亚砷酸钠对人正常肝细胞凋亡及Bax和Bcl-2 mRNA和蛋白表达的影响

目的探讨亚砷酸钠对人正常肝(L-02)细胞凋亡及Bax、Bcl-2 m RNA和蛋白表达的影响。方法将L-02肝细胞分别暴露于含0(对照)、50、100、150μmol/L亚砷酸钠的培养基中暴露24 h。采用MTT法检测L-02肝细胞的存活率,采用流式细胞术检测L-02肝细胞凋亡率,采用RT-PCR的方法检测Bax、Bcl-2 m RNA相对表达情况,采用Westernblotting方法检测L-02肝细胞中Bax、Bcl-2蛋白的表达情况。结果与对照组相比,各浓度亚砷酸钠染毒组L-02细胞的存活率均较低,凋亡率均较高,差异均有统计学意义(P0.05);且随着亚砷酸钠染毒浓度的升高,L-02细胞的存活率呈下降趋势,而凋亡率上升趋势。与对照组相比,各浓度亚砷酸钠染毒组L-02细胞中Bcl-2、Bax m RNA和蛋白的表达水平均较高,100μmol/L亚砷酸钠染毒组Bcl-2 m RNA/Bax m RNA值也较高,而150μmol/L亚砷酸钠染毒组Bcl-2 m RNA/Bax m RNA值及50、150μmol/L亚砷酸钠染毒组Bcl-2蛋白/Bax蛋白值均较低,差异均有统计学意义(P0.05)。结论亚砷酸钠可抑制L-02肝细胞的生长,诱导细胞凋亡的发生;其机制可能与Bcl-2家族的激活有关。     

乙醇对心肌细胞凋亡及凋亡相关基因Bcl-2和Bax表达的影响

目的 研究乙醇对心肌细胞凋亡及凋亡相关基因Bcl-2和Bax表达的影响.方法 将雄性昆明种小鼠随机分为4组,每组6只,分别给予10%,20%,30%的乙醇和生理盐水腹腔注射,每日1次,连续30 d,通过心肌细胞的核固红-结晶紫和免疫组织化学染色,分析细胞凋亡及凋亡相关Bcl-2）和Bcl相关蛋白（基因--B细胞淋巴瘤/白血病-2基因（B-cenlymphoma/leukemia-2,Bcl-associated xprotein,Bax）的表达.结果实验组部分心肌细胞核染色质凝集,染为蓝紫色;定量分析显示,实验组异常的心肌细胞核明显多于对照组（P＜0.01）.实验组心肌细胞中Bcl-2的表达弱于对照组（P＜0.01）,且分布不均;而实验组心肌细胞中Bax的表达明显增强（P＜0.01）,可见棕色粗大颗粒.结论 心肌细胞凋亡在乙醇对心肌影响的发生机制上发挥一定的作用;随着乙醇浓度的增加,心肌细胞的凋亡征象愈加明显;乙醇引起的心肌细胞凋亡与凋亡相关基因Bcl-2和Bax的异常表达有关.     

急性胰腺炎时腺泡细胞凋亡与Bcl-2表达

目的：探讨急性胰腺炎（AP） 时腺泡细胞凋亡与Bcl-2 表达的关系.方法：SD 大鼠30 只,随机分为假手术组（A 组）,急性水肿性胰腺炎组（B 组）,急性出血坏死性胰腺炎组（C 组）.采用逆行胰胆管穿刺注射法建立急性水肿性与出血坏死性胰腺炎模型.检测造模后12 h 各组的血清淀粉酶活性、腹水情况、胰腺组织大体及镜下病理改变与评分、腺泡细胞凋亡指数（AI）、Bcl-2 蛋白表达情况.结果：⑴ C 组血清淀粉酶活性、腹水量、大体及镜下病理评分显著高于B 组（P〈0.05）,Bcl-2 阳性率、腺泡细胞AI 显著低于B 组（P〈0.05）.⑵ B、C 组中腺泡细胞AI 与大体及镜下病理评分均呈显著负相关关系（P〈0.05）.结论：AP 时腺泡细胞的凋亡是机体的一种自我保护机制,Bcl-2 参与了腺泡细胞凋亡的调控.     

高压氧联合rh-EPO对窒息新生大鼠心肌细胞Bcl-2/Bax表达的影响

目的探讨高压氧联合rh-EPO对窒息新生大鼠心肌细胞Bcl-2/Bax表达的影响,为临床治疗新生儿窒息后心肌损害提供分子理论依据。方法选取新生3~7 d的Wistar大鼠40只为研究对象,随机分为对照组、窒息组、rh-EPO组、高压氧组、高压氧联合rh-EPO组各8只,分别给予相应的干预措施。病理学检查及半定量分析常规HE染色,光镜下观察心肌病理改变。对各组心肌细胞采用免疫组织化学染色法检测Bcl-2/Bax蛋白表达。结果新生大鼠心肌细胞病理学观察显示:高压氧联合rh-EPO组心肌细胞结构基本正常,细胞界限欠清晰,心肌纤维排列基本正常;Bcl-2/Bax蛋白表达阳性细胞胞浆呈棕黄色染色。窒息组阳性细胞最多,高压氧联合rh-EPO组阳性细胞较少。结论新生大鼠窒息后采用高压氧与rh-EPO治疗,两者产生协同作用,通过增加Bcl-2表达、减少Bax表达而发挥心肌保护作用,Bcl-2/Bax比值明显增加。     

氢醌对人白血病细胞凋亡及相关蛋白Bcl-2、Bax及Caspase-3表达的影响

目的 研究氢醌对白血病细胞株U937细胞凋亡及相关蛋白Bcl-2、Bax及Caspase-3表达的影响。方法 用不同浓度的氢醌处理U937细胞24 h、48 h后,采用MTT法来检测细胞增殖抑制率;经瑞-吉染色后,观察细胞形态变化;采用流式细胞仪检测细胞凋亡;采用免疫印迹法检测Bcl-2、Bax及Caspase-3蛋白表达。结果 (1)U937细胞的增殖抑制率随氢醌作用时间及浓度的增加而增加,呈时间-剂量依赖性(P<0.05);(2)氢醌作用后,部分细胞体积增大,胞浆中有空泡,胞核发生畸形;(3)流式细胞术结果显示,细胞凋亡率随着氢醌作用时间及浓度的增加而增加,呈时间-剂量依赖性(P<0.05);(4)免疫印迹结果显示,与空白组相比较,染毒48h时,细胞Bax蛋白的表达量增加(P<0.05),而Bcl-2蛋白表达量减少(P<0.05),Bcl-2/Bax比值下降(P<0.05),染毒24 h时,细胞Caspase-3蛋白的表达量增加(P<0.05);与染毒24 h各组相比较,染毒48 h时细胞Caspase-3蛋白的表达量随时间延长呈增加趋势(P<0.05)。结论 氢醌可以诱导U937细胞凋亡,其机制可能与调控凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及Caspase-3的表达有关。     

黄芩苷对急性胆道感染大鼠血清炎症指标及肝细胞损伤的影响

目的探讨黄芩苷(baicalin,BAI)对急性胆道感染(ABTI)大鼠血清炎症指标及肝细胞损伤的影响。方法选取80只雄性SD大鼠采取胆总管注入大肠埃希菌制备ABTI动物模型,随机分为模型组、BAI低剂量(BAI-L)组、BAI中剂量(BAI-M)组和BAI高剂量(BAI-H)组,BAI-L、BAI-M和BAI-H组分别接受10、25、50 mg/kg的BAI灌胃处理,每日1次,连续1周。另选取20只大鼠仅胆总管注入生理盐水作对照。比较各组大鼠血清炎症因子水平、血浆内毒素水平、肝脏相关指标及凋亡指标(Bcl-2和Bax)水平。结果与对照组比较,模型组大鼠的血清炎症因子、血浆内毒素、肝脏相关指标及Bax mRNA水平均升高,而Bcl-2 mRNA水平均降低(P<0.05);与模型组相比,BAI-L组、BAI-M组和BAI-H组的血清炎症因子、血浆内毒素、肝指数、肝功能指标、肝组织脂质及Bax mRNA水平均降低,而Bcl-2 mRNA水平升高(P<0.05); BAI-H组以上指标均优于BAI-L组和BAI-M组(P<0.05)。结论 BAI可降低ABTI大鼠血清炎症指标,并减轻肝细胞损伤程度,且改善效果与剂量有关,可能与其改善炎症及肝细胞凋亡有关,在ABTI防治中有一定应用前景。     

老年急性胆道感染的护理

目的 探讨老年急性胆道感染的临床护理方法.方法 总结1999年4月～2006年4月收治的128例急性胆道感染老年病人的临床护理.结果 临床治愈124例,其中手术治愈44例,非手术治疗84例,死亡4例,无护理并发症.结论 充分评估病情,针对老年病人特点,制定完善的护理计划和落实各项措施,积极做好术前术后护理,是降低手术风险、减少并发症、提高治愈率的关键.     

急性胰腺炎时腺泡细胞凋亡与Bax表达

目的：探讨急性胰腺炎（AP）时腺泡细胞凋亡与Bax表达的关系。方法：SD大鼠30只,随机分为假手术组（A组）,急性水肿性胰腺炎组（B组）,急性出血坏死性胰腺炎组（C组）。采用逆行胰胆管穿刺注射法建立急性水肿性与出血坏死性胰腺炎模型。检测造模后12h各组的血清淀粉酶活性,腹水情况,胰腺组织大体、镜下病理改变与评分,腺泡细胞凋亡指数（AI）,Bax蛋白表达情况。结果：⑴C组血清淀粉酶活性,腹水量,大体及镜下病理评分显著高于B组（P〈0.05）,Bax阳性率,腺泡细胞AI显著低于B组（P〈0.05）。⑵B、C组中腺泡细胞AI与大体及镜下病理评分均呈显著负相关关系（P〈0.05）。结论：AP时腺泡细胞的凋亡是机体的一种自我保护机制,Bax参与了腺泡细胞凋亡的调控。     

大豆异黄酮对大鼠卵巢Bcl-2和Bax蛋白表达影响

目的 通过动物实验研究,观察B-cell lymphoma 2(Bcl-2)蛋白和Bcl-2-associated X protein(Bax蛋白)在大鼠卵巢组织中的表达情况。方法 选用2月龄Wistar雌性大鼠50只,按体重随机分成5组:空白对照组(基础饲料),大豆异黄酮低、中、高剂量组[含量分别为100、200、300 mg/(kg.bw)]、雌激素组(EC)(己烯雌酚0.5 mg/kg),实验周期为7周;采用酶联免疫吸附实验(ELISA)测定各组大鼠卵巢组织中Bcl-2蛋白和Bax蛋白水平。结果 空白对照组、大豆异黄酮低、中、高剂量组、雌激素组Bcl-2蛋白浓度分别为(1.41±0.19)、(1.43±0.20)、(2.07±0.58)、(2.42±0.32)、(2.95±0.78)pg/mL,组间差异均无统计学意义;Bax蛋白浓度分别为(33.64±5.83)、(30.02±9.44)、(17.33±4.21)、(9.67±1.95)、(10.69±4.95)pg/mL,其中大豆异黄酮高剂量组与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 大豆异黄酮可抑制大鼠Bax蛋白表达,对Bcl-2蛋白表达无影响。     

二甲基甲酰胺致人肝细胞凋亡及其对Bcl-2及Bax和Caspase-3表达的影响

目的 初步探讨二甲基甲酰胺(DMF)对正常成人肝细胞的致凋亡作用和对Bcl-2、Bax、Caspase-3表达的影响.方法 以终浓度为0、50、100、150、200mmol/L的DMF作用于正常成人肝细胞12 h后,应用流式细胞术和western blotting法检测细胞凋亡率及Bcl-2、Bax和Caspase-3表达的变化.结果 与阴性对照组比较,各DMF剂量组凋亡率明显上升,差异有统计学意义(P＜0.01).随着染毒剂量的增加,肝细胞凋亡率上升,呈现剂量-反应关系.且染毒后随着DMF剂量的增加,Bcl-2表达水平下降,差异有统计学意义(P＜0.01).与对照组比较,Bax 表达水平无明显变化,Bcl-2/Bax比值随着DMF剂量增加而下降,200mmol/L剂量组与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).在DMF150、200mmol/L剂量组可见到Caspase-3切割活化.结论 DMF可诱导肝细胞发生凋亡,其机制可能与Bcl-2/Bax比值表达下调、Caspase-3发生切割活化有关.     

老年急性胆道感染非手术治疗的临床分析

目的探讨老年急性胆道感染的非手术治疗方法,以提高老年急性胆道感染的治疗水平。方法选取2011年4月-2013年8月老年急性胆道感染患者224例,随机分为对照组和观察组,每组各112例,取两组患者胆汁标本行细菌培养和药物敏感试验,对照组患者单纯敏感抗菌药物治疗,观察组患者在对照组基础上给予消炎利胆片口服,对两组患者治疗效果、住院时间进行评价和统计。结果 224例患者共检出病原菌231株,其中革兰阴性菌191株占82.68%,以大肠埃希菌最为常见,革兰阳性球菌38株占16.45%,真菌2株占0.87%;革兰阴性菌对哌拉西林、环丙沙星、左氧氟沙星以及磺胺甲噁唑/甲氧苄啶敏感性较低,均<60.00%,而对阿米卡星敏感性较高,为95.81%,此外对美罗培南和头孢他啶的敏感率>80.00%;革兰阳性菌对红霉素敏感性较低为52.63%,而对替考拉定、万古霉素、氯霉素以及氨苄西林的敏感性较高,均>90.00%;观察组患者治疗效果明显优于对照组,且住院时间明显短于对照组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论对于老年急性胆道感染患者采取非手术治疗时应根据细菌培养结果选择敏感抗菌药物,在敏感抗菌药物治疗的基础上给予中成药消炎利胆片口服,有利于提高患者的治疗效果,并缩短疗程。     

Bcl-2和Bax蛋白及基因在铝致神经细胞毒性作用中的表达

目的 通过研究Bcl-2和Bax蛋白及基因在铝致神经细胞毒性作用中的表达,以探讨铝对体外培养大鼠神经元细胞的神经毒性作用.方法 用不同浓度氯化铝体外培养大鼠神经元细胞染毒,用原位缺口末端标记（TUNEL）法和扫描电镜观察检测细胞凋亡,免疫组化法测定Bcl-2和Bax蛋白含量,RT-PCR法测定Bcl-2和Bax基因表达量.结果 （1）TUNEL法检测DNA碎片随染铝剂量的加大而增加,扫描电镜观察到了凋亡细胞典型的出芽现象和细胞裂解及凋亡小体的释放.（2）免疫组化和RT-PCR法检测Bcl-2蛋白含量及基因表达量随染铝剂量的加大而减少（P＜0.01,r=-0.695;P＜0.05,r=-0.647）,反之,Bax蛋白含量及基因表达量随染铝剂量的加大而增加（P＜0.01,r=0.676;P＜0.01,r=0.794）.Bcl-2/Bax与铝的作用剂量有关（P＜0.01,r=-0.655;P＜0.01,r=-0.777）.结论 低剂量铝暴露能够诱导神经元凋亡,Bcl-2和Bax蛋白及基因表达在铝致神经细胞凋亡的过程中发挥了重要的调控作用.     

非手术治疗老年急性胆道感染的临床研究

目的 探讨非手术治疗和手术治疗老年急性胆道感染的临床效果,以期提高临床治疗水平.方法 回顾性分析2010年2月-2013年2月118例老年急性胆道感染患者临床资料,根据不同治疗方法分成两组,对照组60例,采用非手术治疗;观察组58例,予以手术治疗,比较两组患者治疗后的临床效果、并发症的发生率、病死率等的差异.结果 对照组的住院时间为(14.8±6.3)d,症状缓解时间为(7.2±2.3)d,平均医疗费用为(2521.8±994.4)元,复发例数为7例占11.67％,死亡11例占18.33％,有并发症7例占11.67％;观察组的住院时间为(12.9±5.9)d,症状缓解时间为(4.1±1.6)d,平均医疗费用为(5792.4±1193.3)元,复发2例占3.45％,死亡3例占5.17％,有并发症4例占6.90％,两组患者在住院时间比较差异无统计学意义,而在其他指标上比较差异有统计学意义(P＜0.05);对照组愈合13例占21.67％,显效19例占31.67％,有效17例占28.33％,无效11例占18.33％,总有效率为81.67％;观察组愈合38例占65.52％,显效11例占18.97％,有效7例占12.07％,无效2例占3.44％,总有效率为96.56％,两组患者临床疗效比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 尽管保守和手术治疗老年急性胆道感染均有较好的临床效果,但只要掌握好适应证,手术治疗对患者的预后更佳.     

蒺藜果皂苷对大鼠脑缺血后神经细胞凋亡及相关蛋白表达的影响

目的观察蒺藜果皂苷对大鼠脑缺血后的细胞凋亡率和相关蛋白（Bcl-2、Bax）的表达,探讨蒺藜果皂苷对大鼠脑缺血损伤的保护作用。方法60只Wistar大鼠随机分成5组：空白对照组、模型对照组、阳性药物舒血宁组、蒺藜果皂苷高剂量组和蒺藜果皂苷低剂量组。线栓法阻断一侧大脑中动脉,缺血24h制成脑缺血模型。流式细胞仪检测细胞凋亡率和蛋白的表达水平。结果模型组的细胞凋亡率和Bax蛋白表达明显高于阳性药物组和蒺藜果皂苷高、低剂量组,而模型组的Bcl-2蛋白表达明显低于阳性药物组和蒺藜果皂苷高、低剂量组（P〈0.05）。结论蒺藜果皂苷能够抑制细胞凋亡,增加Bcl-2蛋白的表达而降低Bax蛋白的表达水平。     

阿托伐他汀对急性心肌梗死后大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的 观察阿托伐他汀对大鼠急性心梗后心肌细胞凋亡及对caspase-3基因表达的影响.方法 取雄性SD大鼠50只,按数字表法随机分为3组:假手术组,生理盐水梗死模型对照组和阿托伐他汀组[10mg/(kg· d)].除假手术组只开胸外,其余大鼠术前连续灌胃3d,第4天结扎冠状动脉左前降支造成急性心肌梗死模型.伊文氏蓝和TTC染色法确定缺血和梗死心肌的范围.原位末端标记检测细胞凋亡,RT-PCR检测caspase-3 mRNA的表达.结果 与对照组比较,阿托伐他汀组可明显减少心肌梗死面积,明显减少心肌细胞凋亡和心肌内caspase-3 mRNA基因表达.结论 阿托伐他汀可减少大鼠急性心梗后心肌细胞凋亡及抑制caspase-3 mRNA基因.     

甘肃省儿童急性下呼吸道感染病原流行病学特征

目的  了解2012-2015年甘肃省儿童急性下呼吸道感染(acute lower respiratory tract infection, ALRTI)病原流行病学特征。 方法  收集2012-2015年甘肃省10家哨点医院458例感染ALRTI患儿的病例监测数据, 通过描述性流行病学方法分析各病毒和细菌感染状况与流行病学特征。 结果  458例儿童ALRTI患者中男女比例为1.81:1, 病毒的阳性检出率为33.62%(95%CI:29.28%~37.97%), 其中呼吸道合胞病毒的阳性检出率居于首位(12.23%); 细菌的阳性检出率为24.84%(95%CI:20.04%~29.65%), 其中分离出肺炎链球菌阳性的患者检出率最高(18.47%); 不同性别儿童病毒阳性检出率与细菌阳性检出率均没有差别(均有P > 0.05);不同年龄儿童病毒阳性检出率无差别(χ²=5.980, P=0.050), 而细菌阳性检出率不同(χ²=12.078, P=0.002), 不同季节病毒感染阳性检出率和细菌感染阳性检出率均有差异(均有P < 0.05), 经Logistics回归分析得, 季节、年龄和哨点医院是儿童ALRTI病毒的影响因素(均有P < 0.05), 而哨点医院和年份是影响细菌感染的因素(均有P < 0.05)。 结论  甘肃省0-14岁儿童ALRTI以呼吸道合胞病毒、流感病毒和副流感病毒为主, 细菌感染以肺炎链球菌和流感嗜血杆菌为主, 其中病毒感染人数较细菌感染人数多, 病毒和细菌感染存在相同的发病高峰。     

胆道感染患者胆汁标本分离的病原体及其耐药性

目的了解胆道感染患者胆汁中常见病原体及其对抗菌药物的耐药性,为临床选择抗菌药物治疗提供参考。方法 对2011年5月-2013年5月收集的胆汁标本,采用法国生物梅里埃公司的VITEK2 COMPACT全自动微生物鉴定仪进行细菌鉴定和药敏试验,并对药敏结果采用WHONET5.3软件进行统计分析。结果共收集445份胆汁标本,其中阳性标本254份,阳性率57.08%。共分离病原体306株,其中革兰阴性（G-）菌231株(75.49%),革兰阳性（G+）菌58株(18.95%),真菌17株(5.56%)。引起胆道感染常见的G-菌依次为大肠埃希菌(21.89％)、肺炎克雷伯菌(18.30％)、铜绿假单胞菌(13.40％); G+菌为粪肠球菌(5.56％)、凝固酶阴性葡萄球菌(3.59％)、屎肠球菌(3.59％)等。G-菌对亚胺培南、厄他培南耐药率最低,其次为头孢替坦、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦;对喹诺酮类、青霉素类、头孢菌素类有较高的耐药性。G+菌对万古霉素耐药率最低,对利奈唑胺耐药率较低,对其他抗菌药物都有不同程度的耐药(30％～90％)。结论胆道感染细菌以G-杆菌为主;定期获得可靠的细菌耐药性动态监测数据,对临床经验性治疗和制定针对分离菌的治疗方案均有重要意义。     

胆总管结石患者ERCP术后早期胆道感染的动态预测工具开发及验证

目的 开发胆总管结石患者经内镜逆行性胰胆管造影术(ERCP)后发生早期胆道感染(PEEBI)的预测工具,以期辅助临床进行ERCP术前决策和术后早期个性化干预。 方法 采用观察性双向队列研究方法,选取某医院接受ERCP的胆总管结石住院患者,分别采用有向无环图(DAGs)和最小绝对收缩与选择算子法(LASSO) 进行基于logistic回归的PEEBI预测,比较预测模型,并进行内外部验证。 结果 2020年1月1日—2023年9月30日,共纳入接受ERCP的胆总管结石患者2 121例,其中77例(3.6%)发生了PEEBI,且主要集中在术后前2天(66.2%)。影响PEEBI的主要因素为非医源的患者相关因素,即糖尿病(OR=2.43, 95%CI: 1.14~4.85)、胆管恶性肿瘤(OR=3.95, 95%CI: 1.74~8.31)和十二指肠乳头憩室(OR=4.39, 95%CI: 1.86~9.52)。DAGs模型较LASSO模型的综合判别能力高3.0% (P=0.007),且DAGs模型外部验证中的区分性能(D=0.133,P=0.894)和校准性能(χ²=5.499,P=0.703)均表现良好。 结论 本研究构建的DAGs模型具有良好的预测性能,临床可在该工具的协助下采取针对性的围手术期早期预防措施,以减少PEEBI的发生。     

急性上呼吸道感染患者病毒流行病学特征分析

目的 探讨急性上呼吸道感染患者病毒流行病学特征,为临床诊治提供参考.方法 选取2017年1月 ～2020年1月上海市浦东新区肺科医院门诊或住院的急性上呼吸道感染患者1306例为研究对象,采用直接荧光免疫法对患者鼻咽拭子样本进行呼吸道病毒检测.分析各病毒检出情况、临床特征、在不同季节、不同年龄中分布情况.结果 1306例...