附子不同配伍对SD正常大鼠和阳虚模型大鼠心脏毒性作用的实验研究

目的:在前期研究的基础上,选用附子的经典配伍药对(附子配伍干姜、附子配伍白芍)研究其对SD正常大鼠和阳虚模型大鼠心脏毒性作用的差异,以期为中医辨证毒理学假说提供一定的理论支持。方法:64只大鼠随机分为8组,空白对照组(A组),阳虚模型组(B组),附子给药组(C组),附子模型给药组(D组),附子芍药给药组(E组),附子芍药模型给药组(F组),附子干姜给药组(G组),附子干姜模型给药组(H组)每组8只,观察用药前后各组大鼠一般状态、体重、心脏系数及相关生化指标、病理学改变的影响,比较各组之间大鼠毒性反应的不同。结果:正常大鼠肌注醋酸泼尼松后均出现心脏毒性反应,造模成功。阳虚模型大鼠给药后附子给药组、附子干姜给药组毒性反应降低,且附子干姜配伍优于附子单独给药;附子白芍给药组LDH、CK含量仍高于空白对照组。结论:不同证候的动物模型附子的毒性反应存在差异,附子药物的毒性与证候以及配伍密切相关。     

附子及其炮制品对大鼠心脏毒性的影响

目的基于心电图变化和血清生化指标的改变,探讨附子及炮制品对大鼠心脏毒性的影响。方法根据附子不同炮制品和给药剂量对雄性SD大鼠分组大鼠,按体质量随机分为10组,即空白组,生附子低、中、高3个剂量组,白附片低、中、高3个剂量组,黑顺片低、中、高3个剂量组,每组各10只。十二指肠注射给药,对比给药前后大鼠Ⅱ导联心电图(ECG)的变化,并检测大鼠血清中肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)和B-型脑钠肽(BNP)水平。结果附子及其炮制品给药后,可短时间内显著增加心率HR、抬高S-T段、延长P-R间期(P0.05或P0.01),对QRS波群、Q-T间期的影响无统计学意义(P0.05)。生附子中剂量组和白附片中剂量组可显著提高CK和LDH水平(P0.05),附子及炮制品对BNP影响无统计学差异(P0.05)。结论生附子可引起ECG异常变化,导致不同程度的心肌损伤,并呈现一定的量-毒关系,炮制品黑顺片、白附片导致的心电异常较生附子减弱,有助于阐明炮制减毒的科学内涵。     

附子配伍贝母对大鼠心、肝、肾脏毒性的实验研究

目的 研究附子配伍贝母对大鼠心、肝、肾功能和形态学的影响.方法 取健康SD大鼠40只随机分为正常组(A组)、附子组(B组)、贝母组(C组)、附子与贝母合用组(D组),每组10只.各组每日分别按2.5 g/kg灌胃给予生理盐水、附子煎液、贝母煎液、附子与贝母混合煎液,给药组浓度均为200 g/L.第14天停药,称重,采集心脏、肝脏及肾脏标本,计算体质量增长率及心、肝、肾脏指数并观察其形态学改变;心脏取血,测定各组血清LDH,CK,AST,ALT,BUN,Cr含量.结果 体重增长率、肝脏指数各组间均无显著差异;心脏指数D组比A、B、C组有显著升高,肾脏指数D组比C组有显著升高;形态学方面各给药组心肌、肝脏、肾脏均可见不同程度的损伤;AST、ALT的变化各组间无显著性差异,和A组相比,各组LDH明显升高,B组、D组BUN、Cr明显升高(P＜0.05或P＜0.01).结论 给药剂量为2.5 g/kg时,单用附子、贝母对大鼠均有显著的心脏、肝脏和肾脏毒性;附子与贝母配伍用药后对大鼠心、肝、肾脏毒性较单用组明显提高.     

附子白术配伍对大鼠佐剂性关节炎的实验研究

实验观察了附子白术不同配伍比例组对大鼠佐剂性关节炎足肿胀及免疫细胞因子TNF—α和炎性介质NO的影响。结果显示附子白术不同配伍比例组可明显抑制佐剂性关节炎大鼠的继发性足肿胀，降低NO及TNF—α水平，且其不同配伍组之间有显著性差异，附子配伍白术在3：1时效果最佳。     

附子与桂枝配伍对大鼠佐剂性关节炎的实验研究

目的研究附子与桂枝配伍对大鼠佐剂性关节炎镇痛、抗炎、抗自由基损伤等方面的影响。方法采用弗氏完全佐剂局部注射法复制大鼠佐剂性关节炎模型,观察附子、桂枝及其不同配伍比例对佐剂性关节炎大鼠的痛阈、足跖厚度以及血清中NO、SOD、MDA含量的影响。结果单味附子、桂枝及其不同配伍比例均具有镇痛、抗炎、抗自由基损伤等方面的作用,但配伍应用后作用明显优于单味附子或桂枝,表现出明显的配伍优势。结论①附子与桂枝配伍在抗炎、镇痛、抗自由基损伤等方面具有显著的协同增效作用,揭示了其"相须"配伍的科学性。②发挥镇痛、抗自由基损伤作用的最佳配伍比例同为附子桂枝9∶4;发挥抗炎作用的最佳配伍比例为附子桂枝3∶2。     

生川乌配伍瓜蒌对大鼠长期毒性实验研究

目的: 观察生川乌配伍瓜蒌对大鼠长期毒性的影响,探讨该反药对配伍与毒性的关系。 方法: SD大鼠80只随机分为生川乌单行(RA)0.3 g·kg^-1、生川乌与瓜蒌(1:1)配伍(RAFT)0.3,0.1 g·kg^-1生川乌剂量组、空白对照组,每组20只,雌雄各半,连续ig给药30 d,末次给药24 h后,腹主动脉取血,取脏器计算脏器指数,检测心肌酸激酶(CK),乳酸脱氢酶(LDH)、天门冬氨酸氨基转氨酶(AST),丙氨酸氨基转氨酶(ALT)、肾尿素氮(BUN),血清肌酐(Cr)等生化指标,主要组织器官进行病理学检查。余1/3大鼠停药15 d后检测相应指标。 结果: 各给药组雌性大鼠肾脏系数高于对照组、胸腺系数低于对照组、红细胞数高于对照组(P<0.05),各给药组雌雄大鼠血清AST,ALT,LDH及BUN水平高于对照组 (P<0.05或P<0.01),RA组及RAFT 0.3 g·kg^-1组雌性大鼠血清Cr水平高于对照组 (P<0.05或P<0.01);RA组雌性大鼠AST,LDH水平高于RAFT 0.1 g·kg^-1组 (P<0.05或P<0.01);RAFT 0.3 g·kg^-1组雌性大鼠AST,ALT,Cr,LDH水平及雄性大鼠AST水平高于RAFT 0.1 g·kg^-1组 (P<0.05或P<0.01)。主要脏器常规HE染色,RAFT 0.3 g·kg^-1及RA组大鼠心、肝、肾均有一定程度损伤。恢复期末,RAFT及RA组雌性大鼠血清AST,ALT水平及雄性大鼠血清ALT水平高于对照组(P<0.05,P<0.01),RAFT及RA组AST,ALT水平差异无统计学意义。 结论: 在所给剂量下,生川乌对大鼠心、肝、肾有明显毒性,RAFT对大鼠心、肝、肾等器官的毒性与RA组比较无明显差异,RA及RAFT对雌性大鼠毒性强于雄性大鼠。     

配伍生姜对马钱子毒性影响的实验研究

目的 :研究配伍生姜对马钱子毒性的影响。方法 :观察配伍生姜对不同浓度马钱子致小鼠死亡率、脏器质量和脏器系数以及连续给药10 d对肝肾形态的影响。结果:结果表明,配伍生姜可以降低马钱子所致的小鼠死亡率,稳定脏器系数,显著改善单用制马钱子所致的肝细胞水肿、脂肪变性与炎症细胞的浸润,对肾细胞在该段时间内影响较小。结论:提示配伍生姜具有制约马钱子毒性影响的作用。     

附子与天花粉配伍对小鼠的亚急性毒性研究

目的:观察附子、天花粉、附子与天花粉配伍对小鼠的亚急性毒性,以评价附子与天花粉配伍的安全性。方法:给小鼠灌服586 mg/kg的药物,对照组给以等剂量生理盐水,观察小鼠中毒症状,记录小鼠的死亡数、体重、脏器系数。结果:给药组各组与对照组比体重增重差异具有统计学意义(P0. 05);给药组各组的心、肝、脾、肺的脏器指数与对照组比差异无统计学意义(P0. 05),第8组(附子单煎0 min)肾脏系数与对照组比差异具有统计学意义(P0. 05)。结论:附子与天花粉配伍并未增加其相对的毒性,若比较第8组,其合煎毒性较附子单煎肾毒性还有所减小。     

基于代谢组学技术研究参附配伍对大鼠心脏毒性的影响

运用UPLC-Q-TOF/MS技术研究人参与附子配伍对大鼠血清中内源性标记物的影响,旨在发现人参对附子减毒作用的内源性标记物及其分子机制。连续7 d给予健康雄性Wistar大鼠不同配伍的参附水煎液20 g·kg^-1,收集血清,通过主成分分析和偏最小二乘判别法分析参附配伍对内源性代谢物的影响。参附合并组中,谷胱甘肽、磷脂酰胆碱、柠檬酸含量下降,同时抗坏血酸、尿酸、D-半乳糖、色氨酸、L-苯丙氨酸的含量上升。说明参附合煎液中附子对心脏产生了毒性影响。参附合煎组中与空白组对比表现出了类似或者稍弱的趋势,但是大部分并不具有统计学意义。对比参附合煎组与合并组,可以得出参附配伍减毒的科学性。结果可见,人参与附子配伍可以减轻附子的心脏毒性, 柠檬酸、谷胱甘肽、磷脂酰胆碱、尿酸可作为附子造成心脏毒性的潜在标记物。     

附子白术配伍对AA大鼠抗炎免疫作用的实验研究

炮附子与白术配伍是汉代张仲景治疗风寒湿痹证的常用药对。笔者在文献研究的基础上,以附子白术药对在仲景甘草附子汤、白术附子汤、附子汤中的原方配伍比例为依据,对佐剂性关节炎大鼠（Adjuvant Arthritis,AA）进行了免疫学方面的实验研究。报道如下：     

基于大鼠室性早搏心脏毒性的附子质量生物评价方法研究

附子是确有疗效的毒剧类中药,构建关联临床毒副反应的质量评价方法对提高其炮制减毒质控水平和保障临床安全性具有重要意义。该文针对附子可导致室性早搏这一早期心脏中毒反应,构建基于大鼠室性早搏(premature ventricular contractions,PVC)最小中毒量(minimal toxic dose,MTD)测定的附子炮制品质量生物评价方法,通过影响因素考察优化方法学(动物性别、体重、对照品稳定性与供试品稳定性),检测结果的重现性符合药品质量生物评价要求。应用该方法检测生附子及其不同炮制品黑顺片、白附片、蒸附片、刨附片、炮天雄致大鼠室性早搏MTD,结果表明,生附子炮制后MTD均显著升高(P0.05),其中黑顺片、蒸附片、刨附片与白附片的MTD分别为生附子的15.76,22.36,19.65,20.97倍;而炮天雄几乎无毒,用该方法检测不出MTD。该方法可以比较好的反映附子及其炮制品的整体心脏毒性。进一步结合附子炮制品的化学成分分析,发现炮制品中双酯型生物碱乌头碱、新乌头碱、次乌头碱,以及单酯型生物碱苯甲酰乌头原碱与PVC呈显著相关。此外,可能还存在其他与致心律失常相关的未测成分,值得深入研究。上述研究为附子临床早期心脏毒性评价与质量控制提供了整体、综合的方法,可作为化学评价方法的有益补充,为保障附子临床应用的安全性提供了新的方法。     

附子与山茱萸配伍对慢性心力衰竭大鼠的影响

目的探讨附子与山茱萸配伍对慢性心力衰竭大鼠增效减毒作用。方法 ip盐酸阿霉素构建大鼠慢性心力衰竭模型,分别给予附子提取物、山茱萸提取物和附子-山茱萸提取物3周后,检测动物血清脑钠素(BNP)含量,心肌细胞Ca2+-ATP酶和Na~+,K~+-ATP酶活性,镜下观察左心室组织病理学形态变化。结果造模3周后,模型组大鼠普遍出现腹水、消瘦、稀便、弓背等症状体征;左心室射血分数(EF)和左心室短轴缩短率(FS)明显下降;血清BNP水平显著升高;左心室组织出现心肌纤维断裂及心肌细胞变性、坏死等病理改变。连续ig给予附子-山茱萸提取物3周后,大鼠症状及体征明显改善,血清BNP水平下降,心肌细胞Na~+,K~+-ATP酶活性升高,左心室组织病理学形态有明显改善。附子提取物和山茱萸提取物分别连续给药3周,上述指标未见明显改善。结论附子与山茱萸配伍可能通过提高心肌细胞Na~+,K~+-ATP酶活性,改善慢性心力衰竭的心肌能量代谢障碍,提高心力衰竭的心肌活性,起到增效减毒作用。     

附子与干姜配伍对心衰大鼠血流动力学的影响

目的:研究附子与干姜配伍对心衰大鼠血流动力学的影响。方法:采用盐酸普罗帕酮注射液静脉注射法建立心衰大鼠心力衰竭动物模型,用BL420E生物机能实验系统记录血流动力学各项指标。结果:附子与干姜配伍可以加快心衰大鼠的心率、升高左心室内压、提高左心室内压最大上升和下降速率,改善心衰大鼠血流动力学的变化。结论:附子干姜配伍有明显的抗心衰作用。     

煎煮时间对附子毒性的影响研究

目的先煎(久煎)是附子等有毒中药减毒去毒的传统方法 ,但对其安全性缺少有效科学评价。本研究将通过比较不同煎煮时间对附子成分和体内毒性的影响,为其在临床上的安全应用提供科学依据。方法采用高效液相色谱法测定江油附子煎煮0、30、60min后水煎液中3种毒性成分含量变化,并以ICR小鼠进行急性毒性检测。结果附子0min水煎液中乌头碱、新乌头碱、次乌头碱含量分别为97.28、176.28、648μg/g;30min水煎液中3种成分含量分别为2.23、1.87、8.52μg/g;60min水煎液中3种成分含量分别为0.00(检测不到),1.88、2.95μg/g。与空白对照组相比,附子0min和30min水煎液均有毒性,而60min毒性不显著,基本可以定义无毒。结论随着煎煮时间的延长,附子的毒性降低,尽管中乌头碱和次乌头碱仍有少量残留,但属于安全范围。本实验结果证明附子可以通过延长煎煮时间达到减毒的目的,以60 min以上为安全煎煮时间。     

井穴放血和薏苡仁对脑缺血大鼠脑水肿影响的实验研究

目的:观察井穴放血和静脉注射薏苡仁提取液对大脑中动脉栓塞大鼠局灶性脑缺血损伤后存活率、存活时间及脑水肿的影响,并比较两种疗法单用与联合使用的效果.方法:选用雄性SD大鼠,随机分为正常组、假手术组、模型组和3个治疗组:井穴放血组、薏苡仁组及井穴放血加薏苡仁组.用Longa法建立大脑中动脉栓塞模型后分别进行不同的干预,测定48 h后各组大鼠的脑含水量和脑系数,同时统计各组大鼠的存活率及存活时间.结果:井穴放血和中药薏苡仁提取液静脉注射后,大鼠48 h内的存活时间延长,病变侧的脑含水量、脑系数降低,两法同用效果优于单用.结论:井穴放血和薏苡仁有提高脑缺血大鼠48 h存活率的趋势,可延长脑缺血大鼠48 h存活时间,对缺血性脑水肿有一定的改善作用.     

甘草与附子配伍对甘草黄酮溶出影响的实验研究

目的探讨甘草与附子配伍后甘草黄酮含量的变化。方法以甘草苷为对照品,用高效液相色谱法测定甘草及其甘草与附子配伍前后煎煮液中甘草苷的含量。结果甘草苷在4．4—44μ/ml范围内呈良好的线性关系（r＝0．9998）;甘草与附子配伍后合煎比甘草单煎液甘草苷的含量降低。结论甘草与附子配伍,使甘草苷等黄酮类成分的含量降低,为中医配伍提供了物质基础上的依据。     

雷公藤提取物对大鼠心脏长期毒性的影响

目的:观察雷公藤提取物长期用药对大鼠心脏毒性的影响。方法:将SD大鼠随机分为空白对照组和雷公藤提取物低、中、高剂量组17,34,68 mg·kg-1,每组60只。各组ig给药1次/d,连续90 d,分别于给药前(0 d)及给药后15,30,60,90 d测定各组血钾、心电图及心功能指标,并采用HE染色法观察大鼠心肌组织的病理变化。结果:低剂量组与给药前或空白对照组比较血钾、心电图及心功能各指标无明显变化。中剂量组给药后60～90 d出现血钾降低,心电图指标如Q-T间期、S-T间期、QRS间期延长、心率降低和ST段偏移,心功能指标如左室收缩压(LVSP)降低、左室舒张末压(LVEDP)升高、左室内压最大上升/下降速度(±dp/dtmax)降低(P<0.05)。高剂量组在给药后15～30 d上述指标已有明显变化(P<0.05)。HE染色显示,给药后90 d低剂量组大鼠心肌未明显见病理变化,中、高剂量组大鼠心肌有明显损伤。结论:雷公藤提取物连续ig给药90 d后,17 mg·kg-1剂量组对大鼠心脏无明显毒性作用,34,68 mg·kg-1剂量组对大鼠心脏有毒性,且高剂量组毒性作用更为明显。     

附子与甘草不同配伍比例配伍减毒的实验研究

目的:通过平行比较附子及附子与甘草不同配伍比例对附子毒性的影响,观察甘草对附子的解毒作用,并对减毒机制进行探索性的研究。方法:平行比较了附子和附子配伍不同比例甘草对附子小鼠急性毒性,测定其半数致死剂量LD50;平行比较附子和附子配伍甘草对大鼠的心脏毒性,测定其半数中毒剂量TD50;以无血清DMEM将附子、附子-甘草3∶1、附子-甘草1∶1、附子-甘草1∶3的含药血清分别按5%,10%,20%稀释成3个浓度,观察各给药组不同浓度的含药血清对原代乳大鼠心肌细胞搏动节律、细胞存活率以及细胞内乳酸脱氢酶(LDH)含量的影响。结果:附子配伍甘草后能够提高附子的LD50和TD50。同空白血清对照组比较附子含药血清能够明显增加心肌细胞搏动节律和LDH的含量(P<0.05),附子配伍不同比例甘草含药血清能够明显降低附子导致心机搏动节律的加快,降低LDH含量。随着甘草比例的增加,作用加强。但不同浓度的附子以及附子配伍甘草含药血清对细胞存活没有明显影响。结论:甘草能够通过提高附子中毒剂量,从而达到减毒作用。甘草对于附子减毒作用是通过抑制心肌细胞节律的增加,保护心肌细胞从而达到减毒作用。     

附子与人参配伍对急性心衰大鼠血流动力学的影响

目的 研究附子与人参配伍前后对急性心衰大鼠血流动力学的影响.方法 建立戊巴比妥钠致大鼠急性心力衰竭动物模型,以左室内压(LVSP)、左室内压最大上升速率(dp/dtmax)、左室内压最大下降速率(dp/dtmin)、左室舒张末期压(LVEDP)及心率(HR)等为血流动力学检测指标,考察附子与人参配伍前后对急性心衰大鼠的影响.结果 附子与人参配伍前后均可改善急性心衰大鼠血流动力学指标,附子或人参单味给药组作用缓和且时间较短,附子与人参配伍后作用增强,并且随着人参配伍比例的增加,作用强度增强;给药15 min后,附子、人参、附子人参1:0.5、附子人参1:1和1:2组,LVSP分别较模型组上升-0.91±2.21 (P＜0.05),-1.96±5.32(P＜0.05),0.41±3.22(P＜0.01),2.46±2.36(P＜0.01),4.39±4.63(P＜0.01);+dp/dtmax分别较模型组上升-0.29±2.23(P＜0.01),-1.33±7.55(P＜0.05),1.91±4.56(P＜0.01),2.87±4.32(P＜0.01),9.91±9.27(P＜0.001).结论 附子与人参配伍能改善血流动力学相关指标,有增强治疗或缓解急性心力衰竭的作用.