CXCL16和ox-LDL在阿霉素肾病小鼠中的变化及意义

目的观察CXCL16和氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)在阿霉素肾病小鼠血、尿及肾组织中的变化,探讨其与阿霉素肾病发生发展的关系。方法将50只雄性Balb/c小鼠分为模型组与对照组。模型组予以一次性尾静脉注射阿霉素10.5 mg/kg建模,对照组经尾静脉注射同样剂量的生理盐水。分别于实验0、1、3、5、7周末测24 h尿蛋白定量,全自动生化分析仪检测血清白蛋白、胆固醇,双抗体夹心ELISA方法检测血清CXCL16、ox-LDL及尿液CXCL16,免疫组织化学SABC法检测肾组织CXCL16及ox-LDL表达,PAS染色观察肾脏组织学改变。结果与对照组相比,模型组小鼠1周末出现血清白蛋白降低(P<0.05),血清胆固醇及24 h尿蛋白定量升高(P<0.05或P<0.01),且持续至实验结束;模型组小鼠血尿CXCL16及血清ox-LDL水平明显增高(P<0.01),且随着时间延长逐渐增高;模型组肾小球CXCL16、ox-LDL表达较对照组增强(P<0.01),且随着时间延长表达逐渐增强。结论 CXCL16和ox-LDL均参与了阿霉素肾病的发生发展,且与疾病的严重程度有关。血清和尿液CXCL16水平可作为评价其肾组织病理损伤严重程度的无创性指标。     

阿霉素复制小鼠微小病变肾病模型研究

目的：探讨阿霉素复制小鼠微小病变肾病模型的方法。方法：30只健康雄性昆明种小鼠,随机分为对照组、模型组,实验第1 d给模型组小鼠经尾静脉一次注射阿霉素7.5 mg/kg,对照组注射等量生理盐水;实验第1 d、第14 d、第28 d和第42 d代谢笼收集24 h尿,测24 h尿蛋白含量;于实验第42 d,心脏采血,全自动生化分析仪检测生化指标并处死小鼠;用10%甲醛固定肾组织,常规石蜡包埋、切片、HE染色观察肾脏组织学改变,同时肾组织用2.5%戌二醛固定作电镜检测。结果：一次尾静脉注射阿霉素7.5 mg/kg使小鼠尿蛋白大量增加,血浆白蛋白降低、血脂升高;肾小球基底膜上皮细胞轻度肿胀,部分基底膜断裂,足突广泛融合。结论：一次尾静脉注射阿霉素7.5 mg/kg可获得肾脏形态改变及临床表现类似于人类肾病综合征的阿霉素肾病小鼠模型。     

胃癌Balb／c小鼠腹膜移植模型建立及生物学特性的研究

目的：建立一种能稳定传代的人胃癌小鼠腹膜移植模型。方法：用免疫功能正常的Ｂａｌｂ／ｃ纯系小鼠，经环胞霉素Ａ和环磷酰胺处理，Ｓｙ８６Ｂ裸鼠可移植性细胞株腹腔移植或传代。结果：经１０代观察，移植率（９４．５％）与裸鼠（１００％）接近；但生长潜伏期短，腹水容量大，带瘤生存时间为裸鼠的１倍以上。凡生长癌性腹水的小鼠均发生腹膜广泛转移结节，移植瘤形态学、组织化学、免疫学、分子遗传学及超微结构符合肠型胃癌特点。结论：本模型可作为研究胃癌腹膜转移机理、生物学行为及治疗的动物模型。     

浆细胞性乳腺炎小鼠模型的建立

目的浆细胞性乳腺炎现在病因尚不明确,本研究旨在建立浆细胞性乳腺炎小鼠动物模型。方法浆细胞性乳腺炎手术切除病变组织制作匀浆接种BALB／c小鼠乳腺诱导建立浆细胞性乳腺炎小鼠模型。结果病理结果显示：A组、B组小鼠乳腺腺泡结构正常,未见到明显病理改变。c组、D组显示小鼠乳导管明显扩张,其内淤积大量上皮细胞及坏死碎屑,管用纤维化程度增加,并有大量中性粒细胞、淋巴细胞尤其是浆细胞浸润。c组有3例明显浆细胞性乳腺炎类似病理改变,建模成功率为50％;D组有5例出现明显浆细胞性乳腺炎类似病理改变,建模成功率为83．3％。E组内仅有3只小鼠乳腺病理改变可见乳导管周围有中性粒细胞浸润,但未见到浆细胞浸润,也无其他一些浆细胞性乳腺炎类似改变。结论浆细胞性乳腺炎患者病变组织可以诱导雌性BALB／c小鼠乳腺组织出现类似病理表现,并且高剂量组能够成功建立小鼠的浆细胞性乳腺炎模型。     

IgA肾病小鼠模型的建立与鉴定

目的建立小鼠IgA肾病模型,为临床研究IgA肾病提供实验依据。方法昆明种小鼠30只,分为正常对照组（10只）、模型组（20只）。采用口服牛血清白蛋白（BSA）联合尾静脉注射葡萄球菌肠毒素B（SEB）的方法制作小鼠IgA肾病模型。第12周末收集新鲜尿液,显微镜下尿红细胞定性检验;摘眼球取血,检测血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）;光镜法观察。肾小球系膜细胞及基质变化;电镜法检测系膜区有无电子致密物沉积;免疫荧光法观察系膜区IgA沉积情况。结果第12周末,模型组小鼠均出现不同程度的血尿;Scr、BUN较正常对照组显著增高（P〈0．01）;光镜下系膜细胞及基质明显增生;电镜下系膜区电子致密物沉积;免疫荧光示系膜区大量的IgA沉积,而正常对照组则无上述表现。结论IgA肾病小鼠模型效果良好,病理、电镜及临床指标与人类IgA肾病临床病理相似。     

体外分离培养Balb/c小鼠胚胎干细胞向神经细胞定向诱导分化

目的: 探讨体外分离培养、诱导胚胎干细胞(ESCs)分化为神经细胞的高效方法. 方法: 自孕3.5 d的Balb/c小鼠获得附植前的早期胚胎,机械剥离法去除胚胎的滋养层细胞获取内细胞团(ICM)分别在小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)饲养层上和明胶包被的培养板中培养获得类ESCs克隆. 进行碱性磷酸酶染色,SSEA-1细胞免疫化学鉴定及体内分化实验鉴定. 模拟体内神经系统发育过程采用序贯诱导方法定向诱导ESCs分化为神经细胞,进行分化后细胞的免疫细胞化学鉴定. 结果: 所分离得到的细胞碱性磷酸酶染色阳性,SSEA-1表达阳性,体内分化实验证实具有多向分化潜能. 符合ESCs的一般特性. 经过序贯诱导方法可以高效诱导ESCs分化为神经细胞. 结论: 体外分离得到的Balb/c小鼠的ESCs经过模拟体内神经系统发育过程经过序贯诱导方法可以高效的诱导为神经细胞,且所获得的神经元比例高.     

三种制作Balb/c小鼠下肢缺血模型方法的比较

目的采用高位结扎并离断一段股动脉、单纯性高位结扎和单纯性低位结扎股动脉三种术式,制作Balb/c小鼠下肢缺血模
型。通过比较3种术式的优缺点,为制作用于再生医学研究的缺血模型提供理论依据。方法选8周龄的雄性Balb/c小鼠30只,
随机分成3组,分别按3种方法制作缺血模型。术后连续观察5 d。第2天行激光多普勒检测。结果激光多普勒显示3种模型
中手术侧的下肢血流阻滞。高位结扎并离断股动脉组中小鼠整个肢体坏疽并脱落;单纯性高位结扎组小鼠中出现小腿及脚爪
坏疽;单纯性低位结扎小鼠脚掌干燥并有脱皮现象,个别脚爪坏死,组织学见大片肌组织坏死及再生俢复反应。结论单纯性低
位结扎股动脉是制作Balb/c小鼠下肢缺血模型比较好的方法。
     

糖尿病肾病小鼠模型研究进展

对于研究哺乳类动物疾病,小鼠提供了-个良好的实用动物模型,特别是近交系小鼠对糖尿病并发肾脏病变方面的易感性更是体现了其优越性.在人体试验以前建立一个真正的可信的糖尿病肾病模型对验证诊断和干预治疗非常有意义.     

病毒性心肌炎小鼠心肌细胞凋亡与外周血淋巴细胞凋亡的研究

目的:研究心肌炎小鼠柯萨奇B3(CVB3)病毒性心肌炎模型外周血淋巴细胞凋亡与心肌细胞凋亡的关系。方法:采用AnnexinV/PI双参数法在流式细胞仪上定量检测CVB3心肌炎小鼠外周血淋巴细胞凋亡及心肌细胞凋亡百分率。结果:CVB3感染所致心肌炎小鼠外周血淋巴细胞凋亡以及心肌细胞凋亡均显著高于正常对照小鼠(P<0.001),且两者呈显著正相关(r=0.80,P<0.01);外周血淋巴细胞及心肌细胞凋亡百分率与心肌病理积分亦呈明显正相关(r=0.72,P<0.01;r=0.85,P<0.01)。结论:病毒性心肌炎外周血淋巴细胞凋亡可以反映心肌细胞凋亡情况,而且两者均与心肌炎病理损害程度密切相关。     

糖尿病肾病小鼠模型的研究现状

糖尿病肾病（diabetic nephropathy,DN）已成为导致终末期肾病的主要原因之一。小鼠是研究人类疾病最常用的实验动物优势明显。目前常用的DN小鼠模型难以完全模拟人类DN病变,限制了DN发病机制和治疗措施的进展。近年来应用基因工程技术和杂交技术建立了一些新的DN小鼠模型,其中部分模型能较好地模拟人类DN的典型病变。本文总结常见DN小鼠模型特点的基础上,对新建立的DN小鼠模型疾病表现、肾病特点及应用进行了分析,从而有助于DN发病机制的深入认识及DN研究中动物模型的合理选择。     

建立适用于旋毛虫抗肿瘤相关基因筛选的动物模型

目的为利用抑制消减杂交(SSH)法筛选旋毛虫抗肿瘤相关基因,建立理想的动物模型获取可靠的实验样本。方法Balb/c小鼠随机分为检测组(Tester)和驱动组(Driver),Tester为经口服感染旋毛虫250条、400条和550条组,Driver为不接种组,在感染后11 d,两组同时在皮下分别接种SP2/0细胞2×106个/只,检测组和驱动组小鼠荷瘤后,于20 d后处死,采集两组肿瘤组织和脾脏组织,用天平称量肿瘤块的重量,游标卡尺测量肿瘤块3个互相垂直直径进行体积比较;为了检测两组小鼠免疫情况,又采用流式细胞术检测体内T淋巴细胞的动态变化,以便评估所需样本的可靠性。结果将肿瘤组织与正常组织分离后,经统计分析比较两组肿瘤块重量和体积大小的差异均极为显著(P<0.01)通过检测T淋巴细胞亚类,FACS共检测1×105个细胞,分别得到脾细胞中CD3 、CD4 和CD8 T淋巴细胞的数量,感染组小鼠机体的CD3 、CD4 、CD8 和CD4 /CD8 显著增高,在接种不同剂量的旋毛虫后荷瘤,小鼠脾脏特异的T淋巴细胞亚类:CD3 差异显著(P<0.05);CD4 差异显著(P<0.05);CD8 差异显著(P<0.05);CD4 /CD8 差异显著(P<0.05)。通过以上指标的测定,我们认为所建立的动物模符合SSH的实验要求。结论建立的旋毛虫抗实体瘤动物模型,可用于旋毛虫抗肿瘤差异基因筛选的实验起始材料,为进一步研究旋毛虫抗肿瘤分子机制创造条件。     

小鼠梗阻性结肠癌模型的建立与稳定性分析

目的 探讨建立小鼠梗阻性结肠癌模型的方法,并验证其稳定性.方法 将50只BALb/c小鼠随机分成25只梗阻性结肠癌模型组(研究组)和25只PBS替代癌细胞模型组(对照组),制模后各组小鼠再分成5个亚组,分别在制模3天、7天、10天、14天、21天处死,并采用小鼠一般状态标注法、拟临床癌性肠梗阻监测法及病理学方法比较两组差异.结果 研究组制模成瘤率100％(25/25).在小鼠模型一般状态的数据分析中,发现研究组与对照组相比在制模后10天起平均进食量、体重及粪便量明显减少,其差异有统计学意义(P＜0.05).在拟临床癌性肠梗阻监测数据分析中,发现研究组在制模后7天起平均腹围、肠道内压力及梗阻上段肠管周径明显高于对照组,其差异有统计学意义(P＜0.05).在病理学检测数据分析中,发现研究组在制模后7d起成瘤,制模后14天起肿瘤环腔生长,并逐渐出现梗阻性结肠癌样改变.结论 小鼠梗阻性结肠癌模型的建立方法简便、肠管损伤程度小、可行、安全、死亡率低,且制模稳定性高;反映了临床梗阻性结肠癌的病理生理演变过程,为较理想的动物模型.     

人巨细胞病毒感染Balb/c小鼠椎间盘的相关检测

目的建立人巨细胞病毒(HCMV)感染Balb/c小鼠模型,探索HCMV感染椎间盘的依据。方法取不同剂量组HCMV AD169株腹腔注射6~8周SPF级Balb/c小鼠♀♂各6只,同时设立灭活病毒对照组6只和细胞对照组6只。取各组小鼠椎间盘组织进行病毒分离与鉴定;采用PCR和RT-PCR分别检测HCMV UL83基因和UL54基因及其相应基因的转录;取椎间盘组织行HE染色病理并观察。结果2×106和2×105PFU/m l病毒组♀小鼠病毒分离、PCR及RT-PCR均为阳性;HE染色可见椎间盘组织局部灶性淋巴细胞浸润等慢性炎症反应,纤维环板层结构紊乱,关节软骨钙化层增厚,大量黏液及泡沫细胞,软骨下血管明显减少。♂小鼠、其它剂量病毒组、灭活病毒组和HF对照组均为阴性。结论HCMV可以感染小鼠椎间盘组织,并与感染病毒剂量有关;人巨细胞病毒感染与椎间盘变性有相关性,可能是椎间盘退变的一个重要危险因素。     

RT-PCR法测定胎鼠大脑皮质内皮素-1 Mrna

目的 建立一种检测先天性人巨细胞病毒感染胎鼠大脑皮质内皮素－１（ＥＴ－１）ｍＲＮＡ的方法。方法 采用逆转录－聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法并对实验条件进行优化。建立稳定的检测体系后,对胎鼠大脑皮质ＥＴ－１ ｍＲＮＡ进行检测,并以ＲＴ－ＰＣＲ后产物的ＯＤ值来反映起初ＥＴ－１ ｍＲＮＡ的模板相对含量。结果 在一定ＴａｐＤＮＡ酶、镁离子浓度、引物浓度等条件下,ＥＴ－１ ｍＲＮＡ经ＲＴ－ＰＣＲ扩增后产     

DNCB致敏诱导BALB/c小鼠特应性皮炎模型的建立

目的探索建立1-氯-2,4-二硝基苯（DNCB）经皮肤致敏诱导BALB／c小鼠特应性皮炎（AD）模型的方法。方法将6只7周龄BALB／c小鼠随机分为3组（n=2）,常规饲养。3组小鼠分别接受1％＋0．2％DNCB溶液（A组）、1％＋0．1％DNCB（B组）和基质（橄榄油：丙酮=4：1）溶液（正常对照c组）处理。用上述溶液反复刺激小鼠的背部和耳廓皮肤,观察皮炎症状和皮肤病理等指标,并检测血浆总igE浓度。结果在首次致敏后的4周中,B组小鼠出现明显皮炎症状,A组小鼠出现轻微皮炎症状后恢复正常,C组无明显皮炎症状。B组小鼠的抓挠动作次数、皮炎症状评分显著高于A组和c组。皮肤病理观察显示B组棘层细胞增厚、炎症细胞浸润,其嗜酸性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞、中性粒细胞和肥大细胞较其它两组有显著差异。B组血浆总IgE浓度高于A、c两组,但样本例数过少,尚未得到统计学支持。结论先后用含1％和0．I％DNCB的丙酮一橄榄油溶液涂拭BALB／c小鼠皮肤能够成功建立AD模型。     

皮下注射与口服地塞米松诱发Balb／c小鼠卡氏肺孢子虫肺炎比较研究

目的：比较皮下注射和口服地塞米松建立Balb/c小鼠卡氏肺孢子虫肺炎（ PCP）模型的差异,探索2种方法的优劣。方法将雌性Balb/c小鼠随机分为地塞米松皮下注射组（注射组）、地塞米松口服组（口服组）和对照组。注射组采用每3天皮下注射地塞米松1次（0．5 mg/次,共16次）的方法诱发PCP;口服组经口灌服1 mg/L的地塞米松溶液1 ml,持续6周;对照1组注射等体积生理盐水;对照2组不给任何药物。结果注射组无死亡小鼠,51天后卡氏肺孢子虫（PC）总感染率为90％（27/30）;口服组2只小鼠死亡,63天后PC总感染率为67％（20/30）;2组比较差异有统计学意义（P＜0．05）。对照组未检出PC包囊。结论皮下注射和口服地塞米松方法均可成功建立Balb/c小鼠PCP动物模型。皮下注射方法与口服方法比较,具有感染率高、死亡率低、诱导时间短的优点。     

同种异体近交系小鼠原位气管移植模型的建立

目的:建立近交系小鼠同种异体原位气管移植模型.方法:供受体体质量配对后,C57BL/6 和BALB/c小鼠随机分为2组,每组各10对,A组为C57BL/6(供体) → BALB/c(受体)组,B组BALB/c(供体) →BALB/c(受体)组,昆明种小鼠10对作为C组即KM(供体) →KM(受体)组. 利用颈前肌肉及周围组织被覆移植气管提供血供建立同种异体小鼠原位气管移植模型. 使用HE染色以及扫描电镜对同种异体小鼠原位气管移植模型进行评估,观察比较上皮积分、淋巴细胞计数以及无核软骨细胞/全部软骨细胞等指标.结果:A, B组全部存活,C组存活6只. A, C组移植气管均发生一定程度的排斥反应,B组无排斥反应发生. A, B, C三组上皮积分分别为: 1.094±0.120分,2.872±0.059分及0.995±0.444分;无核软骨细胞数/骨细胞总数比值分别为:(27.22±1.09)%, (10.60±1.01)% 及(31.40±6.43)%;淋巴细胞计数分别(20.18±1.31)个/HPF,≤5个/HPF及(22.55±4.87)个/HPF. A, B组及C,B组各项指标相比均有统计学意义,而A,C组相比则差异无统计学意义;且C组各数值离散程度均大于A组.结论:成功建立了C57BL/6(供体) → BALB/c(受体)小鼠原位气管移植模型. 近交系及封闭群模型均能反应移植气管的各种病理生理变化,但封闭群模型稳定性较近交系差.     

高脂喂养加单侧肾切除制作小鼠糖尿病肾病模型研究

目的 探讨高脂喂养加单侧肾切除制作糖尿病肾病（DN）模型的可行性.方法 8 周龄的MKR 小鼠（骨骼肌特异性Insulin/IGF-1 双受体缺失的转基因小鼠）60 只,雌雄各半,随机分为3 组,每组20 只.空白组（基础饲料喂养）,高脂组（高脂饲料喂养）,模型组（高脂饲料喂养＋单侧肾切除组）.造模后第1、2、4、6、8 周测体质量、空腹血糖、尿微量白蛋白（UmAlb）.8 周后心脏采血处死各组小鼠留取血标本及肾组织分别进行血肌酐（Cr）、血尿素氮（BUN）的检测及光镜和电镜下观察肾脏病理学改变.结果 与空白组比,8 周时,高脂组、模型组两组血糖明显升高（P〈0.01）,而两组之间比较,血糖无明显变化（P〉0.05）.模型组UmAlb、Cr、BUN 较空白组、高脂组明显升高,差异有显著统计学意义（P〈0.01）,且肾质量（KW）,肾/体质量（KW/BW）较空白组显著增大,病理变化明显.结论 高脂饲料喂养加单侧肾切除的MKR 小鼠是一个良好的糖尿病肾病模型.