白芍经皮透过液对小鼠皮肤成纤维细胞损伤模型的影响

目的研究白芍经皮透过液对小鼠皮肤成纤维细胞损伤模型的影响。方法体外分离培养小鼠皮肤成纤维细胞,D-半乳糖致其损伤,加入2、10、20、100、200 mg/mL白芍经皮透过液。然后,CCK-8法检测细胞活性,β-半乳糖苷酶染色检测细胞衰老,流式细胞术检测细胞周期与凋亡。结果与模型组比较,白芍经皮透过液组细胞活力、S期细胞比例显著增加(P0.05),β-半乳糖苷酶染色阳性细胞显著减少(P0.05),G_0/G_1期比例、细胞凋亡率显著下降(P0.05);与阳性对照组(含0.25 mol/L D-半乳糖和0.05%维生素E的完全培养基)比较,白芍经皮透过液10、20、100 mg/mL组上述指标显著改善(P0.05),在20 mg/mL时最明显。结论白芍经皮透过液可通过增强细胞活性、减少细胞周期阻滞、增加S期细胞比例、降低细胞凋亡来延缓D-半乳糖诱导的小鼠皮肤成纤维细胞损伤,对其具有保护作用。     

不同浓度葛根素溶液对人皮肤成纤维细胞生物学效应的影响

[目的]观察不同浓度的葛根素溶液对人皮肤成纤维细胞(HDF)生物学效应的影响。[方法]体外培养人皮肤成纤维细胞,选用葛根素溶液100、200、300、400、500μg/m L五个不同的药物浓度,观测葛根素溶液在5个药物浓度下对HDF的生物学效应的影响。[结果]与对照组相比较,药物浓度为100、200、300、400μg/m L的葛根素溶液,对体外培养的HDF的生物学效应无影响(P0.05);药物浓度为500μg/m L的葛根素溶液,对体外培养的HDF的增殖有抑制作用(P0.05),且对HDF的细胞膜有一定的损伤作用(P0.05)。[结论]药物浓度500μg/m L的葛根素溶液对体外培养的HDF有抑制增殖和细胞膜损伤的作用,此药物浓度可作为干预HDF的作用剂量,对瘢痕组织的治疗将起到一定作用。     

改构型酸性成纤维细胞生长因子对紫杉醇诱导的人胚肝细胞L-O2及人胚肾细胞293损伤的保护作用

目的 观察紫杉醇对人胚肝细胞L-O2及人胚肾细胞293的毒性作用,及加入改构型酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)后对紫杉醇引起的肝肾细胞损害的保护,并探讨其可能机制.方法 用紫杉醇诱导人胚肝细胞L-O2及人胚肾细胞293损伤,同时加入aFGF对肝、肾细胞进行保护,并测定培养上清液中的SOD,MDA,LDH值,MTT法测定肝、肾细胞活性.结果 紫杉醇在体外对人胚肝细胞L-O2、人胚肾细胞293有一定的毒性作用,使用aFGF对肝、肾细胞进行保护后,IC50值有明显的提高,SOD值与未加aFGF组相比明显升高,而MDA,LDH值明显降低(P<0.05).结论 aFGF可有效对抗紫杉醇引起的肝、肾细胞损伤.     

扇贝贝壳水提物对蛋白酶和成纤维细胞的体外作用研究

目的:体外研究扇贝贝壳水提物的皮肤保护作用.方法:提取扇贝贝壳的水溶性有机成分,体外考察对皮肤保护相关的蛋白酶活性以及成纤维细胞TIG-101增殖(MTT法)和胶原蛋白合成(染色法)的影响,评价扇贝贝壳所含生物活性物质对皮肤的保护作用.结果:扇贝贝壳水溶性有机成分可增强糜蛋白酶活性,抑制弹性蛋白酶和胰蛋白酶活性,并可促进皮肤上皮细胞增殖(P＜0.05)和胶原蛋白合成增加(P＜0.05).结论:扇贝贝壳水溶性有机成分具有保护皮肤组织的生物活性.     

成纤维细胞成骨作用的研究

成纤维细胞（ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ）是结缔组织中最重要的一类细胞。近年来,成纤维细胞在免疫系统疾病发生发展中的作用,尤其是在组织纤维化中所起的作用渐受到重视;成纤维细胞与骨形态发生蛋白（ＢＭＧ）及成纤维细胞生长因子（ＦＧＦ）等骨生长因子的关系也逐渐引起人们的兴趣。在骨折修复过程中,以往成纤维细胞的作用被认为是仅能分泌合成胶原纤丝,形成纤维骨痂;近年来,成纤维细胞在骨折愈合过程中参与骨折的修复、形成骨组织的作用已被证实。［１,２］成纤维细胞是除成骨细胞、软骨细胞之外具有成骨潜能的另一类重要细胞。１　…     

红景天苷、白藜芦醇和人参提取物对中波紫外线诱导人二倍体成纤维细胞损伤的保护作用

目的:探讨红景天苷、白藜芦醇及人参提取物不同时间处理对中波紫外线UVB诱导人胚肺二倍体成纤维细胞(2BS)损伤的保护作用.方法:采用UVB照射2BS细胞不同时间,将5μmol/L红景天苷、10μmol/L白藜芦醇及25μ g/ml人参提取物提前2小时加入细胞或者于照射后加药,培养一定时间后采用MTT法测定细胞活力.结果:红景天苷和白藜芦醇于照射前加药或者照射后加药均能有效上调UVB照射后的2BS细胞活力(P＜0.05),而人参提取物提前加药能有效逆转UVB照射后2BS细胞活力的下降(P＜0.05),于UVB照射后给药则无此作用(P＞0.05).结论:三者均能有效保护2BS细胞,减少UVB诱导的损伤,红景天苷和白藜芦醇对细胞照射后的损伤修复可能具有一定的促进作用.     

白藜芦醇对长波紫外线辐射后皮肤成纤维细胞增殖及诱导型一氧化氮合酶表达的影响

 目的 探讨长波紫外线（ UVA ）对人皮肤成纤维细胞增殖及诱导型一氧化氮合酶（ inducible nitric oxide synthase , iNOS ）表达的影响,探讨白藜芦醇对此影响的防护作用及其机制。 方法 5 J·cm^-2 UVA 照射原代培养的成纤维细胞后予以 0.01 , 0.1 mmol·L^-1 浓度的白藜芦醇干预,四甲基偶氮唑盐 (MTT) 法检测细胞增殖活性,半定量逆转录聚合酶链反应（ RT-PCR ）和蛋白质印迹（ Western-blot ）方法检测细胞 iNOS mRNA 和蛋白的表达。 结果 UVA 辐射后成纤维细胞的增殖活性（ 0.345 ± 0.020 ）较正常对照组（ 0.581 ± 0.038 ）降低, iNOS mRNA/ 蛋白的表达水平［（ 0.834 ± 0.087 ） / （ 0.804 ± 0.021 ）］较正常对照组 ( 未见表达 ) 显著增加。 UVA 辐射后立即予以 0.01 或 0.1 mmol·L^-1 浓度的白藜芦醇处理发现成纤维细胞的增殖活性上升而 iNOS mRNA/ 蛋白的表达下调,与单独 UVA 辐射组相比,差异有统计学意义 (<>P<0.05) 。 结论 UVA 可抑制体外培养的真皮成纤维细胞的增殖,诱导 iNOS 的表达,而白藜芦醇对 UVA 辐射损伤的成纤维细胞有保护作用。     

三七总皂苷对H2O2损伤的皮肤成纤维细胞的保护作用

目的探讨三七总皂苷对H2O2诱导的人皮肤成纤维细胞氧化应激损伤的保护作用。方法用不同浓度(12.5～50μg.ml-1)的三七总皂苷预处理细胞24 h,100μmol.L-1 H2O2干预4 h,MTT法测定细胞活力,流式细胞技术检测凋亡细胞百分率,紫外分光光度计测定超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性和丙二醛(MDA)的含量,羟脯氨酸比色法检测胶原含量。结果三七总皂苷可显著降低H2O2对皮肤成纤维细胞的生长抑制率,减少细胞凋亡数量,降低MDA含量,增强SOD和GSH-Px的活性,增加胶原含量,各指标差异显著(P<0.05,P<0.01)。结论三七总皂苷可拮抗H2O2诱导的皮肤成纤维细胞的氧化应激损伤,保护机制与其抗氧化作用有关。     

茶多酚提取物EGCG对人皮肤成纤维细胞自然老化及慢性光损伤的影响

 目的观察表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechingallate,EGCG)对正常生理代谢状态下人皮肤成纤维细胞(hu-man skin fibroblast,HSF)自然老化以及经长、中波紫外线(UVA及UVB)多次辐射后HSF光损伤的影响。方法分离新生儿包皮获得原代HSF,将其分为正常生理代谢传代实验组(A组)和多次UV照射实验组(B组)。预实验选定EGCG有效作用质量浓度25 mg.L^-1。A组细胞包括加入EGCG干预组和空白对照组,共孵育80 d。B组HSF细胞分组包括:空白对照组、EGCG干预组、多次UVA组、多次UVA+EGCG组、多次UVB组及多次UVB+EGCG组,其中UVA和UVB均采用文献提示日常生理剂量,每天照射,持续照射2周。采用组织化学染色法检测细胞中衰老相关β-半乳糖苷酶的表达量,观察细胞自然老化及照光后的老化情况;采用流式细胞仪测定细胞周期及细胞凋亡率。结果A组中,EGCG组的β-半乳糖苷酶阳性细胞数较正常对照组下降了47.60%(P<0.05)。B组中正常细胞组及EGCG组均只见少量的β-半乳糖苷酶阳性细胞。其余几组阳性细胞比率为:多次UVB组<多次UVA组P<0.05)。日常剂量UV多次辐射后可上调HSF的凋亡率,经EGCG处理的两组细胞凋亡率与单纯UVB组和单纯UVA组比较分别增加了87.08%和56.92%。结论EGCG可减缓生理代谢状态下的HSF老化;EGCG可进一步增加UV多次辐射后的细胞老化及细胞凋亡,此可能是EGCG减轻自然老化去除多次光损伤不同机制所致。     

艾灸对大鼠皮肤创伤成纤维细胞和KGF表达的影响

目的：研究艾灸对大鼠创伤皮肤组织成纤维细胞和角化细胞生长因子（KGF）表达的影响,探讨艾灸对大鼠皮肤创伤修复的作用。方法：建立大鼠背部皮肤创伤模型,采用随机数字表法,将24只大鼠分为治疗组和模型组。根据治疗时间的不同,又将每组分为1天、3天、7天共3个时间点,每个时间点4只大鼠。治疗组进行艾灸治疗,每次30 min,每日1次。以HE染色法检测1天、3天、7天3个时间点修复组织内成纤维细胞数;以免疫组化法检测1天、3天、7天等3个时间点修复组织成纤维细胞生长因子的表达情况。结果：大鼠创面愈合指数治疗组高于模型组（P〈0.05）。大鼠皮肤创面成纤维细胞数,7天治疗组皮肤创面成纤维细胞数高于模型组（P〈0.05）;3天两组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。大鼠创面KGF表达情况,3天模型组KGF表达呈弱阳性,治疗组表达呈阳性;7天模型组KGF表达呈阳性,治疗组表达呈强阳性。结论：艾灸能促进大鼠皮肤创伤愈合,其机制可能与调节不同时间内创面组织成纤维细胞数和KGF含量有关。     

不同浓度川芎嗪对人翼状胬肉成纤维细胞的作用

目的观察川芎嗪对体外培养的人翼状胬肉成纤维细胞的抑制作用。方法收集眼科临床手术切除的人翼状胬肉标本,消化分离成纤维细胞,进行体外细胞培养。分别在pH为7．40和pH为600的条件进行,以无血清RPMI1640培养液配制终浓度为4．0mg／ml、2．0mg／ml、1．0mg／ml、0．5mg／ml和0．25mg／ml的川芎嗪药液,0.02％的丝裂霉素C（MMC）作为阳性对照组,pH为740和／或pH为6．00的RPMI1640培养液作正常对照组,对体外培养的胬肉成纤维细胞进行作用。通过光镜观察对细胞进行计数;四甲基偶氮唑盐（MTT）技术检测显示细胞存活率,间接免疫荧光技术检测细胞波形蛋白（Vimentin）的表达。结果细胞计数和MTT法检测结果显示,在pH为740的条件下,与正常1640培养液组比较,4．0mg／ml的川芎嗪对体外培养的人翼状胬肉成纤维细胞均有明显的抑制作用（P〈0．001）。在pH为6．00的条件下,与正常1640培养液组比较,不同浓度的川芎嗪和pH为6．00的1640培养液对人翼状胬肉成纤维细胞均有明显的抑制作用,与pH为6．00的1640培养液组比较,4．0mg／ml的川芎嗪对人翼状胬肉成纤维细胞的抑制作用明显强于其他浓度的川芎嗪,0.5mg／ml和0.25mg／ml的川芎嗪可明显促进人翼状胬肉成纤维细胞的生长（p〈0.001）。结论川芎嗪对人翼状胬肉成纤维细胞的生长具有双重作用,较高浓度的川芎嗪（4．0mg／ml）对人翼状胬肉成纤维细胞的生长有抑制作用。较低浓度的川芎嗪（0.5mg／ml、0.／ml）在pH为6．00的条件下对人翼状胬肉成纤维细胞的生长有保护作用。     

生肌液体外诱导成纤维细胞成骨作用的研究

目的：探讨成纤维细胞体外成骨的诱导因素，体外获取大量成骨型成纤维细胞，为骨组织修复提供种子细胞。方法：分离、纯化肉芽组织成纤维细胞，使其生长在含生肌液60g/L、FN40mg/L的条件培养液中。采用生物化学、组织化学和显微观察的方法，检测成纤维细胞的成骨标志。结果：生肌液和FN促进成纤维细胞增殖、胶原合成、骨钙素分泌；生肌液可使成纤维细胞由梭形向圆形或多突形转化，细胞重叠成多层结构，其表面有钙盐堆积，逐渐呈云雾状物质，不断融合扩大形成不透光的结节，经趋骨性四环素特异标记证明为新生骨组织。结论：生肌液可诱导成纤维细胞成骨。     

肉苁蓉多糖对人成纤维细胞的增殖作用

肉苁蓉（cistanchedeserticola）为列当科植物的干燥带鳞片的肉质茎，具有补肾阳、益精血功能用于治疗阳萎及不孕症[1]。我院药理教研室的研究还证实本药具有调节免疫功能，抗肿瘤及消除自由基的作用[2,3,4]。为了进一步探讨该药在其他方面特别在创伤愈合中的作用，我们用肉苁蓉多糖对体外培养成纤维细胞的影响进行了初步观察，报道如下：1材料与方法：肉苁蓉多糖（灰白色粉剂），由江苏省中医药研究所植化室提供，实验前用双蒸水配成3.125μg／ml，6．25μg／ml，12．5μg／ml，25μg／ml，50μg／ml和100μg／ml溶液高压灭菌待用。MEM培…     

嫩肤液对老年大鼠皮肤成纤维细胞含量的影响

目的:研究嫩肤液对老年大鼠皮肤成纤维细胞含量的影响,从而了解该药抗皮肤衰老的作用机理.方法:将40只老龄大鼠随机分为药物组、阳性组、模型组和正常组4组,每组10只,前3组背部脱毛后分别涂抹嫩肤液、维生素E胶囊、生理盐水,连续涂敷30天后处死动物,取背部涂药处皮肤及尾腱,经消化后测定OD值,以评价嫩肤液的抗衰老作用.结果:各组成纤维细胞含量与模型(盐水)组相比较,均有显著性差异(P<0.01);药物(嫩肤液)组成纤维细胞含量与正常组间无显著性差异(P>0.05);药物(嫩肤液)组与阳性(维E)组间成纤维细胞含量有显著性差异(P<0.05).结论:嫩肤液能够对成纤维细胞产生刺激作用,促进成纤维细胞分裂、合成及其分泌胶原蛋白和弹性蛋白的能力,使老化的皮肤恢复弹性活力,从而达到抗衰老的目的.     

改构型酸性成纤维细胞生长因子对白花丹素诱导的人胚肝细胞L-O2损伤的保护作用

目的研究改构型酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)对白花丹素引起的人胚肝细胞L-O2损伤的保护作用及机理。方法用白花丹素体外诱导肝细胞损伤,同时用aFGF对肝细胞进行保护,测定培养上清液中的SOD,MDA,LDH值,MTT法测定肝细胞活性。结果与损伤组比较,aFGF对白花丹素引起的胚肝细胞损伤有明显的保护作用(P<0.05)。结论 aFGF可保护肝细胞,其机制可能与其拮抗自由基产生有关。     

中药复方水提液对人牙周膜成纤维细胞增殖和总蛋白含量影响的实验研究

目的:观察中药复方水提液在不同浓度下对人牙周膜成纤维细胞(HPLF)增殖和总蛋白含量的影响.方法:运用细胞生物学方法,通过MTT法和考马斯亮蓝染色法测定HPLF增殖和总蛋白含量的变化.结果:中药复方水提液浓度在1×10-7～1×10-3g/mL时,均能明显促进HPLF增殖,与对照组比较.有显著性差异,且在1×10-3g/mL浓度时作用效应最大;中药复方水提液浓度在1×10-4～1×10-3g/mL,能够明显增加HPLF总蛋白的合成,与时照组比较,有显著性差异.在此范围内,中药复方水提液的作用显示出明显的浓度依赖效应和时间依赖效应.结论:中药复方水提液可促进HPLF增殖及蛋白质合成.     

红景天甙对经UVA/UVB辐射的成纤维细胞生长形态的影响

目的 从细胞生长形态和凋亡率上观察红景天甙对体外培养人皮肤成纤维细胞生长的影响,以及红景天甙对长波紫外线(UVA)、中波紫外线(UVB)辐射的成纤维细胞生长的干预作用.方法 观察成纤维细胞经UVA、UVB辐射后细胞生长形态变化以及加入红景天甙的影响:采用光镜下成纤维细胞计数和流式细胞仪检测对照组及实验组成纤维细胞凋亡率的变化.结果 UVA、UVB辐射成纤维细胞后,细胞出现解体、排列紊乱、脱颗粒现象;加入红景天甙后,体外培养成纤维细胞未出现明显的数量上和形态学改变;红景天甙在最终浓度为200μg·mL-1时,从细胞数量和形态上观察,体外培养成纤维细胞经UVA、UVB照射未出现明显的改变.体外培养的成纤维细胞经UVA、UVB辐射后,出现明显的凋亡峰,凋亡率升高;应用红景天甙后凋亡率下降.表明红景天甙对成纤维细胞由紫外线引起的凋亡具有保护作用.结论 从细胞形态学上观察,UVA、UVB辐射对皮肤成纤维细胞具有明显的损伤作用,红景天甙有保护作用.     

粉防己碱对人皮肤成纤维细胞生长的抑制作用观察

观察粉防己碱对体外培养人皮肤成纤维细胞生长的影响。结果表明：粉防己碱能抑制成纤维细胞生长，抑制作用与浓度、时间呈正相关。据此结果，作者认为粉防己碱在增生性瘢痕的防治中有应用价值。