FKBP52在反复体外受精种植失败患者种植窗期子宫内膜的表达研究

目的探讨FKBP52在反复体外受精种植失败患者种植窗期子宫内膜的表达情况。方法采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)技术和免疫组织化学方法分别测定20例反复体外受精种植失败妇女(组1)种植窗期子宫内膜组织中FKBP52蛋白及其mRNA的表达,并与15例正常生育能力妇女卵泡晚期(组2)和种植窗期(组3)相比较。结果组1的FKBP52mRNA表达水平低于组2,组2低于组3,但差异均无统计学意义(P0.05)。FKBP52蛋白表达于腺上皮的胞核及胞浆,组1在腺上皮的胞核表达明显,组2在腺上皮的胞浆表达明显,组3在腺上皮的胞核及胞浆均有明显表达;组1和组2的FKBP52蛋白表达量分别为(2 125.9±1 729.9)和(1 360.2±853.7),并显著低于组3(8 319.1±5 873.8)(P0.05,P0.01)。结论 FKBP52蛋白在种植窗期的表达和定位异常可能是反复体外受精种植失败患者子宫内膜容受性的影响因素。     

反复种植失败妇女“种植窗”时期子宫内膜组织的细胞骨架蛋白质的差异表达

目的探讨体外受精-胚胎移植治疗周期中反复种植失败(RIF)和已生育正常妇女"种植窗"时期(LH+6~LH+9d)子宫内膜组织蛋白质表达的差异。方法选择RIF妇女和正常对照妇女各4名分为实验组和对照组。采用胶内差异双向电泳、(2D-DIGE)和基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术鉴定子宫内膜组织的差异表达蛋白质。结果两组之间获得16个差异表达蛋白质(其中6个下调表达,10个上调表达),其中10个参与细胞骨架构成,分别是:波形蛋白、埃兹蛋白、Septin 2蛋白、radixin蛋白、纽蛋白、角蛋白8、角蛋白10、角蛋白18、角蛋白19及肌动蛋白。结论本研究结果证实"种植窗"时期RIF妇女子宫内膜组织存在多个细胞骨架蛋白质表达的异常,可能是子宫内膜细胞"质膜转换"缺陷和胚胎种植失败的重要原因。     

Th17及Treg相关因子在反复种植失败患者种植窗口期子宫内膜中的表达

目的通过研究种植窗口期子宫内膜中Treg及Th17特异性转录因子及相关细胞因子表达情况,探讨反复种植失败患者子宫内膜中Treg/Th17平衡调节的可能机制。方法建立种植窗口期子宫内膜标本库。从标本库选择2013年10月至2014年12月收集的符合实验要求的反复种植失败患者(实验组)及首次移植妊娠患者(对照组)各20例,采用定量RT-PCR测量内膜标本中的Treg、Th17特异性表达因子Foxp3和ROR-γt及相关细胞因子IL-10、IL-17表达情况。结果在实验组和对照组子宫内膜上均可见Foxp3、ROR-γt及细胞因子IL-10、IL-17表达;与对照组比较,实验组Foxp3mRNA的相对表达量[(0.77±0.15)vs.(1.57±1.22)]及IL-10mRNA的相对表达量[(1.14±1.03)vs.(1.54±1.77)]均显著降低(P0.05),而ROR-γt mRNA的相对表达量[(0.92±0.39)vs.(0.55±0.15)]及IL-17mRNA的相对表达量[(0.95±0.31)vs.(0.49±0.21)]均显著升高(P0.05)。结论 IL-17、IL-10可能参与内膜中Th17/Treg平衡调节。     

反复种植失败患者与复发性流产患者分泌期子宫内膜自然杀伤细胞数量分析

目的研究子宫内膜自然杀伤细胞(uNK)在反复种植失败(RIF)患者与复发性流产(RM)患者分泌期子宫内膜的表达情况。方法选取2013年3月至2016年10月于本院生殖医学助孕中心的RIF患者(20例)和RM患者(35例),对照25例。于患者尿LH试纸检测峰值出现后第7~9天,利用子宫内膜取样器刮取少量子宫腔内膜组织;根据子宫内膜形态学Noyes标准,确定RIF患者组(n=20)、RM患者组(n=35)与对照组(男性因素不孕患者,n=25)子宫内膜分期;以CD56作为uNK的表面标记物,免疫组化技术检测3组患者分泌期子宫内膜CD56阳性细胞的数量,并利用Vectra~自动病理成像定量分析系统计算细胞阳性细胞率。结果 3组患者内膜形态学分期均有早、中、晚分泌期病例;RIF组与RM组患者分泌期子宫内膜CD56阳性细胞率[分别为(17.59±12.59)%、(16.54±11.37)%]显著高于对照组[(8.01±7.19)%](P<0.01);3组患者子宫内膜CD56阳性细胞率从分泌早期到分泌晚期均呈显著递增趋势(P<0.05);RIF组与RM组分泌早期、中期及晚期CD56阳性细胞率均显著高于对照组(P<0.05)。结论 RIF与RM患者子宫内膜分泌早、中、晚期uNK细胞数量异常升高,提示其可能影响子宫内膜容受性,从而导致妊娠失败。     

芬吗通改善反复胚胎移植失败患者子宫内膜血流和提高妊娠率的研究

目的探讨芬吗通在反复移植失败患者中改善子宫内膜血流及提高临床妊娠率的作用。方法选择2011年5月至2012年12月在我中心接受胚胎解冻移植(FET)助孕,且彩色多普勒能量图提示子宫内膜血流不良(无血流信号和仅内膜下可及血流信号)的反复胚胎移植失败的不育症妇女为研究对象,共404例。应用芬吗通治疗1²个疗程,于移植前一日进行子宫内膜血流检查,分析子宫内膜血流改善情况,随访FET结局。结果 404个研究周期中,其中336例进行了移植周期,胚胎种植率26.19%,临床妊娠率44.04%。完成404个研究周期用药前后子宫内膜血流的检测,血流改善283例,改善率70%。用药前,B超示无血流信号、仅内膜下可及血流信号、内膜下及内膜内均可及血流信号的患者所占比例分别为81.4%、18.6%和0%,服用芬吗通后三者的比例分别为25.5%、23.8%和50.7%,内膜下及内膜内均可及血流信号的患者所占比例明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论芬吗通可明显改善反复移植失败患者的子宫内膜血流情况,提高患者的胚胎种植率及临床妊娠率。     

反复种植失败的治疗新进展

反复种植失败(RIF)是指患者连续经过多次胚胎移植,仍无法正常妊娠.RIF可以归因于母体因素和胚胎因素,母体因素也可分为局部子宫内膜容受性和全身因素.根据病因,RIF的临床治疗主要包括子宫内膜容受性的改善、全身因素的纠正包括高凝状态的改善和免疫治疗,以及提高胚胎种植率等.目前RIF的治疗较多是围绕子宫内膜容受性的提高,...     

子宫内膜容受性检测在反复种植失败患者体外受精-胚胎移植中的应用

目的 评估子宫内膜容受性检测(ERT)技术在反复种植失败(RIF)患者冻融胚胎移植(FET)周期中的应用效果。方法 将接受ERT评估(基于转录组测序的ERT技术模型)的RIF患者(ERT组,n=60)与未接受ERT评估的RIF患者(非ERT组,n=151)、非RIF患者(非RIF组,n=503)的FET结局进行比较。结果 接受ERT评估的RIF患者中绝大部分(58/60,96.67%)的内膜容受期推迟了1～2 d,根据ERT评估结果相应调整了移植时间。FET结果显示,与非ERT组比较,ERT组胚胎种植率(53.25%vs. 35.07%)、宫内妊娠率(66.67%vs. 45.70%)、活产率(55.00%vs. 29.80%)均显著升高(P<0.05),且与非RIF组相当(P>0.05)。不同移植策略(1～2枚卵裂期胚胎、1枚囊胚移植、1枚卵裂期胚+1枚囊胚序贯移植)下,ERT组宫内妊娠率、活产率均显著高于非ERT组(P<0.05)。结论 对RIF患者进行ERT,调整移植时间进行移植,可显著改善RIF患者的FET结局。     

三种移植策略在反复种植失败患者冻融胚胎移植周期中的应用比较

目的通过比较序贯移植、内膜机械刺激与囊胚移植三种移植方案在反复种植失败(RIF)患者冻融胚胎移植周期中的应用结果,为临床选择RIF的干预策略提供参考。方法回顾性分析2016年6月至2017年12月在我院因反复种植失败拟再次行冻融胚胎移植患者共228例,研究组按照移植方案不同分为三组:A组(序贯移植组):移植1枚卵裂期胚胎+1枚囊胚(40例);B组(内膜机械性刺激组):根据胚胎移植时间及数量的不同分为两个亚组,B1组:子宫内膜机械性刺激+1枚囊胚移植(52例);B2组:内膜机械性刺激+2枚卵裂期胚胎移植(47例);C组(囊胚移植组):移植1枚囊胚(40例)。对照组为移植2枚卵裂期胚胎(49例)。结果 A组临床妊娠率(67.52%)、种植率(41.25%)显著高于对照组(分别为36.73%、21.43%,P均0.05);B1组种植率显著高于对照组(44.23%vs 21.43%,P0.05);多胎率、早期流产率、异位妊娠率各组间无统计学差异(P0.05)。结论 RIF患者选择序贯移植、内膜机械性刺激+囊胚移植及囊胚移植三种移植策略均有改善妊娠结局的趋势;三者中序贯移植较传统卵裂期胚胎移植相比,可显著提高临床妊娠率和种植率;序贯移植可以降低因囊胚培养失败无胚胎移植的风险,但同时可能增加多胎率的风险。临床上需要根据患者的具体情况选择个体化移植策略。     

反复种植失败患者冻融胚胎移植的三种内膜准备方案的分析

目的使用GnRH-a 3.75mg降调节激素替代、单纯激素替代及自然周期内膜准备方案对提高反复种植失败患者冻融胚胎移植(FET)妊娠率的利弊分析。方法选取160例(周期)行FET的反复种植失败患者,根据内膜准备方式分为自然周期组(A组)82例、激素替代周期组(B组)36例和降调节激素替代组(C组)42例。比较三组患者的种植率、妊娠率、流产率和生殖激素水平。结果A、B和C三组患者的种植率分别为23.61%、21.25%和38.78%,临床妊娠率分别为42.68%、36.10%和61.90%;C组与A组、B组的种植率和临床妊娠率比较差异均有统计学意义(P<0.05)。A组与B组间胚胎移植日内膜厚度差异有统计学意义[(10.40±1.81)mm vs.(9.12±1.61)mm](P<0.05)。三组患者的流产率和异位妊娠率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论与自然周期内膜准备方案及传统激素替代内膜准备方案比较,3.75mg GnRH-a降调节激素替代内膜准备方式可提高反复种植失败患者冻融胚胎移植妊娠率而不增加流产率。     

反复种植失败患者的个体化胚胎移植

反复种植失败(recurrent implantation failure,RIF)是目前辅助生殖技术(assisted reproductive technology,ART)临床工作中的难题,也是研究和讨论的热点,同时也给患者带来了巨大的经济负担及精神压力。其定义目前尚未统一。结合胚胎移植次数、移植胚胎数目和质量、子宫内膜容受性等来定义RIF可能更准确和全面。由于种植窗不是恒定不变的,统一的胚胎移植时间可能导致子宫内膜与胚胎发育不同步,从而出现RIF。因此个体化胚胎移植是改善RIF患者ART结局的重要手段。     

反复植入失败与子宫内膜容受性标志物研究进展

反复植入失败(RIF)是目前生殖医学领域的主要难题之一。良好的子宫内膜容受性减少了RIF发生的可能性。研究发现RIF和子宫内膜容受性与免疫、非编码RNA、粘附因子等因素相关。通过维持免疫平衡,探索RIF患者相关基因多态性,发现粘附因子和非编码RNA等生物标志物,进而提供了RIF的潜在治疗方法。     

宫腔镜诊治在反复种植失败患者中的临床疗效

目的探讨宫腔镜诊治在反复种植失败(RIF)患者中的临床应用疗效。方法回顾性分析2014年1月至2015年6月在我院行宫腔镜检查及治疗的RIF患者105例,根据宫腔是否异常及是否行宫腔搔刮术将患者分为3组:A组,43例,患者宫腔正常,行诊刮术;B组,28例,患者宫腔正常,未行诊刮术;C组,34例,患者宫腔异常,行诊刮术。比较3组患者宫腔镜诊治后的生化妊娠率、临床妊娠率及着床率等。结果 RIF患者宫腔镜检查宫腔异常的检出率为32.38%。3组患者宫腔镜诊治后的临床结局均有所改善,105例RIF患者共94个移植周期,有56例患者获得生化妊娠,47例患者获得临床妊娠,6例流产。3组间的生化妊娠率(60.0%vs.52.0%vs.65.5%)、临床妊娠率(50.0%vs.48.0%vs.51.7%)及着床率(29.6%vs.22.6%vs.31.5%)比较均无显著性差异(P0.05)。结论宫腔镜诊治能够提高RIF患者的临床妊娠率。对于宫腔正常的患者,宫腔镜检查的同时行宫腔搔刮术与单纯宫腔镜检查相比并未提高妊娠率。     

反复胚胎种植失败患者HLA-Cw基因多态性的研究

目的初探HLA-Cw基因多态性与反复胚胎种植失败的关系。方法采用聚合酶链反应-直接碱基序列分析基因分型技术的方法对研究组50例反复胚胎种植失败患者和对照组17例一次体外受精-胚胎移植即获得妊娠并分娩活婴的患者进行HLA-Cw基因多态性检测,并采用SPSS17.0软件进行分析。结果 (1)在HLA-Cw*01、HLA-Cw*03、HLA-Cw*07基因位点中,研究组和对照组均有较高的频率;(2)研究组HLA-Cw*06基因频率较对照组高,HLA-Cw*07基因频率低于对照组;(3)研究组和对照组的HLA-Cw^(asn)频率远高于HLA-Cw(asn)频率远高于HLA-Cw^(lys);(4)研究组的HLA-Cw(lys);(4)研究组的HLA-Cw^(asn)频率略低于对照组,HLA-Cw(asn)频率略低于对照组,HLA-Cw^(lys)频率略高于对照组;(5)研究组夫妇双方均未检出HLA-Cw(lys)频率略高于对照组;(5)研究组夫妇双方均未检出HLA-Cw^(lys)等位基因的比例较对照组低,而至少一方检出至少一个HLA-Cw(lys)等位基因的比例较对照组低,而至少一方检出至少一个HLA-Cw^(lys)等位基因的比例则较高。上述各观察指标两组间均无显著性差异(P>0.05)。结论 HLA-Cw(lys)等位基因的比例则较高。上述各观察指标两组间均无显著性差异(P>0.05)。结论 HLA-Cw^(lys)频率在反复胚胎种植失败患者中有增加趋势,虽无显著性差异,但有待扩大样本量进行进一步统计分析。     

反复妊娠失败患者种植窗期子宫内膜调节性T细胞功能相关因子的表达

目的分析反复妊娠失败患者种植窗期子宫内膜调节性T细胞相关生物标记物的表达情况。方法利用免疫组织化学技术分析反复种植失败(repeated implantation failure,RIF)(n=23)、复发性流产(recurrent miscarriage,RM)(n=33)与对照组(n=15)女性FOXP3、CTLA-4和TGF-β3水平。通过Vectra~自动病理成像定量分析系统计算其阳性细胞率。结果 RIF组、RM组患者子宫内膜CTLA-4阳性细胞率显著高于对照组(P<0.01),而TGF-β3阳性细胞率显著低于对照组(P<0.01)。FOXP3阳性细胞率与CTLA-4阳性细胞率显著正相关(r=0.68,P<0.01)。结论 RIF、RM患者子宫内膜种植窗期TGF-β3、CTLA-4表达异常,表明TGF-β3、CTLA-4可能参与RIF、RM种植窗期子宫内膜免疫耐受调节,影响其子宫内膜容受性。     

地塞米松对反复种植失败患者外周血Th1/Th2细胞比例失衡的调节作用

目的探讨地塞米松对反复种植失败(RIF)患者外周血Th1/Th2细胞比例失衡的调节作用。方法选择2017年2～5月在我院生殖中心行辅助助孕RIF患者29例,口服地塞米松治疗后分别用流式细胞技术检测外周血Th1、Th2细胞亚群比例。结果口服地塞米松治疗后,RIF组患者外周血中Th1细胞亚群比例(24.31±7.24)%较治疗前(28.60±7.59)%显著下降(P<0.05),Th2细胞亚群比例无显著性差异(P>0.05)。进一步分析治疗前外周血Th1细胞比例异常升高的RIF患者12例以及Th2细胞异常下降的RIF患者6例,结果显示,口服地塞米松治疗后RIF患者外周血中Th1细胞亚群比例(29.97±6.96)%较治疗前(35.66±4.36)%显著下降,Th2细胞亚群比例(0.80±0.14)%较治疗前(0.61±0.09)%显著上升,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论糖皮质激素对于RIF患者外周血Th1/Th2细胞比例失衡具有调节作用。