胰管引流对慢性胰腺炎发病过程中转化生长因子β1表达的影响

为了阐明慢性胰腺炎(chronic pancreatitis,CP)胰腺广泛纤维化形成机理及探讨非手术方法引流阻塞胰管的治疗机理，本研究对转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF—β1)在慢性胰腺炎(CP)过程中及胰管引流后的表达进行动态观察．探讨其在CP胰腺纤维化形成过程中的作用及胰管引流后的变化．     

他克莫司和环孢素A对大鼠肾脏转化生长因子及其受体表达影响的比较

目的比较他克莫司（FK506）和环孢素A（CsA）所致慢性肾毒性大鼠模型肾组织转化生长因子目（TGF-1β）及其受体（TβRⅡ）的表达。方法分别以FK506和CsA灌胃复制大鼠FK506和CsA慢性肾毒性模型，观察大鼠的一般情况，计算肌酐清除率，观察大鼠肾组织病理变化，以免疫组织化学法检测肾组织中TGF-1β、TβR Ⅰ、TBRⅡ蛋白表达的变化，原位杂交法检测肾组织中TβR Ⅰ mRNA及TβR Ⅱ mRNA表达的变化。结果CsA组和FK506组的肾小管、小管间质和人球小动脉均有损伤，但CsA组的损伤明显较FK506组重（P〈0．05）。正常对照组大鼠肾组织中仅见少量TGF-[3，、TβR I和T13RⅡ表达，CsA组和FK506组的TGF-β，、TβR I和TβR Ⅱ表达均明显增加，但FK506组稍轻；正常对照组大鼠肾组织中仅见少量TβR I mRNA、TβR Ⅱ mRNA表达，CsA组和FK506组TβR I mRNA、TβR Ⅱ mRNA明显表达，但FK506组较CsA组为轻。结论FK506的慢性肾毒性弱于CsA，它所诱导的大鼠肾组织中TGF-β，及其受体TβR I和TβR Ⅱ的表达均低于CsA。     

胃癌组织smad4基因和转化生长因子β1及其受体的表达及意义

目的 研究胃癌组织中smad4 mRNA、转化生长因子β、（TGF－β1）、转化生长因子β1受体（TGF－βR1）的表达特征及其意义。方法 常规石蜡包埋切片行smad4 mRNA原位杂交染色及TGF－β1、TGF－βR1免疫组织化学染色。结果 smad4 mRNA、TGF－β1、TGF－βR1在胃腺癌、黏液腺癌和印戒细胞癌中阳性率无明显差异;组织学分级I组、癌细胞未浸润至深肌层和淋巴结未转移的组织smad4 mRNA、TGF-β1、TGF－βR1阳性率明显高于组织学分级Ⅲ级、癌细胞浸润至深肌层或浆膜层和淋巴结转移组织,差异均有显或非常显性意义;smad4 mRNA、TGF－β1、TGF－βR1在胃癌中表达密切相关。结论 smad4 mRNA、TGF－β1和TGF－βR1 3表达与胃癌发生发展、生物学行为和预后可能有关,可作为重要的生物学标记物。     

胃癌组织smad_4基因和转化生长因子β1及其受体的表达及意义

目的研究胃癌组织中smad4mRNA、转化生长因子β1(TGFβ1)、转化生长因子β1受体(TGFβR1)的表达特征及其意义。方法常规石蜡包埋切片行smad4mRNA原位杂交染色及TGFβ1、TGFβR1免疫组织化学染色。结果smad4mRNA、TGFβ1、TGFβR1在胃腺癌、黏液腺癌和印戒细胞癌中阳性率无明显差异;组织学分级Ⅰ级、癌细胞未浸润至深肌层和淋巴结未转移的组织smad4mRNA、TGFβ1、TGFβR1阳性率明显高于组织学分级Ⅲ级、癌细胞浸润至深肌层或浆膜层和淋巴结转移组织,差异均有显著或非常显著性意义;smad4mRNA、TGFβ1、TGFβR1在胃癌中表达密切相关。结论smad4mRNA、TGFβ1和TGFβR13者表达与胃癌发生发展、生物学行为和预后可能有关,可作为重要的生物学标记物。     

地黄提取物对Smads信号通路影响的实验研究

目的：探讨中药地黄对大鼠肾纤维化的作用及可能的机制。方法：将实验动物分成正常对照组、模型组、地黄组,采用一次性尾静脉注射阿霉素复制大鼠肾病模型。治疗8周后观察尿蛋白、尿素氮、血肌酐及肾脏病理改变;同时观测肾皮质中转化生长因子β受体Ⅰ（TβRⅠ）、转化生长因子β受体Ⅱ（TβRⅡ）和Smad2、7的表达。结果：地黄组各项指标与模型组相比,均有统计学差异,形态学观察也显示其组损害轻于模型组。且模型组肾组织TβRⅠ、Smad2 mRNA显著上调,地黄组肾组织TβRⅠ、Smad2 mRNA显著下调,而模型组肾组织Smad7蛋白表达显著下调。同时TβRⅡ mRNA的表达无明显变化。结论：在阿霉素肾病大鼠模型中,地黄提取物对大鼠肾脏有一定的保护作用,其信号转导机制至少部分与它能下调TβRⅠ、Smad2及上调Smad7的表达有关。     

肾衰2号方抑制残余肾TGF-β1与CTGF mRNA的过度表达

目的：探讨肾衰2号方通过抑制转化生长因子-β1（transforming growth factor beta1,TGF-β1）、结缔组织生长因子（connective tissue growth factor,CTGF）mRNA的过度表达而减轻肾脏纤维化的作用机制。方法：制作大鼠5/6肾切除慢性肾衰竭大鼠肾纤维化模型,分别给予肾衰2号方及主要单味药党参、桃仁灌胃,并设科素亚对照组。治疗2个月后用RT-PCR的方法检测CTGF和TGF-β1 mRNA的表达。结果：在5/6肾切除慢性肾衰竭肾纤维化模型组中表现为TGF-β1、CTGF mRNA的过度表达（P〈0.01）,经肾衰2号方治疗后TGF-β1、CTGF mRNA的表达降低（P〈0.01）,科素亚也有一定的作用,而党参、桃仁的作用不明显。结论：肾衰2号方减轻肾纤维化的机制在于抑制细胞因子TGF-β1、CTGF mRNA的过度表达。     

水蛭素对皮肤增生性瘢痕成纤维细胞bFGF及TGFβ_1表达的影响

目的：检测水蛭素对人皮肤瘢痕成纤维细胞碱性成纤维细胞因子（basic fibroblast growth factor,bFGF）、转化生长因子β1（transforming growth factor beta 1,TGFβ1）表达的影响,探讨水蛭素抑制瘢痕形成的作用及机制。方法：体外培养并鉴定人皮肤瘢痕成纤维细胞,实时荧光定量RT-PCR和免疫细胞化学法分别检测不同浓度水蛭素作用人成纤维细胞24h后,bFGF、TGFβ1的mRNA和bFGF、TGFβ1蛋白表达水平。结果：浓度为0.156～2.5 U/L的水蛭素可下调瘢痕成纤维细胞TGFβ1mRNA、蛋白的表达,同时上调bFGF的mRNA、蛋白的表达,不同浓度组间比较,差异有统计学意义。水蛭素可抑制增生性瘢痕成纤维细胞分泌TGFβ1,促进其分泌bFGF。结论：水蛭素抑制瘢痕可调节bFGF、TGFβ1分泌,由此抑制成纤维细胞的生长、增殖并进一步抑制瘢痕形成。     

外源性转化生长因子-β1对骨髓间充质干细胞TβRⅠ、TβRⅡ表达的影响

目的探讨体外培养的大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)中转化生长因子(TGF)β1受体的表达情况和外源性TGFβ1对MSCsTGFβ1受体表达的影响。方法四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法法检测不同浓度TGFβ1对MSCs增殖的影响,对硝基苯磷酸盐(PNP)法检测不同浓度TGFβ1以及同一浓度不同作用时间对MSCs碱性磷酸酶(ALP)活性的影响,免疫细胞化学染色观察MSCs中TGFβ1受体表达情况,Westernblot检测TGFβ1作用早期TβRⅠ、TβRⅡ蛋白表达的变化。结果外源性TGFβ1对MSCs增殖的抑制、ALP活性的促进具有剂量依赖性,在5μg/L时达到平台期;在5μg/LTGFβ1刺激下,随着刺激时间延长,ALP表达量逐渐增加,与对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05);MSCs同时表达TβRⅠ、TβRⅡ,在TGFβ1刺激早期TβRⅡ蛋白表达量无明显变化(P>0.05),TβRⅠ随TGFβ1刺激时间延长,蛋白表达量逐渐增加(P<0.05),TβRⅠ/TβRⅡ比例增加,与ALP的表达变化呈正相关。结论在TGFβ1刺激早期,MSCs通过TβRⅠ、TβRⅡ表达量和TβRⅠ/TβRⅡ相对比例的阶段性、适应性的改变来调节自身对TGFβ1的反应性,启动成骨分化。在此过程中,TβRⅠ作为一限制性因子发挥着重要的作用。     

真皮模板对深度烧伤患者创面愈合过程中转化生长因子β1及其受体和信号转导蛋白Smad 3表达的影响

目的观察真皮模板对深度烧伤创面愈合过程中转化生长因子(TGF)β1及其受体和信号转导蛋白Smad3表达的影响。方法20例烧伤患者四肢Ⅲ度创面切痂后分为两部分,进行同体对照试验其一移植真皮模板(异体脱细胞真皮基质) 自体刃厚皮片,设为模板干预组;另一部分单纯移植自体刃厚皮片,为对照组。分别在术后1、2、3、4周取患者移植创面组织标本进行免疫组织化学染色,采用图像分析系统测定标本中TGFβ1、TGFβ1受体(TβR)Ⅰ、TβRⅡ及Smad3蛋白的阳性表达率。结果移植术后1—4周两组创面组织切片中均可见TGFβ1、TβRⅠ、TβRⅡ、Smad3蛋白呈阳性表达。随着创面逐渐愈合,四者的阳性表达率均逐渐减少,术后1周模板干预组TGFβ1的表达率为(13.08±4.65)%,4周时为(9.03±1.89)%。相同时相点下模板干预组各项指标的阳性表达率均低于对照组(P<0.05)。结论真皮模板与自体刃厚皮复合移植可降低深度烧伤创面TGFβ1、TβRⅠ、TβRⅡ、Smad3蛋白的表达水平,这可能是真皮模板减轻创面瘢痕增生的机制之一。     

冬虫夏草菌粉对5/6肾大部切除大鼠肾脏纤维化的抑制作用及机制

目的 探讨冬虫夏草菌粉对5/6肾大部切除术大鼠肾脏纤维化的抑制作用及其可能机制.方法 30只雄性SD大鼠随机分为3组:假手术组(Sham组,n=10)、5/6肾大部切除模型组(SNx组,n=10)以及5/6肾大部切除+冬虫夏草菌粉干预组(CS组,n=10).术前及术后4、8、12周分别检测大鼠体质量、尿蛋白量变化,并于术后第12周末处死大鼠,检测血尿素氮、肌酐变化,取肾组织切片行HE、Masson染色观察肾脏病理变化,免疫组化观察转化生长因子β1(TGF-β1)及其Ⅰ型受体(TβR Ⅰ)、Ⅱ型受体(TβR Ⅱ)的表达,免疫荧光观察E-c adherin、α-SMA的表达,Western印迹法检测肾脏组织TGF-β1、TβR Ⅰ、TβR Ⅱ、磷酸化(p)Smad2/3、Smad7、E钙黏蛋白(E-cadherin)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达.结果 术后CS组大鼠的体质量高于SNx组,尿蛋白量及血尿素氮、血肌酐低于SNx组.肾脏组织病理分析显示,CS组肾小球硬化、肾小管间质损伤程度均显著低于SNx组(均P＜0.01).CS组TGF-β1、TβR Ⅰ、TβR Ⅱ、p-Smad2/3蛋白表达量均显著低于SNx组(均P＜0.05),E-cadherin蛋白表达量显著高于SNx组(P＜0.05),α-SMA蛋白表达量显著低于SNx组(P＜0.05),Smad7蛋白表达量显著高于SNx组(P＜0.05).结论 冬虫夏草菌粉对5/6肾大部切除大鼠肾脏纤维化具有明显的抑制作用,其机制可能是与其抑制TGF-β1及其下游信号通路以及抑制EMT的发生有关.     

膀胱癌转移生长因子β1过表达的临床意义

目的探讨膀胱移行细胞癌TGFβ1蛋白及mRNA异常表达的临床意义. 方法采用SP法检测74例膀胱癌组织中TGFβ1蛋白的表达;QRT-PCR方法检测43例膀胱癌TGFβ1 mRNA转录水平. 结果膀胱癌TGFβ1蛋白表达阳性率为89.2%,T2～T4浸润性膀胱癌TGFβ1过表达率为83.8%,明显高于Ta～T1表浅性膀胱癌(33.3%),P<0.05;复发转移组30例中TGFβ1过表达29例,而无瘤存活组44例中过表达30例,P<0.005;膀胱癌组织TGFβ1 mRNA含量明显高于正常膀胱组织. 结论 TGFβ1过表达与膀胱癌浸润生长方式和预后等有密切关系,可能成为评价膀胱癌预后的有效指标之一.     

转化生长因子β1对大鼠原代肾小球系膜细胞血管内皮生长因子表达的影响

目的：探讨原代培养的大鼠肾小球系膜细胞血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）的表达及转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）对其表达的影响。方法：采用RT-PCR和Westernblot方法检测大鼠原代培养的肾小球系膜细胞VEGF表达及不同浓度、不同时间的TGF-β1刺激对VEGF表达的作用。结果：原代培养的大鼠肾小球系膜细胞表达VEGF164、120mRNA，TGF-β1呈时间依赖性增加其表达，在12h表达最高，分别为刺激前3．17、2．925倍，有统计学差异（P〈0．001）。在剂量反应曲线上，2ng／ml TGF-β1刺激作用最强，VEGF164、120mRNA表达分别为未刺激组的2．82、2．45倍，有统计学差异（P〈0．001）。与VEGF mRNA表达一致，大鼠原代肾小球系膜细胞仅见VEGF164蛋白表达，2ng／ml TGF-β1呈时间依赖性的增加VEGF 164蛋白表达，24h达高峰，为刺激前的2．37倍。结论：促进肾小球系膜细胞VEGF表达可能是TGF-β1介导肾脏损害发生、发展的机制之一。     

膀胱癌转化生长因子β1过表达的临床意义

目的　探讨膀胱移行细胞癌TGFβ1蛋白及mRNA异常表达的临床意义。 　方法　采用SP法检测 74例膀胱癌组织中TGFβ1蛋白的表达 ;QRT PCR方法检测 43例膀胱癌TGFβ1mRNA转录水平。　结果　膀胱癌TGFβ1蛋白表达阳性率为 89.2 % ,T2 ～T4 浸润性膀胱癌TGFβ1过表达率为 83.8% ,明显高于Ta～T1表浅性膀胱癌 (33.3% ) ,P <0 .0 5 ;复发转移组 30例中TGFβ1过表达 2 9例 ,而无瘤存活组 44例中过表达 30例 ,P <0 .0 0 5 ;膀胱癌组织TGFβ1mRNA含量明显高于正常膀胱组织。　结论　TGFβ1过表达与膀胱癌浸润生长方式和预后等有密切关系 ,可能成为评价膀胱癌预后的有效指标之一。     

三七总皂苷对阿霉素肾病大鼠肾组织转化生长因子-β1表达的影响

目的：探讨三七总皂苷对阿霉素肾病大鼠肾组织转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）表达的影响。方法：将45只Wistar雄性大鼠，适应性喂养1周，测尿蛋白阴性后，随机分为正常组、假手术组、模型组、苯那普利组、三七总皂苷组，每组9只。每周测大鼠体重，每2周收集大鼠24h尿量，测24h尿蛋白定量；10周后处死大鼠，分离血清检测BUN、Scr、Cho、TG、TP和AIb，应用HE、Masson染色，观察肾组织病理学改变，免疫组化方法观察三七总皂苷对阿霉素肾病大鼠肾组织TGF—Bl表达的影响。结果：三七总皂苷能够减轻阿霉素肾病大鼠肾组织病理损害，增加阿霉素肾病大鼠体重，减少尿蛋白排泄、提高血TP和Alb水平，降低BUN和scr水平改善。肾功能；正常组及假手术组肾脏固有细胞胞浆中有较少的TGF-pl表达；三七总皂苷组TGF-pl的表达与模型组相比显著减少（P〈0．05）。结论：三七总皂苷能减轻阿霉素肾病大鼠的肾脏病理损害、降低BUN、Scr、调节TG、TP和Alb水平，对阿霉素肾病大鼠肾功能有一定的保护作用，其机制可能是通过降低阿霉素肾病大鼠肾组织TGF-p1的表达而发挥作用。     

褪黑素对重症急性胰腺炎的保护作用

目的 探讨褪黑素(melatonin,MT)对重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)大鼠胰腺组织中Smac/DIABLO、XIAP mRNA表达的影响及可能机制.方法 54只SD大鼠随机分成假手术(SO)组、重症急性胰腺炎(SAP)组以及MT干预SAP(MS)组,每组18只.通过胰胆管逆行注射3.5%脱氧胆酸钠方法 制备大鼠SAP模型,MS组制造模型前30 min腹腔注射MT.收集各模型组3 h、6 h、12 h标本,观察胰腺组织,检测胰腺组织细胞凋亡.实时定量(real-time)PCR分析胰腺组织中Smac/DIABLO、XIAP mRNA的表达.结果 SAP组和MS组胰腺组织损伤较SO组严重.与SAP组相比,在3 h、6 h、12 h各时点MS组胰腺病理损伤明显减轻,细胞凋亡指数下降(P<0.05),胰腺组织中Smac/DIABLO mRNA表达下调(P<0.05),XIAP mRNA表达上调(P<0.05).结论 MT能明显改善SAP胰腺组织损伤,对急性胰腺炎有保护作用;这可能与调节Smac/DIABLO、XIAPmRNA的表达有关.     

转化生长因子β1诱导肾间质成纤维细胞表型转化及其对结缔组织生长因子基因表达的影响

目的 研究转化生长因子β1（transforming growth factor beta-1,TGF-β1）诱导大鼠正常肾间质成纤维细胞（NRK-49F）表型转化过程中结缔组织生长因子（connective tissue growth factor,CTGF）基因表达的变化.方法 以不同浓度的TGF-β1（0、0.5、1、2、5、10 ng/ml）刺激NRK-49F细胞,分别应用MTT比色法、Western Blot、Northern Blot方法,检测TGF-β1刺激后肾间质成纤维细胞的增殖、Ⅰ型、Ⅲ型前胶原mRAN的表达、细胞表型标志物α-SMA mRNA及蛋白质表达、CTGFmRNA的表达变化.结果 1 ng/ml浓度以上TGF-β1能显著促进NRK-49F细胞增殖,上调Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA的表达水平,诱导肌成纤维细胞表型标志α-SMA mRNA及蛋白质的表达,显著上调CTGF mRNA的表达水平（P＜0.01或P＜0.05）;以上效应均呈浓度依赖性.同时CTGF mRNA表达水平的增高与细胞表型转化的程度相一致.结论 TGF β1能诱导肾间质成纤维细胞发生表型转化,并促进了细胞增殖及细胞外基质的合成;该效应与TGF β1显著上调CTGF的基因表达一致.     

TGF-1在胃癌组织中表达及作用的研究进展

胃癌的发生是多步骤过程,包括癌基因激活和/或抑癌基因失活而导致的细胞增殖增强与凋亡抑制[1]。转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)广泛存在于各种正常或癌变的组织细胞中,参与细胞的增殖、分化及凋亡等多种病理生理过程。TGF-β1在多种恶性肿瘤组织中表达上调,通过抑制免疫系统杀伤肿瘤细胞作用的方式,导致     

梗阻性肾病大鼠肾组织periostin的表达及意义

目的 研究梗阻性肾病大鼠肾组织periostin表达的变化及其与肾间质纤维化的相关性.方法 18只SD雄性大鼠按随机数字法分成3组:假手术组、模型组和贝那普利组,每组6只.用单侧输尿管结扎法建立梗阻性肾病大鼠模型.RT-PCR检测各组大鼠肾组织periostin和转化生长因子(TGF) β1的mRNA表达;ELISA检测各组大鼠肾组织periostin、血管紧张素Ⅱ( AngⅡ)、TGF- β1的蛋白水平;HE及Masson染色观察肾间质变化;免疫组化检测肾组织Ⅰ型胶原蛋白.结果 与假手术组比较,模型组大鼠肾组织periostin、TGF-β1、AngⅡ蛋白表达显著升高(均P＜0.05).与模型组比较,贝那普利组上述蛋白表达显著降低,差异有统计学意义(均P＜0.05).与假手术组比较,模型组大鼠肾组织periostin和TGF- β1的mRNA表达显著上调,差异有统计学意义(均P＜0.05),而贝那普利组periostin和TGF- β1的mRNA表达则显著下调(均P＜0.05).肾组织periostin蛋白表达与AngⅡ、TGF-β1和Ⅰ型胶原的蛋白表达以及肾间质纤维化积分均呈正相关(r值分别为0.652、0.781、0.776和0.825,均P＜0.05).结论 梗阻性肾病大鼠肾组织periostin呈高表达,其可能参与了梗阻性肾病肾间质纤维化进程.     

肌腱愈合过程中转化生长因子β1基因表达的变化

目的研究兔屈趾肌腱Ⅱ区伤口愈合过程中转化生长因子β1（transforming growth factorpβ1，TGF-β1）基因表达的变化。方法取成年新西兰大白兔60只，体重4．0～4．5kg，将左前中趾屈趾深肌腱切断并采用标准Kessler缝合法修复作为实验组，分别于术后1、7、14、21、28及56d获取肌腱及腱鞘进行观察，每个时间点取10只；同一动物的右前肢正常肌腱及腱鞘作为对照组。采用原位杂交和免疫组织化学染色分析TGF—β1的表达情况。结果原位杂交结果示：实验组TGF—β1mRNA在术后1d开始上调，14～21d达高峰，56d保持较高水平；对照组存在TGF—β1mRNA的表达，但表达水平较低；实验组各时间点TGF—β1mRNA表达与对照组比较，差异均有统计学意义（P〈O．05）。免疫组织化学染色：实验组术后1d，TGF—β1蛋白信号的表达增加，14～21d达高峰，56d仍保持一定水平；对照组术后各时间点存在TGF—β1蛋白信号表达，但表达水平较低。结论正常无损伤的肌腱和腱鞘能产生TGF—β1，当肌腱损伤后，细胞因子被激活，增加的细胞因子主要由肌腱细胞与腱鞘细胞产生，与肌腱的内、外源性愈合机制是一致的。