肺炎应首选阿莫西林和三代头孢菌素。7价疫苗覆盖率高。预防儿童肺炎链球菌感染所致的肺炎，采用7价疫苗可以达到很好效果。     

上颌窦炎及咽炎患者肺炎链球菌带菌及耐药性调查

目的 调查急慢性上颌窦炎及咽炎患者肺炎链球菌带菌及耐药情况。方法 用E—test法及纸片扩散法测定耐药情况．结果 86株肺炎链球菌中，对青霉素敏感64株(74.4％)，低度耐药18株(20．9％)，高度耐药4株(4．7％)，青霉素耐药菌株对红霉索、氯霉素、复方新诺明及四环素的耐药率比青霉素敏感株高，所有菌株对万古霉素敏感．结论 了解细菌耐药性的变化是合理应用抗生素的重要依据。     

转座子介导的肺炎链球菌耐药水平传播机制

目的 探索转座子介导的耐药基因水平转移在肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,Sp)耐药传播中的作用.方法 采用长片段聚合酶链反应(long and accurate PCR,LA-PCR)、DNA序列分析、Southern blot、脉冲场凝胶电泳(PFGE)等方法 分析3株不同遗传背景的Sp中转座子的种类、结构,用转化实验分析不同菌株之间耐药性转移方式.结果 (1)Sp中携带mefE的mega元件插入到接合转座子Tn916上形成复合转座子Tn2009-like,其序列与Tn2009具有99%同源性,染色体插入位点完全不同.(2)临床分离的多重耐药Sp(ET86)染色体184 kb和155 kb片段上同时携带Tn1545、Tn917和Tn2009-like,体现出携带耐药决定子的遗传元件集中分布的趋势.另外2株不同耐药表型的Sp分别携带1或2种转座子.(3)转座子上耐药基因可通过转化转移.结论 Sp染色体上转座子可捕获其他耐药元件形成复合转座子,且不同的转座子可在染色体上集中分布、协同作用,促进耐药性的传播和进化.     

肺炎链球菌的耐药性和pbp2b基因扩增产物图谱的相关性

目的 了解肺炎链球菌对青霉素和其它抗生素的耐药情况；对40株青霉素敏感菌株和30株青霉素不敏感菌株进行pbp2b基因扩增产物RFLP图谱相关性研究。方法 采用肉汤稀释法、E-试验和K-B纸片法进行抗生素药物敏感试验；通过用特异性引物pF和pR对肺炎链球菌进行PCR扩增，并对扩增产物进行限制性内切酶HaeⅢ消化反应。结果 肺炎链球菌对青霉素的不敏感率为9．9％～14．6％；40株青霉素敏感菌株(MICs≤0．094μg/ml)中的39株(97．5％)为s1、s2和s3三种之一，1株为r1；30株青霉素不敏感菌株(MICs≥0．12μg/ml)中的26株(86．7％)为r1-16六种之一，其余4株为s1。结论 青霉素和β-内酰胺酶类抗生素对北京地区的肺炎链球菌具有活性；肺炎链球菌的耐药性和pbp2b基因扩增产物图谱之间有相关性。     

谈烧伤学科发展——创新、活力、联动、包容

随着经济社会的发展和人民生活水平的提高,烧伤的发病率和死亡率呈现下降趋势,烧伤学科的进一步发展受到制约;同时,突发事件、恐怖袭击的增多,使烧伤学科在群体性烧创伤救治方面的地位得到加强。在社会主义新时代,烧伤学科如何进一步发展值得思考。2016年杭州G20峰会以"创新、活力、联动、包容"为主题,笔者认为这一主题同样可用以指导烧伤学科的发展。     

Macroscopic, histologic, histochemical, immunohistochemical, and ultrastructural features of mesothelioma

Mesotheliomas are uncommon neoplasms that arise from the cells forming the serosal membranes of the body cavities. Approximately 90-95% of mesotheliomas arise in the pleural cavity and 5-10% in the peritoneal cavity. Rare mesotheliomas arise in the pericardium and in the tunica vaginalis. Unlike many neoplasms, mesotheliomas grow in a diffuse distribution and tend to encase the organs in the various body cavities. A combination of histochemical, immunohistochemical, and ultrastructural features are often necessary to accurately diagnose mesotheliomas. These techniques are highlighted in this review article on mesothelioma.     

Macroscopic,Histologic, Histochemical,Immunohistochemical, and Ultrastructural Features of Mesothelioma

Mesotheliomas are uncommon neoplasms that arise from the cells forming the serosal membranes of the body cavities. Approximately 90–95% of mesotheliomas arise in the pleural cavity and 5–10% in the peritoneal cavity. Rare mesotheliomas arise in the pericardium and in the tunica vaginalis. Unlike many neoplasms, mesotheliomas grow in a diffuse distribution and tend to encase the organs in the various body cavities. A combination of histochemical, immunohistochemical, and ultrastructural features are often necessary to accurately diagnose mesotheliomas. These techniques are highlighted in this review article on mesothelioma.