实验性高脂免体外培养阴茎海绵体平滑肌细胞凋亡的研究

目的观察高脂诱导的血管性ED家兔阴茎海绵体平滑肌(Corpus Cavernosum Smooth Muscle,CCSM)细胞形态、结构变化及高脂对CCSM细胞凋亡、增殖的影响。方法雄性新西兰家兔10只,随机分为模型组和对照组,每组各5只。模型组为采用经高脂、高胆固醇饮食结合球囊导管扩张双侧髂内动脉建立、鉴定的血管性ED模型;对照组喂以正常饮食。8周后切取阴茎CCSM组织观察并做体外细胞培养。经处理后分别在光镜、透射电镜下观察,流式细胞仪检测细胞凋亡,MTT比色法观察细胞增殖活性,RT-PCR法研究Caspase-3 mRNA的表达情况,免疫荧光法检测Caspase-3活性。结果与对照组相比,模型组光镜和电镜下CCSM细胞内含较多脂质囊泡,线粒体、内质网等细胞器出现损伤,凋亡小体明显增多。流式细胞仪检测证实模型组CCSM细胞凋亡率较对照组明显增高(1.44±0.20%Vs5.96±1.60%,P<0.01)。MTT比色法显示高脂对CCSM的增殖有明显抑制作用(模型组与对照组A值分别为:0.52±0.08Vs1.42±0.04,P<0.01)。模型组的Caspase-3 mRNA表达和活性值均显著高于对照组(0.74±0.00Vs0.65±0.00,P<0.01;活性值0.03±0.00Vs0.01±0.00,P<0.05)。结论高脂、高胆固醇饮食可严重影响CCSM结构,促进CCSM细胞凋亡并抑制其增殖。CCSM细胞凋亡/增生的失衡可能是高脂导致ED发生发展的重要病理环节。     

疏肝理气活血法对肝郁气滞大鼠阴茎海绵体NOS活性影响的实验研究

目的 探求肝郁气滞男性阴茎海绵体组织中NOS活性及疏肝理气活血中药对其影响。方法 采用与人类精神性应激十分相似的非损伤性应激刺激法,制造肝郁气滞型大鼠动物模型,以免疫组化与计算机图象分析技术测定海绵体组织中NOS活性。结果 证明肝郁气滞动物模型组阴茎海绵体组织中nNOS活性与空白对照组有显著性差异(P<0.01),疏肝理气活血中药高剂量组阴茎海绵体组织中nNOS活性与模型组有显著性差异(P<0.05)。结论 肝郁气滞可导致阴茎海绵体组织中nNOS活性下降,而疏肝理气活血中药有增强阴茎海绵体组织中nNOS活性的作用。 这可能是形成心因性ED病理基础的一个重要环节。     

101例ED患者阴茎海绵体肌电图检测结果分析

目的 观察勃起功能障碍(erectile dysfunction,ED)患者中阴茎海绵体平滑肌存在病变的比例及特征.方法 采用德国WIEST公司Space 7500型阴茎海绵体肌电图(corpus cavernosum electromyogram,CC-EMG)检测仪对门诊101位ED患者进行检测.患者平均年龄(31.46±8.89)岁,病程(2.62±1.36)年.结果 CC-EMG检测结果未见异常者69人(68.32%),异常者32人(31.68%).描记图未见异常组与异常组图形各参数比较:时程分别为(3.95±1.87)s和(6.03±5.28)s,两组差异比较(P<0.01),波幅分别为(299.86±54.88)μ V和(268.13±76.93)μV,两组差异比较(P<0.05);相位分别为(6.79±3,43)s vs(6.53±3.07)s,两组差异比较(P>0.05),频率分别为(1.54±0.23)次/min vs(1.51±0.32)次/min,两组差异比较(P>0.05).结论 阴茎海绵体平滑肌病变(包括自主神经功能紊乱)在ED患者中占有一定的比例.CC-EMG异常ED患者描记图主要表现为波形同步不良,出现bursts波、whips波和slaves波,波幅减小,时程明显延长.     

实验性高脂兔体外培养阴茎海绵体平滑肌细胞凋亡的研究

目的观察高脂诱导的血管性ED家兔阴茎海绵体平滑肌（Corpus Cavernosum Smooth Muscle，CCSM）细胞形态、结构变化及高脂对CCSM细胞凋亡、增殖的影响。方法雄性新西兰家兔10只，随机分为模型组和对照组，每组各5只。模型组为采用经高脂、高胆固醇饮食结合球囊导管扩张双侧髂内动脉建立、鉴定的血管性ED模型；对照组喂以正常饮食。8周后切取阴茎CCSM组织观察并做体外细胞培养。经处理后分别在光镜、透射电镜下观察，流式细胞仪检测细胞凋亡，MTT比色法观察细胞增殖活性，RT-PCR法研究Caspase-3 mRNA的表达情况，免疫荧光法检测Caspase-3活性。结果与对照组相比，模型组光镜和电镜下CCSM细胞内含较多脂质囊泡，线粒体、内质网等细胞器出现损伤，凋亡小体明显增多。流式细胞仪检测证实模型组CCSM细胞凋亡率较对照组明显增高（1．44&#177;0．20％Vs5．96&#177;1．60％，P〈0．01）。MTT比色法显示高脂对CCSM的增殖有明显抑制作用（模型组与对照组A值分别为：0．52&#177;0．08Vs1．42&#177;0．04，P〈0．01）。模型组的Caspase-3 mRNA表达和活性值均显著高于对照组（0．74&#177;0．00Vs0．65&#177;0．00，P〈0．01；活性值0．03&#177;0．00Vs0．01&#177;0．00，P〈0．05）。结论高脂、高胆固醇饮食可严重影响CCSM结构，促进CCSM细胞凋亡并抑制其增殖。CCSM细胞凋亡／增生的失衡可能是高脂导致ED发生发展的重要病理环节。     

阴茎包埋对海绵体形态结构的影响

目的:探讨阴茎包埋对大鼠阴茎海绵体形态结构的影响。方法:通过建立隐匿阴茎大鼠模型获得实验标本,分2月组、4月组进行观测,每组25只大鼠。各阶段又分包埋组(15只)、正常组(10只),光镜和电镜下观察海绵体形态结构的改变。结果:阴茎包埋2月组海绵体形态结构无明显变化,4月组病理改变较为明显,光镜下见大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞,内皮细胞分布杂乱,细胞间大量间质组织增生,海绵窦狭窄;电镜下见阴茎海绵体平滑肌细胞及内皮细胞萎缩、线粒体退变、内质网扩张,致密体及收缩纤维减少,脂滴增加,空泡形成。包埋组与正常组阴茎海绵体在外观和重量上无明显差异(P>0.05)。结论:阴茎包埋对海绵体外观和重量无明显影响,但随着包埋时间的延长,海绵体组织发生超微结构上的病理改变。     

益肾壮阳膏对勃起功能障碍阴茎血流动力学的影响

目的:观察益肾壮阳膏对ED患者阴茎海绵体动脉血流动力学参数的影响,探讨其作用机制。方法:选取门诊92例ED患者,随机分为观察组(n=60)和对照组(n=32),分别予益肾壮阳膏和安慰剂治疗,疗程4周,比较治疗前后IIEF-5评分、阴茎勃起硬度评分(EHS)及阴茎海绵体动脉血流动力学参数。结果:治疗后观察组IIEF-5、EHS较治疗前显著升高[(19.18±3.56)分vs(12.63±3.78)分,(3.58±0.50)分vs(3.21±0.62)分,P均0.01],且显著高于对照组治疗后评分[(19.18±3.56)分vs(13.72±2.85)分,(3.58±0.50)分vs(3.28±0.58)分,P均0.01)];但两组间及组内治疗前后阴茎海绵体动脉收缩期峰值流速、舒张末期流速、阻力指数变化均无统计学意义(P均0.05)。观察组治疗有效率为73.33%,优于对照组的21.88%(Z=-4.665,P0.01)。结论:益肾壮阳膏对ED患者有较好的改善作用,可以提高阴茎勃起硬度及改善IIEF-5评分。但阴茎血流动力学无明显改变,其作用机制需进一步研究。     

降钙素基因相关肽对糖尿病性ED大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞表型转化的影响

目的:了解降钙素基因相关肽(CGRP)对糖尿病性ED大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞表型转化的影响。方法:利用链脲佐菌素建立糖尿病及糖尿病性ED大鼠模型。阴茎海绵体平滑肌细胞原代培养,并进行免疫细胞化学染色鉴定。实验分为2组:正常对照组和糖尿病性ED大鼠组。不同浓度(0、10,60,100 nmol/L)CGRP作用24h后,利用qRT-PCR检测各组细胞碱性调宁蛋白和骨桥蛋白mRNA的表达。结果:各组原代培养阴茎海绵体平滑肌细胞α-肌动蛋白阳性细胞率为(95.94±0.03)%。与正常对照组比较,糖尿病组ED大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞碱性调宁蛋白mRNA表达显著减少(4.41±0.29 vs 10.35±0.62,P<0.01),而骨桥蛋白mRNA表达水平显著上调(5.28±0.32 vs 1.32±0.24,P<0.01)。当CGRP作用的终浓度为100 nmol/L时,糖尿病组大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞经CGRP作用后,与未经其作用相比,碱性调宁蛋白mRNA表达显著上调(6.90±0.22 vs 4.41±0.29,P<0.01),而骨桥蛋白mRNA表达水平显著减少(3.26±0.31 vs 5.28±0.32,P<0.01)。结论:CGRP可使糖尿病性ED大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞表型从合成型向收缩型转化。     

阴茎包埋对海绵体内勃起通路的影响

目的 观察阴茎包埋对海绵体内勃起通路的影响.方法 通过建立大鼠隐匿阴茎模型获得实验标本,分2、4、6个月组进行观测.各阶段中包括包埋组、假手术组和正常组.采用紫外分光光度计检测海绵体内一氧化氮合酶(NOS)的活性,免疫组织化学法显示雄激素受体(AR)在海绵体内的表达水平.结果 3个时间段内包埋组NOS活性分别为1.79、1.67、1.24 U/mg·prot,与正常组和对照组比较,酶活性降低随包埋时间延长逐渐显著(2个月组P>0.05,4个月组P<0.05,6个月组P<0.01),但包埋对各阶段大鼠阴茎海绵体内AR表达水平无影响.结论 阴茎包埋可直接影响勃起通路中最重要的神经递质一氧化氮合成的关键酶-NOS的活性来影响勃起通路,且这种影响与阴茎包埋时间正相关.     

彩色多普勒超声在血管性阴茎勃起功能障碍诊断中的应用

目的评估阴茎海绵体注射后彩色多普勒超声对男性血管性阴茎勃起功能障碍（ED）患者诊断作用。方法47例ED患者经阴茎海绵体注射PGE1 30μg诱导勃起后行彩色超声多普勒检查左、右海绵体动脉血流指标,包括收缩期最大流速（PSV）,动脉舒张末期血流速度（EDV）,阻力指数（RI）。结果非血管性ED组41例（87.2%）,其中左、右海绵体动脉PSV分别〉25 cm/s者33例,左右海绵体动脉PSV相加〉50 cm/s者8例。动脉性ED组2例（4.25%）,左右海绵体动脉PSV均〈25 cm/s,背深静脉未见血流。静脉性ED组4例（8.51%）。结论阴茎海绵体注射血管活性药物后多普勒彩色超声对男性血管性ED检查是一种微创而准确的方法。     

泌乳素瘤性ED大鼠阴茎组织nNOS表达及超微结构变化的初步研究

目的:采用已烯雌酚(DES)诱导建立大鼠垂体泌乳素瘤勃起功能障(P-ED)模型,并研究泌乳素瘤ED大鼠阴茎n NOS表达及超微结构的变化。方法:取雄性Wistar大鼠,分为生理盐水对照组10只、花生油对照组10只及模型组20只。模型组腹腔内注射DES建立泌乳素瘤模型,8周后进行阿扑吗啡(APO)试验测定阴茎勃起功能筛选出P-ED大鼠模型。取垂体行病理学检查,并测定垂体质量、血清泌乳素(PRL)及睾酮(T)浓度。免疫组化法测定阴茎组织n NOS表达的变化,透射电镜观察阴茎海绵体组织超微结构变化。结果:APO试验共筛选出P-ED大鼠模型15只。与生理盐水及花生油对照组相比,注射DES 8周时大鼠垂体质量显著升高[(46.7±15.5)mg vs(11.7±2.4)、(12.4±2.3)mg,P均0.05)];血清PRL浓度显著升高[(1 744.9±304.5)ng/ml vs(11.5±2.4)、(10.6±1.9)ng/ml,P均0.01)];FT浓度降低[(1.54±0.46)ng/ml vs(3.11±1.08)、3.04±1.11)ng/ml,P均0.05)]。与生理盐水及花生油对照组相比,注射DES 8周时大鼠阴茎勃起次数显著减少(16.7%vs 100%、vs 87.5%,P0.05)。透射电镜下,8周时阴茎海绵体内皮细胞、平滑肌细胞等均有显著改变。与生理盐水及花生油对照组相比,P-ED组8周时阴茎组织n NOS表达平均光密度值(MOD)显著减少(0.024±0.011 vs 0.066±0.019、0.058±0.021,P均0.05)。结论:阴茎组织超微结构的变化及n NOS表达减少可能是泌乳素瘤大鼠发生ED的主要机制。     

胫骨干骨折的手术治疗对策

目的：明确不同固定器械在胫骨干不同骨折类型固定中的特点，以指导临床应用。方法：68例胫骨干骨折，行加压钢板螺钉、交锁髓内钉、单侧外固定架固定后，作临床疗效分析。结果：加压钢板固定组42例，感染5例，骨不连1例，平均愈合时间3．8个月；交锁髓内钉固定组13例，无感染及骨不连，平均愈合时间5．4个月；单侧外固定架组13例，骨不连1例，踝关节背伸受限3例，平均愈合时间4．5个月。结论：胫骨骨折交锁髓内钉固定并发症少，功能恢复好，适用范围广，但要注意及时进行动力加压。加压钢板及外固定架固定应选择各自的最佳适应证，以达到理想的疗效。     

不同方法重建指尖离断静脉回流的疗效分析

目的：探讨不同方法重建指尖离断静脉回流的疗效。方法：2008年3月-2013年2月收治指尖离断患者80例,38例吻合指侧方静脉重建回流,术中吻合动静脉比例1：1或1：2或2：2,平均1：2;22例吻合指腹静脉重建回流,术中吻合动静脉比例1：1;20例未吻合静脉,术中仅吻合1条动脉,行侧切口或甲床放血。观察各组治疗效果。结果：吻合指侧方静脉组手指全部成活,无一例发生回流障碍;吻合指腹静脉组19例发生静脉危象,其中4例手指坏死;未吻合静脉组20例均发生回流障碍,其中6例手指坏死。58例获随访,随访时间6~28个月。吻合指侧方静脉组32例,指尖外形佳、指腹饱满;吻合指腹静脉组14例,指体轻度萎缩,指甲生长不平整;未吻合静脉组12例,指体萎缩明显。吻合指侧方静脉组指甲生长近平整,长度长于其他两组[（14.4±3.2）mm比（12.5±2.3）mm和（12.2±2.2）mm],远侧指间关节活动度大于其他两组[（63±5）°比（48±3）°和（45±7）°],两点分辨觉小于其他两组[（4.6±0.4）mm比（7.1±1.2）mm和（7.3±0.6）mm],感觉级别高于其他两组[S（3.45±0.39）级比S（2.57±0.42）级和S（2.55±0.49）级],差异均具有显著性（P〈0.05）。吻合指腹静脉组和未吻合静脉组在指甲长度、运动和感觉方面差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：吻合指侧方静脉能有效解决指尖再植静脉回流问题,可避免回流障碍,成活率高,促进指甲生长,可恢复 DIPJ 活动度及感觉。     

膝关节后交叉韧带断裂治疗临床分析

目的 对35例膝关节后交叉韧带断裂治疗进行临床分析,重点探讨了有关交叉韧带断裂的治疗问题。方法 经明确诊断后,分析采用胫骨附着处撕脱骨折复位固定手术治疗26例、早期髌韧带中1／3移植重建3例、单纯长腿石膏固定6例。结果 本组病例全部进行随访,随访时间13个月－5年,胫骨附着处撕脱骨折复位固定及髋韧带中1／3移植重建29例为优良、单纯长腿石膏固定6例为差。结论 后交叉韧带断裂后应该及时给予手术修复;膝后外侧手术入路,操作简单,暴露充分;少于3个月的陈旧性病例仍适应手术治疗。