低浓度酒精对成年大鼠空间位置的记忆及海马CA1区BDNF表达的影响

目的 探讨低浓度酒精摄取对成年大鼠空间位置记忆的影响,并通过免疫组织化学方法检测低浓度酒精摄取后海马CA1区脑源性神经营养因子(BDNF)的表达.方法 成年雄性SD大鼠给予连续3 d Morris水迷宫训练,然后动物随机分为实验组和对照组.实验组动物给予5%(V/V)酒精为唯一饮料喂养,对照组动物以自来水代替酒精.在给与酒精喂养后的3,7,14,21,30d行Morris水迷宫行为观察.动物在水迷宫行为学观察后,取脑、冰冻切片,用ABC法行BDNF免疫组织化学反应,用Motic 3.2图像分析系统测定免疫反应阳性产物的平均灰度值.结果 给予低浓度酒精喂养3 d与7 d后,动物找到平台的潜伏期[分别为(8.93±1.38)s,(9.66±1.04)s]与对照组[分别为(8.24±2.94)s,(10.07±0.71)s](P＞0.05),酒精喂养14,21,30d后,动物找到平台的潜伏期[分别为(9.19±1.81)s,(10.45±0.97)s,(12.37±1.81)s]明显短于对照组[分别为(17.14±3.66)s,(18.83±1.25)s,(21.41±2.73)s],差异有显著性(P＜0.05).BDNF的免疫组化反应显示低浓度酒精喂养3 d时BDNF在海马CA1区的表达平均灰度值(145.3±14)与对照组(143.8±12)相比差异无显著性(P＞0.05);而低浓度酒精喂养7 d、14d与21d时,海马CA1区BDNF的表达平均灰度值(分别为125.6±17,127.4±15,130.7±14)明显低于对照组(分别为147.5±13,142.7±10,145.8±16)(平均灰度值与阳性产物的多少成反比)(P＜0.05);酒精连续喂养30d后,海马CA1区BDNF的表达平均灰度值(146.2±11)接近于对照组(144.5±14),差异无显著性(P＞0.05).结论 短期内低浓度酒精摄取有助于成年大鼠空间位置记忆的保持,其机制可能与低浓度酒精摄取上调BDNF在海马CA1区的表达有关.     

电针结合药物治疗对慢性应激抑郁模型大鼠海马CA1、CA3区BDNF的影响

目的研究电针针刺“百会”、“大椎”穴结合药物盐酸氟西汀对慢性应激抑郁症大鼠海马内CA1、CA3区脑源性神经营养因子(BDNF)的影响。方法将25只成年SD雌性大鼠随机分为正常组、模型组、电针组,药物组,针药结合组。以免疫组化技术显示比较电针结合药物、电针、药物对慢性应激抑郁模型大鼠海马CA1、CA3区BDNF的影响。结果电针结合药物组大鼠海马内CA1、CA3区BDNF阳性神经元的细胞数量表达多于电针组和药物组,而强阳性神经元的细胞数量表达少于电针组和药物组。结论电针结合药物治疗好于单纯药物治疗和电针治疗。     

雌激素改善大鼠记忆及促进海马BDNF蛋白表达上调

目的探讨雌激素改善大鼠记忆与BDNF表达的关系。方法停止繁殖的15月龄雌性大鼠,体质量350～400g,随机分为治疗组和对照组,在颈部皮下分别注射相同剂量的苯甲酸雌二醇和生理盐水。采用Morris水迷宫检测大鼠记忆,大鼠海马BDNF、TrkB及mRNA表达采用RT-PCR检测,BDNF、TrkB及proBDNF蛋白表达采用Western-blot检测。结果治疗组大鼠潜伏期缩短,海马BDNF、TrkB、proBDNF表达上调(P<0.01)。结论雌激素改善大鼠记忆,可能与BDNF及相关蛋白表达上调有关。     

不同训练方式建立大鼠空间记忆后海马结构中BDNF表达的变化

目的：研究短期强化训练能否建立可靠的空间长时记忆;用不同训练方式建立空间记忆后,大鼠海马结构中脑源性神经营养因子（BDNF）的表达是否会发生变化。方法利用Morris水迷宫建立大鼠空间短期记忆、长期记忆和短期强化训练形成的长期记忆3种模型,用激光共聚焦显微镜观察正常（NC）组、短期记忆（ST）组、长期记忆组（LT）和短期强化训练形成的长期记忆（SRT ）组大鼠海马各亚区的BDNF的分布情况。结果 Morris水迷宫定位航行实验中LT组和SRT组间寻找站台平均潜伏期和策略差异均无统计学意义;记忆检测发现,LT组大鼠除了在站台所在象限的停留时间明显长于SRT组,差异有统计学意义（P＜0.05）外,两组大鼠寻找站台潜伏期和策略以及穿越站台次数差异均无统计学意义。LT组与NC组及ST组比较,海马齿状回和CA1区的BDNF免疫荧光反应明显增强,差异有统计学意义（均 P＜0.05）;SRT组与NC组以及ST组比较,海马齿状回和CA1区的BDNF免疫荧光反应明显增强,差异有统计学意义（P＜0.05或 P＜0.01）。LT组与SRT组之间,NC组与ST 组之间,海马各区的BDNF表达差异均无统计学意义。结论短期强化训练可建立与长期训练基本相同的长期记忆。BDN F与空间长期记忆的形成密切相关,其可能不参与空间短期记忆的形成或调节。     

脑室内注射BDNF抗体对大鼠海马NOS表达的影响

目的：探讨脑室内注射脑源性神经营养因子（BDNF）抗体阻断内源性BDNF对大鼠海马-氧化氮合酶（NOS）阳性神经元的影响。方法：脑室内注射BDNF抗体一周后,采用Morris水迷宫进行行为检测;并用NADPH-黄递酶组化染色方法观察海马NOS阳性神经元数目的变化。结果：与对照组相比,实验组大鼠空间学习和记忆能力明显下降（P〈0．01）;实验组大鼠海马CA1区NOS阳性神经元数目（38．37±5．23）明显少于对照组（49．53±5．74）（P〈 0．01）;实验组DG区NOS阳性神经元数目（48．77±5．51）明显少于对照组（60．40±7．39）（P〈0．01）。结论：脑室内注射BDNF抗体可导致大鼠空间学习记忆能力下降,海马NOS阳性神经元数目减少,提示BDNF对学习和记忆的影响可能与海马NOS阳性神经元数目的变化有关。     

何首乌对Aβ1-40诱导的大鼠海马神经元内BDNF表达的影响

目的：探讨Aβ1-40对海马CA1区神经元脑源性神经营养因子（brain—derived neurotrophic factor，BONY）表达的影响，以及何首乌对其的干预作用。方法：右侧海马微量注射Aβ1-40，观察海马BDNF的表达变化；并使用何首乌浸膏对大鼠模型进行干预治疗。动物存活30d后，用“Y”迷宫检测各组动物学习和记忆能力；采用免疫组织化学方法和Westem-blot检测海马CA1区神经元BDNF的表达；应用尼氏染色法观察海马CA1区神经元数目和形态。结果：Aβ1—40能够导致大鼠学会躲避电刺激所需的“尝试次数”明显增加；BDNF蛋白的表达明显下降，并可以在海马观察到Aβ1-40的沉积；CA1区的神经元出现胞体肿胀、排列散乱等形态改变，且使用何首乌对动物模型干预治疗30d后。大鼠的躲避电刺激所需的“尝试次数”明显下降；海马CA1区神经元BDNF表达明显上调。结论：使用Aβ1—40在体内能够下调海马CA1区神经元BDNF表达。何首乌干预治疗30d，能够改善动物的学习和记忆能力，并能减少Aβ1-40对海马CA1区神经元BDNF表达的抑制作用。     

丰富环境对大鼠学习记忆及海马CA1区脑源性神经营养因子表达的影响

目的 探讨丰富环境对Wistar大鼠学习记忆的影响及其脑源性神经营养因子(BDNF)机制.方法 20只3周龄Wistar大鼠随机分为丰富环境组和正常对照组,分别在丰富环境和正常环境喂养30d.Morris水迷宫实验评定其学习记忆能力,免疫组化检测海马CA1区BDNF的蛋白表达.结果 丰富环境组大鼠逃避潜伏期[(24.37±5.45)s]显著短于对照组[(31.28±5.39)s],差异具有显著性(P<0.05);丰富环境组跨越平台次数[(3.38±0.79)次]、平台象限游泳距离[(915.52±125.12)cm]明显多于对照组[(2.21±0.49)次、(468.67±70.29)cm],差异具有显著性(P<0.01);丰富环境组海马CA.区BDNF灰度值(128.79±8.45)明显小于正常对照组(142.57±9.36),差异具有显著性(P<0.05).结论 丰富环境明显增强大鼠的学习记忆能力,其可能是通过BDNF机制实现的.     

跑台运动对脑卒中后抑郁大鼠抑郁样行为、海马氧化应激及海马CA1区BDNF表达的影响

目的 观察脑卒中慢性应激大鼠抑郁样行为、海马氧化应激及海马CA1区脑源性神经营养因子(BDNF)表达的变化和中等强度跑台运动的干预作用,探讨跑台运动影响卒中后抑郁(PSD)大鼠抑郁行为的可能机制.方法 将44只大鼠随机分为4组:即假手术组(sham)、卒中组(MCAO)、卒中抑郁组(PSD)及PSD运动组(PSD+E)...     

急性高原低氧大鼠海马BDNF的表达

目的通过对平原组、急性高原组大鼠海马脑源性神经营养因子（BDNF）表达的研究，探讨高原低氧对大鼠脑海马神经细胞的损伤机制。方法应用免疫组织化学方法结合图像分析技术对两组大鼠海马BDNF表达进行定性、定量分析。结果急性高原组大鼠海马CA1、CA3区神经元BDNF阳性表达含量比平原组大鼠分别增高23．5％、24．1％。结论急性高原组大鼠海马CA1、CA3区神经元BDNF阳性表达发生明显变化，其含量升高，提示BDNF在避免急性高原低氧对大鼠海马CA1、CA3区神经元应激损伤中可能起重要作用。     

益智健脑颗粒对AD模型大鼠学习记忆能力及海马神经元、BDNF表达的影响

目的探讨益智健脑颗粒对Aβ1-40诱导的AD模型大鼠学习记忆能力及海马CA1区神经元BDNF表达的影响。方法右侧海马微量注射Aβ1-40建立AD动物模型,并用益智健脑颗粒对其进行干预,Y迷宫检测各组大鼠学习和记忆能力,免疫组织化学方法检测海马CA1区神经元BDNF表达。结果Aβ1-40能够导致大鼠学会躲避电击所需的尝试次数明显增加[(25.36±3.48)次vs(15.41±2.89)次],海马CA1区BDNF灰度值较对照组明显增大[(139.13±7.55)次vs(128.36±8.45)次],差异有显著性。应用益智健脑颗粒后,尝试次数明显减少[(17.12±3.51)次vs(25.36±3.48)次]、海马CA1区BDNF灰度值明显减小[(129.98±7.86)次vs(139.13±7.55)次]。结论益智健脑颗粒可以改善AD模型鼠的学习记忆能力,可以作为临床治疗AD的试验用药。     

七氟醚对幼鼠获取空间学习记忆能力及海马pERK1/2表达的影响

目的探讨七氟醚对幼鼠获取空间学习记忆能力及海马p ERK1/2表达的影响。方法出生后14 d SD幼鼠54只,随机分为对照组(C组)、七氟醚5%组(Sevo组)、假手术组(Sham组)各18只。C组不做任何处理,Sevo组幼鼠暴露于5%的七氟醚4 h,Sham组幼鼠吸入氧气4 h,1周、3周、6周后于上午8:00~11:00应用Morris水迷宫对幼鼠进行7 d的行为学观察,记录逃避潜伏期,行为学结束后随即取出6只幼鼠用免疫组化法测定海马CA1区神经元p ERK1/2的表达。结果与Sham组比较,Sevo组逃避潜伏期和探索时间明显延长(P<0.01),Sevo组海马CA1区神经元p ERK1/2的表达明显减少(P<0.01);Sham组与C组逃避潜伏期时间差异无统计学意义,海马CA1区神经元p ERK1/2的表达之间差异无统计学意义。结论七氟醚对幼鼠获取空间学习记忆能力的影响与抑制海马p ERK1/2表达有关。     

孕期应激对子代雌鼠成年后酒精摄取行为及脑内小白蛋白表达的影响

目的 探讨孕期应激对子代雌鼠成年后酒精摄取行为以及脑内小白蛋白表达的影响.方法 6只SD孕鼠随机分为孕期应激组(PS组,n=3)和对照组(CON组,n=3).PS组孕鼠在妊娠晚期接受限制性应激,CON组孕鼠不给予孕期应激.子代成年后,PS组和CON组雌性子代分别随机分为PS-S组(n=6)和PS-NS组(n=6),CON-S组(n=6)和CON-NS组(n=6).PS-S组和CON-S组动物先后接受限制性应激和冰水应激.所有动物均给予水和酒精溶液进行喂养,比较各组子鼠的基础酒精摄人量和子代应激后的酒精摄入量.用免疫组化方法检测子代海马和前额皮质小白蛋白的表达.结果 PS-NS组在第1,4,6周的酒精摄入量明显低于CON-NS组(P<0.05).PS-S组在限制性应激后第1周的酒精摄入量[(3.79±0.47)kg·d-1·g-1]明显高于CON-S组[(1.68±0.68)kg·d-1·g-1](P<0.05),而PS-S组动物在冰水应激后第3周的酒精摄入明显小于CON-S组(P<0.05).另外,PS-S组子代海马CA2区和前额皮质M1区的小白蛋白表达均明显低于CON-S组(15.82±0.30,26.52±0.12,P<0.05).结论 孕期应激可影响成年雌性子代的酒精摄取行为,此过程可能与海马和前额皮质小白蛋白表达的减少有关.     

BDNF、TrkB在大鼠海马CA_3区的表达及其与学习记忆的关系

目的:研究BDNF及其受体TrkB在大鼠海马CA3区时空分布变化及其与学习记忆的关系。方法:采用免疫组织化学实验,观察BDNF及TrkB在正常大鼠发育期、成年期和老龄期海马CA3区的定位分布及时间变化。成年组和老龄组于免疫组织化学染色前接受水迷宫试验,研究BDNF及TrkB的分布变化与学习记忆的关系。结果:生后15~20d,海马CA3区阳性细胞最多。成年期细胞染色强,核大而圆无着色。老龄期阳性细胞数量少,染色淡,发生了明显退行性变化。水迷宫定向航行实验中平均潜伏期成年组和老龄组有显著性差异(P<0.01);空间搜索实验中NE象限停留时间成年组和老龄组有显著性差异(P<0.01)。结论:海马CA3区BDNF及TrkB的时空表达基本一致。表达高峰为生后15~20d。老龄期呈增龄性下降,细胞出现退行性变化。BDNF及受体TrkB的表达与学习记忆能力呈平行关系,BDNF及受体TrkB在学习记忆中发挥着重要作用。     

银杏叶提取物对半乳糖致痴呆大鼠学习记忆及海马CA1区nNOS表达的影响

目的观察银杏叶提取物(extracts of ginkgo biloba,EGb)对D-半乳糖(D-galactose)致痴呆大鼠学习记忆及海马CA1区神经型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase,nNOS)表达的影响。方法将48只SD大鼠随机分为6组,腹腔注射D-gal建立痴呆模型,以不同剂量的EGb进行干预。采用Y型迷宫检测行为学变化;以免疫组化和Western Blot法检测大鼠海马CA1区nNOS表达。结果痴呆模型组较空白对照组尝试次数显著增加[(77±5.2)次vs(50±6.3)次](P<0.01),海马CA1区nNOS表达降低(P<0.01);EGb中、高剂量组较痴呆模型组尝试次数减少[(57±8.2)次、(52±4.1)次vs(77±5.2)次](P<0.01),而海马CA1区nNOS表达均升高;治疗组尝试次数减少(P<0.05),而nNOS表达没有统计学意义(P>0.05)。结论EGb能改善D-gal致痴呆大鼠学习记忆能力,其作用机制可能与增加海马CA1区nNOS表达有关,其中预防效果比治疗效果更优。     

胰岛素逆转1型糖尿病脑病模型大鼠海马齿状回神经发生障碍与空间学习记忆异常的研究

目的揭示海马齿状回神经发生与1型糖尿病脑病发病的相互关系以及用胰岛素干预后所发生的变化。方法分别用链脲佐菌素和胰岛素建立1型糖尿病脑病大鼠模型和胰岛素治疗大鼠模型,采用Morris水迷宫以及5-溴脱氧尿嘧啶（BrdU,一种神经干细胞DNA合成的标记物）单标、BrdU＋NF（神经丝,成熟神经元的标志物）双标、BrdU＋GFAP（胶质原纤维酸性蛋白,成熟星形胶质细胞的标志物）双标的免疫组织化学方法,测试大鼠的空间学习记忆能力,并在光镜下观察处于海马齿状回神经发生过程中的细胞存活、迁移和分化的程度。结果1型糖尿病脑病模型大鼠的空间学习能力,海马齿状回BrdU单标、BrdU＋NF双标和BrdU＋GFAP双标的阳性细胞数均明显下降（P〈0.01）;用胰岛素治疗后可提升以上各项指标几乎接近正常水平（P〈0.01）,但各种阳性细胞形态以及细胞迁移的方向、路径和终点均不受到明显的影响。结论个体内长期缺乏胰岛素,导致海马齿状回神经干细胞生存率和分化率下降,可能是诱发1型糖尿病脑病的一个因素;尽早用胰岛素进行干预可逆转神经发生障碍和学习记忆异常,这将有利于防治该脑病的发生。     

幼年Wistar大鼠空间学习记忆与海马CA3区苔藓纤维分布

目的探讨空间学习记忆与海马CA3区苔藓纤维可塑性的关系.方法Morris水迷宫内对正常幼年Wistar大鼠进行定位航行试验后,用Timm显影染色方法,观察海马CA3区苔藓纤维分布的可塑性变化.结果大鼠在14天学习训练间,其逃避潜伏期逐日缩短,由平均(57.4±29.3)s下降到(7.9±3.5)s.苔藓纤维主要集中在门区和CA3透明层,但学习和对照两组大鼠海马CA3区始层都多少不等地存在苔藓纤维终扣分布,两组苔藓纤维分布面密度分别为0.03432±0.01516,0.03694±0.01657.经t检验,P＞0.05,差异无显著性.结论幼年Wistar大鼠Morris水迷宫14天空间学习记忆训练没能引起海马CA3区始层苔藓纤维分布的变化.     

NGF、BDNF和NT3在AD大鼠海马中的分布及表达变化

目的 观察NGF、BDNF和NT3在Alzheimer disease（AD）大鼠海马中的分布及其表达变化。方法 采用海马注射Aβ淀粉蛋白的方法建立AD模型。10d后对大鼠进行灌注,取脑,冰冻切片,用NGF、BNDF和NT3抗体行免疫组织化学染色。对海马恒定视野内NGF、BDNF和NT3的阳性细胞进行记数并进行统计学分析。结果 AD组海马中的NGF阳性细胞较正常组显著增多（P〈0．01）．且染色增强。BDNF阳性细胞较正常组明显减少（P〈0．01）．染色强度减弱。而NT3的阳性细胞数及染色强度与正常组比较差异均没有统计学意义（P〉0．05）。结论 NGF、BDNF和NT3在AD的海马中发生了不同的变化,提示NGF、BDNF和NT3在AD中发挥了不同的作用．尤其是BDNF阳性细胞的减少可能与AD的神经功能减退有关。